刘小娟[1]（2021）在《基于代谢组学探讨针刺联合HRT对POI患者性激素相关代谢物及代谢通路的影响》文中研究表明目的:基于数据挖掘技术,探究古今文献针刺治疗早发性卵巢功能不全（Premature ovarian insufficiency,POI）患者较优的针刺腧穴配伍方案,通过随机对照临床试验,进一步观察针刺联合激素替代治疗（Hormone replacement treatment,HRT）的临床疗效和安全性,并从代谢组学角度探究针刺联合HRT调节POI患者血清性激素的代谢组学机制。方法:分别建立古代文献和现代文献针灸治疗POI的数据库,运用EXCEL和SPSS Modeler 19.0软件分析选经用穴规律,得出较佳的针刺配伍方案。进一步设计随机对照临床试验,将64例早发性卵巢功能不全的患者随机分为3组,其中试验组为针刺HRT组,给予针刺联合HRT治疗;对照组1为针刺组,予以单纯针刺治疗,对照组2为HRT组,给予单纯HRT治疗,三组疗程均为3个月。分别评估治疗前和治疗后的血清抗苗勒氏管激素（anti-Mullerian hormone,AMH）、血清性激素3项包括促卵泡成熟激素（follicle-stimulating hormone,FSH）、促黄体生成素（luteinizing hormone,LH）和雌二醇（estrogen,E2）、窦卵泡数量、改良Kupperman（KI）评分、更年期生存质量（Menopause Quality of Life Scale,MENqol）评分、焦虑自评量表（Self—Rating Anxiety Scale,SAS）评分以评估临床疗效。记录治疗过程中的不良反应并检测治疗前后的血常规、肝功能、肾功能评估治疗的安全性。最后随机抽取针刺联合HRT组10例患者、针刺组12例患者、HRT组9例患者,分别采集这些患者治疗前和治疗后3个月的血清标本,采用液相色谱—质谱技术检测血清差异代谢物,运用Metabo Analyst 4.0进行代谢通路分析。结果:1古代文献共收集102条针灸处方,涵盖40个腧穴;现代文献共收集106条针灸处方,涵盖75个腧穴。经脉选择上:古今医家均以任脉为最主要选经,其次为肾经、膀胱经、脾经,现代多选胃经。部位选择上:古今医家均以腹区为最主要的选部,其次为足区、腿区、腰区和骶区的选择,现代医家背区的选择更多。腧穴选择上:古今文献高频腧穴均以关元第一,其余高频腧穴差异较大,古代依次是中极、涌泉、阴交、商丘;现代依次是三阴交、肾俞、子宫、足三里;古今高频腧穴配伍均以关元为主,其余配伍腧穴差异较大。特定穴选择上:古今文献高频特定穴均是募穴、五输穴、交会穴、背俞穴。古代文献多选八脉交会穴,现代文献多选原穴。古今文献特定穴腧穴频次第一均是关元,古代依次是中极、阴交、涌泉、商丘、然谷;现代依次是关元、三阴交、肾俞、足三里、太溪、太冲。特定穴腧穴配伍上古今均以关元为主穴,其余配伍特定穴差异较大。2针刺组治疗后POI患者血清AMH水平较治疗前提高（P<0.05）。三组治疗后分别较治疗前血清FSH水平下降、LH水平下降、E2水平上升（P<0.05）,改良KI评分、MENqol评分、SAS评分均下降（P<0.05）。组间比较发现针刺组对AMH和雌二醇的改善均优于HRT组（P<0.05）;治疗前机体E2高于22pmol/L或FSH水平低于40U/L者,针刺改善雌二醇效果更稳定。针刺联合HRT对POI患者性生活改善均优于针刺组和HRT组（P<0.05）。3针刺组治疗前后差异的代谢物有5个:L—谷氨酸、D—脯氨酸、β—氨基丙腈、柠檬酸、N—乙酰—L—苯基丙氨酸;参与的代谢通路主要有8条:D—谷氨酸和D—谷氨酸盐代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、精氨酸生物合成、氨酰—t RNA合成、氰基氨基酸代谢、三羧酸循环、乙醛酸和二羧酸代谢、苯基丙氨酸代谢。HRT组治疗前后有6种差异的代谢物:L—赖氨酸、β—丙氨酸、5—胺基戊醛、γ—亚麻酸、脱氧胆酸、肌酐;参与的代谢通路有10条:赖氨酸降解、赖氨酸生成、生物素代谢、泛酸和辅酶A的生物合成、β—丙氨酸代谢、丙酸盐代谢、亚麻酸代谢、磷酸戊糖途径、精氨酸和脯氨酸代谢。针刺联合HRT组治疗前后有2种差异代谢物:L—蛋氨酸、4—氨基丁醛二甲缩醛;参与的代谢通路有4条:β—丙氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、氨酰—t RNA合成。结论:1古今文献针灸治疗早发性卵巢功能不全选经用穴大致相同,存有差别,现代在传承础上有发展。2三种疗法均可改善POI患者血清性激素水平、改善症状、提高生存质量,缓解焦虑情绪;针刺提高卵巢储备功能、改善血清雌二醇水平独具优势;尤对有一定雌二醇水平或FSH水平低于40U/L者疗效更稳定;针刺联合HRT改善患者性生活有协同作用。三种疗法短期内不良反应低。3针刺联合激素、针刺、激素三者调节代谢物及代谢通路有所不同。
王彦彦[2]（2020）在《岭南中医妇科治疗月经病学术源流及诊疗特色整理研究》文中研究表明目的:综合运用文献研究、中医学术研究、比较研究等方法,通过网络文献检索系统、广州市各大图书馆、访谈名老中医学术继承人或后人、跟名老中医出诊学习等四种途径,对岭南中医名家治疗月经病学术思想、诊疗特色及临床经验等进行大规模的收集整理,发掘岭南地区月经病的发病特点和名家调治月经病的诊治规律,初步呈现岭南中医妇科医家治疗月经病的学术思想源流及特色经验集成,为临床继承应用岭南中医妇科学术流派的学术思想及临证经验提供依据。在此基础上,用参与性研究方法初步验证其中一位名医的经验方的临床疗效,为岭南中医妇科学术思想的临床疗效提供循证依据。为中医妇科后辈学习岭南中医妇科提供指引,为发挥岭南中医妇科优势,继承与发扬岭南中医妇科奠定一定的基础。方法:本研究工作主要通过广泛收集历代岭南中医妇科名家相关历史记载、发表论文、医案医着、名医弟子的跟师记录、心得、经验总结及其他途径关于名医的一些记录等,搜集其中各岭南名医关于月经病诊治的学术背景、学术思想,临床经验,有效病案等,通过比较研究的科研方法,归纳整理出岭南名医对于月经病诊治的特色和规律,形成“岭南中医妇科治疗月经病”学术源流。同时对岭南中医妇科名家治疗月经病的诊疗特色进行整理研究,采用文献收集、名老中医自身总结、名家访谈、弟子访谈、跟诊学习等形式,采用传统及现代的多种研究方法,综合运用多种技术手段,研究当代岭南妇科名医的学术思想、思辨特点、临床经验、方药特色、典型医案,总结其共性规律和特点,总结岭南中医妇科流派的学术思想。在基于上述岭南中医妇科名家治疗月经病的临证经验特色总结下,选择岭南妇科名家李丽芸的一个经验方药,采用参与性临床研究,从方药、治法入手,凝练形成代表性研究方案,评价临床疗效,为岭南中医妇科学术思想的临床疗效提供循证依据。结果:在岭南医学的发展过程中,岭南地区中医妇科流派的发展受岭南文化的历史沉淀影响深刻。岭南中医妇科形成因素包括地域、经济文化、体质因素等。岭南中医妇科流派的构成代表有罗氏妇科、蔡氏妇科两支妇科派系,还包括以妇科病为专科的岭南医家及兼治妇科病的名家。岭南中医妇科流派治疗月经病的学术特点:（1）传承发扬中医,创新中医理论,培养数代岭南名医;（2）百病生于气,重视调理气机;（3）因地制宜,注重湿热致病,顾护气阴;（4）四诊合参,重视望诊、脉诊;（5）心身同治,调畅情志,重视情志治病;（6）调理肾脾,先天与后天并重;（7）用药轻灵,善用南药花药;（8）结合岭南饮食文化,药食同源,重视药膳。本研究选择岭南妇科名家李丽芸教授经验方之补肾健脾法中药复方,治疗脾肾两虚型经期延长（黄体功能不全）,运用随机对照方法,与地屈孕酮片作为对照,结果如下:两组患者治疗后经行时间延长的主证积分明显下降,组间比较无统计学差异（P>0.05）,说明两组治疗疗效相当;两组治疗后中医证候积分均较治疗前明显下降,组间比较有统计学意义（P<0.05）,说明中药组在改善患者的中医症状方面更为有效。经过三个月经周期的治疗两组HPS评分均较治疗前明显增加,而两组间治疗后对照,差异无统计学意义,说明两组的疗效相当。两组基础体温高温相持续时间经治疗后延长,而治疗后组间比较差异无统计学意义（P>0.05）,说明两组在延长黄体期时间方面疗效相当。两组黄体中期血清孕酮值（BBT上升6-8天）经治疗后较前显着增加（P<0.05）,差异有统计学意义,说明两组治疗均有可能提高黄体中期血清孕酮值而改善黄体功能。但因两组治疗前后黄体中期血清孕酮值水平组间比较,差异均无统计学意义,组间不具可比性,尚不能证明中药组对提高黄体中期血清孕酮水平的有效性。结论:岭南气候地理的独特性造成了岭南地区有别于我国其他地区的疾病特点及居民体质,如外邪常夹湿邪入侵人体,月经病患者也多气虚、阴虚及痰湿体质等;岭南地区还有采用当地中草药煲凉茶和煲汤的饮食文化习惯,因此药膳调经也成为岭南中医妇科的一大特色。岭南妇科流派传承特点:以代表性南海罗氏妇科为例,其调经特色在于:（1）崇尚景岳,调经首重阴阳;（2）脾肾为本,气血为用;（3）养阴保津,驱邪扶正,攻补有度;（4）治疗重视地域气候的差异;（5）善用南药,药性平和;（6）重视情志治病。罗元恺教授继承发扬,衷中参西,提出女性肾气—天癸—冲任—子宫轴的概念,这是岭南中医妇科理论上的重大突破。罗氏的传人欧阳惠卿、李丽芸、罗颂平、王小云等传承罗氏的学术思想,又各有发展创新。欧阳惠卿致力于补肾活血法在妇科领域常见病、难治病的应用研究,其科研成果硕果累累。李丽芸充实了补肾法,提出经典的补肾八法,丰富了补肾调周法的经验。罗颂平立足天人合一,提出月经周期与太阴月节律同步的创新观点。王小云经多年临床实践及科学研究,形成特色明显的中医“心身同治”学术思想,创新以情胜情的情志疗法。同时岭南妇科流派传承人为岭南中医妇科流派的研究开创流派工作室,培养人才,为岭南妇科流派作出贡献。潮汕蔡氏妇科其传承以家传为主,兴盛至今的除了其百年不衰的疗效。近现代名医蔡仰高、蔡纯臣刻苦努力传承良好的家风医德,崇仲景学说,重脾肾,博采众长,重视祖方、偏方,又有创新。至现代蔡妙珊教授继承先辈经验,又结合吸收院校中医教学,将蔡氏妇科发扬壮大。临床验证方面,李丽芸教授经验方之8号健脾补肾方对脾肾不足型经期延长（黄体功能不全）患者是有效的,其疗效与地屈孕酮片改善黄体功能不全型经期延长的疗效相当,而对改善患者脾肾不足型中医症状方面更优于地屈孕酮。此经验方具有临床可行性及可重复性。
赵玮[3]（2020）在《脂肪干细胞来源的外泌体对大鼠卵巢早衰的作用及机制研究》文中认为卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）是一种临床异质性高的疾病,随着社会经济的快速发展,POF的发病率呈上升趋势。当前POF的治疗方法主要是进行激素补充治疗,这种治疗方法虽然能够缓解患者的各种临床症状,但是对卵巢功能并不能从根本上进行改善,所以如何为POF患者提供一种安全有效的治疗方式成为目前的热点。已有大量研究证实,脂肪干细胞来源的外泌体（ADSCs-EXO）可在多种组织器官的修复中发挥有效作用,但目前关于同种来源的ADSCs-EXO在卵巢早衰中的作用尚无报道。本研究利用大鼠颗粒细胞损伤模型和大鼠卵巢早衰模型,研究ADSCs-EXO对卵巢颗粒细胞和组织的保护作用,并初步探索其作用机制,为POF的治疗提供了一种新的安全有效的途径。第一部分:大鼠脂肪干细胞来源的外泌体的分离与鉴定【目的】采用酶消化法从大鼠腹股沟脂肪提取脂肪干细胞,然后采用快速试剂盒提取法对脂肪干细胞进行外泌体的提取,最后对提取的外泌体特性进行鉴定,验证快速试剂盒提取法的可靠性,为下一步实验细胞和动物实验奠定基础。【材料与方法】切取12周大鼠腹股沟的脂肪组织,使用I型胶原蛋白酶消化法进行脂肪干细胞的提取,将提取的细胞接种于培养瓶中进行培养,首先鉴定其表面标记物,然后检测其成脂、成骨、成软骨的多向分化能力。将稳定传代的第三代ADSCs进行传代并收集细胞上清,然后采用快速试剂盒提取法外泌体,提取后进行电镜检测、粒径分析及表面标志物的Western Blotting测定,完成对脂肪干细胞来源的外泌体（ADSCs-EXO）的鉴定。【结果】1、细胞形态学观察结果显示,细胞生长良好,出典型的鱼群状表现,传代以后,细胞形态稳定,表现为长梭型。2、ADSCs阳性标记物CD90、CD73、CD44均为阳性表达,而阴性标记物CD45、CD34、CD11b均为阴性表达,结果符合脂肪间充质干细胞表面标记物的特点。3、本实验中获得的ADSCs可以成功分化为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞。4、透射电子显微镜下可见,ADSCs-EXO呈现圆形或椭圆形小囊状两种典型的形态,为脂质双层膜,直径在50-100nm左右。5、粒径分析结果显示ADSCs-EXO直径分布中位数为125.6nm,悬液中原始颗粒浓度为1.2×109个/m L。6、Western Blotting结果显示,特异性膜蛋白CD9、CD63以及膜生成相关复合物TSG101为阳性表达。【结论】采用快速试剂盒法能够从ADSCs从成功分离外泌体,所得的ADSCs-EXO经过鉴定符合外泌体相关检测标准,可以用于后续的实验研究。第二部分:去氧乙烯基环己烯（VCD）诱导大鼠卵巢早衰模型的建立【目的】验证文献报道中的腹腔连续注射VCD诱导SD大鼠卵巢早衰的方式,建立稳定的类似人类卵巢早衰变化过程的动物模型,为后续研究奠定坚实的基础。【材料与方法】选取动情周期正常的1月龄大鼠,随机分成空白组、佐剂组及VCD组进行实验,佐剂组及VCD组每日按照2m L/Kg（0.2m L/100g）进行腹腔连续注射,连续15天,佐剂组注射芝麻油,VCD组注射VCD工作液。给药完成后第1周开始进行动情周期的监测,给药完成后第4周、7周、10周随机抽取3只大鼠进行眼眶血及双侧卵巢的收集。眼眶血采用ELISA的方法进行血清E2、FSH及AMH水平的测定,卵巢HE染色后观察其形态、结构及卵泡数目的变化。【结果】1、空白组和佐剂组大鼠动情周期规律出现,实验结束时无1只出现动情周期紊乱;而VCD组给药完成后10w所有大鼠均出现发生动情周期紊乱,均造模成功。2、卵巢形态观察及卵泡计数结果显示,空白组、佐剂组整个实验过程中,卵巢无明显变化,各级卵泡数目正常;VCD组给药完成后第10w,卵巢中不同发育阶段的卵泡数目均明显减少,始基卵泡数为20.67±2.52,初级卵泡数为26.00±3.00,次级卵泡数为15.00±1.00和窦状卵泡数为9.33±1.53。3、血清学指标的测定结果显示,空白组、佐剂组各取材时间点血清E2、FSH及AMH比较无明显变化;VCD组给药完成后第10w,血清E2及AMH分别降低至29.87±2.54、0.76±0.07明显,而FSH增高为20.79±1.32。【结论】采取连续15天对1月龄大鼠进行腹腔注射VCD（160mg/kg）的建模方式能够成功建立POF模型。第三部分:脂肪干细胞来源的外泌体对VCD损伤大鼠颗粒细胞的作用研究【目的】建立并利用VCD诱导的大鼠颗粒细胞损伤模型,探讨ADSCs-EXO是否对VCD损伤的大鼠颗粒细胞具有修复及保护作用,并初步研究其机制,为下一步动物实验打下基础。【材料与方法】选取四只3-4周龄大鼠,采用胰酶法进行大鼠卵巢颗粒细胞的提取,观察颗粒细胞增殖活力及激素分泌情况。然后将颗粒细胞分为空白组、VCD组及VCD+ADSCs-EXO组（VCD 30μM+ADSCs-EXO 10μg）进行培养48h后,测定各组细胞抑制率、激素分泌情况、细胞凋亡率,然后进一步检测Bcl-2,Bax,Caspase-3,Kitl等相关蛋白的表达情况。【结果】1、胰酶法提取到的大鼠颗粒细胞生长存活率高,生长状态稳定,能够用于后续各项实验的开展。2、VCD+ADSCs-EXO组颗粒细胞增殖抑制率、细胞激素分泌量要明显好于单纯VCD组,抑制程度轻微;Annexin-V/PI双染法结果显示VCD+ADSCs-EXO组存活细胞比例要大于VCD组,而凋亡早期细胞及凋亡晚期细胞比例要小于VCD组。3、荧光定量PCR和Western Blotting实验结果显示VCD+ADSCs-EXO组与VCD组相比较,促进凋亡基因Bax和凋亡蛋白酶Caspase3表达的水平均明显降低,而抑制凋亡基因Bcl-2表达的水平明显增高;VCD+ADSCs-EXO组与VCD组相比较,KITL基因表达水平明显增高。【结论】ADSCs-EXO可以明显改善和抑制VCD损伤颗粒细胞的应激反应和凋亡,对颗粒细胞具有保护作用,其机制可能影响凋亡与抗凋亡相关途径蛋白的表达,实现对颗粒细胞的保护作用。第四部分:脂肪干细胞来源的外泌体对VCD诱导卵巢早衰大鼠的作用研究【目的】通过VCD诱导成功的大鼠卵巢早衰模型,探讨ADSCs-EXO对大鼠卵巢功能是否具有修复及保护作用,并初步研究其作用机制,为POF的治疗提供一种新的有效的方案。【材料与方法】将大鼠分为空白组及建模组,建模成功后分为空白组、PBS组、ADSCs组及EXO组进行手术,其中空白组、PBS组每侧卵巢原位分别注射20μL PBS,ADSCs组每侧卵巢原位注射20μL ADSCs细胞悬液,EXO组每侧卵巢原位注射20μL ADSCs-EXO悬液。术后第1天开始进行动情周期的监测,术后28天后收集各组大鼠眼眶血及卵巢,眼眶血采用ELISA的方法进行血清E2、FSH及AMH水平的测定,左侧卵巢进行HE染色、卵泡形态计数、Tunel染色及免疫组化,右侧卵巢进行Bcl-2,Bax,Caspase-3,KIT,Kitl,PI3K,AKT等相关蛋白的表达情况。【结果】1、空白组大鼠动情周期规律出现,PBS组大鼠无规律动情周期出现,EXO组与ADSCs组动情周期均逐渐发生恢复,但EXO组恢复的更快,发情期时间占比要优于ADSCs组。2、ADSCs组及EXO组卵巢组织中各级卵泡数目明显增多,但EXO组卵巢的情况要比ADSCs组明显要好。3、ADSCs及ADSCs-EXO卵巢原位注射均可以使VCD卵巢早衰大鼠的血清E2、AMH及FSH水平恢复,但是ADSCs-EXO血清指标恢复程度要明显优于ADSCs。4、TUNEL结果显示,ADSCs组及EXO组卵泡内外凋亡的细胞明显减少,但凋亡程度EXO组要明显优于ADSCs组。5、免疫组化结果显示,ADSCs与ADSCs-EXO能够有效的使颗粒细胞凋亡基因Bax,Caspase3表达减少,但ADSCs-EXO的作用要优于ADSCs。6、荧光定量PCR和Western Blotting实验结果显示ADSCs组、EXO组与VCD组相比较,Bax和Caspase3基因表达的水平均明显降低;Bcl-2、KIT、Kitl、PI3K、AKT基因表达的水平均明显增高;但是EXO组下降和上升的幅度要明显好于ADSCs组。【结论】ADSCs-EXO对VCD诱导的POF大鼠卵巢功能具有修复和保护作用,其机制可能是因为抑制卵巢颗粒细胞凋亡,进而激活KIT-KITL-PI3K-AKT信号传导通路得以实现的,将ADSCs-EXO用于卵巢早衰治疗,具有良好的临床转化和应用前景,为POF的治疗提供了一种新的有效的方案和思路。
王阳[4]（2020）在《基于数据挖掘探究中医经典医案中早发性卵巢功能不全的用药规律》文中研究表明目的:本研究通过收集、整理治疗早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency,POI）疗效确切的中医经典医案,提取首诊处方,通过数据挖掘,分析中医经典医案治疗POI的用药经验、组方规律,总结诊疗思路,为中医的传承提供更客观的统计学依据,为POI临床和科研提供参考。方法:对中国知网（CNKI）、万方数据库（Wanfang Database）、维普数据库（VIP Database）以“早发性卵巢功能不全”、“中医”、“经验”等为关键词进行检索,人工检索北京中医药大学图书馆馆藏图书,收集中医治疗POI的经典医案,筛选有效病例,提取初诊处方。借助中医传承辅助平台V2.5（TCMISS V2.5）,对药物使用频次、四气五味归经、核心配伍及潜在新处方等进行统计分析。基于上述统计分析结果,总结中医用药治疗经验,诊疗特色。结果:经筛选,共纳入教授、主任医师经典医案119篇,处方119首,涉及中药179味。研究显示,治疗POI的常用药物为菟丝子、熟地黄、当归、甘草、枸杞子、淫羊藿、女贞子、白芍、丹参、山茱萸,以补虚药、活血化瘀药、清热药为主。证型分布以肾虚证、肾虚肝郁证为主,阴虚血燥证、脾肾两证、肾虚血瘀证次之。不同证型的常用药物因证型不同而存在差异,肾虚证以菟丝子、熟地黄、当归、枸杞子等滋肾阴、补肾阳药为主;肾虚肝郁证以菟丝子、熟地黄、当归、柴胡、香附等补肾、疏肝理气药为主;阴虚血燥证以甘草、女贞子、熟地黄、香附、知母等补气、滋阴、养血、清热药为主;脾肾两虚证以菟丝子、茯苓、当归、白术、续断等补肾、健脾、化湿药为主;肾虚血瘀证以当归、熟地黄、川芎、菟丝子、红花、丹参等补肾、养血、活血药为主。按四气,常用药物以温性药和平性药为主;按五味,常用药物中甘味药使用最多,苦味次之;按归经,常用药物主入肝经、肾经、脾经。通过方剂分析,治疗POI的常用药对为:①熟地黄,菟丝子;②菟丝子,当归;③熟地黄,当归;④菟丝子,枸杞子;⑤熟地黄,菟丝子,当归,等。药物的关联规则有:①熟地黄,当归,枸杞子->菟丝子;②熟地黄,枸杞子->菟丝子;③当归,枸杞子->菟丝子;④菟丝子,当归,枸杞子->熟地黄;⑤熟地黄,香附—>菟丝子,等。得到的4个潜在新处方为:①党参、黄芪、桑椹、百合;②阿胶珠、白扁豆、蛇床子、茵陈、远志、鸡内金;③熟地黄、淫羊藿、当归、紫河车、月季花;④补骨脂、牡蛎、五味子、龙骨、瓜蒌。结论:POI发病年龄多集中在28岁以上,临床上以肾虚证较为常见;POI的用药方面以补虚药为主,兼顾清虚热、化血瘀,标本兼治;药性以温、平为主,药味以甘味为主,主归肝、肾经。常用药物组合也以补益药物组合为主;聚类分析得出的潜在药物组合和新方具有一定理论价值及代表性,可为临床探索及实验研究提供参考。
苏先芝[5]（2020）在《加减归肾丸对早发性卵巢功能不全的临床疗效及实验研究》文中认为目的:1.通过观察加减归肾丸（方）对早发性卵巢功能不全（脾肾不足、肝郁血瘀型）的血清性激素水平和证候积分疗效,探索补肾健脾、调肝活血法及药物在早发性卵巢功能不全治疗中的应用,为患者提供有效的中医药治疗选择,为今后探讨其抗卵巢衰老的作用机理奠定基础。2.对比分析早发性卵巢功能不全小鼠模型三种常用造模方法的差异,探索符合早发性卵巢功能不全临床特征的造模方法,力求找到更理想的早发性卵巢功能不全动物模型,为临床和实验研究提供参考。3.在动物层面,从影响异染色质聚集的角度探讨加减归肾丸（方）抗卵巢衰老的机理,初步明确加减归肾丸（方）干预后的小鼠卵巢组织衰老相关异染色质聚集形成主要相关蛋白的变化情况。方法:1.临床研究采用自身前后对照的临床试验方法,选取于北京中医药大学东直门医院就诊的26例POI患者给予加减归肾丸（方）中药口服治疗3个月经周期（闭经者治疗3个月）,对患者治疗前后中医证候积分和改良的Kupperman量表积分、血清促卵泡生成素（follicle-stimulating hormone,FSH）、促黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、雌二醇（estradiol,E2）水平进行评价,记录入组后患者体征舌脉及安全性指标,分析加减归肾丸（方）的临床疗效。2.动物造模研究将96只动情周期规律的ICR小鼠随机分为4组:空白对照组、雷公藤组、二氧化乙烯基环己烯（4-vinylcyclohexene diep-oxide,VCD）组、半乳糖组。分别给予不同造模干预,分别于干预后第16、46和76天随机处死各组8只小鼠,检测小鼠血清血清FSH、LH、E2、抗苗勒氏管激素（anti-Mullerian hormone,AMH）和抑制素B（inhibin B,INHB）水平、观察卵巢和子宫病理改变等。以分析和评价造模方法的优劣。3.体内药物实验将72只动情周期规律的ICR小鼠随机选取12只作为空白对照,其余采用VCD造成早发性卵巢功能不全小鼠模型。造模成功后将造模小鼠随机分为模型组、补佳乐组、加减归肾丸低剂量组、加减归肾丸中剂量组和加减归肾丸高剂量组,加减归肾丸各组分别与加减归肾丸高、中、低剂量溶液灌胃,补佳乐组予补佳乐溶液灌胃,模型组予等量生理盐水灌胃,每日1次,连续4周。给药期间观察小鼠一般状况及动情周期变化,给药结束后测定各组小鼠性激素水平,了解各组卵巢功能情况。在共聚焦显微镜下检测不同组别小鼠卵巢中颗粒细胞异染色质形态及聚集情况,观察加减归肾丸（方）对染色质结构的影响。测定卵巢组织SAHF标志性蛋白H3K9me3与HP1 α的变化,进一步了解加减归肾丸（方）对SAHF的影响。结果:1.临床研究:比较治疗前后患者情况,在中医证候积分方面,经治疗后患者均有不同程度的月经改善,包括恢复行经、月经量增多等。加减归肾丸（方）亦能改善腰膝酸软、性欲减退、潮热盗汗、烦躁易怒、胸闷胁痛、失眠多梦等症状,差异有统计学意义。治疗前后耳鸣、神疲乏力、小腹胀痛症状评分无统计学差异,治疗总有效率达到73%;在改良的Kupperman量表评分方面,治疗后患者潮热出汗、感觉异常、皮肤蚁行感症状评分显着下降,焦虑、肌肉关节痛、性生活疼痛评分亦有下降,差异有统计学意义。对于精神抑郁、头痛、尿频尿急症状无统计学差异;在实验室指标方面,患者血清FSH、LH值较治疗前明显减低,差异有统计学意义;E2值较治疗前有所升高,但无统计学差异。2.造模方法研究:雷公藤组小鼠在第16天时出现体重减轻,多数动物出现动情周期紊乱,AMH和E2值显着降低,发育中卵泡数和成熟卵泡数减少,子宫内膜变薄;第46天时小鼠体重恢复,E2值仍降低,发育中卵泡数和黄体数显着减少;但第46天时,除E2值仍持续偏低外,雷公藤组小鼠体重、血清性激素值及卵巢、子宫组织结构均与同期空白对照组无显着差异。半乳糖组小鼠在第16天时出现卵巢指数减低,AMH和E2值均减低,子宫内膜厚度减小;第46天时E2仍持续减低,发育中的卵泡数、黄体数减低;第76天时AMH和E2值减低,子宫内膜厚度减小,半数以上动物出现动情周期紊乱;VCD组小鼠在第16天时出现卵巢湿重及卵巢指数减低,AMH和E2值显着减低,FSH值和FSH/LH升高;第46天时小鼠体重、血清性激素与前无差异,发育中的卵泡数和黄体数较前进一步减少;第76天时小鼠AMH、LH、E2仍明显降低,FSH/LH比值升高,绝大多数小鼠出现动情周期紊乱,发育中卵泡数、成熟卵泡数均减少,子宫内膜和子宫肌壁厚度均减小。3.体内药物实验:动情周期:空白对照组小鼠全部有规律的动情周期,表现为6-7天出现一次规律动情周期,模型组造模后出现动情周期紊乱,主要表现为无规律的动情周期或动情间期延长。给药后,中药各剂量给药组部分小鼠动情周期逐渐开始恢复,给药结束时,中药高剂量组58%、中药中剂量组50%、中药低剂量组42%小鼠动情周期恢复规律;西药组33%小鼠动情周期规律,67%小鼠表现为持续动情期。血清性激素:与空白对照组相比,模型组AMH、INHB、E2值明显降低（P<0.05）,FSH值、FSH/LH 比值显着升高（P<0.01）。中药高剂量组AMH、INHB值较模型组明显升高（P<0.01,P<0.05）。中药高、中剂量组、西药组E2值较模型组明显升高（P<0.01,P<0.05）,中药中剂量组FSH/LH比值较模型组显着降低（P<0.05）。LH各组未产生显着差异（P>0.05）,中药各给药组、西药组FSH值未与模型组产生差异（P>0.05）。异染色质聚集:模型组SAHF阳性细胞比例较空白对照组显着升高,说明卵巢衰老模型构建成功。与模型组相比,补佳乐组、中药高剂量组、中剂量组SAHF阳性细胞的比例明显降低（P<0.05）,中药低剂量组SAHF阳性细胞比例虽较模型组有所降低,但未能产生统计学意义（P>0.05）H3K9me3和HP1蛋白在模型组卵巢中呈高表达,在空白对照组中低表达,在中药低剂量、中剂量、高剂量组中逐渐减少,西药组和中药高剂量组中表达相似,均较低。SAHF标志性蛋白含量:模型组HMGA1/HMGA2蛋白含有量显着高于空白对照组（P<0.01）,给药4周后,各给药组HMGA1/HMGA2蛋白含有量较模型组均明显降低（P<0.01）,含有量从低到高依次为:补佳乐组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。结论:1.加减归肾丸（方）可以降低POI患者血清基础FSH、LH水平,改善月经情况、中医证候积分和围绝经期症状,表明加减归肾丸（方）对于改善POI患者卵巢功能有一定的治疗作用;2.化学毒性物质VCD能诱导小鼠卵巢功能减退,模拟POI的病理过程,在三种造模方法中最为优选,可作为探讨POI发病机理和用药研究的动物模型;3.加减归肾丸（方）可通过抑制衰老相关异染色质聚集,从而逆转卵巢发生过早衰老,进而相对促进卵泡的生长发育,使受损的卵巢功能得以恢复,或许为补肾健脾、调肝活血中药抗卵巢衰老的作用机制。
蔡炜文[6]（2020）在《针药结合疗法对卵巢早衰的临床疗效研究》文中进行了进一步梳理目的:观察针刺疗法对于卵巢早衰患者各阶段的疗效,在针刺治疗作用于临床时,对患者月经周期、经期、内分泌水平、伴随症状等方面的影响。探讨针药结合的作用机制,为临床上卵巢早衰的治疗提供有益的思路。方法:根据纳入标准选择符合研究的患者,共40例,通过随机分组的方法,将其平均分为针药结合组与药物治疗组各20人,药物治疗组釆用中药结合西药人工周期疗法治疗,针药结合组采用针刺结合西药人工周期疗法治疗,3个月经周期为1疗程。分别于治疗前后观察患者的月经、性激素水平、临床症状改善情况的变化。结果:1.针药结合组治疗前后相比,FSH、LH水平差异显着（p<0.01）,在E2上未见明显差异（p>0.05）。药物治疗组可以改善LH水平（p<0.05）,但对改善FSH和E2水平无明显疗效（p>0.05）。经过3个月的治疗后,两组改善FSH、LH和E2水平疗效相当（p>0.05）。2.治疗前与治疗后相比,两组可以明显改善患者的月经周期、经期、Kupperman评分、焦虑自评量表（SAS）评分,具有显着疗效（p<0.05）。治疗3个月后,两组在改善Kupperman评分、焦虑自评量表（SAS）评分、经期方面疗效相当（p>0.05）,针药结合组在改善患者月经周期情况上优于药物治疗组（p<0.05）。3.针药结合组总有效率为80.00%,药物治疗组总有效率为76.47%,两组总有效率存在显着差异（P<0.05）,针药结合治疗对卵巢早衰患者的临床综合疗效更加明显。结论:针刺结合西药人工周期疗法可明显改善卵巢早衰患者的月经状况、激素水平和伴随症状,在治疗改善月经相关症状方面明显优于药物治疗组,针药结合疗法对于卵巢早衰有显着的疗效,对临床上卵巢早衰的治疗有肯定的作用。
缪梦琦[7]（2020）在《补肾活血方治疗皮质酮所致的早发性卵巢功能不全的机制研究》文中研究表明研究分为药效实验和机制实验两个部分。目的:（一）药效实验比较三个补肾的方剂（左归丸、右归丸和补肾活血方）治疗皮质酮引起的早发性卵巢功能不全的效果。（二）机制实验通过蛋白组学技术研究药效实验中治疗效果最优的补肾方剂在皮质酮诱导的早发性卵巢功能不全治疗中的潜在的分子机制。方法:（一）药效实验50只雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组、模型组、补肾活血方组、左归丸组、右归丸组,每组各10只。皮下注射皮质酮以诱导早发性卵巢功能不全模型。三组治疗组（补肾活血方组、左归丸组、右归丸组）边造模边给药,三周后腹主动脉采血并取脑组织及卵巢组织。采用酶联免疫吸附测定5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺以比较各组应激情况。采用酶联免疫吸附测定雌二醇、卵泡刺激素、抗苗勒氏管激素的浓度以比较各组性激素水平。左侧卵巢用于苏木精-伊红（H&E）染色后显微观察各组卵巢的形态及进行卵泡计数。（二）机制实验50只雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白组、模型组、补佳乐组、补肾活血方低剂量组、补肾活血方高剂量组,每组各10只。皮下注射皮质酮以诱导应激性早发性卵巢功能不全模型。三组治疗组边造模边给药,三周后腹主动脉采血并取脑组织及卵巢组织。采用酶联免疫吸附测定5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺以评价各组应激情况。采用酶联免疫吸附测定雌二醇、卵泡刺激素、抗苗勒氏管激素的浓度以验证补肾活血方的药效并比较低高剂量的药效。左侧卵巢用于苏木精-伊红染色后显微观察各组卵巢的形态及进行卵泡计数以验证补肾活血方的药效并比较低高剂量的药效。基于蛋白质组学分析用于鉴定差异表达的蛋白质。蛋白质印迹法用于验证蛋白质组学结果。结果:（一）药效实验模型组与空白组相比5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺均显着降低,通过药物干预后有不同程度的改善。模型组与空白组相比雌二醇、抗苗勒氏管激素浓度降低,卵泡刺激素浓度升高;卵巢颗粒细胞排列紊乱,闭锁卵泡增多,其他各级卵泡减少。与模型组相比,补肾活血方组雌二醇及抗苗氏管激素的浓度升高,卵泡刺激素的浓度显着降低,并且窦前及窦状卵泡数显着增加,闭锁卵泡显着减少;左归丸组雌二醇及抗苗氏管激素的浓度升高,卵泡刺激素浓度降低但均无显着性差异,并且闭锁卵泡显着减少;右归丸组雌二醇浓度升高,卵泡刺激素浓度降低,抗苗勒氏管激素浓度显着升高,并且窦状卵泡显着增加,闭锁卵泡显着减少。（二）机制实验空白组、模型组及补肾活血方组,这三组通过蛋白质组学筛选出了7个差异蛋白,其中Np4和Angptl4同时被GO和KEGG富集,因此选择了这两种蛋白进行进一步的验证实验。蛋白印迹法测定出Np4和Angptl4的表达情况与蛋白组学的结果一致。结论:（一）药效实验三种补肾方均能不同程度的改善皮质酮所致的早发性卵巢功能不全,其中补肾活血方的治疗效果最好。（二）机制实验补肾活血方可能是通过调节Np4和Angptl4的表达来改善皮质酮诱导的早发性卵巢功能不全。
许立君[8]（2019）在《坤泰胶囊联合芬吗通治疗卵巢早衰的临床疗效研究》文中研究表明目的:探讨坤泰胶囊联合芬吗通治疗卵巢早衰临床疗效,并初步研究坤泰胶囊治疗本病的作用机理,为临床治疗卵巢早衰提供依据。方法:选取2017年1月至2018年9月期间在我院门诊及住院治疗的卵巢早衰患者90例,根据治疗顺序,将90例卵巢早衰阴虚火旺型患者随机分为3组,分别为联合组30例（口服坤泰胶囊和芬吗通）、治疗A组30例（口服坤泰胶囊）、治疗B组30例（口服芬吗通）。药物服用方法:坤泰胶囊口服使用,4片/次,每日服用3次,餐后半小时。芬吗通口服使用,1片/次,每天服用1次,每28天为1个周期,前14天服用白色片剂（内含雌二醇1mg）,每日口服1片;后14天,每日口服1片灰色片（内含雌二醇1mg和地屈孕酮10mg）,3个周期为1疗程。治疗1个疗程后,记录三组治疗结果,并进行统计学分析。观察治疗前后中医证候积分、抑制素B、卵泡刺激素（follicule-stimulating hormone,FSH）、雌二醇（estradiol,E2）和平均卵巢体积（Mean ovarian volume,MOV）的变化。West blot法检测3组血中抗氧化酶（superoxide dismutase2,SOD2）、凋亡相关蛋白Bax（BCL2-Associated X,Bax）、淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2,Bcl2）和抗缪勒管激素（anti-Müllerian hormone,AMH）的表达。结果:（1）中医证候积分情况及疗效比较:比较治疗前后三组患者的中医证候总积分,三组分析结果差异均具有统计学意义（P<0.05）;比较治疗后联合组中医证候总积分和治疗A治疗B两组的中医证候总积分,分析结果显示,联合组优势更明显,差异具有显着统计学意义（P<0.01）。治疗后,联合组中医证候疗效总有效率86.7%,治疗A组总有效率70.0%。治疗B组总有效率66.7%。三组患者在改善中医证候疗效上有明显差异,其中联合组疗效最优,差异具有统计学意义（P<0.05）。（2）中医证候各症候改善程度比较:在患者中医证候改善各方面治疗后的情况做比较,在改善患者月经周期、经期、失眠多梦、腰膝酸软、头晕耳鸣、手足心热、潮热颧红等方面,联合组明显优于其他两组,结果具有统计学意义（P<0.05）。（3）生化指标比较:治疗后,比较三组患者的基本生化指标,并与治疗前指标进行对比。治疗前后改善患者抑制素B、卵泡刺激素水平、雌二醇水平及平均卵巢体积水平结果进行比较,其中治疗后三组均优于治疗前,分析结果具有统计学意义（P<0.05）;其中联合组与其他两组比较,抑制素B、卵泡刺激素水平、雌二醇水平及平均卵巢体积水平均明显改善,差异具有显着统计学意义（P<0.01）。（4）SOD2、Bax、Bcl2、AMH蛋白表达结果比较:检测三组患者血液中SOD2、Bax、Bcl2和AMH的表达水平。结果显示,三组患者治疗后SOD2、Bax、Bcl2及AMH的表达水平与治疗前相比均升高,差异具有统计学意义（P<0.05）,其中联合组的SOD2、Bax、Bcl2及AMH的表达水平治疗后,明显优于其他两组,差异具有显着统计学意义（P<0.01）。结论:（1）坤泰胶囊联合芬吗通治疗卵巢早衰,能有效的改善其中医证候症状,提高患者的治疗效果,明显改善患者卵巢早衰症状。（2）坤泰胶囊联合芬吗通治疗卵巢早衰,能有效改善患者的月经周期、经量,调节症状效果和内分泌水平。（3）坤泰胶囊联合芬吗通能够明显改善POF患者机体内抑制素B、卵泡刺激素水平、雌二醇水平及平均卵巢体积水平。（4）坤泰胶囊联合芬吗通治疗卵巢早衰能够提高Bax、Bcl2水平,增加血液中SOD2含量,加强AMH的表达。
熊东妮[9]（2019）在《卵巢储备功能减退患者中医体质类型与证型相关性的临床研究》文中研究说明目的:通过分析卵巢储备功能减退患者的常见中医体质类型及证型的分布规律,探讨两者间的相关性,为预防卵巢储备功能减退的进一步发生及个体化治疗提供新的研究思路并制定相应的调治方案。方法:本研究采用调查问卷的方式,设计统一的一般情况调查表、中医证型调査表和中医体质调査表,对卵巢储备功能减退患者的体质及证型进行统计分析,结果通过EXCEL软件建立原始数据库,采用SPSS 21.0统计软件进行分析。结果:1.102例卵巢储备功能减退患者的易感体质为阴虚质（27.5%）、气虚质（23.5%）和气郁质（21.6%）。常见证型为肝肾阴虚证（35.3%）、气血两虚证（23.5%）、肝郁肾虚证（20.6%）。2.卵巢储备功能减退患者中医体质与证型具有显着相关性（P<0.05）。3.通过对相关因素的研究发现,36～40岁为卵巢储备功能减退的高发期,占66.7%,年龄分布与体质类型分布有一定相关性（P<0.05）;卵巢储备功能减退患者的主要临床表现为月经周期不规律;饮食情况、流产史等与卵巢储备功能减退发病有一定的相关性。结论:卵巢储备功能减退患者的易感体质为阴虚质、气虚质和气郁质,常见证型以肝肾阴虚证、气血两虚证、肝郁肾虚证为主。卵巢储备功能减退患者的中医体质类型与证型之间具有相关性,阴虚体质、湿热体质与肝肾阴虚证相关;气虚体质与气血两虚证相关;气郁体质与肝郁肾虚证相关;阳虚体质与脾肾阳虚证相关;血瘀体质与肾虚血瘀证相关。年龄对体质分布有一定的影响,饮食失宜、流产次数等是导致卵巢储备功能减退发病的重要因素。
杨会生[10]（2019）在《针刺对早发性卵巢功能不全患者卵巢功能影响的病例注册登记研究》文中提出研究背景早发性卵巢功能不全（Premature Ovarian Insufficiency,POI）是指女性在40岁之前出现闭经或月经稀发,伴有促性腺激素水平升高、雌激素水平降低等内分泌异常及一系列围绝经症状。POI患者症状表现为潮热、盗汗、失眠、尿频、阴道干涩、性欲下降、性交不适等,其骨质疏松、冠心病、帕金森病发病的风险增加,甚至可导致寿命减少。POI在年龄小于40岁的人群中发病率约为1%,在30岁以下的人群中发病率为0.1%。不同种族POI发病率不同,中国女性为2.8%,西方国家发病率为3.7%。其中原发性闭经患者中患病率为10-28%,继发性闭经患者中发病率为5%-10%。POI是导致不孕或低妊娠率的重要原因,其发病率呈逐年上升和年轻化趋势,严重危害女性的生殖健康,严重影响患者的心理健康和生活质量。随着对POI的研究深入,生殖领域相关研究者逐渐意识到卵巢功能衰竭是一组临床表现多样、病因复杂且进行性发展的疾病。2016年欧洲人类生殖与胚胎学会（The European Society of Human Reproduction and Embryology,ESHRE）发布的“POI 患者管理指南”将促卵泡激素（Follicle Stimulating Hormone,FSH）的诊断阈值降为25 mIU/mL;2017年《早发性卵巢功能不全的临床诊疗中国专家共识》中将FSH水平在15～25 mIU/mL定义为亚临床期POI,此属高危人群,旨在对POI患者早发现早治疗。目前,现代医学对于POI的治疗,尚没有恢复卵巢功能和提高受孕率的可靠干预措施。临床常用的激素替代疗法（Hormone Replacement Therapy,HRT）对低雌激素状态的改善疗效确切,但停药后易复发,长期应用可使服药妇女患心血管疾病、乳腺癌、子宫内膜癌等疾病的风险增加。随着促排卵技术广泛应用,临床医师尝试采用多种促排卵方案诱发POI患者排卵,但尚无确切的证据表明其疗效,在HRT的基础上,进行赠卵体外受精-胚胎移植（In Vitro Fertilization-Embryo Transfer,IVF-ET）是POI的适应证。在非激素治疗中,中医药尤其是针灸用于卵巢功能的改善日益受到关注。ESHRE指南及中国专家共识均提及将中医药（包括针灸）作为辅助治疗的选择,然而囿于有限的临床证据,尚无法形成推荐意见。针灸治疗可激发机体内源性激素分泌,改善卵巢功能。针灸治疗POI可促使月经周期的恢复,改善临床症状,调整异常的生殖内分泌激素水平;应用于辅助生殖技术（Assisted Reproductive Technique,ART）可增加获卵数及受精数,提高胚胎种植率和临床妊娠率,降低周期取消率。然而,限于目前国内外针灸治疗POI的临床研究整体较少,现有研究质量偏低,针灸对卵巢功能的改善临床证据不足,针灸疗效和优势的彰显尚需高质量的临床研究支持。近年来,真实世界研究（Real Word Study,RWS）兴起,病例注册登记研究（Patient Registry Study,PRS）作为RWS的主要方式,是采用观察性研究方法,登记病人的健康信息,评估疾病、状况或暴露人群的结局。PRS能够最大程度地还原真实的临床干预情况,收集全样本的临床信息,在常规医疗条件下,利用日常医疗实践过程中所产生的信息,开展的科研活动,为深入研究奠定基础,所产生的证据可与随机对照试验相互补充。虽然,现在针灸治疗POI在临床应用广泛,但是目前仍然缺少高质量的临床证据,这是制约针灸进一步推广的关键因素。针灸干预的暴露性,决定试验过程无法实施盲法的实施,所以高质量的RCT难以开展。因此开展高质量的、适合针灸特色和POI疾病特点的临床试验至关重要。我们应该采用一种新的研究模式,开展基于真实世界的针灸治疗POI的病例注册登记研究,将针灸与POI疾病结合,并引入病例注册登记中,填补针灸在注册登记研究中的空白。研究目的通过国际针灸病例注册登记平台（International Patient Registry Platform of Acupuncture-Mmoxibustion,IPRPAM）,收集真实世界中针灸治疗POI患者的临床诊疗数据,分析POI患者的临床特征,初步探索针灸对POI患者卵巢功能和妊娠结局的影响。研究方法本研究采用了基于真实世界研究的前瞻性、多中心病例注册登记研究设计方法,是一种观察性效果比较研究（Comparative Effectiveness Research,CRE）。本研究以RWS、CRE、随机对照临床试验（Randomized controlled trial,RCT）等方法学为基础,结合POI疾病的特点和针灸的发展需求、诊疗特点以及团队的工作基础,探索针灸治疗POI病例注册登记研究设计、实施、效果评估等方面的方法学要素。本研究数据来自国际针灸病例注册登记研究平台（www.amreg.org）,包含不同诊疗方案和不同病情的临床真实医疗环境病例数据。为了保证研究结果的外部真实性较高,设定了较宽的纳入和排除标准,不限制和排除年龄、既往病情、合并疾病、生育需求、合并用药、卵巢手术史等,并招募多学科联合的登记医师群包含针灸医师、中医妇科医师、西医妇科医师、生殖医学医师等,确保覆盖较广泛的POI人群。本研究结合针灸治疗POI的特点,采集了人口学资料、首诊信息、治疗方案和治疗情况记录、月经情况、激素水平（FSH、LH、E2、AMH）、窦卵泡计数（Antral Follicle Count,AFC）焦虑自评量表（Self-rating Anxiety Scale,SAS）和 Kupermann量表;另外POI患者大部分有强烈的生育需求,本研究也登记生殖医学相关指标。PRS因宽泛的纳入和排除标准,且应用灵活,不可避免地引入混杂因素。同时,未随机、盲法和设置对照,也会导致不同程度的偏倚。本研究采用多重插补法（Multiple Imputation,Ml）填补缺失数据,采用分层分析、多因素调整分析和倾向性评分（逆概率处理加权法）平衡混杂因素,利用广义混合相加模型（Generalized Additive Mixed Model,GAMM）拟合针刺与卵巢功能指标的量效关系曲线,分析针刺对POI患者卵巢功能和妊娠结局影响的独立作用,探究针刺的最佳干预时机。研究结果1.POI患者人口学特征和临床特征纳入分析154例POI患者,年龄32.93±5.10岁,大学以上学历者占77.27%（119/154）;未婚患者为9.09%（14/154）,其中继发闭经的比例为（71.43%）（10/14）;病程在 1-5 年占 60.96%（89/146）,病程大于 5 年占 23.97%（40/146）,其中继发闭经患者病程≥5年的比例显着高于月经稀发者。继发闭经患者妊娠史>22次、分娩率和流产率均高于月经稀发患者。继发闭经占51.95%（80/154）,无原发闭经者,月经稀发者占48.05%（74/154）。月经初潮年龄为13.07±1.28岁,继发闭经患者和月经稀发患者月经初潮年龄无明显差异（P>0.05）。月经稀发者月经周期的中位数和IQR为55（46.75-69.75）天,经期正常者的比例为70.27%（52/74）,月经量少者的比例为52.7%（39/74）,痛经发生率为37.84%（28/74）。纳入的154例POI患者,继发闭经患者FSH水平高于46.49 mIU/mL占67.5%（54/80）、LH 水平高于 11.06 mIU/mL 占 72.5%（58/80）、E2 水平低于 20.23 pg/ml占 59.7%（46/77）、AMH 水平低于 0.02ng/ml 占 55.2%（37/67）、AFC 为 0 个占63.2%（36/57）;月经稀发患者的 FSH 高于低于 30.33 mIU/mL 占 43.2%（32/74）、LH 水平低于 7.8 mIU/mL 占 74.32%（55/74）、E2 高于 pg/ml 占 65.3%（47/72）、AMH 水平高于 0.23 ng/ml 占 55.88%（38/68）、AFC≥1 个占 73.2%（30/41）。154例POI患者的干预措施情况分布,针刺天数最小26天,最大335天,平均值为75.23天,中位数为53天;继发闭经组的针刺天数高于月经稀发组,无显着性差异（P=0.101>0.05）。针刺次数最小值为12次,最大值为116次,平均值为31.55次,中位数为26次;继发闭经组的针刺次数显着高于月经稀发组（P0.008<0.05）。针刺频次为每周3次者比例最多,占50.65%（78/154）。大部分POI患者为单纯针刺治疗,占83.77%（129/154）。2.针刺改善POI患者卵巢功能的作用分析（1）针刺对月经情况的影响纳入分析的154例POI患者中,针刺干预前,继发闭经者80例（51.95%）,月经稀发者74例（48.05%）。接受至少12次的针刺或针药联合干预后,闭经患者单纯针刺后的月经回潮率为59.01%（39/66）,针药联合组的月经回潮率为71.43%（10/14）。月经稀发患者,单纯针刺后月经规律率为49.21%（31/63）,针药联合治疗后的月经规律率为63.64%（7/11）。经过IPTW调整混杂因素后,继发闭经POI患者的月经回潮率,与针刺组比较,针药联合组的OR=0.48,95%CI=[0.20,1.15],无显着性差异（P=0.10>0.05）;月经稀发患者的月经规律率,与针刺组比较,针药联合组的OR=5.84,95%CI=[1.27,26.83],具有显着性差异（P=0.02<0.05）,表明在POI月经稀发患者中,针药联合治疗后月经规律率是单纯针刺的5.84倍。（2）针刺对FSH的影响经过至少12次针刺或针药联合干预后,FSH<15mIU/mL以下的比例为42.55%（60/141）。针刺与FSH水平变化的量效关系为随着针刺次数的增加,FSH先降低,在针刺次数40次左右时降至最低,随后稍微增加保持水平;按月经情况分层发现,月经稀发患者的最佳针刺次数为40次,闭经患者的最佳针刺次数为70次。经IM插补缺失数据和IPTW调整混杂因素后,针刺次数每增加12次,FSH降低24.05mIU/mL,具有显着性差异（β=-24.05,95%CI=[-28.32,-19.79],P<0.001）。（3）针刺对LH的影响LH在卵巢功能基础状态的正常参考值范围为2～15 mIU/mL。经过至少12次针刺或针药联合干预后,LH在正常范围的比例为87.41%（118/135）。探索针刺与LH水平变化的疗效关系发现,随着针刺次数的增加,LH先降低,在针刺36次时降至最低,随后稍微增加保持水平;按月经情况分层,月经稀发患者的最佳干预次数为40次,而闭经患者的最佳干预次数在60次。经IM插补缺失数据和IPTW调整混杂因素后,针刺次数每增加12次,LH降低12.45 mIU/mL,具有显着性差异（β=-12.45,95%CI=[-15.22,-9.68],P<0.001）。（4）针刺对E2的影响E2卵巢功能基础状态的正常参考值范围为25～50pg/ml。经过至少12次针刺或针药联合干预后,E2正常的比例为56.12%（78/139）。针刺与E2水平的量效关系为随着针刺次数的增加,E2水平增加,在针刺次数60次时达到最大值,随后保持水平;按月经情况分层,继发闭经患者的E2水平存在波动,较不稳定,说明在治疗过程中POI闭经患者的病情存在较大的变化。经IM插补缺失数据和IPTW调整混杂因素后,针刺次数每增加]2次,E2增加11.44 pg/ml,具有显着性差异（/3=11.44,95%CI=[7.47,15.40],P<0.001）。（5）针刺对AMH的影响AMH的正常参考值范围为2～7 ng/ml,AMH<I.1 ng/ml提示卵巢储备功能减退。经过至少12次针刺或针药联合干预后,AMH高于1.1 ng/ml的比例为51.55%（50/97）。针刺与AMH的量效关系为随着针刺次数的增加,AMH水平也增加,针刺次数50次后,AMH增加速度减慢,随后基本保持水平;按月经情况分层,继发闭经最佳干预次数为70次达到最高;月经稀发患者最佳干预次数36次。经IM插补缺失数据和IPTW调整混杂因素后,针刺次数每增加12次,AMH增加0.65 mg/ml,具有显着性差异（β=0.65,95%CI=[0.21,1.08],P=0.005）。（6）针刺对AFC的影响经过至少12次针刺或针药联合干预后,AFC≥3个的比例占73.86%（65/88）。随着针刺次数的增加,AFC个数也增加,针刺次数50次时达到最大值,随后降低;按月经情况分层,继发闭经患者最佳干预次数为60次左右;月经稀发患者随着的AFC与针刺次数呈正相关的增加趋势。经IM插补缺失数据和IPTW调整混杂因素后,针刺次数每增加12次,AFC增加2.2个,具有显着性差异（β=2.2,95%CI=[1.67,2.73],P<0.001）。3.针刺对POI患者的妊娠情况影响154例POI患者,随访至有妊娠情况记录的病例有48例。纳入分析的48例患者中有10例妊娠,妊娠率为20.83%（10/48）,其中自然妊娠率为12.50%（6/48）,辅助生殖技术妊娠率为8.33%（4/48）。经过IPTW调整混杂因素发现,闭经是POI患者妊娠与否的危险因素,月经稀发患者得妊娠风险是继发闭经患者的12.28倍,具有显着性差异（OR=12.28,95%CI=[2.39,63.09],P=0.003）。4.安全性结果154例患者中,不良事件发生腹泻2人次、感冒4人次、胃痛1人次;滞针6人次、皮下淤血10人次,经过处理后滞针和皮下淤血均缓解。与针刺无关的不良事件发生为7人次,与针刺相关不良事件发生为16人次。研究结论1.通过分析POI患者的临床特征,本研究发现与月经稀发患者相比,继发闭经患者FSH和LH水平更高、E2和AMH水平更低,卵巢储备功能低下,AFC较少,妊娠结局差;POI继发闭经患者在实际临床中的针刺治疗周期长,干预手段复杂。2.针刺能够增加POI继发闭经患者月经回潮率,能够提高月经稀发患者月经规律率;可以降低FSH和LH水平,升高E2和AMH水平,增加AFC个数,最佳针刺干预次数为40～60次。3.针刺有助于提高POI患者的妊娠率,月经稀发POI患者针刺后的妊娠可能性更高。
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本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 基于古今文献数据挖掘针刺治疗POI的选经用穴规律的分析 |
| 1 基于数据挖掘探讨古代文献治疗POI的选经用穴规律 |
| 1.1 古籍文献来源 |
| 1.2 检索词 |
| 1.3 研究工具 |
| 1.4 数据录入与处理、数据库的建立 |
| 1.5 文献纳入及排除标准 |
| 1.6 数据分析 |
| 1.7 结果 |
| 2 基于数据挖掘探讨现代文献治疗POI的选经用穴规律 |
| 2.1 数据库来源 |
| 2.2 检索年限 |
| 2.3 检索词 |
| 2.4 研究工具 |
| 2.5 数据录入与处理、数据库的建立 |
| 2.6 文献纳入及排除标准 |
| 2.7 数据分析 |
| 2.8 结果 |
| 3 基于古今文献针灸治疗POI选经用穴对比分析 |
| 3.1 古今文献选经比例及网络链接对比 |
| 3.2 古今文献同经络高频选穴及其网络链接对比 |
| 3.3 古今文献选部比例对比 |
| 3.4 古今文献同部位高频选穴对比 |
| 3.5 古今文献高频腧穴及其网络链接对比 |
| 3.6 古今文献特定穴分类比例对比 |
| 3.7 古今文献特定穴选穴对比 |
| 3.8 古今文献高频特定穴腧穴及其网络链接对比 |
| 4.确定本研究临床选穴 |
| 小结 |
| 第二部分 针刺联合激素治疗POI的临床疗效及安全性评价 |
| 1 伦理审查 |
| 2 受试者来源 |
| 3 受试者选择标准 |
| 3.1 诊断标准 |
| 3.2 纳入标准 |
| 3.3 排除标准 |
| 3.4 剔除标准 |
| 3.5 脱落标准 |
| 3.6 终止标准 |
| 4 临床试验设计 |
| 4.1 研究类型 |
| 4.2 分组 |
| 4.3 随机 |
| 4.4 对照 |
| 4.5 样本量计算 |
| 4.6 研究周期 |
| 5 治疗方案 |
| 5.1 试验组:针刺联合激素组(简称A+H组) |
| 5.2 对照组1:单用针刺组(简称Acu组) |
| 5.3 对照组2:单用HRT 组(简称HRT 组) |
| 6 观察指标及评价时间点 |
| 6.1 AMH及血清性激素三项 |
| 6.2 窦卵泡数量(AFC) |
| 6.3 改良Kupperman评分量表(KI) |
| 6.4 绝经期生存质量量表(MENqol) |
| 6.5 焦虑自评量表(SAS) |
| 7 不良反应和安全性评价 |
| 7.1 不良反应 |
| 7.2 安全性评价 |
| 8 质量控制 |
| 8.1 研究设计 |
| 8.2 样本收集 |
| 9 统计方法 |
| 10 结果与分析 |
| 10.1 患者入组情况及基线比较 |
| 10.2 三组AMH、AFC结果分析 |
| 10.3 三组血清性激素FSH、LH、E2 结果分析 |
| 10.4 三组生存质量分析 |
| 10.5 三组治疗POI患者MENqol各维度评分分析 |
| 10.6 三组焦虑情绪评分分析 |
| 11 不良反应和安全性评价的分析 |
| 11.1 不良反应分析 |
| 11.2 安全性评价 |
| 小结 |
| 第三部分 针刺联合激素调节POI患者血清性激素相关代谢物及代谢通路的研究 |
| 1 受试者来源 |
| 2 受试者选择标准 |
| 3 样本采集与预处理 |
| 3.1 采样 |
| 3.2 采取标本时间点 |
| 3.3 血清预处理 |
| 4 各组标本数量 |
| 5 试验流程 |
| 5.1 试验试剂及仪器 |
| 5.2 代谢物提取 |
| 5.3 液相色谱、质谱条件 |
| 5.4 检测方法的验证 |
| 6 数据处理及统计分析方法 |
| 6.1 差异代谢物筛选及鉴定 |
| 6.2 代谢通路分析 |
| 7 试验结果 |
| 7.1 针刺组治疗前后血清差异性代谢物及代谢通路分析 |
| 7.2 激素组治疗前后血清差异性代谢物及代谢通路分析 |
| 7.3 针刺联合激素治疗前后血清差异性代谢物及代谢通路分析 |
| 小结 |
| 第四部分 全文讨论 |
| 1 POI的发病呈高发低龄趋势并严重影响女性生殖健康 |
| 1.1 中医对POI的认识 |
| 1.2 现代医学对POI的认识 |
| 2 激素替代治疗是最新共识推荐治疗POI的一线方案 |
| 3 针灸治疗POI古今大致相同、存有差异 |
| 3.1 经脉选择——任脉首选,肾经与膀胱经、脾经与胃经同治 |
| 3.2 部位选择——局部选穴,重在病所,循经远取,经脉所过 |
| 3.3 腧穴选择——注重特定穴的运用、多种配穴法联用 |
| 3.4 古今选经用穴特点差异的分析 |
| 4 临床针刺治则围绕POI的基本病机 |
| 4.1 临床选穴共凑补肾益精、通调冲任之功 |
| 4.2 低频连续波电针对HPO轴调节更具优势 |
| 5 临床研究结果分析讨论 |
| 5.1 针刺改善卵巢储备功能、提高雌二醇水平独具优势 |
| 5.2 针刺对机体有一定雌二醇水平及FSH水平低者效果更稳定 |
| 5.3 针刺联合激素协同改善POI患者性生活 |
| 5.4 三种疗法不良反应低、安全性好 |
| 6 针刺联合激素调节POI患者性激素相关代谢物及代谢通路 |
| 6.1 代谢组学可作为探究针刺作用机制的可行方法 |
| 6.2 代谢组学在卵巢减退疾病的应用 |
| 6.3 针刺通过降调L—谷氨酸、升调柠檬酸从而改善雌激素水平 |
| 6.4 激素通过降调丙氨酸、上调γ—亚麻酸保护卵巢功能 |
| 6.5 针刺联合激素通过上调L—蛋氨酸的水平增强卵巢功能 |
| 7 研究思考与展望 |
| 7.1 研究创新 |
| 7.2 研究不足 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 早发性卵巢功能不全治疗进展 |
| 参考文献 |
| 附录:CRF表 |
| 附录:随机数字表 |
| 读博期间发表论文 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 岭南中医妇科流派源流 |
| 第一节 岭南中医妇科流派形成的背景 |
| 一、岭南中医妇科的形成因素 |
| 二、岭南中医妇科的源流 |
| 第二节 岭南中医妇科流派治疗月经病的学术特点 |
| 一、传承发扬中医,创新中医理论 |
| 二、百病生于气,重视调理气机 |
| 三、因地制宜,注重湿热致病,顾护气阴 |
| 四、四诊合参,重视望诊、脉诊 |
| 五、心身同治,调畅情志,重视情志治病 |
| 六、调理肾脾,先天与后天并重 |
| 七、用药轻灵,善用南药花药 |
| 八、结合岭南饮食文化,药食同源,重视药膳 |
| 第三节 岭南中医妇科与国内其他妇科流派治疗月经病特色比较 |
| 第二章 岭南中医妇科名家治疗月经病的学术经验 |
| 第一节 研究纳入标准 |
| 一、岭南中医妇科名家研究的纳入标准 |
| 二、流派研究的纳入标准 |
| 三、排除标准 |
| 四、纳入结果 |
| 第二节 清代岭南中医妇科名家 |
| 一、何梦瑶 |
| 二、刘渊 |
| 三、何守愚 |
| 四、潘名熊 |
| 第三节 民国时期中医妇科名家 |
| 一、吕楚白 |
| 二、吕安卿 |
| 三、谢泽霖 |
| 四、郭梅峰 |
| 第四节 新中国成立后岭南妇科医家 |
| 一、罗氏妇科 |
| 二、蔡氏妇科名家 |
| 三、其他妇科名家 |
| 第三章 名家及传承人的访谈 |
| 第一节 访谈法研究概述 |
| 一、访谈方式 |
| 二、访谈的研究步骤 |
| 第二节 访谈名家 |
| 一、访谈中医名家李丽芸教授 |
| 二、访谈中医名家王小云教授 |
| 三、访谈中医名家蔡妙珊教授 |
| 第三节 访谈中医名家传承人 |
| 一、采访题目 |
| 二、采访时间地点 |
| 三、采访目的 |
| 四、访谈概要 |
| 第四节 岭南中医妇科学术流派的学术思想传承主线 |
| 一、罗氏妇科的主要学术传承思想 |
| 二、蔡氏妇科学术思想传承 |
| 三、本研究的创新性 |
| 第四章 李丽芸教授经验方治疗黄体功能不全致经期延长的临床疗效观察 |
| 第一节 研究方案 |
| 一、研究目的 |
| 二、研究对象 |
| 三、实验方案 |
| 四、观察指标 |
| 五、数据管理及统计分析 |
| 第二节 研究结果 |
| 一、一般临床资料观察 |
| 二、疗效标准及结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略语表 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分: 大鼠脂肪干细胞来源的外泌体的分离与鉴定 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分: 去氧乙烯基环己烯(VCD)诱导大鼠卵巢早衰模型的建立 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分: 脂肪干细胞来源的外泌体对VCD损伤大鼠颗粒细胞的作用研究 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 第四部分: 脂肪干细胞来源的外泌体对VCD诱导卵巢早衰大鼠的作用研究 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 文献综述 卵巢早衰的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 1. 西医对于早发性卵巢功能不全的认识 |
| 1.1 定义 |
| 1.2 病因 |
| 1.3 检查 |
| 1.4 治疗 |
| 2. 中医对于早发性卵巢功能不全的认识 |
| 2.1 病因病机 |
| 2.2 治疗 |
| 3. 结语 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二章 中医治疗POI医案文献研究及用药规律研究 |
| 1. 资料与方法 |
| 1.1 医案来源 |
| 1.2 医案筛选 |
| 1.3 研究方法 |
| 2. 研究结果 |
| 2.1 医案检索结果 |
| 2.2 基本信息 |
| 2.3 用药频次 |
| 2.4 药物四气 |
| 2.5 药物五味 |
| 2.6 药物归经 |
| 2.7 组方规律分析 |
| 2.8 新方分析 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 发病年龄 |
| 3.2 病因病机 |
| 3.3 用药分析 |
| 3.4 核心药物组合分析 |
| 3.5 新方分析 |
| 结语 |
| 1 结论 |
| 2 不足 |
| 3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 1 |
| 附录 2 |
| 附录 3 |
| 主要研究成果 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一: 早发性卵巢功能不全的西医研究进展 |
| 1. 病因 |
| 2. 治疗 |
| 3. 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二: 早发性卵巢功能不全的中医研究进展 |
| 1. 病因病机 |
| 2. 中医药治疗 |
| 3. 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 加减归肾丸治疗早发性卵巢功能不全的临床观察 |
| 1. 临床资料 |
| 2. 观察项目 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 总结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 三种早发性卵巢功能不全小鼠造模方法的比较研究 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 加减归肾丸对POI小鼠的疗效和机制研究 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩写对照 |
| 前言 |
| 临床研究 |
| 1 病例来源与一般资料 |
| 2 诊断标准 |
| 2.1 西医诊断标准 |
| 2.2 中医诊断标准 |
| 3 纳入、排除、剔除、脱落、终止标准 |
| 3.1 纳入标准 |
| 3.2 排除标准 |
| 3.3 剔除标准 |
| 3.4 脱落标准 |
| 3.5 终止标准 |
| 4 研究方法 |
| 4.1 随机方法 |
| 4.2 治疗方案 |
| 4.3 意外情况及处理 |
| 5 观察指标 |
| 5.1 人口学资料 |
| 5.2 有效性指标 |
| 5.3 总疗效评定标准 |
| 5.4 安全性指标 |
| 6 统计学分析方法 |
| 结果 |
| 1 治疗前两组比较 |
| 1.1 治疗前两组患者血清性激素水平比较 |
| 1.2 治疗前两组患者的中医证候评分比较 |
| 2 两组治疗后的结果比较 |
| 2.1 治疗后两组患者血清性激素水平比较 |
| 2.2 治疗后中医证候评分比较 |
| 2.3 综合疗效对比 |
| 2.4 安全性评价 |
| 讨论 |
| 1 中医对本病的认识 |
| 1.1 中医对本病的定义 |
| 1.2 中医对本病病因病机的认识 |
| 2 西医对卵巢早衰的认识 |
| 3 中西医治疗现状 |
| 3.1 中医治疗现状 |
| 3.2 西医治疗现状 |
| 4 治疗方法的探讨 |
| 4.1 中药治疗的方药分析 |
| 4.2 针刺治疗的依据 |
| 4.3 针刺治疗的现代机理研究 |
| 5 研究结果 |
| 结语 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 绪论 |
| 第一章: 文献研究 |
| 1.1 POI的概述 |
| 1.2 POI西医的研究进展 |
| 1.2.1 POI的发病机理 |
| 1.2.2 POI的治疗 |
| 1.3 POI的中医研究进展 |
| 1.3.1 POI的发病机理 |
| 1.3.2 POI的治疗 |
| 1.4 蛋白组学在中医药研究中的应用 |
| 参考文献 |
| 第二章: 补肾活血方、左归丸和右归丸治疗皮质酮引起的POI的比较研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验仪器及设备 |
| 2.1.4 实验药品及其制备 |
| 2.1.5 分组及给药 |
| 2.1.6 生理状况、体重变化 |
| 2.1.7 样本采集与保存 |
| 2.1.8 生化指标测定 |
| 2.1.9 卵巢病理学检查 |
| 2.1.10 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 三种补肾方对大鼠生理状况、体重的影响 |
| 2.2.2 三种补肾方对大鼠脑匀浆5-HT、NE、DA的影响 |
| 2.2.3 三种补肾方对大鼠血清CORT、E_2、FSH、AMH的影响 |
| 2.2.4 三种补肾方对大鼠卵巢形态学的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章: 补肾活血方治疗皮质酮引起的POI的药效验证及机制研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验动物 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 实验仪器及设备 |
| 3.1.4 实验药品及其制备 |
| 3.1.5 分组及给药 |
| 3.1.6 生理状况、体重变化 |
| 3.1.7 样本采集与保存 |
| 3.1.8 生化指标测定 |
| 3.1.9 卵巢病理学检査 |
| 3.1.10 蛋白组学筛选差异蛋白 |
| 3.1.11 蛋白免疫印迹法测定Np4、Angptl4的表达 |
| 3.1.12 免疫组化法检测Np4、Angptl4蛋白的定位 |
| 3.1.13 统计学分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 补肾活血方对大鼠生理状况、体重的影响 |
| 3.2.2 补肾活血方对大鼠脑匀浆5-HT、NE、DA的影响 |
| 3.2.3 补肾活血方对大鼠动情周期的影响 |
| 3.2.4 补肾活血方对大鼠血清CORT、E2、FSH、AMH的影响 |
| 3.2.5 补肾活血方对大鼠卵巢形态学的影响 |
| 3.2.6 蛋白质鉴定结果 |
| 3.2.7 验证NP4和ANGPTL4的表达 |
| 3.2.8 三种补肾方对Np4和Angptl4表达的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 一般资料 |
| 1.1 临床资料 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 脱落剔除标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 分组方法 |
| 2.2 治疗方法 |
| 2.3 主要仪器及试剂 |
| 2.4 观察指标 |
| 2.5 疗效判定标准 |
| 2.6 统计学处理 |
| 结果 |
| 1 三组患者一般资料比较 |
| 2 治疗前后中医证候积分及临床疗效比较 |
| 3 治疗前后中医证候各症候改善程度比较 |
| 4 三组患者治疗前后抑制素 B、FSH、E2、MOV 比较 |
| 5 三组患者治疗前后 SOD2、Bax、Bcl2、AMH 蛋白表达结果比较 |
| 讨论 |
| 1 POF发病机制 |
| 2 POF的治疗 |
| 3 坤泰胶囊组成及药理作用 |
| 4 坤泰胶囊的现代研究近况 |
| 5 本研究结果分析 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间研究成果 |
| 致谢 |
| 提要 |
| abstract |
| 引言 |
| 临床研究 |
| 一、临床资料 |
| (一)病例来源 |
| (二)诊断标准 |
| (三)纳入标准 |
| (四)排除标准 |
| (五)中医体质判定标准 |
| (六)中医证候诊断标准 |
| 二、研究方法 |
| (一)观察指标 |
| (二)调查方法 |
| (三)统计学处理 |
| 三、结果及分析 |
| (一)一般情况结果 |
| (二)DOR患者中医体质类型分布 |
| (三)DOR患者中医证型分布 |
| (四)DOR患者中医体质类型与证型的相关性 |
| 讨论 |
| 一、DOR患者相关因素分析 |
| (一)DOR发病与年龄的关系 |
| (二)DOR患者的临床表现特征 |
| (三)DOR发病与饮食情况的关系 |
| (四)DOR与孕产史的关系 |
| (五)DOR发病与情志因素的关系 |
| 二、DOR与中医体质相关性的分析 |
| (一)中医体质学的概念 |
| (二)中医体质与疾病的关系 |
| (三)DOR与中医体质的相关性 |
| 四、DOR患者中医体质与证型相关性的探讨 |
| (一)DOR患者证型的分布特征 |
| (二)DOR患者中医体质与证型的相关性 |
| 五、从体质探讨DOR的防治 |
| (一)中医“治未病”思想在DOR中的指导作用 |
| (二)DOR的防治思路 |
| (三)建立“辨体-辨病-辨证”三维论治体系 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 卵巢储备功能减退中西医发病机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 论文着作 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 早发性卵巢功能不全的研究现状 |
| 1. 早发性卵巢功能不全的概述 |
| 2. 早发性卵巢功能不全的病因 |
| 2.1. 遗传因素 |
| 2.2. 医源性因素 |
| 2.3. 免疫因素 |
| 2.4. 酶缺乏 |
| 2.5. 其他因素 |
| 3. 早发性卵巢功能不全的现代医学治疗 |
| 3.1. 药物种类 |
| 3.2. 方案选择 |
| 3.3. 剂量 |
| 3.4. 复方口服避孕药 |
| 4. 中医对早发性卵巢功能不全的认识 |
| 4.1. 肾虚 |
| 4.2. 脾胃虚 |
| 4.3. 肝郁血虚 |
| 4.4. 情志因素 |
| 5. 早发性卵巢功能不全的中医治疗 |
| 5.1. 针灸治疗 |
| 5.2. 中药治疗 |
| 5.3. 其他治疗 |
| 6. 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 病例注册登记的研究现状 |
| 1. 病例注册登记研究的概述 |
| 2. 病例注册登记研究的用途 |
| 2.1. 描述疾病自然史和转归 |
| 2.2. 确定临床实践的临床效益和成本效益 |
| 2.3. 测量或监控安全性和伤害性 |
| 2.4. 促进临床决策 |
| 3. 病例注册研究的设计 |
| 4. 病例注册研究与随机对照试验 |
| 5. 国内外病例注册登记研究现状 |
| 6. 早发性卵巢功能不全的病例注册登记研究 |
| 7. 针灸治疗POI的病例注册登记研究探讨 |
| 8. 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 临床研究 |
| 临床资料与研究方法 |
| 1. 研究目的 |
| 2. 研究内容 |
| 3. 技术路线 |
| 4. 针灸治疗POI病例注册登记研究平台设计 |
| 4.1. 基本功能 |
| 4.2. 数据元素 |
| 4.3. 运行模式 |
| 4.4. 运行测试、优化和更新 |
| 5. 研究设计 |
| 5.1. 成立研究小组 |
| 5.2. 招募研究中心和医师 |
| 6. 筛选早发性卵巢功能不全患者 |
| 6.1. 诊断标准 |
| 6.2. 纳入标准 |
| 6.3. 排除标准 |
| 6.4. 剔除标准 |
| 7. 病例注册登记信息 |
| 7.1. 研究中心和医生的基本情况 |
| 7.2. 患者的基本信息 |
| 7.3. 首诊信息 |
| 7.4. 治疗方案 |
| 7.5. 治疗情况 |
| 7.6. 观察指标 |
| 7.6.1. 月经情况 |
| 7.6.2. 卵巢功能评估 |
| 7.6.3. 患者自评量表评分 |
| 7.6.4. 生殖相关指标 |
| 7.6.5. 安全性指标 |
| 8. 质量控制 |
| 8.1. 研究实施 |
| 8.2. 参研人员审查 |
| 8.3. 研究培训 |
| 8.4. 质量控制检查 |
| 8.5. 制定相关标准操作程序 |
| 8.6. 数据管理、核查与清洗 |
| 9. 伦理审批和临床试验注册 |
| 10. 统计分析 |
| 10.1. 分层分析 |
| 10.2. 调整混杂因素 |
| 10.3. 广义相加混合模型 |
| 结果 |
| 1. 人口学特征分布 |
| 2. POI患者临床特征分布 |
| 2.1. 病程、妊娠史及流产史特征 |
| 2.2. 月经情况特征 |
| 2.3. 基线卵巢功能特征 |
| 3. POI患者的干预措施情况分布 |
| 4. 针刺对POI患者月经情况的影响 |
| 5. 针刺对POI患者卵巢功能的影响 |
| 5.1. 促卵泡激素(Follicle Stimulating Hormone,FSH) |
| 5.2. 促黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH) |
| 5.3. 雌二醇(Estradiol,E_2) |
| 5.4. 抗苗勒管激素(Anti-Mullerian Hormone,AMH) |
| 5.5. 窦卵泡计数(Antral Follicle Count,AFC) |
| 6. 针刺对POI患者妊娠情况的影响 |
| 7. 安全性分析 |
| 讨论 |
| 1. 针灸病例注册登记研究将为POI的临床研究提供新的研究模式 |
| 2. 针灸治疗POI病例注册登记研究的方法学特点 |
| 2.1. 研究设计与实施 |
| 2.2. 数据管理和质量控制 |
| 2.3. 数据处理和统计分析 |
| 3. POI患者人口学特征和临床特征分析 |
| 4. 针刺改善POI患者卵巢功能的作用分析 |
| 5. 针刺对POI患者的妊娠结局影响分析 |
| 6. 本研究的创新、不足与展望 |
| 7. 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
