张雪薇[1]（2021）在《夹脊电针结合神经松动术对坐骨神经损伤兔腓肠肌萎缩肌肉湿重比、肌细胞凋亡、Bcl-xL、Bad表达的影响》文中研究指明目的:本研究旨在研究夹脊电针结合神经松动术对坐骨神经卡压伤后腓肠肌细胞凋亡、肌肉湿重比、Bcl-xL、Bad表达的影响,探讨夹脊电针结合神经松动术抑制兔坐骨神经损伤后肌细胞凋亡,延缓肌肉湿重比下降速度的相关调控机制,为失神经肌萎缩的临床治疗手段提供理论基础。方法:180只新西兰大耳白兔,雌雄各半,随机分为5组,正常对照组、模型对照组、神经松动术组、夹脊电针组、夹脊电针结合神经松动术组（简名结合组）,每组36只。每组再按时间点（治疗后1、2、4周）分为3个亚组,每个亚组12只动物。采用坐骨神经钳夹法制备兔坐骨神经急性损伤模型。正常对照组不进行任何处理,模型对照组造模后不进行任何干预治疗,夹脊电针组、神经松动术组、结合组在术后第3天开始分别给予夹脊电针、神经松动术以及夹脊电针结合神经松动术的治疗。5组家兔分别于治疗1、2、4周后取材,测量双侧腓肠肌湿重并计算其湿重比;采用TUNEL法观察腓肠肌肌细胞凋亡;RT-PCR法观察Bcl-xL、Bad mRNA表达;Western Blot法观察Bcl-xL、Bad蛋白表达。结果1.腓肠肌湿重比正常对照组的湿重比为正常值1,在1、2、4周三个时间点中,各组（正常对照组除外）湿重比都随时间延长而不断下降,在四周时达到最低值;同一时间点上,三组治疗组的湿重比均低于正常对照组（P<0.05）,高于模型对照组（P<0.05）,结合组高于神经松动术组和夹脊电针组（P<0.05）;同一时间点上神经松动术和夹脊电针组差异无统计学意义（P>0.05）。2.Tunel检测细胞凋亡指数1、2、4周三个时间中,各组（正常对照组除外）的细胞凋亡指数均随时间延长而不断上升,在4周达到最高值;同一时间点上,三组治疗组的细胞凋亡指数均高于正常对照组（P<0.05）,低于模型对照组（P<0.05）,且结合组低于神经松动术组和夹脊电针组（P<0.05）;同一时间点上的神经松动术组和夹脊电针组差异无统计学意义（P>0.05）。3.Bcl-xL的mRNA及蛋白表达1、2、4周三个时间点中,各组（正常对照组除外）B cl-xL的mRNA及蛋白表达均随时间延长而不断下降,在四周时达到最低值;同一时间点上,三组治疗组的Bcl-xL表达均低于正常对照组（P<0.05）,高于模型对照组（P<0.05）,且结合组高于夹脊电针组和神经松动术组（P<0.05）;在同一时间点上,夹脊电针B cl-xL的表达高于神经松动术（P<0.0 5）4.Bad的mRNA及蛋白表达1、2、4周三个时间中,各组（正常对照组除外）Bad的 mRNA及蛋白表达均随时间延长而不断下降,在四周达到最低值;在同一时间点上,三组治疗组的Bad的表达均高于正常对照组（P<0.05）;低于模型对照组（P<0.05）;且结合组Bad的表达均低于夹脊电针组和神经松动术组（P<0.05）;在同一时间点上,夹脊电针Bad的表达低于神经松动组（P<0.05）结论夹脊电针和神经松动术均可以减少腓肠肌肌细胞凋亡,延缓坐骨神经损伤后兔腓肠肌萎缩程度,二者结合的治疗效果更好。夹脊电针和神经松动术能延缓坐骨神经损伤后兔腓肠肌萎缩,其机制可能与抑制腓肠肌肌细胞中Bad的表达,上调Bcl-xL的表达有关。
刘振辉[2]（2021）在《仿生导电人工神经支架的研究》文中研究说明目的:（1）制备具有导电功能的多微通道多壁碳纳米管琼脂糖导电支架,并对其进行表征,验证其生物相容性,利用支架进行细胞三维立体培养,研究电刺激对RSC96细胞生长的影响。（2）制备具有取向性纳米纤维的PLLA纤维膜,并对其进行表征,验证其生物相容性,研究纤维取向性对RSC96细胞信号蛋白的影响。（3）制备仿生导电人工神经支架,将支架植入大鼠坐骨神经缺损,探讨仿生导电人工神经支架对大鼠坐骨神经修复效果和机制。方法:（1）利用梯度冷冻和冷冻干燥技术制备出具有多微通道多壁碳纳米管琼脂糖导电支架。通过微结构、溶胀和脱溶涨、导电率、形状记忆功能、载药及药物释放性能、力学性能和生物相容性对制备的多微通道多壁碳纳米管琼脂糖导电支架进行表征,对三维立体培养的RSC96细胞进行组织学评价,观察不同培养条件下细胞生长行为。（2）利用静电纺丝技术制备出具有取向纳米纤维的PLLA纤维膜。通过扫描电镜、力学性能、降解性和生物相容性对制备的PLLA纤维膜进行表征。利用免疫荧光技术研究纤维取向性对RSC96细胞ERK、P38MAPK、MEK和LRP4蛋白的影响。（3）利用定制的模具制备多微通道导电支架,将第二部分制备的高取向PLLA纤维膜和定制的多微通道导电支架组合成仿生导电人工神经支架,并将神经支架植入到大鼠坐骨神经缺损处。将实验动物分为支架组（S）、支架联合电刺激组（S&E）和自体神经移植组（AT）,通过坐骨神经功能指数、神经电生理检测、肌肉组织学检测、再生神经的组织学检测来分析仿生导电神经支架对周围神经再生的影响。结果:（1）加入的多壁碳纳米管没有影响琼脂糖支架的孔隙组成比和形状记忆功能,但0.025%wt多壁碳纳米管提高了支架在溶胀平衡状态下的溶胀率和保水能力。多壁碳纳米管改变了琼脂糖支架的电导率、载药及药物释放能力和力学性能。高浓度多壁碳纳米管对RSC96细胞和PC12细胞的增殖有一定影响。电镜下PC12细胞在多壁碳纳米管琼脂糖支架上生长状态良好。多壁碳纳米管的加入未改变RSCs细胞的S100β表达量。当电刺激存在时,RSC96细胞层沿支架纵轴排列较好,0.025%MWCNT-琼脂糖支架和0.05%MWCNT-琼脂糖支架表现出更好的细胞黏附性。（2）制备的PLLA纤维膜为多孔结构,纤维大部分为取向排列,高取向纤维膜的纤维取向性更高,其表面光滑,粗细均匀,纤维间形成立体的三维孔隙并分布于整个纤维膜。取向PLLA纤维膜的拉伸强度为（59.06±2.49）MPa,取向PLLA纤维膜的拉伸强度为（56.82±2.80）MPa,两种纤维膜拉伸强度没有统计学差异;取向PLLA纤维膜的杨氏模量为（1037.07±133.30）MPa,高取向PLLA纤维膜的杨氏模量为（971.45±112.39）MPa,两种纤维膜杨氏模量没有统计学差异;取向PLLA纤维膜的断裂伸长率为364.48±53.79,高取向PLLA纤维膜的断裂伸长率为356.89±40.21,两种纤维膜断裂伸长率没有统计学差异。增加PLLA纤维膜的取向,并未明显改变纤维膜的拉伸强度、杨氏模量和断裂延伸率。改变纤维膜的纤维取向程度,对PLLA纤维膜的降解速率没有影响。取向PLLA纤维膜和高取向PLLA纤维膜对RSC96细胞的增殖均没有影响。和取向性纤维膜相比,高取向的PLLA纤维膜上的RSC96细胞呈现出现明显的丝状伪足,沿着排列整齐的纳米纤维延伸。和取向性PLLA纤维膜相比,高取向PLLA纤维增加了RSC96细胞ERK、P38 MAPK、MEK和LRP4蛋白表达量（P<0.01）。（3）制备的仿生导电人工神经支架跟大鼠坐骨神经匹配良好,植入神经缺损出未见异物反应。S&E组坐骨神经功能指数、神经电生理结果、肌肉组织学结果、轴突和髓鞘再生效果接近AT组,好于S组。术后12周时免疫组化结果显示,NF-H蛋白和S00-β蛋白表达,S&E组和AT组的高于S组（P<0.01）,而S&E组接近AT组。LRP4蛋白和P38MAPK蛋白表达,AT组高于S组（P<0.01）,但AT和S&E组,S&E组和S组相比均无差异无统计学意义。ERK蛋白和MEK蛋白表达情况,AT组高于S组和S&E组（P<0.01）,S&E组和S组两者相比差异无统计学意义。结论:（1）多壁碳纳米管琼脂糖支架具有高的孔隙率、一定的形状记忆功能、载药及药物释放能力、导电能力,良好的生物相容性。在电刺激存在时,具有导电性能的多壁碳纳米管琼脂糖支架对RSC96细胞生长具有引导作用。（2）和取向性的PLLA纤维膜相比,高取向性的PLLA纤维膜未改变其力学性能、降解性和生物相容性,但增加了ERK、P38 MAPK、MEK和LRP4蛋白的表达量,能引导RSC96细胞生长和迁移,这有利于其在周围神经再生中的应用。（3）仿生导电人工神经支架联合电刺激能够增强周围神经再生。电刺激可能通过ES通过与MAPK信号通路的激活促进周围神经再生,ERK、P38MAPK、MEK和LRP4可能参与周围神经再生。
乌云额尔敦[3]（2020）在《针刀干预对制动4周KOA模型兔伸肌—屈肌生物力学及软骨变化的影响》文中指出[研究背景]膝骨关节炎作为临床常见的慢性退行性骨关节疾病其临床表现多为疼痛、关节活动障碍。临床中根据患者病变的不同程度和主观疼痛将KOA分为初期、早期、中期和晚期四个阶段。采用阶梯治疗策略对KOA进行相关治疗和康复方面的研究,其中基础包括健康宣教、运动生活指导、科学合理的功能锻炼和中医药康复治疗。针刀疗法是一种新兴的中医理论指导下的生物力学干预疗法,临床治疗KOA疗效确切,课题组在前期研究中对中晚期制动6周KOA模型家兔展开相关实验研究,但是对早中期KOA家兔膝关节周围软组织的干预研究较少。所以本课题观察早中期制动4周KOA模型兔在针刀干预后膝关节周围软组织的力学性能变化,并通过纳米压痕、番红O/固绿染色、免疫荧光双标染色观察针刀对膝关节软骨结构的影响,同时应用ELISA检测血清、关节液中软骨代谢产物表达情况,进一步探索针刀“调筋治骨”治疗KOA的作用机制,为临床治疗KOA提供实验依据。[研究目的]基于改良Videman法制备4周KOA模型,探讨针刀对膝骨关节炎的治疗是否通过改变膝关节伸肌-屈肌的张力、弹性和生物力学从而影响关节软骨,明确不同分期伸肌-屈肌生物力学改变在软骨破坏降解中的作用,恢复软骨应力平衡减少损伤,阐明针刀治疗KOA的生物力学机制。基于行为学、形态学、生物力学及分子生物学检测方法观察针刀干预膝关节伸肌-屈肌生物力学条件下兔的步态、软骨代谢及结构变化、肌肉性能的改变;通过纳米压痕技术和酶联免疫吸附法检测兔膝关节软骨储存模量、损失模量、阻尼系数和兔关节囊滑液及血清中软骨降解产物软骨寡聚基质蛋白（COMP）和Ⅱ型胶原羧基端肽（CTX-Ⅱ）揭示针刀缓解关节软骨降解的机制,明确针刀治疗KOA的最佳治疗时间,阐释针刀“调筋治骨”法治疗KOA的生物力学等机制,为临床治疗提供实验依据和理论支持。[研究方法]57只新西兰兔按照体重由小到大排号,查随机数字表,按体重随机分为正常组9只、模型组、针刀组、电针组和西药组每组各12只。采用改良Videaman法对48只新西兰兔进行制动造模4周。解除制动3天后进行干预。正常组:每日进行抓取,同时给予纯水3 ml灌胃,每日1次,共4周。模型组:每日进行抓取,同时给予纯水3ml灌胃,每日1次,共4周。针刀组:每日进行抓取,同时给予纯水3ml灌胃,每日1次,同时在股内、外侧肌腱止点、股直肌肌腱止点、股二头肌肌腱止点、鹅足腱囊针刀、压痛结节点进行针刀干预,每周2次,共4周。电针组:对梁丘、血海、内膝眼、外膝眼、阴陵泉、阳陵泉、委中、曲泉进行电针干预,应用穴位神经刺激仪行电针刺激治疗,分别连接梁丘-委中,血海-曲泉（波形疏密波,频率2/100 Hz,强度2mA）,每次20min,隔天治疗1次,共4周。西药组:每日进行抓取,按体重10 mg/kg给予塞来昔布灌胃,每日1次,干预4周。干预结束后,进行相关组织取材检测。采用改良的Lequesne MG膝关节评估量表对各组兔进行行为学评价;对兔股直肌-股二头肌进行HE染色及拉伸弹性模量等检测,以评估兔股直肌-股二头肌肌肉性能;对兔膝关节软骨进行纳米压痕、番红O/固绿染色以及免疫荧光双标染色等检测,以观察膝关节软骨结构变化;同时应用ELISA检测各组兔血清、关节液中软骨代谢产物（COMP,CTX-2）表达情况。[研究结果]1.Lequesne评分结果:模型组（6.22± 1.92）、针刀组（5.67±0.87）、电针组（5.89±0.93）和西药组（6.11±0.60）,各组间差异无统计学意义（P>0.05）。干预治疗4周后,模型组Lequesne评分较前降低（4.67±1.12）,与模型组相比,针刀组（3.33±0.71,P=0.002<0.01）、电针组（3.56±0.88,P=0.009<0.01）和西药组（3.11±0.60,P=0.000<0.01）Lequesne评分显着降低;针刀组与电针组差异无统计学意义（P=0.583）。2.各组兔肌肉HE染色结果:在固定视野内（10×20倍）,模型组股直肌平均横截面积（1.44±0.11 ×10-1 mm2）与正常组（2.02±0.36 ×10-1mm2）相比显着缩小（P=0.000<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组股直肌平均横截面积显着增加（1.89±0.12 ×10-1mm2,P=0.000<0.01）,电针组股直肌平均横截面积增加但无统计学差异（1.63 ± 0.29 × 10-1mm2,P=0.125）,西药组股直肌平均横截面积显着增加（1.98±0.49 ×10-1mm2,P=0.000<0.01）;针刀组与电针组相比,针刀组改善股直肌横截面积更佳（P=0.014<0.05）。固定视野内模型组股直肌肌纤维数（173.08±11.19条）与正常组（137.75±14.48条）相比显着升高（P=0.000<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组股直肌肌纤维数显着降低（140.35±15.81条,P=0.000<0.01）,电针组股直肌肌纤维数表达降低但无统计学差异（159.42±27.68条,P=0.106）,西药组股直肌肌纤维数明显降低（151.24±26.39条,P=0.013<0.05）;针刀组与电针组相比,针刀组股直肌纤维数更少（P=0.014<0.05）。各组兔股二头肌固定视野内肌横截面积和肌纤维数比较在固定视野内（10×20倍）,模型组股二头肌平均横截面积（1.37±0.22×10-1mm2）与正常组（2.30±0.30×10-1 mm2）相比显着缩小（P=0.000<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组股二头肌平均横截面积显着增加（1.88 ±0.32×10-1mm2,P=0.000<0.01）,电针组股二头肌平均横截面积显着增加（1.84±0.29×10-1mm2,P=0.000<0.01）,西药组股直肌平均横截面积显着增加（1.96±0.46 ×10-1 mm2,P=0.000<0.01）;针刀组与电针组相比股二头肌平均横截面积无统计学差异（P=0.691）。模型组股二头肌肌纤维数（185.47±15.61条）与正常组（115.94±10.59条）相比显着升高（P=0.000<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组股二头肌肌纤维数显着降低（142.56±27.86条,P=0.000<0.01）,电针组股二头肌肌纤维数显着降低（144.05±20.78条,P-=0.000<0.01）,西药组股直肌肌纤维数显着降低（151.38±30.76条,P=0.000<0.01）;针刀组与电针组相比,股二头肌纤维数无统计学差异（P=0.845）。3.各组兔伸肌-屈肌拉伸弹性模量结果:①各组兔股直肌拉伸弹性模量结果:与正常组相比,模型组股直肌整体EM值显着升高（2.122±0.529VS 0.878±0.269 MPa,,P=0.000<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组股直肌整体EM值显着降低（1.202±0.583 MPa,P=0.002<0.01）,电针组股直肌整体 EM 值显着降低（1.054±0.167MPa,P=0.000<0.01）,西药组股直肌整体EM值显着降低（1.164±0.291 MPa,P=0.001<0.01）;同时针刀组与电针组相比,股直肌EM值差异无统计学意义（P=0.565）。②各组兔股二头肌拉伸弹性模量结果与正常组相比,模型组股二头肌整体EM值显着升高（0.775±0.173 VS 0.401 ±0.141 MPa,P=0.007<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组股二头肌整体EM值表达降低（0.668±0.202 MPa,P=0.406）,电针组股二头肌整体EM值表达降低（0.647±0.290 MPa,P=0.320）,西药组股二头肌整体 EM 值表达降低（0.700 ± 0.148 MPa,P=0.559）。4.各组兔膝关节软骨纳米压痕结果:①各组兔膝关节胫骨软骨纳米压痕结果:从整体数据看,模型组胫骨软骨SM值与正常组相比表达降低;干预治疗后,与模型组相比,针刀组胫骨软骨SM值表达升高,电针组胫骨软骨SM值明显升高（P<0.05）,西药组胫骨软骨SM值表达稍升高。从平均值看,模型组胫骨SM值与正常组（5.74±0.68VS6.88±0.62 Pa,P=0.438）相比表达降低;干预治疗后,与模型组相比,针刀组胫骨SM值表达升高（8.79±2.32 Pa,P=0.056）,电针组胫骨SM值表达明显升高（10.09±2.92 Pa,P=0.012<0.05）,西药组胫骨SM值表达升高（6.35±0.43 Pa,P=0.675）;同时,针刀组SM值与电针组相比无统计学差异。模型组胫骨软骨LM值与正常组相比表达降低;干预治疗后,与模型组相比,针刀组胫骨软骨LM值表达升高,电针组胫骨软骨LM值明显升高（P<0.05）,西药组胫骨软骨LM值稍升高。从平均值看,模型组胫骨LM值与正常组（0.94±0.15VS 1.22±0.09 Pa,P=0.398）相比表达降低;干预治疗后,与模型组相比,针刀组胫骨LM值表达升高（1.56±0.65 Pa,P=0.073）,电针组胫骨LM值表达明显升高（1.73±0.53 Pa,P=0.029<0.05）,西药组胫骨 LM 值表达稍有升高（1.08±0.50 Pa,P=0.645）。模型组兔胫骨软骨LF值与正常组相比表达降低;干预治疗后,与模型组相比,针刀组胫骨软骨LF值表达升高,电针组胫骨软骨LF值升高,西药组胫骨软骨LF值升高。从平均值看,模型组胫骨LF值与正常组（0.163±0.008VS0.177±0.004,P=0.216）相比表达降低;干预治疗后,与模型组相比,针刀组（0.174±0.026,P=0.335）、电针组（0.173±0.006,P=0.363）、西药组（0.172 ± 0.008,P=0.410）胫骨 LF 值表达升高;同时,针刀组LF值与电针组相比无统计学差异。②各组兔膝关节股骨软骨纳米压痕结果:模型组股骨软骨SM值与正常组相比表达显着升高（P<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组股骨软骨SM值显着降低（P<0.01）,电针组股骨软骨SM值显着降低（P<0.01）,西药组股骨软骨SM值显着降低（P<0.01）。模型组股骨SM值与正常组（13.27± 3.61 VS 4.23±1.33 Pa,P=0.001<0.01）相比显着升高;干预治疗后,与模型组相比,针刀组股骨SM值显着降低（5.83±1.23 Pa,=0.003<0.01）,电针组股骨SM值显着降低（6.21±0.74 Pa,P=0.004<0.01）,西药组股骨 SM 值表达显着降低（5.78±3.34 Pa,P=0.003<0.01）。同时,针刀组与电针组SM值相比无统计学差异。从整体数据看,模型组股骨软骨LM值与正常组相比显着升高（P<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组股骨软骨LM值显着降低（P<0.01）,电针组股骨软骨LM值显着降低（P<0.01）,西药组股骨软骨LM值显着降低（P<0.01）。模型组股骨LM值与正常组（2.15 ± 0.39 VS 0.68±0.16 Pa,P=0.000<0.01）相比显着升高;干预治疗后,与模型组相比,针刀组股骨LM值显着降低（1.03±0.19 Pa,P=0.002<0.01）,电针组股骨LM值显着降低（1.10±0.18 Pa,P=0.002<0.01）,西药组股骨 LM 值显着降低（0.97±0.50Pa,P=0.001<0.01）。与正常组相比,模型组兔股骨软骨LF值在1 Hz、2.59Hz、6.708 Hz时表达升高,在17.374 Hz、45 Hz时,模型组股骨软骨LF值表达降低,但差异均无统计学意义;干预治疗后,与模型组相比,针刀组、电针组和西药组股骨软骨LF值表达均有升高趋势。从平均值看,模型组胫骨LF值与正常组（0.166±0.013VS0.163±0.014,P=0.788）相比表达升高;干预治疗后,与模型组相比,针刀组（0.178±0.006,P=0.218）、电针组（0.176±0.011,P=0.280）、西药组（0.174±0.013,P=0.426）胫骨LF值表达升高。5.各组兔软骨Mankin评分结果:与正常组相比（0± 0）,模型组Mankin评分显着升高（5.12±1.65,P=0.000<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组Mankin评分明显降低（4.07±0.78,P=0.026<0.05）,电针组 Mankin 评分显着降低（3.67±1.40,P=0.003<0.01）,西药组 Mankin 评分明显降低（3.93±1.44,P=0.014<0.05）。6.各组兔免疫荧光染色结果:模型组细胞核数与正常组相比表达降低（39.00 ± 11.95 VS 47.33±6.14个,P=0.076）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组（48.37±8.62个,P=0.017<0.05）和西药组细胞核数（51.46±13.35,P=0.004<0.01）明显升高。同时,模型组细胞核IOD与正常组相比明显降低（218085±65522 VS 281656±47981,P=0.032<0.05）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组（264482±59410,P=0.058）与电针组（268533± 53436,P=0.051）细胞核IOD有所升高,但差异无统计学意义,西药组细胞核IOD显着升高（296503±96731,P=0.004<0.01）。模型组F-actin骨架蛋白IOD与正常组相比显着降低（427822± 114112 VS 591898±161368,P=0.005<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组（490082±93263,=0.184）和电针组（488292±101458,P=0.220）骨架蛋白IOD表达稍升高但无统计差异,西药组骨架蛋白IOD值表达明显升高（532521±185545,P=0.046<0.05）。核/骨架蛋白比值方面,模型组与正常组相比比值升高（0.55±0.23 VS 0.49 ± 0.09,P=0.486）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组（0.56±0.18,P=0.866）、电针组（0.59±0.23,P=0.596）和西药组（0.58±0.18,P=0.755）比值表达升高,但无统计学差异。模型组Ⅱ型胶原IOD与正常组相比显着降低（70567±26683 VS 133780±61671,P=0.001<0.01）:干预治疗后,与模型组相比,针刀组（91485±36482,P=0.168）和电针组（89782±51996,P=0.236）Ⅱ型胶原IOD值表达升高但无统计学差异,西药组Ⅱ型胶原IOD 值明显升高（106694±30698,P=0.031<0.05）。7.各组兔血清和关节液中CTX-2和COMP含量结果:与正常组（5.92±1.15 ng/ml）相比,模型组血清CTX-2含量显着升高（8.37±0.89 ng/ml,P=0.001<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组血清CTX-2含量降低（7.22±1.36ng/ml,P=0.091）,电针组血清CTX-2含量降低（8.07±1.26ng/ml,P=0.657）,但无统计学意义;西药组血清CTX-2含量明显降低（6.86±0.99ng/ml,P=0.025<0.05）;针刀组与电针组CTX-2含量相比无统计学差异（P=0.204）。与正常组（5.29±1.10 ng/ml）相比,模型组血清COMP含量显着升高（8.47 ± 1.64 ng/ml,P=0.000<0.01）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组血清COMP含量明显降低（6.61±1.39 ng/ml,P=0.014<0.05）,电针组血清COMP含量降低,西药组血清COMP含量降低（6.99±0.99ng/ml,P=0.053）。模型组关节液中CTX-2含量与正常组相比表达升高（9.28±2.22VS 8.45±0.79ng/ml,P=0.231>0.05）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组关节液CTX-2含量表达降低（7.98±0.87 ng/ml,P=0.066）,电针组关节液CTX-2含量表达明显降低（7.82±0.47 ng/ml,P=0.032<0.05）,西药组关节液CTX-2含量表达显着降低（7.37±0.77 ng/ml,P=0.007<0.01）。模型组关节液中COMP含量与正常组相比表达升高（8.19±0.98VS 7.15±1.08 ng/ml,P=0.138）;干预治疗后,与模型组相比,针刀组关节液COMP含量表达降低（7.48±1.14 ng/ml,P=0.283）,电针组关节液COMP含量表达降低（7.38±1.13,P=0.244）,西药组关节液COMP含量表达降低（7.28±1.71 ng/ml,P=0.194）。[研究结论]1.针刀干预早中期KOA模型兔,可显着改善膝关节功能活动。2.针刀干预早中期KOA模型兔,可直接改善股直肌-股二头肌萎缩状态,明显降低相应拉伸弹性模量,从而间接改善膝关节软骨承受的异常生物力。3.针刀干预早中期KOA模型兔,可显着降低关节软骨病理损伤,部分改善软骨粘弹性能,部分缓解软骨细胞外基质的降解,从而发挥治疗作用,即“调筋治骨”。
程媛[4]（2020）在《PVDF/PCL复合压电导管促进周围神经长段缺损再生研究》文中认为周围神经损伤（PNI）是一种临床常见的损伤,其广泛存在于交通事故和工作生活之中。神经缺损是PNI中最严重的情况。神经缺损后因电导率不连续,引起机体运动和感觉功能丧失,直接影响患者的生活质量和寿命。自体神经移植是临床金标准,但来源受限、供区受损和大小难匹配等问题限制其应用。随着组织工程技术的发展,利用生物材料制备神经引导通道（NGCs）桥接于神经断端,已成为基础和临床研究的热点。在NGCs中创建更具传导性的微环境对于神经修复至关重要,其研究主要集中在生物因子,细胞治疗,纳米材料,以及电刺激信号等方面。电刺激（ES）可以改善生物电信号转导,从而激活终板潜能并提高组织再生水平。近年来,压电材料由于可以在不需要外加电源或电极的情况下将环境机械能转换成电信号而受到越来越多的关注。在压电聚合物中,聚偏氟乙烯（PVDF）因其最佳的压电性能和生物相容性,在生物医学领域广受关注。但PVDF的生物降解性差,需要二次手术移除支架,增加了患者的痛苦和不便;此外,与传统生物材料相比,其生物相容性也有待提高。因此,本研究首次将可生物降解材料聚己内酯（PCL）与PVDF结合,制备PVDF/PCL复合压电神经导管。一方面改善PVDF力学性能,生物相容性和生物可降解性;另一方面使制备的复合导管仍具有良好的压电性能以产生足够的电刺激信号。在探索压电复合物制备所需的混合溶剂、反应温度和时间、晶相转变及形貌变化等主要因素后,采用浇铸/退火-溶剂置换法制备得到具有微孔结构的PVDF/PCL复合压电支架。拉伸实验表明所制备的支架具有良好的机械强度。扫描电子显微镜结果显示PVDF/PCL复合压电支架具有微孔和多层结构,有利于物质交换与神经再生所需营养供给。傅里叶红外光谱、X射线衍射、热重分析和压电力显微镜分别表征PVDF/PCL压电复合物的晶相、热稳定性和压电性能,证实制备方法的可行性。细胞毒性实验和凋亡实验表明该复合物具有良好的生物相容性。此外,体外实验表明20%PVDF/PCL复合压电支架能有效促进大鼠雪旺细胞（RSCs）的增殖和分化。最后,在治疗大鼠15 mm坐骨神经缺损的研究中,PVDF/PCL复合压电导管能显着提高神经的电生理,形态学和功能性恢复水平,并且具有促血管生成,缓解肌肉萎缩的功能。大鼠体内植入4个月后,PVDF/PCL复合压电导管发生缓慢降解,失重率为9.1%。肝肾功能生化检查、血常规与主要脏器HE染色结果表明,该导管对SD大鼠没有明显的毒副作用。因此,本研究制备的PVDF/PCL复合压电支架能有效促进周围神经修复,在神经组织工程领域具有良好的应用潜能。
陈玉佩[5]（2019）在《电针“委中”对大鼠腰多裂肌细胞外基质重塑和卫星细胞增殖的影响》文中指出腰痛是全球范围内高发且复发率极高的一种公共健康问题,严重影响人们的工作效率和生活质量。由此带来的高额医疗费用,给个人和社会带来了巨大的经济负担。寻求一种安全有效且花费较少的腰痛治疗方法是目前医疗相关部门正在解决的问题。针刺作为一种安全、有效、无创的物理治疗方式被广泛推荐为腰痛的临床治疗方法。位于竖脊肌深层的腰部多裂肌在维持腰椎稳定性方面发挥重要作用。多裂肌形态的改变和功能的紊乱都会诱发或加重腰痛。因此,维持多裂肌正常的形态和功能是预防腰痛发生的关键。肌卫星细胞是骨骼肌损伤后再生修复的干细胞,肌卫星细胞的增殖是受损骨骼肌实现再生修复的关键。课题组前期对电针“委中”穴治疗多裂肌损伤所致腰痛模型的机制做了大量研究,发现电针“委中”穴可能通过调节血清中白细胞介素-17（IL-17）、血清肌酸激酶（CK）等,促进损伤多裂肌早期的再生修复,且以第4天的疗效最为明显。因此,本研究结合动物实验和细胞实验观察电针“委中”穴对损伤多裂肌再生修复的影响,以及再生修复过程中Integrinβ 1/ERK途径对肌卫星细胞增殖相关分子和细胞外基质（Extracell ular matrix,ECM）中胶原蛋白I（Collagen I）、基质金属蛋白酶2（Matrix Metalloproteinases,MMP2）表达的影响,揭示电针“委中”穴促进腰多裂肌损伤后再生修复的部分作用机制。实验一电针“委中”穴对大鼠腰多裂肌损伤后Collagen I、MMP2表达的影响目的:观察电针“委中”穴对大鼠腰多裂肌损伤后与骨骼肌增殖相关的成肌分化抗原（MyoD）、配对核转录因子7（Pax7）和ECM中Collagen I、MMP2表达的影响,揭示电针“委中”穴促进腰多裂肌损伤修复的部分作用机制。方法:SPF级雄性SD大鼠24只,随机分为正常组、模型组、电针组,每组8只,双侧腰4、5节段多裂肌局部注射0.5%的布比卡因建立多裂肌损伤的腰痛模型,电针组选取双侧“委中”穴进行电针治疗,频率2/100Hz,电流强度1-2mA,20min/次,1次/天,共针刺3次,正常组与模型组不给予针刺干预。第4天各组大鼠腹主动脉取血,制备针刺血清;收集损伤部位多裂肌,观察HE染色后多裂肌的形态学变化和Masson染色后胶原纤维的变化;WB检测MyoD、Pax7、Collagen I、MMP2的蛋白表达情况。结果:（1）肌肉注射0.5%的布比卡因导致多裂肌形态发生明显改变。（2）布比卡因注射后,多裂肌中胶原纤维数量增加;电针干预后胶原纤维数量减少。（3）Collagen Ⅰ、MMP2蛋白表达:与正常组比较,模型组CollagenⅠ、MMP2蛋白表达升高（P<0.01,P<0.05）;与模型组比较,电针组Collagen Ⅰ蛋白表达降低（P<0.01）、MMP2蛋白表达升高（P<0.01）。（4）MyoD、Pax7蛋白表达:与正常组比较,模型组MyoD蛋白表达升高（P<0.01）、Pax7蛋白降低（P<0.01）;与模型组比较,电针组MyoD、Pax7蛋白表达升高（P<0.05,P<0.01）。结论:电针“委中”穴可能通过良性调节ECM中Collagen Ⅰ、MMP2的蛋白表达,促进多裂肌增殖,实现损伤多裂肌早期的再生修复。实验二大鼠腰多裂肌卫星细胞的分离培养与鉴定目的:通过酶消化法建立一种多裂肌MSCs分离、纯化、培养及鉴定的有效方法。方法:SPF级雄性SD大鼠1只,分离获取腰4、5节段多裂肌,用I型胶原酶消化,使用差速贴壁法对腰多裂肌MSCs进行纯化处理,采用免疫荧光细胞化学染色检测Pax7、MyoD、MyHC的表达进行鉴定。结果:（1）形态学观察可见,分离、纯化得到的腰多裂肌MSCs形态为圆形,折光性强,培养一段时间后,细胞呈梭型。分离所得到的细胞具有一致的生长方式和形态特点。（2）免疫荧光细胞化学染色结果显示,分离得到的腰多裂肌MSCs在静止期表达Pax7、增殖期表达MyoD、分化早期表达MyHC。结论:应用酶消化法可以成功分离获得多裂肌MSCs,其相关特异性标志物表达为阳性,说明该方法是一种简单、高效的分离、培养、鉴定多裂肌MSCs的方法。实验三电针血清促进大鼠腰多裂肌细胞外基质重塑和肌卫星细胞增殖与ERK关系的研究目的:观察ERK在电针血清促进多裂肌MSCs增殖和ECM重塑过程中Collagen Ⅰ、MMP2表达的影响,探讨电针血清促进ECM重塑和MSCs增殖作用与ERK之间存在的关系。方法:以实验一中所制备的正常血清、模型血清、电针血清,另加设ERK抑制剂血清（电针血清+PD98059）为干预手段,培养实验二中分离鉴定所得的MSCs。共培养24h后,CCK-8检测各组MSCs的增殖能力;WB检测各组Collagen Ⅰ、MMP2、MyoD、Pax7、ERK的蛋白表达;RT-PCR检测 Collagen Ⅰ、MMP2 的 mRNA 表达。结果:（1）WB结果显示,与正常血清组比较,模型血清组ERK蛋白表达显着下降（P<0.01）;与模型血清组比较,电针血清组ERK蛋白表达显着增加（P<0.01）。（2）MSCs增殖能力检测:①CCK-8:与正常血清组比较,模型血清组MSCs的增殖能力显着下降（P<0.01）;与模型血清组比较,电针血清组MSCs的增殖能力显着上升（P<0.01）,抑制剂血清组MSCs的增殖能力显着下降（P<0.01）;与电针血清组比较,抑制剂组MSCs的增殖能力显着下降（P<0.01）。②WB检测MyoD、Pax7:与正常血清组比较,模型血清组蛋白表达显着下降（P<0.01）;与模型血清组比较,电针血清组的蛋白表达显着增加（P<0.01）,抑制剂血清组与模型血清组比较无差异（P>0.05）;与电针血清组比较,抑制剂血清组蛋白表达显着下降（P<0.01）。（3）WB和RT-PCR检测ECM重塑:与正常血清组比较,模型血清组Collagen I蛋白、mRNA表达显着增加（P<0.01）,MMP2 mRNA表达下降（P<0.01）;与模型血清组比较,电针血清组Collagen I蛋白、mRNA表达显着降低（P<0.01）、MMP2蛋白表达增加（P<0.01）;与电针血清组比较,抑制剂血清组Collagen Ⅰ蛋白、mRNA表达显着增加（P<0.01）、MMP2蛋白表达显着降低（P<0.01）。结论:电针血清通过促进ECM的重塑——增加MMP2的表达降解过多的Collagen Ⅰ,促进多裂肌MSCs的增殖,实现损伤多裂肌的再生修复;ERK参与了电针血清促进ECM重塑和MSCs增殖的过程。实验四电针血清促进大鼠腰多裂肌细胞外基质重塑和肌卫星细胞增殖与Integrinβ 1关系的研究目的:观察Integrinβ 1/ERK途径在电针血清促进多裂肌MSCs增殖和ECM重塑过程中Collagen Ⅰ、MMP2表达的影响,探讨电针血清促进ECM重塑和MSCs增殖作用与Integrinβ 1/ERK途径之间存在的关系。方法:同实验三,另设Integrinβ 1抑制剂血清组（电针血清+GRGDS）。干预24h后,采取 CCK-8 法检测 MSCs 的增殖能力;WB 检测 MyoD、Pax7、Collagen Ⅰ、MMP2、ERK、Integrinβ1 蛋白表达;RT-PCR 检测 Collagen Ⅰ和MMP2 mRNA 表达。结果:（1）WB结果显示,与正常血清组比较,模型血清组Integrinβ 1蛋白表达显着下降（P<0.01）;与模型血清组比较,电针血清组Integrinβ 1蛋白表达显着增加（P<0.01）。（2）MSCs增殖能力检测:①CCK-8结果:与正常血清组比较,模型血清组MSCs增殖能力显着下降（P<0.01）;与模型血清组比较,电针血清组MSCs增殖能力显着上升（P<0.01）,抑制剂血清组MSCs增殖能力显着下降（P<0.01）;与电针血清组比较,抑制剂组MSCs的增殖能力显着下降（P<0.01）。②WB检测MyoD、Pax7:与正常血清组比较,模型血清组蛋白表达显着下降（P<0.01）;与模型血清组比较,电针血清组蛋白表达显着增加（P<0.01）,抑制剂血清组与模型血清组比较无差异（P>0.05）;与电针血清组比较,抑制剂血清组蛋白表达显着下降（P<0.01）。（3）WB和RT-PCR检测ECM的重塑:与正常血清组比较,模型血清组Collagen Ⅰ蛋白、mRNA表达上升（P<0.01）,MMP2蛋白表达上升（P<0.01）、mRNA表达下降（P<0.01）;与模型血清组比较,电针血清组Collagen I蛋白、mRNA表达显着下降（P<0.01）,MMP2蛋白、MMP2 mRNA表达增加（P<0.01）;抑制剂血清组Collagen Ⅰ蛋白、mRNA表达显着下降（P<0.01）,MMP2蛋白表达无差异（P>0.05）、mRNA表达上升（P<0.01）;与电针血清组比较,抑制剂血清组Collagen Ⅰ、MMP2 mRNA表达无差异,Collagen Ⅰ蛋白表达上升（P<0.01）,MMP2蛋白表达下降（P<0.01）。（4）WB检测ERK:与正常血清组比较,模型血清组ERK蛋白表达显着下降（P<0.01）;与模型血清组比较,电针血清组ERK蛋白表达显着升高（P<0.01）,抑制剂血清组ERK蛋白表达显着下降（P<0.01）;与电针血清组比较,抑制剂血清组ERK蛋白表达显着下降（P<0.01）。结论:电针血清通过促进ECM的重塑——增加MMP2的表达降解过多的Collagen Ⅰ,促进多裂肌MSCs的增殖,实现损伤多裂肌的再生修复;Integrinβ1/ERK途径参与了电针血清促进ECM重塑和MSCs增殖的过程。
钱运[6]（2019）在《石墨烯导管促进周围神经长段缺损再生研究》文中提出目的周围神经缺损伤广泛发生于严重外伤后,常引起支配区域的感觉和运动功能障碍,极大影响患者生活质量,且疗效不佳。神经导管的应用逐渐成为替代方案。为了最大限度地模拟体内生长环境,理想的神经导管应具备机械引导、电流传导和刺激血管再生的功能。然而大部分神经导管只能起到机械性通道的作用,因此神经修复情况仍不满意。本课题将制备氧化石墨烯纳米粒/聚己内酯导电神经导管,并探究其在促进周围神经长段缺损再生中的作用,同时探讨潜在修复机制。方法采用一体成型工艺制备氧化石墨烯/聚己内酯神经导管,通过扫描电镜和透射电镜分别观察导管表面结构和氧化石墨烯纳米颗粒结构;此外,检测氧化石墨烯与聚己内酯间作用力、神经导管弹性模量、断裂伸长率及导电能力。分别制备氧化石墨烯/聚己内酯支架和聚己内酯支架,体外实验培养施旺细胞,观察施旺细胞在不同支架上的形态结构,通过活死细胞染色、CCK法、免疫荧光染色、Western Blot、q-PCR法检测细胞毒性、增殖、黏附水平及神经标记物表达。建立15mm大鼠坐骨神经缺损模型,在术后6周、12周和18周评估功能学、电生理学、组织形态学水平,同时检测损伤区域微血管化程度,并测定血管形成相关信号通路表达。结果氧化石墨烯/聚己内酯导管为多层多孔结构,呈现出良好的机械性能和导电性能,同时明显促进施旺细胞活性。体内实验显示,氧化石墨烯/聚己内酯导管组的轴突和髓鞘再生水平与自体神经移植疗效接近,明显优于聚己内酯导管对照组。此外,氧化石墨烯/聚己内酯导管还能促进微血管形成,而AKT-eNOS-VEGF信号通路可能在此过程中起重要作用。结论氧化石墨烯/聚己内酯神经导管具有良好机械强度、导电性和生物相容性,能显着促进长段周围神经缺损再生并改善血管微环境,在神经组织工程领域有巨大潜力。
江梓琴[7]（2018）在《FES和姿态传感器在踝关节角度调节建模中的应用研究》文中认为近年来,功能性电刺激（Functional Electrical Stimulation,FES）在肢体康复治疗中得到广泛应用,成为智能康复系统的研究热点之一。FES指通过电刺激刺激失去神经控制的肌肉,使肌肉产生收缩,从而恢复人体特定部位功能的前沿技术,其有效性取决于刺激时间、刺激强度的精确控制。随着FES系统从开环向闭环趋势发展,建立电刺激下关节角度的模型是研究FES闭环控制系统的基础。因此,本文利用FES与姿态传感器搭建人体实验平台,探究FES调节踝关节角度响应特性。从现象学出发,利用遗传算法训练基于神经网络的H（Hammerstein）模型;从机理学出发,推导FES至踝关节角度的机理模型,利用扩展卡尔曼滤波（Extended Kalman Filter,EKF）算法辨识机理模型未知参数:建立两种FES下的踝关节角度模型后,对两种模型进行比较与讨论。具体研究内容如下:首先,以姿态传感器与电刺激仪搭建实验平台,基于不同的实验个体开展FES调节踝关节角度实验。将电刺激频率25Hz、幅值25mA作为固定电刺激参数,探究电刺激脉宽变化对踝关节角度的影响。结果表明,电刺激激励下踝关节角度表现出滞后性、非线性、时变性,为后续建立踝关节模型提供理论与数据基础。其次,根据实验结果,从现象学出发,建立神经网络结构的H模型。通过遗传算法对模型参数进行辨识,将在体实验数据应用十折交叉法验证该模型。结果表明,H模型能够有效预测电刺激下踝关节的角度变化。再次,从机理学方法出发,分析踝关节运动学、FES下肌肉收缩动力学与拉格朗日逆动力学过程,推导在电刺激下的踝关节肌肉骨骼模型。机理模型虽具有更好的解释性,但结构复杂且参数较多难以辨识,本文对模型进行了简化,应用EKF算法对模型未知参数展开辨识。结果表明,该模型能有效的预测电刺激参数下踝关节角度变化的响应。最后,对比与分析两种模型在不同个体,不同电刺激输入序列下的模型误差,结果表明基于机理学方法的踝关节肌肉骨骼模型的归一化均方根误差值（NRMSE）平均低于20%,基于现象学方法的H模型NRMSE平均低于30%。本文建立的两种模型都能较好的预测踝关节角度变化,对比模型的准确性,鲁棒性,机理模型略优。本文研究为电刺激参数配置的优化调整、探索FES调节踝关节运动角度特性、提高电刺激闭环治疗系统的准确性奠定研究基础。
李翔[8]（2018）在《半植入式电刺激对周围神经损伤后影响的实验研究》文中指出目的:本课题通过构建家兔坐骨神经急性损伤模型,研究应用半植入式电刺激对周围神经损伤后的疗效,为半植入式电刺激的临床应用提供参考。方法:首先随机选取32只实验用的雄性家兔,建立急性坐骨神经损伤模型。模型成功建立1周后,随机分为两组,实验组16只,对照组16只,左侧为实验侧,同时行对侧自身对照。于原神经外膜标记损伤缝线的近端放置电极导丝、远端肌肉组织内埋入电极导丝,电极穿过皮下隧道并引至皮外,接下来的电极线连接至半植入式电刺激装置,对实验家兔实施每日4h的间歇性电刺激（刺激参数为频率:20hz;脉宽:100us;电压:9V;波型:方波）。分别于术后第三周末、第六周末取材,计算胫神经传导速度、腓肠肌湿重恢复率、肌纤维细胞横截面积、腓肠肌病理切片、坐骨神经病理切片。对实验数据进行统计学分析。结果:1.一般情况:32只家兔手术均成功,无一只死亡,取材顺利。术后第三周末、第六周末电极导丝取出时,导丝无明显色泽变化,无断裂、腐蚀痕迹,没有明显的液体渗入,肌肉、皮肤未见溃烂坏死。2.术后第三周末,肌电图记录数据,计算胫神经传导速度:实验组104.83±1.25m/s、对照组84.31±1.13 m/s,P<0.05具有统计学意义,说明两组差异显着;术后第六周末,实验组107.29±2.12 m/s、对照组55.37±1.24 m/s,P<0.01具有统计学意义,说明两组差异非常显着。3.术后第三周末,计算家兔腓肠肌湿重恢复率结果为:实验组78.34±6.51%、对照组59.23±4.68%,P<0.05具有统计学意义,说明两组差异显着;术后第六周末,实验组89.63±6.57%、对照组44.16±3.24%,P<0.01具有统计学意义,说明两组差异非常显着。4.组织学表现:（1）术后第三周末、第六周末的腓肠肌HE染色组织学观察可发现,术后第三周末实验组、对照组肌纤维均有不同程度的萎缩,细胞间隙增大,而实验组对应程度明显轻于对照组,实验组、对照组差异明显。术后第六周末,实验组肌纤维萎缩程度较三周前有所改善,而对照组肌纤维较三周前萎缩更明显,细胞间隙较三周前增大,肌纤维细胞排列紊乱,实验组、对照组差异明显。术后第三周末,计算肌纤维细胞横截面积结果为:实验组4768.27±263.17um2、对照组3632.33±203.63um2,P<0.05具有统计学意义,说明两组差异显着:术后第六周末,实验组5024.13±273.25um2、对照组3489.15±263.27um2,P<0.05具有统计学意义,说明两组差异显着（2）术后第三周末、第六周末实验组和对照组的坐骨神经HE染色观察发现,实验组神经轴突比较粗,髓鞘结构正常,而对照组神经髓鞘有不同程度的变性、松弛、弯曲,实验组与对照组有明显的差异。结论:半植入式电刺激可对神经再生的生长速度有促进作用、有利于恢复肌肉湿重,其预防失神经性肌肉萎缩的疗效确切;可能成为临床上周围神经损伤后康复治疗的主要手段。
严名扬[9]（2018）在《从气的时序性事态认知探讨骨骼肌撞击伤模型纤维化进程的特点》文中研究指明背景:撞击伤是临床上最常见的急性骨骼肌损伤（Acute skeletal muscle injury,ASMI）类型之一。因撞击损伤时的环境、外力大小方向、肢体状态等因素的不同,骨骼肌撞击伤的发病机制仍尚未明确阐述。尤其是并发于骨折、神经血管损伤时,骨骼肌损伤常常被忽视,或者被置于次要的地位;而骨骼肌损伤后的不完全性修复,如纤维化、慢性炎症等,常常导致肢体疼痛、功能恢复不全等后遗症,成为临床上面临的主要难题和挑战。而对骨骼肌撞击伤发病机制的研究需要建立在良好的撞击伤模型基础上。大量的实验模型被建立以适用于不同的研究目的,但对骨骼肌撞击伤系统模拟、描述、评价的实验模型尚很不足,尤其是对撞击伤本身致病的力学撞击反应的相关研究尚缺乏。中医药治疗跌打损伤（骨骼肌损伤）具有悠久的历史和丰富的实践经验,并建立了完善的学科体系。针对ASMI,中医骨伤科学以气血为病机核心的修复特点,常采用三期辨证的治疗策略;并以“调和气血”为原则,“即筋伤辨治,气血为要”。但在不同损伤程度的ASMI模型中,以及机体表现出的在炎症反应、增殖修复和替代塑性等阶段的差异性,就要求中医药的辨证施治对“气”在此语境中展现出其理论学说的诠释和临床决策的指导作用;为中医药的治疗策略和现代化提供话语角度,即为骨骼肌损伤的认知、治疗提供中医药的现代性思路,而不是相当于现代技术的被“悬置”。目的:探讨“气”理论的现代性话语体系,为中医药诊治疾病提供新的认知角度。通过分析外力作用于大鼠腓肠肌的撞击反应、力学传导和组织损害的关系、以及腓肠肌不同程度损伤模型修复过程中的病理组织学特点和纤维化进程等方式,建立稳定有效的骨骼肌撞击伤模型系统。利用对撞击伤模型系统的描述与评价,在以“气”为核心的病机中,探讨骨骼肌损伤的中西医结合治疗在认识、诊断等层面的交汇点;并以此建立的骨骼肌撞击伤模型系统为进一步的实验研究提供理论和实践依据。方法:理论探讨:从“气”的语词指称的认知模式出发,使用分析哲学的语词指称和现象学的意向性还原等方法,结合“气”作为汉语词所具有的自身特点,探讨“气”语词的所指形式和内容,并以此角度尝试对气的相关理论进行现代性的语言诠释。实验研究:①测量并比较大鼠腓肠肌与胫腓骨的解剖关系,并据此探讨大鼠小腿的几何动力学特点;根据大鼠小腿的解剖动力学特点,开展木质支持盾的设计和撞击伤造模系统的技术改进。②通过改进重物坠落技术（Drop-mass technique,DMT）,根据不同参数的撞击能量检测撞击能量和撞击反应（包括:峰值力、最大速度、脉宽、位移、冲量和吸收能量等变量）的严重程度是否存在关联以及如何关联,明确撞击伤造模系统的稳定性和撞击反应的力学特性。③使用大鼠腓肠肌模型,探讨不同参数的致伤能量（1.18J:G1kg24cm,2.35J:G0.5kg48cm、G1kg24cmm、G2kg12cm,4.71J:G1kg48cm）诱发的撞击反应、力学特点和腓肠肌损伤的严重程度是否存在关联以及如何存在关联;并探讨腓肠肌在离体和在体情况下撞击反应的差异。④通过在不同时间点（撞击伤后第1、3、7、14、35、56天）观察损伤后大鼠肢体的功能恢复情况、肌纤维损伤的组织形态学变化、以及纤维化程度等方面,结合撞击伤的力学特点,探讨不同严重程度的腓肠肌撞击伤模型在组织修复、肌纤维再生、功能恢复等时序性过程中的事态性差异。结果:理论探讨:通过对“气”语词指称的事态性分析,阐述了气在传统思维下“象-事-是”对应“语词-意义-指称对象”的认知模式;“气”作为时序性事态的把握主要表现为时序性现象流和空间性体验流的组织形式,并以此形成客体对象,如基本事态和复杂事态。实验研究:①实验造模的腓肠肌肌腹正处于大鼠胫腓骨几何形态和力学传导的薄弱区域;并且大鼠小腿存在多个肌性和骨性的动力学三角结构为骨骼肌创伤时提供了缓冲空间;据此本研究改进了的DMT,设计了包括木质支持盾的撞击伤造模系统。②以木质平台为被试对象,分析了在不同程度撞击反应中各变量的差异和相互关系。证实了撞击的峰值力决定撞击间期（P<0.05）,脉宽与撞击强度呈负相关（P<0.05）;冲量是反映撞击强度最有效的指标（P<0.05）,而吸收的能量最能体现撞击对被试的破坏程度（P<0.05）。同时,撞击反应强度遵循能量和动量守恒定律,并具有自身特点;相比速度的增加,撞击重物的质量对撞击结果影响更大。③伴随腓肠肌撞击伤造模损伤能量的升高,撞击反应越强烈,骨骼肌损伤的程度越严重（P<0.05）。根据肌内膜、肌束膜、肌外膜和深筋膜等膜性结构的损伤情况,结合外力传导的分布特点以及损伤的形态学观察,腓肠肌损伤归纳出三级不同损伤程度（中度损伤模型根据肌纤维裂口情况表现出三类亚型）,和力学传导分布（挤压区、剪切区、牵张区）对应着损伤分区（核心区、交替区、边缘区）等特点。在本撞击伤造模系统中,腓肠肌在体比离体的刚度更高、撞击反应稍强烈（P<0.05）,但两者的组织损伤无差异（P>0.05）。④随着腓肠肌撞击伤模型损伤程度的加重,在伤后不同的时间区间内的肢体运动功能恢复情况变差（P<0.05）、病理组织学改变以及纤维化程度越严重（P<0.05）,说明了组织微观损伤和撞击反应、力学传导特点、以及解剖观察的对应关系。对骨骼肌撞击伤的分区分度描述在损伤修复过程中表现出不同的时序性差异（P<0.05）,说明了重度损伤模型核心区存在的“二次修复”反应是导致功能恢复不全的病理性修复的关键。同时,重度损伤模型的病理性修复结局呈现出纤维化、脂肪替代、萎缩变性等类型。结论:1.以时序性事态为内涵的“气”概念性指称使与“气”相关的术语在同一视角下呈现层次性的外延体系,并为中医理论的研究和应用提供了一个新途径。2.基于DMT改进的撞击伤造模系统具有稳定性的撞击反应的力学特性;撞击能量参数的不同决定了撞击反应的独特性。3.该撞击伤造模系统复制的腓肠肌撞击伤模型稳定、准确和成熟,并有效排除了骨骼因素。同时,肌肉张力和刚度的升高能有效降低撞击反应,具有一定的保护作用。4.结合外力传导的分布和分区,更有利于对骨骼肌损伤程度的描述和评估,并为撞击伤模型系统提供不同层次的模型表征,如肌肉的断裂、肌束的断裂、肌纤维的断裂、胶原纤维的撕裂、弹性变形和微结构损伤等。这些为对骨骼肌不同程度损伤的深入研究提供了理论基础和实验依据。5.本实验发现了本撞击伤造模系统存在的“二次撞击”及其特点,为相关的具有二次撞击的各种损伤,提供了理论依据和实践模型。同时,本实验还发现了重度损伤模型表现出的“二次修复”和慢性炎症病灶区等特点,为临床相关研究提供了实验依据。6.通过对腓肠肌撞击伤后肢体运动功能的时序性评价、病理组织学的时序性描述、胶原纤维程度的时序性判断,使实体在相关范畴内的时序性事态的把握被呈现出来。使“气”的时序性事态认知理论在实践中得到应用、验证,并为中医药基础理论融入现代化研究提供一个可参考的角度和行之有效的科学途径。本实验为从“气”治“伤”提供新的认识途径和诠释角度;并结合不同程度损伤的修复差异,试图阐述“气机”不畅的丰富内容,为骨骼肌损伤后的分区分型辨证论治提供理论和实验基础。。最后通过对“气”语词指称的事态性分析,探讨ASMI修复过程在中医“气”学理论中的话语诠释和认知方式。
杨超[10]（2018）在《三法三穴调节细胞自噬促进SNI大鼠运动功能恢复的机理研究》文中进行了进一步梳理[目的]基于行为学、形态学、组织细胞学与分子生物学的综合评价,探究三法三穴推拿干预是否可以调控SNI大鼠脊髓至外周运动通路细胞自噬进程,并以脊髓腹角为切入点,从Akt-mTOR通路及AMPK-mTOR通路的角度,深入研究三法三穴调节运动神经元细胞自噬的分子途径,进一步理清推拿促进周围神经损伤运动功能恢复的内在机制。[方法]对坐骨神经损伤模型（SciaticNerve Injury,SNI）大鼠进行定性定量的三法三穴推拿干预,从超微形态学、组织细胞学及分子生物学三个层面阐述推拿调节细胞自噬促进SNI大鼠运动功能恢复的潜在机理:1.以坐骨神经功能指数验证疗效,采用透射电镜观察并分析脊髓至外周运动通路自噬体的生成和组织超微结构的变化,探寻三法三穴促进SNI大鼠后肢精细动作恢复的超微形态学依据;2.以腓肠肌湿重评价肌肉萎缩情况,通过分子生物学方法,检测自噬相关蛋白LC3及p62表达变化,分析三法三穴调节细胞自噬减缓失神经肌肉萎缩的内在规律;3.以斜板试验评价后肢肌力的变化,采用鞘内注射自噬诱导剂雷帕霉素为阳性药物对照,以双重免疫荧光标记法检测脊髓腹角LC3与NeuN共表达情况,并以分子生物学方法检测p-mTOR、p-Akt及p-AMPK等细胞自噬上游关键因子的表达,以期进一步分析三法三穴是否可以调节脊髓运动神经元细胞自噬及其潜在分子机制。[结果]1.三法三穴调节SNI大鼠脊髓至外周运动通路自噬体的形成促进组织超微结构的恢复1.1.行为学结果坐骨神经功能指数:干预第0次,与假手术组比较,模型组大鼠SFI显着降低（P<0.01）。干预第10次,与模型组比较,三法三穴组大鼠SFI结果升高（P<0.05）。干预第15次及第20次,与模型组比较,三法三穴组SFI结果显着升高（P<0.01）。1.2.脊髓腹角电镜结果造模后28天,电镜下模型组可见运动神经元核仁固缩明显,核膜凹凸不平,染色质深染聚集于核膜附近,胞质内可见自噬体及溶酶体。三法三穴组脊髓腹角神经元核仁、核膜改变较模型组轻,细胞质内自噬体及自噬溶酶体较模型组明显增加（P<0.05,P<0.01）。1.3.坐骨神经损伤点电镜结果造模后28天,电镜下模型组可见神经纤维髓鞘重度崩脱、扭曲,轴索严重萎缩甚至消失;轴索内线粒体呈现空泡状。三法三穴组可见大部分神经纤维髓鞘保留较完整,轴索无肿胀或萎缩,轴索内自噬溶酶体较模型组增加（P<0.05）。1.4.腓肠肌电镜结果造模后28天,电镜下模型组可见肌丝排列紊乱横纹消失,卫星细胞胞核极不规整,见大量空泡状线粒体。电镜下三法三穴组肌丝排列较整齐,横纹出现;可见清晰Z线及M线;卫星细胞细胞核较模型组规整,腓肠肌肌束间隙自噬体及自噬溶酶体较模型组增多（P<0.01,P<0.05）。2.三法三穴调控坐骨神经损伤点及腓肠肌细胞自噬促进SNI大鼠运动功能恢复2.1.行为学结果腓肠肌湿重:干预第0次,与假手术组比较,模型组大鼠腓肠肌湿重显着降低（P<0.01）。干预第20次,与模型组比较,三法三穴组大鼠腓肠肌湿重明显升高（P<0.01）。2.2.坐骨神经损伤点细胞自噬标记蛋白LC3、p62表达变化干预第0次,与假手术组比较,模型组大鼠坐骨神经损伤点LC3表达上调（P<0.05）。干预第20次,模型组大鼠坐骨神经损伤点LC3表达与假手术组无显着差异（P>0.05）;与模型组比较,三法三穴组LC3表达上调（P<0.05）。干预第0次,与假手术组比较,模型组大鼠坐骨神经损伤点p62表达上调（P<0.01）。干预第20次,模型组较假手术组坐骨神经损伤点p62仍显着增高（P<0.01）;与模型组比较,三法三穴组大鼠坐骨神经损伤点p62表达显着降低（P<0.05）。2.3.腓肠肌细胞自噬标记蛋白LC3、p62表达变化干预第0次,与假手术组比较,模型组大鼠腓肠肌中LC3表达显着上调（P<0.01）。干预第20次,与假手术组相比,模型组大鼠LC3表达仍较高（P<0.05）;三法三穴组LC3表达与模型组相比无差异（P>0.05）。干预第0次,与假手术组比较,模型组大鼠腓肠肌中p62表达显着上调（P<0.01）。干预第20次,与假手术组相比,模型组大鼠腓肠肌中p62仍趋于较高水平（P<0.01）;与模型组比较,三法三穴组p62表达降低（P<0.05）。3.三法三穴调控脊髓腹角神经元细胞自噬促进SNI大鼠运动功能恢复3.1.行为学结果斜板试验:干预第0次,与假手术组比较,模型组斜板试验角度显着降低（P<0.01）。干预第4次,与溶剂组比较,雷帕霉素组斜板角度升高（P<0.05）。干预第6次至第20次,与溶剂组比较,雷帕霉素组斜板角度显着升高（P<0.01）。干预第6次,三法三穴组斜板角度升高（P<0.05）。干预第10次至第20次,与模型组比较,三法三穴组斜板角度显着升高（P<0.01）。3.2.脊髓腹角LC3/NeuN双重免疫荧光标记结果干预第0次,与假手术组相比,模型组脊髓腹角LC3/NeuN共表达量增加（P<0.05）。干预第20次,与假手术组比较,模型组脊髓腹角LC3/NeuN共表达量仍处于上调状态（P<0.05）;与溶剂组相比,雷帕霉素组LC3表达显着增高（P<0.01）;与模型组比较,三法三穴组LC3表达也较高（P<0.05）,但与雷帕霉素组仍存差异（P<0.05）。3.3.脊髓腹角自噬体降解标记蛋白p62表达变化干预第0次,与假手术组相比,模型组脊髓腹角p62表达显着增加（P<0.01）。干预第20次,与假手术组相比,模型组p62表达仍然处于上调阶段（P<0.01）;与溶剂组相比,雷帕霉素组p62表达显着下降（P<0.01）;与模型组比较,三法三穴组p62表达下降（P<0.05）,但与雷帕霉素组仍有显着差距（P<0.01）。3.4.脊髓腹角细胞自噬上游mTOR-ULK信号通路关键因子表达结果干预第0次,与假手术组相比,模型组p-mTOR与p-ULK表达增高（P<0.01）。干预第20次,与假手术组相比,模型组p-mTOR与p-ULK仍处于上调状态（P<0.01）;溶剂组与模型组无显着差异（P>0.05）;与溶剂组比较,雷帕霉素组p-mTOR显着降低（P<0.01）,p-ULK显着上升（P<0.01）;与模型组比较,三法三穴组p-mTOR降低（P<0.05）,p-ULK上调（P<0.05）,但与雷帕霉素组仍存差异（P<0.01）。3.5.脊髓腹角mTOR通路上游AMPK表达结果干预第0次,与假手术组比较,模型组脊髓腹角p-AMPK表达无显着差异（P>0.05）。干预第20次,与假手术组比较,模型组脊髓腹角pAMPK表达同样无显着性差异（P>0.05）;溶剂组、雷帕霉素组与模型组无显着性差异（P>0.05）;与模型组比较,三法三穴组脊髓腹角p-AMPK表达增加（P<0.05）。3.6.脊髓腹角mTOR通路上游Akt表达结果干预第0次,,与假手术组相比,模型组p-Akt表达增高（P<0.05）。干预第20次,与假手术组相比,模型组p-Akt表达仍处于上调状态（P<0.01）;溶剂组与模型组无统计学差异（P>0.05）;与溶剂组相比,雷帕霉素组p-Akt表达显着下调（P<0.05）;与模型组相比,三法三穴组无显着性差异（P>0.05）。[结论]1.三法三穴干预可以促进SNI大鼠脊髓腹角至外周运动通路自噬体的生成,保护运动神经元、轴索及肌纤维超微结构的稳定,促进SNI大鼠后肢精细动作的恢复;2.三法三穴干预可以加速SNI大鼠神经损伤点与腓肠肌细胞自噬进程,使损伤点与失神经肌肉细胞加快清除与再利用坏死的细胞器,减缓肌肉的萎缩;3.三法三穴干预可以促进SNI大鼠后肢肌力的恢复,其潜在机制是促进脊髓腹角神经元细胞自噬,三法三穴对细胞自噬的调节是通过AMPK-mTOR信号通路完成的,而不是依靠Akt-mTOR信号通路实现的。
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1.中医对失神经肌萎缩的认识及研究进展 |
| 1.1 中医对失神经肌萎缩的认识 |
| 1.2 中医治疗失神经肌肉萎缩的研究进展 |
| 2.现代医学对失神经肌萎缩的认识及治疗研究进展 |
| 2.1 失神经肌萎缩的发生发展机制 |
| 2.2 Bcl-2 家族 |
| 2.3 现代医学治疗失神经肌萎缩的研究进展 |
| 实验研究 |
| 1.材料与实验方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 指标检测 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2.实验结果 |
| 2.1 各时间点各组家兔小腿腓肠肌湿重比 |
| 2.2 Tunel检测细胞凋亡 |
| 2.3 各时间点各组家兔腓肠肌中Bcl-xL的蛋白表达 |
| 2.4 各组家兔腓肠肌中Bcl-xL的mRNA表达 |
| 2.5 各组家兔腓肠肌Bad的蛋白表达 |
| 2.6 各组家兔腓肠肌中Bad的mRNA表达 |
| 讨论 |
| 1.模型的构造 |
| 1.1 实验动物的选择 |
| 1.2 造模方法的选择 |
| 2.指标的选取 |
| 2.1 湿重比 |
| 2.2 细胞凋亡指数 |
| 2.3 Bcl-xL |
| 2.4 Bad |
| 2.5 Bcl-xL与Bad |
| 3.神经松动术对兔坐骨神经损伤后腓肠肌肌萎缩的影响 |
| 4.夹脊电针对兔坐骨神经损伤后腓肠肌肌萎缩的影响 |
| 5.夹脊电针结合神经松动术对兔坐骨神经损伤后腓肠肌萎缩的影响 |
| 6.不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间所发表的论文 |
| 个人简历 |
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一部分 多微通道导电神经支架的设计和制备及物理性能和生物相容性能检测评价 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 主要仪器 |
| 1.2 实验对象及主要试剂 |
| 1.3 实验分组及方法 |
| 1.4 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 聚左旋乳酸取向性纤维膜及其生物相容性的研究 |
| 1 研究方法与内容 |
| 1.1 主要仪器 |
| 1.2 实验对象及主要试剂 |
| 1.3 实验分组及方法 |
| 1.4 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 仿生导电人工神经支架修复大鼠坐骨神经缺损的研究 |
| 1 研究方法与内容 |
| 1.1 主要仪器 |
| 1.2 实验对象和主要试剂 |
| 1.3 实验分组和方法 |
| 2 结果 |
| 3.讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 周围神经损伤修复的细胞和分子机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 针刀治疗KOA的临床和实验研究进展 |
| 1 针刀治疗KOA临床研究进展 |
| 2 针刀治疗KOA的实验研究进展 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 针刀治疗膝骨关节炎抑制软骨细胞凋亡机制的研究进展 |
| 1 组织层面: 改善关节软骨形态 |
| 2 细胞层面: 降低细胞凋亡率,促进受损软骨修复 |
| 3 分子层面: 调控各分子及相关信号通路抑制软骨细胞凋亡 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述三 针刀对膝骨关节炎镇痛作用的研究概述 |
| 1 外周镇痛机制 |
| 2 中枢镇痛机制 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述四 膝关节的生物力学研究 |
| 1 关节周围软组织 |
| 2 骨性结构 |
| 3 下肢力线 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 技术路线图 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验试剂和耗材 |
| 1.3 主要仪器及设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 模型制备 |
| 2.2 动物分组及干预措施 |
| 2.3 取材及指标检测 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 各组兔行为学结果 |
| 3.2 各组兔肌肉HE染色结果 |
| 3.3 各组兔伸肌-屈肌拉伸弹性模量(EM)结果 |
| 3.4 各组兔膝关节软骨纳米压痕结果 |
| 3.5 各组兔膝关节软骨番红O/固绿染色结果 |
| 3.6 各组兔膝关节软骨免疫荧光染色结果 |
| 3.7 各组兔血清和关节液中CTX-2和COMP含量结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 KOA动物模型选择 |
| 4.2 针刀干预缓解KOA模型兔股直肌-股二头肌萎缩,降低膝周肌群拉伸弹性模量 |
| 4.3 针刀干预降低KOA模型兔软骨Mankin评分,缓解KOA软骨损伤 |
| 4.4 针刀干预改善KOA模型兔关节软骨生物力学性能 |
| 4.5 针刀干预促进KOA模型兔软骨细胞外基质修复 |
| 4.6 针刀干预抑制KOA模型兔软骨降解标志物CTX-2、COMP的表达 |
| 5 结论 |
| 结语 |
| 1 实验总结 |
| 2 创新点 |
| 3 存在的问题与不足 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研宄成果 |
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 周围神经组织与神经组织工程 |
| 1.1.1 神经组织结构与组成 |
| 1.1.2 周围神经组织的缺损与再生 |
| 1.1.3 神经组织工程支架的研发与应用 |
| 1.2 神经组织工程支架的材料与结构 |
| 1.2.1 支架材料 |
| 1.2.2 支架结构 |
| 1.3 压电材料在组织工程上的应用 |
| 1.3.1 生物组织中的压电性 |
| 1.3.2 电刺激在神经再生中的促进作用 |
| 1.3.3 压电材料在组织工程中的应用 |
| 1.4 本课题的研究思路与主要内容 |
| 1.4.1 本课题的研究思路 |
| 1.4.2 本课题的主要研究内容 |
| 1.4.3 本课题的创新点 |
| 第二章 PVDF/PCL复合压电支架的制备和基本性质 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 仪器与材料 |
| 2.2.1 实验仪器 |
| 2.2.2 材料与试剂 |
| 2.3 实验方法与步骤 |
| 2.3.1 PVDF/PCL复合压电支架的制备 |
| 2.3.2 PVDF/PCL复合压电支架形貌观察与元素分析 |
| 2.3.3 PVDF/PCL复合压电支架的孔隙率测定 |
| 2.3.4 PVDF/PCL复合压电支架的力学性能 |
| 2.3.5 PVDF/PCL复合压电支架的晶相分析 |
| 2.3.6 PVDF/PCL复合压电支架的压电性能 |
| 2.3.7 PVDF/PCL复合压电支架的热稳定性 |
| 2.3.8 PVDF/PCL复合压电导管的构造 |
| 2.3.9 PVDF/PCL复合压电导管的形貌观察 |
| 2.4 实验结果与讨论 |
| 2.4.1 复合压电支架制备条件的确立 |
| 2.4.2 PVDF/PCL复合压电支架的TEM观察与EDS分析 |
| 2.4.3 PVDF/PCL复合压电支架的孔隙率测定 |
| 2.4.4 PVDF/PCL复合压电支架的力学性能 |
| 2.4.5 PVDF/PCL复合压电支架的晶相分析 |
| 2.4.6 PVDF/PCL复合压电支架的压电性能 |
| 2.4.7 PVDF/PCL复合压电支架的热稳定性 |
| 2.4.8 PVDF/PCL复合压电导管的形貌观察 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 PVDF/PCL复合压电支架的体外毒性及其对RSC细胞增殖与分化的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 仪器与材料 |
| 3.2.1 实验仪器 |
| 3.2.2 材料与试剂 |
| 3.3 实验方法与步骤 |
| 3.3.1 RSC细胞培养 |
| 3.3.2 支架的制备与灭菌 |
| 3.3.3 细胞毒性实验 |
| 3.3.4 细胞凋亡实验 |
| 3.3.5 RSC细胞在PVDF/PCL复合压电支架上的增殖行为 |
| 3.3.6 RSC细胞在PVDF/PCL复合压电支架上的形貌观察 |
| 3.4 实验结果与讨论 |
| 3.4.1 细胞毒性 |
| 3.4.2 细胞凋亡 |
| 3.4.3 细胞增殖 |
| 3.4.4 细胞的附着与形态 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 PVDF/PCL复合压电导管治疗大鼠坐骨神经缺损 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 仪器与材料 |
| 4.2.1 实验仪器 |
| 4.2.2 材料与试剂 |
| 4.3 实验方法与步骤 |
| 4.3.1 实验动物分组与大鼠坐骨神经缺损模型构建 |
| 4.3.2 大鼠坐骨神经功能恢复评价 |
| 4.3.3 大鼠电生理实验 |
| 4.3.4 大鼠血液样本收集和预处理 |
| 4.3.5 大鼠再生神经、肌肉和主要器官样本收集与预处理 |
| 4.3.6 样本检测与统计学分析 |
| 4.3.7 PVDF/PCL复合压电导管的体内降解 |
| 4.4 实验结果与讨论 |
| 4.4.1 不良反应与毒副作用考察 |
| 4.4.2 促进大鼠坐骨神经再生与功能恢复 |
| 4.4.3 促进大鼠坐骨神经血管新生 |
| 4.4.4 改善腓肠肌失神经萎缩 |
| 4.4.5 PVDF/PCL复合压电导管的体内降解 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 总结与展望 |
| 5.1 研究总结 |
| 5.2 克服的主要困难 |
| 5.3 课题展望 |
| 5.3.1 增加大鼠样本量,选择多个时间节点进行长期考察 |
| 5.3.2 提高支架压电性能 |
| 5.3.3 电刺激促进神经再生的作用机制 |
| 5.3.4 压电支架的降解速率 |
| 5.3.5 选择更多疾病模型探讨压电支架的通用性 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 细胞外基质的研究现状 |
| 1 ECM的组成及其降解系统 |
| 1.1 ECM的组成 |
| 1.2 ECM的降解系统 |
| 2 ECM作用的实现途径 |
| 2.1 ECM硬度 |
| 2.2 ECM硬度相关通路 |
| 3 ECM的研究进展 |
| 3.1 ECM与癌症的研究现状 |
| 3.2 ECM与纤维化疾病的研究现状 |
| 参考文献 |
| 综述二 细胞外基质与骨骼肌损伤修复关系的研究进展 |
| 1 骨骼肌损伤的研究现状 |
| 1.1 骨骼肌损伤的原因 |
| 1.2 骨骼肌损伤的病理机制 |
| 2 骨骼肌纤维化研究现状 |
| 2.1 ECM调节骨骼肌纤维化的相关分子机制 |
| 2.2 ECM力学传导通路与骨骼肌细胞之间的关系 |
| 参考文献 |
| 综述三 骨骼肌再生修复过程中相关信号通路的研究进展 |
| 1 MSCs的概况 |
| 2 骨骼肌损伤修复过程中的信号通路 |
| 2.1 MAPK信号通路与骨骼肌损伤 |
| 2.2 PI3K/Akt/mTOR信号通路与骨骼肌损伤 |
| 2.3 Wnt信号通路与骨骼肌损伤 |
| 2.4 Notch信号通路与骨骼肌损伤 |
| 2.5 JAK/STAT信号通路与骨骼肌损伤 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 实验研究 |
| 实验技术路线图 |
| 实验一 电针“委中”穴对大鼠腰多裂肌损伤后胶原蛋白Ⅰ、基质金属蛋白酶2表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 实验二 大鼠腰多裂肌卫星细胞的分离培养与鉴定 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 实验三 电针血清促进大鼠腰多裂肌细胞外基质重塑和肌卫星细胞增殖与ERK关系的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 实验四 电针血清促进大鼠腰多裂肌细胞外基质重塑和肌卫星细胞增殖与Integrinβ1关系的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 1 各部分实验结果小结 |
| 2 结论 |
| 3 创新点 |
| 4 不足和展望 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在学期间的主要研究成果 |
| 摘要 |
| abstract |
| 中文部分 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 研究现状 |
| 1.2.1 神经导管的种类和特点 |
| 1.2.2 神经导管的内外微环境 |
| 1.2.3 电刺激与导电神经导管 |
| 第二章 氧化石墨烯/聚己内酯神经导管的制备与表征 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 氧化石墨烯/聚己内酯神经导管制备 |
| 2.2.2 氧化石墨烯/聚己内酯神经导管表征 |
| 2.2.3 数据统计分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 氧化石墨烯/聚己内酯神经导管的体外生物相容性实验 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 神经导管支架材料准备与消毒 |
| 3.2.2 施旺细胞培养 |
| 3.2.3 施旺细胞增殖、毒性实验 |
| 3.2.4 施旺细胞微观形态扫描电镜实验 |
| 3.2.5 倒置荧光显微镜观察实验 |
| 3.2.6 蛋白质印迹法(Western Blot)、实时荧光定量核酸扩增检测(quantitative PCR) |
| 3.2.7 数据统计分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 氧化石墨烯/聚己内酯神经导管修复坐骨神经缺损实验 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 建立大鼠坐骨神经缺损模型 |
| 4.2.2 大体观察 |
| 4.2.3 功能学检测——步态分析 |
| 4.2.4 电生理学检测 |
| 4.2.5 组织形态学检测 |
| 4.2.6 免疫组织化学染色检测 |
| 4.2.7 蛋白质印迹法(Western Blot) |
| 4.2.8 数据统计分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 全文总结 |
| 英文部分 |
| Chapter 1 Introduction |
| 1.1 Background |
| 1.2 Research Status |
| 1.2.1 Types and Characteristics of Nerve Conduits |
| 1.2.2 Internal and External Microenvironment of Nerve Conduits |
| 1.2.3 Electrical Stimulation and Conductive Nerve Conduits |
| Chapter 2 Preparation and Characterization of Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit |
| 2.1 Introduction |
| 2.2 Materials and Methods |
| 2.2.1 Preparation of GO/PCL Nerve Conduit |
| 2.2.2 Characterization of GO/PCL Nerve Conduit |
| 2.2.3 Statistical Analysis |
| 2.3 Results |
| 2.4 Discussion |
| 2.5 Conclusion |
| Chapter 3 In Vitro Biocompatibility Studies of Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit |
| 3.1 Introduction |
| 3.2 Materials and Methods |
| 3.2.1 Preparation and Disinfection of Nerve Conduit Materials |
| 3.2.2 Schwann Cell Culture |
| 3.2.3 Schwann Cell Proliferation and Toxicity Assays |
| 3.2.4 Microscopic Morphology of Schwann Cells with SEM |
| 3.2.5 Cell Observation with Inverted Fluorescence Microscopy |
| 3.2.6 Western Blot and Real-time Quantitative PCR |
| 3.2.7 Statistical Analysis |
| 3.3 Results |
| 3.4 Discussion |
| 3.5 Conclusion |
| Chapter 4 In Vivo Repair of Sciatic Nerve Defects by Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit |
| 4.1 Introduction |
| 4.2 Materials and Methods |
| 4.2.1 Rat Sciatic Nerve Defect Model |
| 4.2.2 General Observation |
| 4.2.3 Functional Evaluation-Gait Analysis |
| 4.2.4 Electrophysiological Tests |
| 4.2.5 Histomorphological Evaluation |
| 4.2.6 Immunohistochemical Staining Evaluation |
| 4.2.7 Western Blot |
| 4.2.8 Statistical Analysis |
| 4.3 Results |
| 4.4 Discussion |
| 4.5 Conclusion |
| Chapter 5 Overall Conclusions |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间已发表或录用的论文 |
| 八年制学位论文要求 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 课题研究背景和意义 |
| 1.2 研究现状 |
| 1.2.1 FES治疗的研究现状 |
| 1.2.2 关节模型的研究现状 |
| 1.3 本文研究意义和内容安排 |
| 第二章 FES调节踝关节角度在体实验研究 |
| 2.1 基于姿态传感器的FES实验设计 |
| 2.1.1 基于姿态传感器实验平台搭建 |
| 2.1.2 姿态传感器与电刺激仪介绍 |
| 2.1.3 实验注意事项与基本步骤 |
| 2.2 电刺激参数确定实验 |
| 2.2.1 电刺激频率确定实验 |
| 2.2.2 电刺激幅值确定实验 |
| 2.2.3 电刺激脉宽阈值实验 |
| 2.3 基于姿态传感器的电刺激调节踝关节角度实验 |
| 2.3.1 实验设置 |
| 2.3.2 实验结果与分析 |
| 2.3.3 FES下踩关节运动特性的分析与讨论 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 基于现象学方法的踝关节H模型建模 |
| 3.1 基于神经网络的H模型结构的确定 |
| 3.2 遗传算法辨识H模型参数 |
| 3.2.1 遗传算法基本原理 |
| 3.2.2 模型参数确定 |
| 3.3 基于神经网络的Hammerstein模型测试结果 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 基于机理学方法的踩关节肌肉骨骼建模 |
| 4.1 FES下肌肉骨骼模型总概述 |
| 4.2 踝关节的运动学分析 |
| 4.2.1 踝关节运动模式分析 |
| 4.2.2 踝关节力臂分析 |
| 4.3 FES下踩关节的动力学分析 |
| 4.3.1 电刺激参数对激活状态的影响 |
| 4.3.2 基于Hill模型的肌肉力分析 |
| 4.3.3 踝关节力矩计算 |
| 4.4 踝关节逆动力学分析 |
| 4.4.1 拉格朗日方程概述 |
| 4.4.2 踝关节动力学简化模型 |
| 4.4.3 FES下踝关节肌肉骨骼模型的状态方程 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 扩展卡尔曼滤波器算法辨识机理模型参数与模型对比分析 |
| 5.1 扩展卡尔曼滤波器在模型中的运用 |
| 5.1.1 扩展卡尔曼滤波器的理论分析 |
| 5.1.2 扩展卡尔曼滤波器算法在机理模型中的应用 |
| 5.2 机理模型辨识结果 |
| 5.2.1 机理模型参数估计结果 |
| 5.2.2 机理模型适用性检验 |
| 5.3 H模型与机理模型的比较 |
| 5.4 模型讨论与分析 |
| 5.5 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 在学期间研究成果及发表的学术论文 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 实验材料与方法 |
| 第三章 实验结果 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间的主要成果 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 综述一 骨骼肌创伤性纤维化的信号通路与临床防治 |
| 1 临床表现 |
| 1.1 创伤性肌肉骨骼损伤与修复 |
| 1.2 老化、退变与代谢紊乱 |
| 1.3 遗传性疾病 |
| 2 治疗策略 |
| 2.1 一般处理 |
| 2.2 手术修复 |
| 2.3 药物治疗 |
| 2.4 细胞生物制剂治疗 |
| 2.5 中医药治疗 |
| 3 纤维化和细胞介质的传导研究 |
| 3.1 卫星细胞 |
| 3.2 卫星细胞龛室 |
| 3.3 单核/巨噬细胞 |
| 3.4 纤维化母细胞 |
| 4 在纤维化发育过程中信号通路的作用 |
| 4.1 Notch和Wnt |
| 4.2 转化生长因子 |
| 4.3 p38丝裂原活化蛋白激酶 |
| 4.4 骨形态发生蛋白 |
| 4.5 神经肌肉接头 |
| 4.6 肌肉生长抑制素 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述二 急性骨骼肌损伤动物实验模型和技术应用 |
| 1 骨骼肌损伤动物实验模型 |
| 1.1 骨骼肌损伤与炎症反应 |
| 1.2 骨骼肌损伤的动物模型 |
| 2 动物模型和肌肉的选择 |
| 2.1 非侵入性的模型更合理 |
| 2.2 肌群的选择 |
| 2.3 实验动物的选择 |
| 3 结束语 |
| 参考文献 |
| 综述三 从“气”论治骨骼肌损伤 |
| 1 中医对“骨骼肌损伤”的认识—名正气顺 |
| 1.1 对“筋”和“肉”的认识 |
| 1.2 筋伤-骨骼肌损伤的病因 |
| 2 骨骼肌损伤的病机—气机 |
| 3 骨骼肌损伤的治则—调气 |
| 4 骨骼肌损伤后中医气机失常的现代研究 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 理论探讨 |
| 从认知模式谈中医“气”语词指称的概念性与时序性事态的对象化 |
| 1 “气”语词指称的出发点和模式 |
| 1.1 “气”语词指称与物质世界的“极精微物质” |
| 1.2 认知模式供给侧的理论重构 |
| 2 “气”语词指称的形式与意义 |
| 2.1 初始对象—“气”语词指称的意向性分析 |
| 2.2 语词指称是关于气的命题 |
| 2.3 论证“气”作为时序性事态的语词指称 |
| 3 “气”时序性事态的对象化呈现中医语词的概念化 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 实验正文 |
| 实验一 大鼠腓肠肌与胫腓骨的解剖关系和几何动力学特点 |
| 材料和方法 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 结果 |
| 1 胫腓骨与腓肠肌复合物的解剖形态学测量 |
| 2 撞击伤造模系统和支持盾的设计 |
| 讨论 |
| 1 大鼠小腿解剖与动力学三角 |
| 2 撞击伤造模系统和支持盾 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验二 撞击伤造模系统撞击反应的力学特性 |
| 材料和方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 实验地点和环境 |
| 1.3 实验仪器与设备 |
| 1.4 实验数据处理软件 |
| 2 方法 |
| 2.1 撞击伤造模系统撞击反应的数据收集与处理 |
| 2.2 撞击反应的动力学性能检测 |
| 2.3 数据统计 |
| 2.4 实验流程图 |
| 结果 |
| 1 撞击能量与撞击反应强度的关系 |
| 2 撞击反应变量间的相互关系 |
| 3 相同撞击势能,冲量对撞击反应的影响 |
| 4 相同撞击冲量,势能对撞击反应的影响 |
| 讨论 |
| 1. 撞击伤造模系统具有稳定的力学特性 |
| 2. 撞击伤造模系统的构件设计与测量原理 |
| 3 被试对象木质材料性能 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验三 腓肠肌撞击伤模型不同程度撞击事件的力学反应和传导特点 |
| 材料和方法 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 结果 |
| 1 腓肠肌损伤的离体撞击反应情况 |
| 2 在体腓肠肌损伤的撞击反应情况 |
| 3 腓肠肌状态(离体与在体)对撞击反应变量的影响 |
| 4 不同能量级别损伤后腓肠肌的形态学观察 |
| 讨论 |
| 1 在不同参数的损伤能量中腓肠肌的撞击反应具有稳定的力学特性 |
| 2 肌肉状态对骨骼肌撞击伤的影响 |
| 3 不同程度腓肠肌撞击伤的形态分型与力学分区 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验四 不同程度腓肠肌撞击伤模型的组织修复与纤维化进程的时序性分析 |
| 材料和方法 |
| 1 材料 |
| 2 实验步骤与方法 |
| 结果 |
| 1 腓肠肌损伤后肢体运动功能恢复的时序性评价 |
| 2 大鼠腓肠肌撞击伤后病理组织学改变的时序性描述 |
| 3 大鼠腓肠肌撞击伤后纤维化的时序性评价 |
| 讨论 |
| 1 腓肠肌撞击伤模型原理的综合分析 |
| 2 肢体功能恢复与组织修复 |
| 3 骨骼肌损伤的“形”与“气” |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 附录 |
| 附录1 英文缩略词表 |
| 附录2 实验四实验性图片 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 现代医学周围神经损伤病理及治疗方法研究进展 |
| 1. 周围神经的生理功能及解剖特点 |
| 2. 周围神经损伤程度分级及功能修复影响因素 |
| 3. 周围神经损伤后的病理变化 |
| 4. 周围神经损伤后运动功能修复时限 |
| 5. 周围神经损伤的现代医学治疗 |
| 6. 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 推拿治疗原发性及继发性坐骨神经病变系统评价及meta分析 |
| 1. 资料与方法 |
| 1.1. 文献纳入与排除标准 |
| 1.2. 文献检索信息来源及检索方式 |
| 1.3. 文献筛选方法 |
| 1.4. 文献数据信息提取方法 |
| 1.5. 文献质量评价方法 |
| 1.6. 文献提取的数据分析 |
| 2. 结果 |
| 2.1. 纳入文献的特征 |
| 2.2. 纳入文献的方法学质量 |
| 2.3. 纳入文献结局指标meta分析结果 |
| 2.4. 纳入文献的推拿治疗远期疗效分析 |
| 2.5. 纳入文献推拿安全性分析 |
| 2.6. 纳入文献异质性分析 |
| 2.7. 纳入文献倒漏斗图分析 |
| 3. 讨论 |
| 3.1. 推拿治疗原发性及继发性坐骨神经病变有效性及安全性探讨 |
| 3.2. 推拿治疗原发性及继发性坐骨神经病变选经取穴规律探讨 |
| 3.3. 推拿治疗原发性及继发性坐骨神经病变手法选择规律探讨 |
| 3.4. 推拿治疗原发性及继发性坐骨神经病变疗程分析 |
| 3.5. 本系统评价的局限性 |
| 3.6. 对今后研究的启发 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 综述三 中医外治法促进周围神经损伤后运动功能恢复的机理研究进展 |
| 1. 中医外治法可以调控神经营养因子表达 |
| 2. 中医外治法可以保护神经元骨架及髓鞘结构 |
| 3. 中医外治法可以修复受损神经元的轴浆运输机制 |
| 4. 中医外治法可以促进雪旺细胞的增殖 |
| 5. 中医外治法可以减缓失神经肌肉萎缩的程度 |
| 6. 中医外治法可以抑制神经元的凋亡 |
| 7. 中医外治法可以调控神经元细胞自噬 |
| 8. 小结 |
| 参考文献 |
| 综述四 细胞自噬调节损伤后神经再生修复的研究进展 |
| 1. 细胞自噬对神经细胞的调控作用研究进展 |
| 1.1. 细胞自噬的生物学进程 |
| 1.2. 细胞自噬调控神经的再生与修复 |
| 2. 细胞自噬的实验检测方法研究进展 |
| 2.1. 透射电子显微镜观察组织中自噬体的形成与数量是重要手段 |
| 2.2. 分子生物学方法检测LC3及p62的表达是重要途径 |
| 3. 细胞自噬上游分子信号通路 |
| 3.1. mTOR-ULK1/2通路是调节细胞自噬的重要途径 |
| 3.2. PI3K-Akt通路激活可以通过促进mTOR磷酸化抑制细胞自噬 |
| 3.3. AMPK磷酸化可以通过抑制mTOR磷酸化激活细胞自噬 |
| 4. 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 总体实验技术路线图 |
| 实验一 三法三穴对SNI大鼠脊髓腹角至外周通路超微结构的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 2.1. 行为学检测结果 |
| 2.2. 电镜观察情况 |
| 2.3. 自噬体计数结果 |
| 3. 讨论 |
| 3.1. 三法三穴对SNI大鼠坐骨神经功能指数的影响 |
| 3.2. 三法三穴对SNI大鼠形态学影响研究背景 |
| 3.3. 三法三穴对SNI大鼠脊髓腹角神经元超微结构的影响 |
| 3.4. 三法三穴对SNI大鼠神经损伤点超微结构的影响 |
| 3.5. 三法三穴对SNI大鼠腓肠肌超微结构的影响 |
| 4. 小结 |
| 实验二 三法三穴对SNI大鼠坐骨神经损伤点及腓肠肌细胞自噬的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 2.1. 三法三穴对SNI大鼠腓肠肌湿重的影响 |
| 2.2. 三法三穴对SNI大鼠坐骨神经损伤点LC3、p62表达的影响 |
| 2.3. 三法三穴对SNI大鼠腓肠肌LC3、p62表达的影响 |
| 3. 讨论 |
| 3.1. 三法三穴干预对SNI大鼠腓肠肌湿重的影响 |
| 3.2. 三法三穴干预对神经损伤点及腓肠肌细胞自噬的影响 |
| 4. 小结 |
| 实验三 三法三穴对SNI大鼠运动神经元细胞自噬影响及其分子机制研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 2.1. 三法三穴对SNI大鼠后肢肌力的影响 |
| 2.2. 三法三穴对SNI大鼠脊髓腹角LC3/NeuN共表达的影响 |
| 2.3. 三法三穴对SNI大鼠脊髓腹角p62表达的影响 |
| 2.4. 三法三穴对SNI大鼠脊髓腹角p-mTOR及p-ULK表达的影响 |
| 2.5. 三法三穴对SNI大鼠脊髓腹角p-Akt表达的影响 |
| 2.6. 三法三穴对SNI大鼠脊髓腹角p-AMPK表达的影响 |
| 3. 讨论 |
| 3.1. 细胞自噬上游信号通路研究背景 |
| 3.2. 三法三穴及雷帕霉素对SNI大鼠后肢肌力的影响 |
| 3.3. 三法三穴及雷帕霉素对SNI大鼠对运动神经元细胞自噬的影响 |
| 3.4. 三法三穴及雷帕霉素对SNI大鼠mTOR-ULK通路的影响 |
| 3.5. 三法三穴及雷帕霉素对SNI大鼠mTOR上游Akt通路的影响 |
| 3.6. 三法三穴及雷帕霉素对SNI大鼠mTOR上游AMPK通路的影响 |
| 4. 小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
