张伟奇,王倩,何燕,王雪芹[1]（2021）在《甘磷酸胆碱原料药中3种遗传毒性杂质含量测定方法的建立》文中研究说明目的:建立气-质联用（GC-MS）法同时测定甘磷酸胆碱原料药中环氧氯丙烷、缩水甘油、3-氯-1,2-丙二醇等3种遗传毒性杂质的含量。方法:以4批甘磷酸胆碱原料药为检测样品。色谱柱为ZB-WAXplusTM;进样口温度为200℃;进样方式为不分流进样;载气为氦气（He）,恒流模式;程序升温为初始温度30℃保持1 min,然后以30℃/min的速率升温至220℃并保持5 min;进样量为1μL。离子源为电子轰击源（EI）,电离电压为70 eV,离子源温度为200℃;质谱传输接口温度为250℃;质谱监测模式为选择离子（SIM）;检测特征离子为环氧氯丙烷[质荷比（m/z）49、57、62]、缩水甘油（m/z 31、43、44）、3-氯-1,2-丙二醇（m/z 44、61、79）;溶剂延迟时间为3 min。结果:环氧氯丙烷、缩水甘油、3-氯-1,2-丙二醇检测的质量浓度线性范围分别为29.86～746.48、172.91～922.18、21.18～211.85 ng/mL（r均大于0.999 0）;检测限分别为19.91、115.27、10.59 ng/mL;定量限分别为29.86、172.91、21.18ng/mL;精密度（n=6）、重复性（n=6）、稳定性（室温放置12 h,n=8）试验的RSD均小于10%;平均加样回收率分别为93.88%、91.45%、91.86%,RSD分别为5.10%、3.10%、2.49%（n=9）。在4批甘磷酸胆碱原料药中,均未检出上述3种遗传毒性杂质。结论:建立的GC-MS法简单高效、准确度高、重复性好,可用于同时测定甘磷酸胆碱原料药中环氧氯丙烷、缩水甘油、3-氯-1,2-丙二醇等3种遗传毒性杂质的含量。
赵晋蔚,杨梦宁,梁辰,姚双全,覃程荣,孙广航[2]（2021）在《食品及纸质食品包装材料中氯丙醇危害与检测方法》文中研究表明对食品及纸质食品包装材料中氯丙醇的生物危害进行了分析,列举了各国相关标准中对食品及纸质食品包装材料中氯丙醇类的限量值要求,并对目前各类标准和相关研究中提出的氯丙醇类检测方法进行了分析比较,为食品及纸质食品包装材料中氯丙醇类的检测提供借鉴。
胡金华[3]（2020）在《9-（2-羟丙基）腺嘌呤-柱前衍生化-HPLC-FLD法检测3-氯-1,2-丙二醇》文中提出3-氯-1,2-丙二醇（3-monochloro-1,2-propanediol,3-MCPD）具有生殖毒性、肾脏毒性、神经毒性、遗传毒性、致癌性等毒性,国际癌症研究机构（international agency for cancer research,IARC）将其归类为2B类致癌物。目前,关于3-MCPD的检测方法主要有气相色谱法（gas chromatography,GC）、气相色谱-质谱联用法（gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）、毛细管电泳技术（capillary electrophoresis,CE）、分子印迹法（molecular imprinting,MIP）等,而高效液相色谱-荧光法（HPLC-FLD）却鲜见报道。本课题基于实验室已建立腺嘌呤衍生化3-MCPD的基础上,对腺嘌呤第九位取代的三种物质与3-MCPD衍生化后的衍生物进行了荧光光谱分析,最终确定了9-（2-羟丙基）腺嘌呤作为衍生试剂的衍生效果更好,并在环境水和食用植物油中游离3-MCPD检测上得到了很好地应用。本课题主要包含以下几部分内容:（1）氯乙醛二乙缩醛水解获得的氯乙醛分别与腺嘌呤、9-甲基腺嘌呤、9-（2-羟乙基）腺嘌呤、9-（2-羟丙基）腺嘌呤反应,利用HPLC-UV分离获得四种3-MCDP衍生物,通过探究其荧光强度与p H值、甲醇体积分数、NaCl浓度的关系,确定HPLC-FLD法最佳分离条件,最终得出9-（2-羟丙基）腺嘌呤衍生效果更好。（2）空白峰的生成抑制探索实验表明了基于高碘酸钠氧化裂解3-MCPD、亚硫酸钠中和过量高碘酸钠的基础上再加入醋酸铅可以有效抑制空白峰的生成,衍生试剂的p H值及浓度、氧化裂解时间、衍生化温度及时间的单因素实验进一步提高了方法的灵敏度。（3）纯水体系下,0.0～100.0 ng/mL、100.0～1000.0 ng/mL 3-MCPD的标准曲线方程分别y=7.91447x+27.43477、y=7.62336x+40.83123;R2分别为0.9974、0.9974。湖水、江水、造纸厂水中3-MCPD的含量依次为0.52、1.47、3.51μg/kg。（4）0.03 g/mL NaCl溶液体系下,0.0～100.0 ng/mL 3-MCPD标准曲线方程为y=7.83635x+24.82129,R2=0.99863。对实验室已建立的食用植物油中游离3-MCPD的提取方法做了调整,并检测出大豆油、稻米油、花生油、山茶油、玉米油中3-MCPD含量分别为16.37、26.89、153.74、30.51、17.48μg/kg。（5）基于实验室腺嘌呤衍生化3-MCPD法应用于酱油中3-MCPD的检测上,发现三氯蔗糖会对实验结果造成巨大影响,透析袋分离酱油中3-MCPD和三氯蔗糖的探索实验表明了该前处理效果较差。
张忠飞[4]（2019）在《2-氯丙醇酯的合成、检测和急性毒性研究》文中进行了进一步梳理氯丙醇酯是甘油酯结构中羟基或者酯键被氯取代的化合物,具有潜在的生殖毒性、肾毒性和免疫毒性,在精炼植物油、烘焙和煎炸等食品中都能被检测到,是食品热加工过程中产生的污染物。目前3-氯丙醇（3-MCPD）酯相关的研究较多,其同分异构体2-氯丙醇（2-MCPD）酯并未得到足够重视。究其原因,一方面2-氯丙醇酯相关的毒理学数据缺乏;另一方面2-氯丙醇酯合成过程中产生多种杂质,导致难以制备高纯度标准品。本论文旨在设计一条以丙二酸二乙酯为原料,在温和条件下合成游离的2-MCPD路线,然后再通过酯化反应得到六种不同结构的2-氯丙醇酯,并经过质谱、核磁共振波谱、红外光谱和圆二色谱等技术表征其结构;以合成的2-MCPD酯为分析标准品,构建和优化UPCC-q TOF检测2-氯丙醇单酯的方法,并以此为基础,用甘油酯模式反应证实棕榈油精炼条件下有2-氯丙醇单酯产生;采用最大限量法测定2-氯丙醇棕榈酸单酯（P-2-MCPD）和2-氯丙醇棕榈酸双酯（PP-2-MCPD）对Swiss小鼠的经口急性毒性,结果表明两种氯丙醇棕榈酸酯LD50（半数致死量）均大于5000 mg/kg body weight（BW）,同时发现实验组血清中仅有睾酮显着降低;根据急性毒性实验结果,选用与睾酮合成相关的小鼠睾丸间质细胞系TM3为体外研究模型,基于细胞存活率研究2-氯丙醇酯对TM3的影响。进一步通过蛋白印迹法（Western blotting）分析2-氯丙醇棕榈酸单双酯对睾酮合成及细胞凋亡和坏死通路中关键蛋白表达量的影响,包括类固醇激素急性调节蛋白（StAR）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2关联的X蛋白（Bax）、切割的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Cleaved caspase 3）、混合谱系激酶域样蛋白（MLKL）和受体相互作用蛋白（RIP xp）等。主要结果如下所述:1.以丙二酸二乙酯为起始原料,在酸催化条件下,经二氯海因氯化得到氯代丙二酸二乙酯;然后在低温甲醇溶液中用硼氢化钠将氯代丙二酸二乙酯还原成游离的2-MCPD;通过Steglich酯化反应,在4-二甲氨基吡啶（DMAP）和N,N-二环己基碳二亚胺（DCC）催化下将脂肪酸和游离的2-氯丙醇酯化,通过调控脂肪酸比例来控制单酯和双酯的产量;通过质谱、核磁共振光谱和红外光谱确定结构为2-氯丙醇酯,经峰面积法测定纯度为98%以上;三种单酯经圆二色谱验证为外消旋体。2-氯丙醇单酯和双酯的总产率约为50-54%和56-59%。2.通过优化色谱柱、流动相改性剂、自动背压调节器（ABPR）压力、柱温和洗脱梯度,改进了超临界合相色谱串联飞行时间质谱（UPCC-q TOF）分析2/3-氯丙醇单酯的方法,加入改性剂后的最佳方案为:采用2-PIC（2-甲氨基吡啶）色谱柱,流动相改性剂为甲醇;ABPR:1800 psi,柱温:50℃;流速1 mL/min;梯度洗脱:0.5-10%甲醇。该液相方法时间为12 min,对于不同的脂肪酸,2-氯丙醇单酯或3-氯丙醇单酯有很好的分离效率;同时对同一脂肪酸对应不同的3-/2-氯丙醇单酯也有较好分离度。检测氯丙醇酯生成模式反应中,甘单酯、甘二酯和甘三酯生成3-/2-氯丙醇单酯比值为:2.9-4.5:1。3.通过最大限量法测定P-2-MCPD和PP-2-MCPD对Swiss小鼠的急性毒性,结果显示,给予2-氯丙醇酯后14天Swiss小鼠无一死亡,P-2-MCPD 和 PP-2-MCPD 的 LD50 均大于 5000 mg/kg BW。根据 GHS（全球化学品统一分类和标签制度）等分类标准P-2-MCPD和PP-2-MCPD均应被划归为无毒化合物类（Nontoxic compounds）。与空白组相比,P-2-MCPD和PP-2-MCPD组Swiss小鼠血清中睾酮含量显着降低;组织病理学分析发现高剂量的P-2-MCPD和PP-2-MCPD（5000 mg/kg BW）导致Swiss小鼠轻微的肾损伤和睾丸损伤,由此推测睾丸可能是2-氯丙醇酯的靶器官。4.通过MTT法测定细胞活性发现五种2-氯丙醇酯均对TM3的存活率产生影响,且存在剂量反应关系。LDH（乳酸脱氢酶）测定结果表明P-2-MCPD在40-320μM之间显着提高TM3细胞的LDH释放量,而且存在剂量-反应关系。Western blotting结果显示,2-氯丙醇棕榈酸单双酯能使Cleaved caspase 3在给药后6 h和24 h表达量有显着变化,而且有时间反应关系。综上所述,2-氯丙醇酯能显着降低小鼠睾丸间质细胞TM3存活率,其中P-2-MCPD和PP-2-MCPD对细胞存活率的影响最为显着,而且P-2-MCPD致毒机理可能与Cleaved caspase 3蛋白介导的细胞凋亡有关。
杜晓宁,张鹏帅,雷雯,王伟,侯捷[5]（2019）在《稳定同位素技术在我国食品安全检测领域的应用进展》文中指出为了深入了解稳定同位素技术在近十多年来食品安全领域的应用热点,本文着重关注国内科研领域的相关研究,从稳定同位素比值测定在食品溯源技术中的应用、稳定同位素技术在食品真实属性鉴别中的应用、稳定同位素内标试剂与同位素稀释质谱法结合的检测技术在食品中有害物质检测中的应用等三个方面综述了稳定同位素在食品安全领域的快速发展及已经形成规范的技术水平。随着稳定同位素技术的发展及数据库的积累,相关理论不断完善,其必将在食品安全领域成为至关重要的应用技术之一。
李嘉辉[6]（2019）在《芝麻木酚素对植物油模拟脱臭及煎炸过程中缩水甘油酯的抑制研究》文中提出缩水甘油酯（Glycidyl Esters,GEs）作为一种新型油脂热加工的伴生化学危害物,主要形成于食用油脂精炼过程,特别是高温脱臭环节。除此之外,煎炸等高温条件也会促使GEs的形成。随着GEs的生成和抑制研究的深入,已经获悉抗氧化剂的加入能够有效抑制油脂精炼脱臭以及高温煎炸过程中GEs的生成,而芝麻木酚素是芝麻油中天然存在的一类油溶性抗氧化剂,不仅具有强的抗氧化作用,并且更加安全,具有替代人工合成抗氧化剂的潜力。同时在精炼脱臭或者高温加热下,芝麻木酚素中的芝麻林素转化为芝麻酚将可以提供更好的抗氧化作用。因此,本文首先通过建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用法实现对GEs的高效检测以及准确定量,然后研究芝麻林素和芝麻酚,以及富含芝麻林素的冷榨芝麻油的添加对植物油模拟脱臭以及高温煎炸过程中GEs的抑制作用,为使用天然芝麻木酚素及冷榨芝麻油来抑制植物油在脱臭及煎炸过程中GEs的产生提供理论基础和技术指导。主要研究结果如下:（1）超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用法测定植物油中GEs的方法建立在现有研究基础上,建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用法检测GEs的方法。通过提高前处理上样量,增加目标物的分析浓度,满足对GEs含量更低的样品的检测要求;优化流动相梯度洗脱程序,避免流动相对色谱柱造成损耗,减少有机溶剂的使用,整个流动相梯度洗脱程序只需15.2 min,比现有方法至少节约了31%的时间,更加高效;通过子离子模式优化了5种GEs的定量离子对和碰撞能,利用质荷比为313.20>71、341.30>71、339.30>95、337.20>95、335.20>95等离子对分别作为C16:0-GE、C18:0-GE、C18:1-GE、C18:2-GE、C18:3-GE的定量离子对,采用多反应监测模式（MRM）进行定量使得5种GEs的检测更具特异性。本方法中5种GEs的检出限为0.00450.023mg/kg,平均回收率为96.16%107.02%,相对标准偏差（RSD）为1.98%5.74%。这说明,此方法可操作性强,具有较高的灵敏度和准确度,重现性好,能够满足实际食用植物油样品中微量GEs的高效准确定量检测。（2）芝麻木酚素以及冷榨芝麻油的添加对模型油模拟脱臭过程中GEs的抑制作用的研究芝麻木酚素（芝麻林素和芝麻酚）的添加能够抑制模型棕榈油（Model palm oil,MPO）、模型玉米油（Model corn oil,MCO）以及模型米糠油（Model rice bran oil,MRO）三种模型植物油中GEs的生成,且随着其添加量的增加,GEs的抑制率逐渐提高,在芝麻林素最大添加量（0.10%）时,三种模型油中GEs抑制率大小依次为MCO（19.84%）>MRO（17.34%）>MPO（15.65%）;在芝麻酚最大添加量（0.050%）时,GEs抑制率大小依次为MPO（28.99%）>MRO（19.00%）>MCO（17.48%）。根据芝麻林素和芝麻酚对GEs的抑制效果以及芝麻林素和芝麻酚之间的含量变化分析得到,芝麻酚的抑制效果明显高于芝麻林素。通过傅里叶变换红外光谱的检测结果表明,芝麻酚的加入可能通过捕获自由基的方式来抑制环酰氧鎓自由基中间体的产生,或者直接作用于环酰氧鎓自由基中间体的产生,从而抑制GEs的生成。而添加冷榨芝麻油不仅是通过芝麻林素和芝麻酚的抑制作用而减少GEs的生成,还能够通过显着减少模型油中所含有的GEs生成前体物质DAG的含量从而使GEs的含量显着降低,并且DAG前体物质含量的降低对调配油样中GEs的含量变化起到主要的作用（P<0.05）。另外,冷榨芝麻油还能够提高模型油中的不饱和脂肪酸含量以及改善初始的油脂品质,同时提高MCO和MRO的氧化稳定性,但是会降低MPO的氧化稳定性（P<0.05）（3）芝麻酚的添加对连续煎炸棕榈油油样中GEs的抑制作用的研究芝麻酚的添加能够有效降低煎炸过程中GEs的含量,但对于抑制煎炸过程中GEs生成从而降低GEs含量的作用主要表现在初始的升温阶段（由25°C升至180±2°C）及第一次煎炸（5min）。经第一次煎炸（5 min）后,与新鲜棕榈油中的GEs含量相比,空白对照（未添加芝麻酚）油样中所含的GEs含量降低了14.45%,随着芝麻酚添加量由0.025%增加至0.10%,油样中的GEs含量分别降低了16.92%、20.30%、22.35%、26.25%,这表明由于煎炸过程而导致的油样中GEs含量的降幅将随着芝麻酚添加量的增加而变大（P<0.05）,而在第一次煎炸（5 min）随后的8 h连续煎炸过程中含有不同添加量芝麻酚的油样中的GEs含量变化差异不大（P>0.05）。同时,通过对油脂的品质指标进行测定发现,在煎炸过程中芝麻酚的添加能够发挥抗氧化作用,以及清除自由基能力,减缓煎炸油样氧化、聚合、分解等反应的发生,延缓了煎炸过程油脂的氧化变质,提高棕榈油的煎炸稳定性。
王丹[7]（2019）在《基于色谱—串联质谱技术测定果蔬中的农药多残留》文中研究指明农残分析是一项对复杂基质中的痕量化合物进行分析的技术,它要求方法灵敏度高、特异性强,基质效应的干扰是前处理中的关键问题。目前QuEChERS方法已经得到了广泛应用,是一种简便、快速、安全、便宜的分析方法,该方法虽然快速方便,但对于复杂的基质净化效果不佳。本研究将多壁碳纳米管（MWCNTs）,氧化锆涂层的二氧化硅（Z-Sep）结合QuEChERS前处理技术,以气相色谱串联质谱（GC-MS/MS）和液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）作为分析手段,对果蔬基质中农药多残留进行提取分析,建立了净化效果更好的果蔬中农药多残留分析检测方法,主要研究结果如下:1、以混合蔬菜为原料,在传统的QuEChERS前处理方法上进行改进,净化步骤采用多壁碳纳米管（MWCNTs）,氧化锆涂层的二氧化硅（Z-Sep）结合传统的QuEChERS吸附剂进行净化,选取182种代表性农药对净化条件进行优化。实验最终采用N-丙基乙二胺（PSA）、多壁碳纳米管（MWCNTs）、氧化锆涂层的二氧化硅（Z-Sep+）混合净化体系;确定了MWCNTs（TNM3）用量为30mg,Z-Sep+用量为80mg,PSA用量为125mg,净化后的样品澄清并基本无色。2、研究了PSA结合MWCNTs和Z-Sep的净化体系相较于传统的QuEChERS净化体系PSA结合GCB和C18的区别。通过从外观颜色和色谱图杂质峰的比较来看,发现加入MWCNTs净化的样品色素含量少于加入GCB,并且杂质峰数量也明显减少。同时,相比于传统的QuEChERS方法,添加Z-Sep大大降低了基质效应,在净化效果上显示出了明显的优越性。3、建立了果蔬中182种农药气相色谱串联质谱检测方法和液相色谱串联质谱方法。GC-MS/MS采用3-乙氧基-1,2-丙二醇,L-（+）-古洛糖酸γ-内酯,D-山梨糖醇3种物质作为分析保护剂,3种分析保护剂分别可对RT 5-9min,7-17min,7-34min的化合物提供共流出保护或抵消基质效应的作用;LC-MS/MS采用色谱柱ACQUITY UPLC HSS T3（100 mm×2.1 mm,1.7μm）分析123项农药,稀释定容法（稀释1倍）降低分析项目的基质效应;在多反应监测（MRM）模式下,182种农药能够很好的分离、定性及定量,线性范围在10200μg/kg,相关系数（R2）>0.99。4、利用建立的果蔬中农药多残留方法对菠菜、姜、茄子、苹果4种基质中样品进行添加回收率实验和精密度实验。182种农药在10μg/kg、20μg/kg和50μg/kg添加水平下（n=6）的回收率范围在56.0%124.0%范围内,相对标准偏差低于22.0%。并通过实际样品的检测比对,扩大了该方法的应用范围,提高了方法的适用性。改进后的QuEChERS方法大大地提高了检测果蔬中农药多残留的净化效果和检测准确度,得到了令人满意的结果。
向晓玲,王立媛,沈向红,李春松,沈建福,吴平谷[8]（2017）在《固相萃取-衍生化-气相色谱-质谱法测定富脂调味品中3-氯-1,2-丙二醇》文中研究指明目的建立固相萃取-衍生化-气相色谱-质谱法测定富脂调味品中的3-氯-1,2-丙二醇（3-MCPD）的方法。方法以豆瓣酱等为代表的富脂调味品采用超声提取,碱性硅藻土固相萃取柱净化、苯硼酸衍生后采用气相色谱质谱法（GC-MS）测定3-MCPD。结果 3-MCPD的线性范围为1100 ng/mL,相关系数为0.9993,3-MCPD在酱油、黄豆酱、辣椒油3种基质中的检出限分别为0.6、0.5和7.0μg/kg,定量限分别为1.9、1.6和18.8μg/kg。在样品中添加2.51000μg/kg 3-MCPD,平均回收率为78.3%106.7%,相对标准偏差为1.9%11.6%（n=6）。结论该方法净化效果好,灵敏度、准确度均满足检测要求,可作为富脂调味品中3-MCPD含量检测的确证方法。
唐熙,刘华建,唐雯,邹哲祥[9]（2017）在《气相色谱-质谱法测定咸味食品香精中3-氯-1,2-丙二醇》文中提出建立了一种可靠的测定咸味食品香精中3-氯-1,2-丙二醇（3-MCPD）的气相色谱-质谱（GC-MS）方法。考察了不同提取溶剂对香精中3-MCPD的提取效率;采用佛罗里硅土固相萃取柱净化样品,考察了不同比例的乙酸乙酯-正己烷淋洗液对3-MCPD回收率的影响,以及用七氟丁酸酐衍生时温度对产率的影响。本方法在1.010000μg/L的浓度范围内,3-MCPD有较好的线性关系,相关系数r>0.99。通过对不同类型的香精空白样品进行添加回收实验,精密度实验考察方法的可行性。3-MCPD的平均回收率介于89.4%103%之间,相对标准偏差介于1.17%4.33%。方法检出限为1.0μg/kg;定量限为5.0μg/kg。
张爽[10]（2014）在《食品中3-氯-1，2-丙二醇对小鼠T淋巴细胞抑制作用及机制研究》文中进行了进一步梳理本研究为中国博士后科学基金一类项目801120106201。3-氯-1，2-丙二醇（α-chlorohydrin，3-MCPD）是目前被国际上广为关注的食品污染物—氯丙醇类化合物中最常见的代表物质。在食品工业中，利用酸水解植物蛋白工艺生产氨基酸的过程中，会不可避免地产生氯丙醇类副产物，其中3-MCPD的含量最高。与传统的发酵酿造工业相比，酸水解工艺具有生产时间短，成本低等优点，因此被广泛应用。利用酸水解蛋白进一步加工得到配制酱油等调味品，因此在配制酱油和相关调味品中3-MCPD的污染较为常见。本研究以3-MCPD（+）为研究对象，以18-22g BALB/c小鼠为实验动物，在非细胞毒剂量范围内，探究3-MCPD（+）对小鼠是否具有体内外的免疫抑制作用，如果具有免疫抑制作用，探索其发生抑制作用的机制。主要取得如下研究结果：（1）通过MTT法筛选出3-MCPD（+）的非细胞毒剂量范围，并进一步确定3-MCPD（+）的实验剂量。在0～4mM范围内，吸光度值与空白值相比没有显着性差异，说明该剂量范围是BALB/c小鼠脾淋巴细胞的非细胞毒剂量范围。进一步通过刀豆蛋白A（ConA）的诱导确定1，2，4mM剂量的3-MCPD（+）对脾淋巴细胞的增殖具有抑制作用。（2）系统研究了3-MCPD（+）对BALB/c小鼠脾淋巴细胞产生免疫抑制作用的机制。进行具有代表性的免疫学实验如流式细胞术分析、ELISA试剂盒检测、RNA提取和半定量反转录聚合酶链反应、细胞内钙离子的荧光测定，结果确定1，2，4mM剂量的3-MCPD（+）对小鼠脾淋巴细胞具有免疫抑制作用。采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分析3-MCPD（+）对ConA激活的信号通路NF-κB、NFAT、AP-1的影响，发现3-MCPD（+）抑制了NF-κB、NFAT2、AP-1代表性蛋白的表达。得出结论：经ConA刺激后，NF-κB、NFAT2、AP-1蛋白的表达量增多，但是随着3-MCPD（+）剂量的不断升高，三种蛋白的表达量逐渐减少，呈剂量依赖关系。3-MCPD（+）对BALB/c小鼠脾淋巴细胞具有免疫抑制作用，这种抑制作用可能是通过抑制NF-B，NFAT及AP-1信号通路来实现的。（3）构建二硝基氟苯（DNFB）所致的迟发型超敏反应（DTH）小鼠模型。进行外耳廓组织学分析。结果表明：3-MCPD（+）对BALB/c小鼠具有体内的免疫抑制作用。综上所述，食品中氯丙醇类化合物的代表物质3-MCPD对BALB/c小鼠体内外都具有免疫抑制作用，这种抑制作用呈现出剂量依赖性，从而为食品中3-MCPD进一步的安全性评价提供毒理学依据。
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
| 1 材料 |
| 1.1 主要仪器 |
| 1.2 主要药品与试剂 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 色谱条件 |
| 2.2 质谱条件 |
| 2.3 溶液制备 |
| 2.3.1 混合对照品溶液的制备 |
| 2.3.2 供试品溶液的制备 |
| 2.3.3 空白溶剂 |
| 2.4 方法学考察 |
| 2.4.1 专属性试验 |
| 2.4.2 线性关系考察 |
| 2.4.3 检测限和定量限考察 |
| 2.4.4 精密度试验 |
| 2.4.5 稳定性试验 |
| 2.4.6 重复性试验 |
| 2.4.7 加样回收率试验 |
| 2.5 甘磷酸胆碱原料药中3种遗传毒性杂质含量的测定 |
| 3 讨论 |
| 3.1 质谱条件的选择 |
| 3.2 色谱条件的选择 |
| 3.3 所建方法的合理性分析 |
| 1 食品中氯丙醇类的危害 |
| 1.1 肾脏毒性 |
| 1.2 生殖毒性 |
| 1.3 神经毒性 |
| 1.4 免疫毒性 |
| 1.5 致突变性 |
| 1.6 致癌性 |
| 2 食品及纸质食品包装材料中氯丙醇类物质限值要求 |
| 3 氯丙醇检测方法 |
| 3.1 萃取方式 |
| 3.2 衍生化试剂 |
| 3.3 检测仪器 |
| 3.4 其他检测方法 |
| 4 结语及展望 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 3-MCPD的物理、化学性质 |
| 1.2 3-MCPD形成的机理 |
| 1.2.1 酸水解产生 |
| 1.2.2 热处理产生 |
| 1.2.3 氯丙醇酯降解产生 |
| 1.3 3-MCPD的来源 |
| 1.4 3-MCPD的毒性 |
| 1.4.1 生殖毒性 |
| 1.4.2 遗传毒性 |
| 1.4.3 致癌性 |
| 1.5 3-MCPD的代谢途径 |
| 1.6 部分国家对3-MCPD的限量要求 |
| 1.7 减少或避免3-MCPD生成的方法 |
| 1.8 3-MCPD的萃取方法 |
| 1.8.1 固相萃取(SPE) |
| 1.8.2 固相微萃取(SPME) |
| 1.8.3 磁性固相萃取(MSPE) |
| 1.8.4 液-液萃取(LLE) |
| 1.9 3-MCPD的检测方法 |
| 1.9.1 气相色谱法(GC) |
| 1.9.2 气相色谱-质谱法(GC-MS) |
| 1.9.3 毛细管电泳-电导法(CE-CD) |
| 1.9.4 毛细管电泳-电化学法(CE-ED) |
| 1.9.5 分子印迹法(MIP) |
| 1.9.6 高效液相色谱-紫外法(HPLC-UV) |
| 1.10 3-MCPD酯的简介 |
| 1.11 立题意义及背景 |
| 1.12 研究的主要内容 |
| 第2章 四种腺嘌呤类试剂衍生效果与荧光性能评价 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与仪器 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 氯乙醛及腺嘌呤类衍生试剂溶液的配制 |
| 2.3.2 高浓度衍生产物溶液的制备 |
| 2.3.3 衍生产物荧光光谱研究 |
| 2.3.4 四种腺嘌呤类衍生试剂的荧光效果比较及评价 |
| 2.4 实验结果与分析 |
| 2.4.1 衍生化原理 |
| 2.4.2 四种3-MCPD衍生物的制备 |
| 2.4.3 四种3-MCPD衍生物的质谱分析 |
| 2.4.4 四种3-MCPD衍生物的荧光强度与p H关系 |
| 2.4.5 四种3-MCPD衍生物的荧光强度与甲醇体积分数关系 |
| 2.4.6 四种3-MCPD衍生物的荧光强度与NaCl浓度关系 |
| 2.4.7 四种腺嘌呤类衍生试剂的衍生效果对比及评价 |
| 2.5 本章小结 |
| 第3章 以9-(2-羟丙基)腺嘌呤为衍生试剂的HPLC-FLD法测定3-MCPD的参数优化 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与仪器 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 HP-Ade作为衍生试剂空白峰的生成抑制探索 |
| 3.3.2 HP-Ade作为衍生试剂空白峰的生成抑制优化比较实验 |
| 3.3.3 最佳抑制空白峰的条件下比较体系及干扰物的液相分析结果,验证可行性 |
| 3.3.4 最佳抑制空白峰的条件测定3-MCPD条件优化实验 |
| 3.4 实验结果与分析 |
| 3.4.1 空白干扰峰生成及抑制探索实验结果 |
| 3.4.2 方法3和方法6衍生效果对比 |
| 3.4.3 空白峰生成最小化及3-MCPD衍生物峰生成最大化的优化实验 |
| 3.4.4 利用最佳抑制空白峰的条件比较体系及干扰物的液相分析结果,验证可行性 |
| 3.4.5 最佳抑制空白峰的条件测定3-MCPD条件优化实验 |
| 3.5 本章小结 |
| 第4章 以9-(2-羟丙基)腺嘌呤为衍生试剂的HPLC-FLD法测定食用油中游离的3-MCPD |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与仪器 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 NaCl溶液的浓度对3-MCPD衍生化的影响探索 |
| 4.3.2 NaCl溶液的浓度对空白峰生成的影响探索 |
| 4.3.3 0.03 g/mL NaCl溶液体系下3-MCPD标准曲线的绘制(0.0-100.0ng/mL) |
| 4.3.4 食用油中游离3-MCPD的测定实验 |
| 4.4 实验结果与分析 |
| 4.4.1 不同浓度的NaCl溶液对3-MCPD衍生化及空白峰生成的影响 |
| 4.4.2 0.03 g/mL NaCl溶液体系下3-MCPD标准曲线的绘制结果 |
| 4.4.3 萃取时间的选择 |
| 4.4.4 加标回收率实验结果 |
| 4.4.5 不同食用油中游离3-MCPD的测定结果 |
| 4.5 本章小结 |
| 第5章 荧光分光光度法检测环境水样中3-MCPD的探索 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与仪器 |
| 5.2.1 实验材料 |
| 5.2.2 实验仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 3-MCPD标准曲线的绘制—HPLC-FLD法 |
| 5.3.2 3-MCPD标准曲线的绘制—荧光分光光度法 |
| 5.3.3 HPLC-FLD法和荧光分光光度法的加标回收率实验 |
| 5.3.4 HPLC-FLD法和荧光分光光度法分别检测环境水中的3-MCPD |
| 5.4 实验结果与分析 |
| 5.4.1 HPLC-FLD法绘制3-MCPD标准曲线的结果 |
| 5.4.2 荧光分光光度法绘制3-MCPD标准曲线的结果 |
| 5.4.3 HPLC-FLD法和荧光分光光度法加标回收率的结果 |
| 5.4.4 HPLC-FLD法和荧光分光光度法分别检测环境水中3-MCPD的实验结果 |
| 5.5 本章小结 |
| 第6章 酱油检测中三氯蔗糖的干扰、样品前处理方法探索 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验材料与仪器 |
| 6.2.1 实验材料 |
| 6.2.2 实验仪器 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 检测方法 |
| 6.3.2 液-液萃取法提取酱油中3-MCPD的探索 |
| 6.3.3 酱油中3-MCPD加标回收率实验 |
| 6.3.4 目标峰的验证实验 |
| 6.3.5 9-(2-羟丙基)腺嘌呤与三氯蔗糖反应 |
| 6.3.6 3-MCPD与三氯蔗糖分离的探索 |
| 6.4 实验结果与分析 |
| 6.4.1 液-液萃取法提取酱油中3-MCPD的探索实验结果 |
| 6.4.2 酱油中3-MCPD加标回收率的测定结果 |
| 6.4.3 对目标峰进行验证实验结果 |
| 6.4.4 9-(2-羟丙基)腺嘌呤与三氯蔗糖反应结果 |
| 6.4.5 3-MCPD与三氯蔗糖分离的探索实验结果 |
| 6.5 本章小结 |
| 第7章 总结与展望 |
| 7.1 实验总结 |
| 7.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 2-氯丙醇酯结构和特征 |
| 1.2 2-MCPD合成方法进展 |
| 1.2.1 烯丙基醇为原料合成2-MCPD |
| 1.2.2 环氧化合物为原料合成2-MCPD |
| 1.2.3 1,3-二苯甲基甘油醚为原料合成2-MCPD |
| 1.3 2-氯丙醇及脂肪酸酯毒性评价 |
| 1.3.1 急性毒性 |
| 1.3.2 体外毒性 |
| 1.3.3 吸收和代谢 |
| 1.4 2-氯丙醇酯检测方法 |
| 1.4.1 氯丙醇及其脂肪酸酯分析方法演变历程 |
| 1.4.2 氯丙醇及其脂肪酸酯富集方法 |
| 1.4.3 气相色谱串联质谱方法(GC-MS) |
| 1.4.4 液相色谱法(LC-MS) |
| 1.4.5 超高效合相色谱法 |
| 1.4.6 其他分析检测方法 |
| 1.5 2-氯丙醇及其脂肪酸酯在食品中分布及风险评估 |
| 1.5.1 2-氯丙醇及其脂肪酸酯在食品中分布 |
| 1.5.2 2-氯丙醇及其脂肪酸酯风险评估 |
| 1.6 2-氯丙醇及其脂肪酸酯形成机理和消减策略 |
| 1.6.1 酸水解蛋白类体系中氯丙醇酯形成机理 |
| 1.6.2 油脂类体系中氯丙醇酯形成机理 |
| 1.6.3 其他体系中氯丙醇酯形成机理 |
| 1.6.4 氯丙醇酯前处理消减策略 |
| 1.6.5 氯丙醇酯加工过程中消减策略 |
| 1.6.6 氯丙醇酯后处理法消减策略 |
| 1.7 研究内容 |
| 1.7.1 立题依据 |
| 1.7.2 拟解决的关键问题 |
| 1.7.3 研究内容 |
| 第二章 2-氯丙醇及其脂肪酸酯的合成及表征 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验试剂和仪器 |
| 2.2.1 实验试剂 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 氯代丙二酸二乙酯的合成 |
| 2.3.2 2-氯丙醇的合成 |
| 2.3.3 2-氯丙醇酯的合成 |
| 2.3.4 气相串联质谱和液相串联飞行时间质谱检测方法 |
| 2.3.5 核磁共振检测方法 |
| 2.3.6 傅里叶变换红外检测(ATR-FTIR)方法 |
| 2.3.7 圆二色谱测定方法 |
| 2.4 实验结果与讨论 |
| 2.4.1 2-氯丙醇酯合成及分离纯化结果 |
| 2.4.2 气相串联质谱测定结果 |
| 2.4.3 液相串联飞行时间质谱测定结果 |
| 2.4.4 核磁碳谱和氢谱测定结果 |
| 2.4.5 傅里叶变换红外测定结果 |
| 2.4.6 圆二色谱测定结果 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 运用UPCC-qTOF检测2-氯丙醇酯及其在模式反应中含量变化 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验试剂和仪器 |
| 3.2.1 实验试剂 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 工作液配制 |
| 3.3.2 UPCC方法优化 |
| 3.3.3 定量分析氯丙醇单酯 |
| 3.3.4 铁催化甘油酯生成氯丙醇酯模式实验 |
| 3.4 实验结果与讨论 |
| 3.4.1 UPCC色谱条件优化结果 |
| 3.4.3 铁催化生成氯丙醇酯模式实验结果 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 2-氯丙醇棕榈酸酯的急性毒性 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验试剂和仪器 |
| 4.2.1 实验试剂 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1. 动物饲养 |
| 4.3.2. 最大耐受量和绝对致死量测定 |
| 4.3.3 最大限量法测定半数致死量 |
| 4.3.4 毒性反应、进食量和体重观察 |
| 4.3.5 血液采集和小鼠器官收集 |
| 4.3.6 石蜡切片制备 |
| 4.3.7 统计分析方法 |
| 4.4 实验结果与讨论 |
| 4.4.1 急性毒性实验结果 |
| 4.4.2 平均体重和平均日进食量变化 |
| 4.4.3 组织器官相对质量变化 |
| 4.4.4 小鼠血液指标含量变化 |
| 4.4.5 病理切片结果 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 2-氯丙醇酯对小鼠睾丸间质细胞TM3的细胞存活率影响 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 实验试剂和仪器 |
| 5.2.1 实验试剂 |
| 5.2.2 生化试剂所用试剂配方 |
| 5.2.3 实验仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 细胞培养方法 |
| 5.3.2 MTT法测2-氯丙醇酯对TM3细胞存活率 |
| 5.3.3 2-氯丙醇酯对TM3细胞乳酸脱氢酶释放量检测 |
| 5.3.4 UPLC-MSMS法测定睾酮含量 |
| 5.3.5 细胞总蛋白的提取 |
| 5.3.6 Western blotting检测 |
| 5.4 实验结果与讨论 |
| 5.4.1 六种2-氯丙醇酯对TM3细胞存活率影响结果 |
| 4.4.2 2-氯丙醇酯对TM细胞培养基中睾酮含量的影响 |
| 5.4.3 2-氯丙醇酯对凋亡、坏死等相关蛋白表达的影响 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 结论和展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录Ⅰ 核磁、质谱、红外和圆二色谱数据 |
| 附录Ⅱ 附图和附表 |
| 致谢 |
| 攻读博士期间发表的论文 |
| 1 稳定同位素在食品溯源技术中的应用 |
| 1.1 碳同位素的应用 |
| 1.2 氮同位素的应用 |
| 1.3 氢、氧同位素的应用 |
| 2 稳定同位素在食品品质和真实性鉴别中的应用 |
| 2.1 13C同位素的应用 |
| 2.2 2H、18O同位素的应用 |
| 2.3 15N同位素的应用 |
| 3 同位素稀释质谱法在食品中有害物质检测中的应用 |
| 3.1 在农兽药残留检测中的应用 |
| 3.2 食品中非法及滥用添加剂、迁移污染物及毒素的检测 |
| 4 展望 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要英文缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 缩水甘油酯的研究进展 |
| 1.1.1 缩水甘油酯简介 |
| 1.1.2 缩水甘油酯的生成抑制 |
| 1.1.3 缩水甘油酯的分析检测方法 |
| 1.2 芝麻木酚素的研究进展 |
| 1.2.1 芝麻木酚素简介 |
| 1.2.2 芝麻林素 |
| 1.2.3 芝麻酚 |
| 1.3 本论文的研究意义、目的及研究内容 |
| 1.3.1 研究意义 |
| 1.3.2 研究目的 |
| 1.3.3 研究内容 |
| 第二章 UPLC-MS/MS测定植物油中GEs的方法建立 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与仪器 |
| 2.2.1 实验材料和试剂 |
| 2.2.2 实验仪器和设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 标准溶液的配制 |
| 2.3.2 样品前处理 |
| 2.3.3 UPLC-MS/MS测定条件 |
| 2.3.4 方法学评价 |
| 2.3.5 数据分析 |
| 2.4 实验结果与讨论 |
| 2.4.1 前处理方法优化 |
| 2.4.2 流动相梯度洗脱程序优化 |
| 2.4.3 质谱条件的优化 |
| 2.4.4 基质效应、线性关系、检出限和定量限 |
| 2.4.5 方法回收率 |
| 2.4.6 市售食用植物油样品中缩水甘油酯的检测分析 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 芝麻木酚素对植物油模拟脱臭过程中GEs的抑制作用研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与仪器 |
| 3.2.1 实验材料和试剂 |
| 3.2.2 实验仪器和设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 油样中GEs的测定 |
| 3.3.2 油样中芝麻林素和芝麻酚的测定 |
| 3.3.3 油样中甘油酯和脂肪酸含量的测定 |
| 3.3.4 DSG化学模拟体系中芝麻酚对酯羰基基团的作用监测 |
| 3.3.5 油样的理化指标测定 |
| 3.3.6 芝麻林素添加量对植物油模拟脱臭过程中GEs的抑制研究 |
| 3.3.7 芝麻酚添加量对植物油模拟脱臭过程中GEs的抑制研究 |
| 3.3.8 冷榨芝麻油添加比例对植物油模拟脱臭过程中GEs的抑制研究 |
| 3.3.9 数据分析 |
| 3.4 实验结果与讨论 |
| 3.4.1 芝麻林素添加量对植物油模拟脱臭过程中GEs的抑制作用 |
| 3.4.2 芝麻酚添加量对植物油模拟脱臭过程中GEs的抑制作用 |
| 3.4.3 冷榨芝麻油添加比例对植物油模拟脱臭过程中GEs的抑制作用 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 芝麻木酚素对植物油煎炸过程中GEs的抑制作用研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与仪器 |
| 4.2.1 实验材料和试剂 |
| 4.2.2 实验仪器和设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 植物油煎炸过程中含有不同添加量芝麻酚的油样制备 |
| 4.3.2 油样中GEs的测定 |
| 4.3.3 油样中芝麻酚的测定 |
| 4.3.4 油样的理化指标测定 |
| 4.3.5 数据分析 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 芝麻酚添加量对连续煎炸棕榈油油样中GEs的抑制作用 |
| 4.4.2 油样的理化指标分析 |
| 4.5 本章小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 附件 |
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 国内外研究现状 |
| 1.2.1 果蔬中农药残留常见的前处理技术 |
| 1.2.2 QuEChERS法的产生 |
| 1.2.3 国外QuEChERS的研究 |
| 1.2.4 我国的QuEChERS方法研究 |
| 1.2.5 QuEChERS方法吸附剂的种类 |
| 1.2.6 QuEChERS方法的发展趋势 |
| 1.2.7 QuEChERS方法的优势 |
| 1.3 果蔬中农药残留常见的检测技术 |
| 1.3.1 串联四级杆质谱技术 |
| 1.3.2 气相色谱-串联质谱技术 |
| 1.3.3 超高效液相色谱-串联质谱联用技术 |
| 1.4 本课题的研究内容及研究意义 |
| 1.4.1 研究内容 |
| 1.4.2 研究的意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 仪器设备 |
| 2.2 试剂药品 |
| 2.3 实验材料 |
| 2.3.1 样品原料 |
| 2.3.2 溶液配置 |
| 2.4 样品前处理步骤 |
| 2.4.1 制样要求 |
| 2.4.2 样品制备 |
| 2.4.3 提取步骤 |
| 2.5 仪器条件 |
| 2.5.1 气相色谱串联质谱条件的建立 |
| 2.5.2 液相色谱-串联质谱条件的建立 |
| 2.6 定性定量方法 |
| 2.6.1 定量测定 |
| 2.6.2 定性测定 |
| 3.实验结果与分析 |
| 3.1 QuEChERS方法的提取流程选择 |
| 3.2 净化剂的选择优化 |
| 3.2.1 PSA净化量的优化 |
| 3.2.2 多壁碳纳米管净化量的优化 |
| 3.2.3 Z-Sep+净化量的优化 |
| 3.3 基质效应的评价 |
| 3.3.1 基质效应产生的原因 |
| 3.3.2 降低基质效应的验证 |
| 3.4 方法学验证 |
| 3.6.1 方法线性及检测限 |
| 3.6.2 方法准确度和精密度 |
| 3.6.3 不同检测方法比对 |
| 4.讨论 |
| 4.1 提取溶剂的选择 |
| 4.2 提取过程pH的变化 |
| 4.3 PTV进样口的效果评价 |
| 5.结论 |
| 6.创新点与展望 |
| 6.1 创新点 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样品和试剂 |
| 1.2 仪器 |
| 1.3 标准溶液及试剂的配置 |
| 1.3.1 标准储备液 |
| 1.3.2 标准工作液 |
| 1.3.3 同位素内标储备液 |
| 1.3.4 同位素内标工作液 |
| 1.3.5 苯硼酸衍生化试剂 |
| 1.4 标准衍生 |
| 1.5 样品前处理 |
| 1.5.1 提取 |
| 1.5.1. 1 酱油样品 |
| 1.5.1. 2 黄豆酱样品 |
| 1.5.1. 3 辣椒油样品 |
| 1.5.2 样品净化 |
| 1.5.3 样品衍生化 |
| 1.6 色谱条件 |
| 1.6.1 气相色谱条件 |
| 1.6.2 质谱条件 |
| 2 结果 |
| 2.1 线性范围和检出限 |
| 2.2 衍生化 |
| 2.2.1 衍生试剂的选择 |
| 2.2.2 衍生化温度的优化 |
| 2.2.3 衍生时间和衍生剂用量的选择 |
| 2.3 固相萃取优化 |
| 2.4 回收率和精密度实验 |
| 3 讨论 |
| 3.1 提取 |
| 3.2 固相萃取净化条件的选择 |
| 3.3 富脂调味品中3-MCPD结果分析 |
| 4 结论 |
| 1 引言 |
| 2 实验部分 |
| 2.1 仪器和材料 |
| 2.2 标准溶液的配制 |
| 2.3 色谱-质谱条件 |
| 2.4 样品前处理 |
| 2.5 衍生化 |
| 3 结果与讨论 |
| 3.1 提取溶剂的选择 |
| 3.2 固相萃取条件的选择 |
| 3.2.1 填料的选择 |
| 3.2.2 上样溶剂的选择 |
| 3.2.3 洗脱溶剂的选择 |
| 3.3 衍生条件的选择 |
| 3.3.1 衍生温度和时间的选择 |
| 3.4 方法的线性方程和检出限 |
| 3.5 方法的回收率和精密度 |
| 4 实际样品检测 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 氯丙醇类化合物概述 |
| 1.1.1 食品中氯丙醇的形成概况 |
| 1.1.2 食品中氯丙醇的种类及结构特征 |
| 1.1.3 氯丙醇类物质的毒性研究进展 |
| 1.1.4 部分国家对于氯丙醇类物质的限量标准 |
| 1.2 3-氯-1, 2-丙二醇的结构、危险性评价及检测方法 |
| 1.2.1 3-氯-1, 2-丙二醇的来源 |
| 1.2.2 3-MCPD 的吸收分布和生物转化 |
| 1.2.3 针对 3-MCPD 的危险性评价 |
| 1.2.4 各国关于 3-MCPD 污染情况的调查 |
| 1.2.5 3-MCPD 的检测方法 |
| 1.3 研究目的意义 |
| 1.4 主要研究内容 |
| 1.4.1 研究路线 |
| 第2章 3-氯-1, 2-丙二醇对 BALB/c 小鼠 T 淋巴细胞的影响 |
| 2.1 材料与设备 |
| 2.1.1 材料与试剂 |
| 2.1.2 仪器与设备 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 脾细胞悬液的制备 |
| 2.2.2 非细胞毒剂量筛选及 ConA 细胞增殖实验 |
| 2.2.3 细胞培养与测定 |
| 2.2.4 统计学处理 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 3-MCPD(+)对小鼠 T 淋巴细胞非细胞毒剂量的筛选 |
| 2.3.2 3-MCPD(+)对 ConA 诱导的 T 淋巴细胞增殖的影响 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 3-氯-1, 2-丙二醇对 T 细胞表面标志及周期的影响 |
| 3.1 材料与设备 |
| 3.1.1 实验动物和标准品 |
| 3.1.2 试剂 |
| 3.1.3 仪器与设备 |
| 3.1.4 主要试剂的配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 脾淋巴细胞的诱导 |
| 3.2.2 细胞的培养与固定 |
| 3.2.3 流式细胞术检测 3-MCPD(+)对脾中 T 淋巴细胞膜表面标志的影响 |
| 3.2.4 流式细胞术检测 3-MCPD(+)对脾淋巴细胞细胞周期的影响 |
| 3.2.5 统计学处理 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 流式细胞术分析 3-MCPD(+)对小鼠脾中 T 淋巴细胞 CD4+、CD8+比值的影响 |
| 3.3.2 流式细胞术分析 3-MCPD(+)对 ConA 诱导的 T 淋巴细胞周期的影响 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 3-氯-1,2-丙二醇对 Th1/Th2 分泌的细胞因子及其表达的影响 |
| 4.1 材料与设备 |
| 4.1.1 实验动物和标准品 |
| 4.1.2 仪器与设备 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 |
| 4.1.4 引物的序列、大小和条件的选择 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 IL-2, IL-4, IL-6 , IFN-γ细胞因子的检测 |
| 4.2.2 RNA 提取和半定量反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）分析 |
| 4.2.3 统计学处理 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 不同浓度的 3-MCPD(+)对 Th1/Th2 分泌细胞因子的影响 |
| 4.3.2 不同浓度的 3-MCPD(+)对 4 种细胞因子基因表达的影响 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 3-氯-1, 2-丙二醇对 ConA 激活的 T 细胞信号转导通路（NF- B、NFAT、AP-1）的影响 |
| 5.1 材料与设备 |
| 5.1.1 实验动物和标准品 |
| 5.1.2 仪器与设备 |
| 5.1.3 主要试剂的配制 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 细胞内[Ca2+]浓度的测定 |
| 5.2.2 T 细胞纯化 |
| 5.2.3 脾细胞蛋白的提取 |
| 5.2.4 蛋白免疫印迹分析 |
| 5.2.5 统计学分析 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 食品中 3-MCPD(+)对 ConA 激活的细胞内[Ca2+]的影响 |
| 5.3.2 食品中 3-MCPD(+)对 ConA 激活的 NF-κB 信号通路的影响 |
| 5.3.3 食品中 3-MCPD(+)对 ConA 激活的的 AP-1 信号通路的影响 |
| 5.3.4 食品中 3-MCPD(+)对 ConA 激活的 NFAT 信号通路的影响 |
| 5.4 本章小结 |
| 第6章 3-氯-1, 2-丙二醇对二硝基氟苯(DNFB)所致迟发型超敏反应模型(DTH)的影响 |
| 6.1 材料与设备 |
| 6.1.1 材料与试剂 |
| 6.1.2 仪器与设备 |
| 6.1.3 主要试剂的配制 |
| 6.2 实验方法 |
| 6.3 结果与分析 |
| 6.3.1 3-MCPD(+)对 DNFB 诱导的 DTH 小鼠耳部重量的影响 |
| 6.3.2 3-MCPD(+)对 DNFB 诱导的 DTH 小鼠模型外耳廓的组织学分析 |
| 6.4 本章小结 |
| 第7章 结论 |
| 7.1 全文结论 |
| 7.2 创新点 |
| 参考文献 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 攻读学位期间科研成果 |
| 致谢 |
