大鼠脾虚模型形成过程中子宫血管舒缩因子的变化

一、大鼠脾气虚证模型形成过程中子宫血管舒张—收缩因子的改变（论文文献综述）

袁星星^[1]（2021）在《基于肠道及呼吸道菌群探讨六君子汤治疗哮喘慢性持续期的疗效及机制研究》文中认为目的:观察六君子汤对哮喘慢性持续期肺脾气虚证患者的临床疗效及其对肠道和呼吸道菌群的影响。在此基础上通过关联性分析的方法,进一步明确肠道、呼吸道菌群与临床指标的关联性,从而阐明六君子汤治疗哮喘的可能机制。方法:1.选取符合诊断标准和纳入标准的哮喘慢性持续期肺脾气虚证患者72例,随机分为治疗组和对照组,每组各36例。其中对照组采用ICS/LABA按需使用的治疗方法,治疗组在对照组的基础上给予六君子汤口服治疗,每次1袋,一日2次。两组患者疗程均为4周并随访12周。分别观察两组患者治疗前、后及随访时ACT评分、中医症状评分、肺功能指标、Fe NO和EOS百分比的变化,并比较两组患者急性发作风险和ICS总使用量。2.分别于治疗组和对照组中随机各选取10名哮喘患者作为研究对象,同时选取10名健康志愿者作为阴性对照。采用一次性样品收集盒,收集两组患者治疗前、后粪便及诱导痰样本,抽提粪便和痰样本基因组DNA后进行Illumina Miseq高通量测序,并行生物学信息分析,以研究各组间肠道及呼吸道菌群是否存在差异。3.收集上述各组患者及健康对照组的临床资料,通过分析肠道菌群和呼吸道菌群与哮喘病情的关联性;进一步分析肠道菌群与呼吸道菌群的菌属相似度,并与治疗后患者临床指标进行相关性分析。结果:1.本研究最终治疗组共32例纳入数据分析,对照组共31例纳入数据分析。治疗组治疗后、随访1、随访2、随访3与本组治疗前比较,ACT评分显着增加,中医症状评分显着降低,差异均具有统计学意义（P<0.01）;且治疗组明显优于对照组,差异均具有统计学意义（P<0.01）。与本组治疗前比较,治疗组治疗后FEV1%Pred、PEF和FEV1/FVC均显着增加,Fe NO和EOS百分比均显着降低,差异均具有统计学意义（P<0.01）,两组治疗后组间比较,治疗组明显优于对照组,差异均具有统计学意义（P<0.01）。两组治疗期间均无因哮喘再次急性发作而退出治疗,治疗组1例出现胸闷气短,对照组6例出现喘息、气短症状,两组患者再次急性发作风险的比较,治疗组优于对照组（P=0.042）。两组ICS总使用量的比较,治疗组明显低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.01）。2.在物种丰富度方面,Ace和Chao1指数结果显示哮喘患者肠道菌群丰富度较健康对照组显着降低,而呼吸道菌群丰富度较健康对照组显着增加;在物种多样性方面,哮喘患者肠道菌群Shannon指数较健康对照组显着降低,Simpson指数显着增加,而呼吸道菌群Shannon指数较健康对照组显着增加,Simpson指数显着降低,两组间比较差异均具有统计学意义（P<0.01）。在组间物种差异分析中,从菌门至菌属水平,哮喘组和健康对照组之间肠道和呼吸道菌群丰度均发生了明显变化;通过Lef Se多级物种差异判别分析提示,健康对照组肠道和呼吸道中分别以厚壁菌门（Firmicutes）和放线菌目（Actinomycetales）升高为主,哮喘组肠道和呼吸道中均以变形菌门（Proteobacteria）升高为主。与治疗前相比,治疗组治疗后肠道菌群Ace、Chao1和Shannon指数显着增加,Simpson指数显着降低,而呼吸道菌群Ace、Chao1和Shannon指数显着降低,Simpson指数显着增加,组内比较差异均具有统计学意义（P<0.01和P<0.05）,而对照组治疗后肠道菌群Ace、Chao1、Shannon和Simpson指数与本组治疗前比较均无明显变化,差异均无统计学意义（P>0.05）;呼吸道菌群Shannon指数显着降低,Simpson指数显着增加,组内比较差异均具有统计学意义（P<0.01和P<0.05）,而对Ace和Chao1指数无明显影响,差异均无统计学意义（P>0.05）。两组治疗后组间比较,治疗组肠道菌群Ace、Chao1和Shannon指数明显高于对照组,Simpson指数明显低于对照组,而呼吸道菌群Ace、Chao1和Shannon指数明显低于对照组,Simpson指数明显高于对照组,组间比较差异均具有统计学意义（P<0.01和P<0.05）。在组间物种差异分析中,从菌门至菌属水平,两组患者治疗前后组内及组间肠道和呼吸道菌群丰度均发生了明显变化;通过Lef Se多级物种差异判别分析提示,与本组治疗前相比,治疗组治疗后肠道菌群和呼吸道菌群以厚壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌目（Bacteroidales）升高为主,而对照组治疗后肠道菌群以异杆菌属（Allobaculum）和梭杆菌门（Fusobacteria）升高为主。3.哮喘患者肠道菌群和呼吸道菌群的表达丰度与哮喘病程和哮喘年住院次数呈现显着相关性;通过将差异的肠道菌群和呼吸道菌群取交集后得到16种交集菌属,包括副雷沃菌属（Paraprevotella）、另枝菌属（Alistipes）、阿德勒克罗伊茨菌属（Adlercreutzia）、假单胞菌属（Pseudomonas）、欧陆森氏菌属（Olsenella）、吉米菌属（Gemmiger）、克雷伯氏菌属（Klebsiella）、颤杆菌属（Oscillibacter）、臭杆菌属（Odoribacter）、普雷沃氏菌属（Prevotella）、奈瑟菌属（Neisseria）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）、韦荣氏球菌属（Veillonella）、乳酸杆菌属（Lactobacillus）、蔷薇菌属（Roseburia）和副细菌属（Parabacteroides）,这些菌群的丰度与哮喘的肺功能指标、ACT评分、EOS百分比、中医症状积分和Fe NO存在显着的相关性。结论:1.六君子汤能够改善哮喘慢性持续期肺脾气虚证患者临床症状和肺功能,降低再次急性发作风险和减少ICS的总使用量。2.哮喘患者肠道和呼吸道菌群发生显着改变,六君子汤能够调控哮喘患者肠道和呼吸道菌群丰富度和多样性,恢复菌群稳态。3.哮喘患者肠道菌群和呼吸道菌群之间存在显着的关联性,六君子汤通过调控肠道菌群进而恢复呼吸道菌群稳态,从而达到治疗哮喘的作用。

司东旭^[2]（2021）在《肺脾为核心脏腑整体辨证支气管哮喘慢性持续期免疫调控研究》文中指出目的基于前期支气管哮喘慢性持续期（Chronic duration of bronchial asthma,CDBA）中医干预方案研究成果,温润方组（Wenrunformulagroup,WRFG）良好控制率75.44%,明显优于常规辨证组（Routine syndrome differentiation group,RSDG）良好控制率 48.33%。本研究进一步通过分子生物学研究,证明“肺脾为核心脏腑整体辨证”的中医干预思路充分反映了中医治疗CDBA的优势与特色。构建基于“肺脾为核心脏腑整体辨证”CDBA免疫调控的生物学依据。方法本研究工作主要依托课题——支气管哮喘慢性持续期中医干预方案,分别在山东中医药大学附属医院、安徽中医药大学第一附属医院、北京中医药大学东直门医院、中国中医科学院西苑医院等四个研究中心,开展同时期、多中心、随机、对照、三盲的临床实用性随机对照优效设计研究。应用“肺脾为核心脏腑整体辨证”观指导思想下形成的“温润辛金培本”原理系列方药（简称温润方）为中医干预方案。共纳入符合研究要求病例128例,将入组病例随机分为WRFG和RSDG。为进一步观察两组治疗前血清免疫球蛋白、白介素谱系分布特点,以及治疗后血清免疫球蛋白、白介素谱系变化趋势,对符合要求的入组患者进行了二次筛选。同时,招募健康人群作为健康对照组（Healthy group,HG）,并收集受试者血清标本。采用ELISA竞争检测方法进行血清标本检测,开展“肺脾为核心脏腑整体辨证”治疗CDBA调节血清免疫球蛋白及血清白介素水平的免疫调控研究。结果1病例信息分析本研究根据现有各组血清病例数,结合纳入排除标准,确定纳入WRFG24例,RSDG 14例、HG 14例。WRFG与RSDG两组患者治疗前中医单项症状体征积分及中医症状体征总积分比较中,只有腰膝酸软1（1,2）（WRFG）、0（0,1）（RSDG）,具有统计学差异。其他单项中医症状体征及中医症状体征总积分均无统计学差异;WRFG与RSDG两组患者治疗后中医单项症状体征积分及中医症状体征总积分比较中,均无统计学差异;WRFG组患者疗前疗后中医单项症状体征积分及中医症状体征总积分比较中,喘息、乏力、口干、心悸、头晕、畏寒肢冷、腰膝酸软、咳嗽、咳嗽性质、咳痰不爽、总分具有统计学差异。其他单项中医症状体征均有下降趋势,但无统计学差异;RSDG组患者疗前疗后中医单项症状体征积分及中医症状体征总积分比较中,气短、乏力、口干、畏寒肢冷、咳嗽、咳嗽性质、总分具有统计学差异。其他单项中医症状体征多有下降趋势,但无统计学差异;WRFG与RSDG中医单项症状体征积分及中医症状体征总积分差值比较中,WRFG在喘息、口苦、口干、心悸、纳呆、腹胀、口渴喜饮、大便不调、夜尿频、头晕、腰膝酸软、总分等方面较RSDG症状积分降低,但均无统计学差异;WRFG与RSDG疗前疗后肺功能比较,两组患者在FEV1%FVC、PEF%等方面无统计学差异。2血清免疫球蛋白2.1治疗前组间比较WRFG血清IgA、IgG水平较RSDG和HG低,具有统计学差异。WRFG血清IgE水平较RSDG无统计学差异,较HG低,具有统计学差异。RSDG血清IgA、IgG、IgE水平较HG无统计学差异。2.2治疗后组间比较WRFG血清IgA、IgG水平较RSDG和HG无统计学差异。WRFG血清IgE水平较RSDG高,具有统计学差异,较HG无统计学差异。RSDG血清IgA、IgG、IgE水平较HG无统计学差异。3血清促炎白介素3.1治疗前组间比较WRFG 血清 IL-1β、IL-2、IL-5、IL-7、IL-8、IL-13、IL-20、IL-25、IL-36y 水平较RSDG、HG 低,具有统计学差异。WRFG 血清 IL-3、IL-4、IL-6、IL-9、IL-33 水平较RSDG无统计学差异,较HG低,具有统计学差异。RSDG 血清 IL-1β、IL-7、IL-8、IL-9、IL-13、IL-20、IL-25、IL-33、IL-36γ 水平较HG无统计学差异。RSDG血清IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6水平较HG低,具有统计学差异。3.2治疗后组间比较WRFG 血清 IL-1β、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-9、IL-33、IL-36γ 水平较 RSDG 无统计学差异,较HG低,具有统计学差异。WRFG血清IL-2、IL-3、IL-8、IL-13、IL-20、IL-25水平较RSDG、HG无统计学差异。RSDG 血清 IL-1β、IL-3、IL-7、IL-8、IL-13、IL-20、IL-33 水平较 HG 无统计学差异。RSDG 血清 IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-25、IL-36γ 水平较 HG 低,具有统计学差异。4血清抗炎白介素4.1治疗前组间比较WRFG 血清 IL-10、IL-21、IL-27、IL-28A、IL-35 水平较 RSDG、HG 低,具有统计学差异;WRFG血清IL-29水平较RSDG低,具有统计学差异,较HG无统计学差异;血清IL-12、IL-37水平较RSDG无统计学差异,较HG低,具有统计学差异。RSDG 血清 IL-10、IL-12、IL-21、IL-27、IL-28A、IL-29、IL-35、IL-37 水平较 HG无统计学差异。4.2治疗后组间比较WRFG血清IL-10、IL-12、IL-21水平较RSDG无统计学差异,较HG低,具有统计学差异;WRFG血清IL-27、IL-29、IL-35、IL-37水平较RSDG、HG无统计学差异;WRFG血清IL-28A水平较RSDG低,具有统计学差异,较HG无统计学差异。RSDG 血清 IL-10、IL-12、IL-21、IL-27、IL-28A、IL-29、IL-35、IL-37 水平较 HG无统计学差异。结论1 WRFG组在改善哮喘患者喘息、咳嗽、咳嗽性质、咳痰不爽、乏力、口干、心悸、头晕、畏寒肢冷、腰膝酸软、总分等全身症状体征方面具有明显的优势。体现了WRFG“肺脾为核心脏腑整体辨证”,整体诊治CDBA的优势与特色。2 WRFG治疗后血清免疫球蛋白、血清促炎和抗炎白介素水平升高并接近健康人水平,可能与温润方减轻了哮喘患者气道慢性炎症这一基础病理损害,使哮喘患者气道炎症局部对较高的血清促炎白介素水平耐受性增强,提高了气道对损伤因子的免疫防御及修复能力有关。3 CDBA具有多种免疫细胞及细胞组分参与的慢性气道炎症病理变化基础,炎症、免疫参与了疾病宏观表现的微观病理变化。反之,不同的微观炎症免疫调控失衡状态影响着宏观中医哮喘的病机演变。CDBA存在着“肺脾为核心多脏虚”的关键病机共性规律。“肺脾为核心脏腑整体辨证”是在全面客观认识CDBA脏腑关系与病机演变规律基础上对中医整体观念、脏腑辨证的继承、发展、应用,强调以“肺脾为核心”的整体观揭示哮喘发病机制。

童黄锦^[3]（2021）在《温郁金不同饮片化瘀止痛效应物质及作用机制研究》文中研究表明中药的同一品种因不同基原、不同入药部位,尤其是经加工炮制得到的不同饮片存在着药性与疗效异同,充分体现了中医药特色。姜科植物温郁金Curcuma wenyu Jin Y.H.Chenet C.Ling的根茎,经趁鲜加工、蒸制及醋制得到片姜黄、生莪术及醋莪术饮片,其药性与功能主治各有倚重。片姜黄长于破血行气,生莪术破血祛瘀力强,莪术醋制后增强其化瘀止痛功效。以三种饮片为主要原料的经典方剂及成方制剂主要用于气滞血瘀引起的疼痛。原发性痛经发病率高,临床表现以经行腹痛为主,血瘀贯穿整个病变过程。气滞血瘀证是原发性痛经辨证论治的主要证候,活血化瘀法为主要治法。温郁金不同饮片均具化瘀止痛功效,广泛应用于原发性痛经等妇科血瘀证的治疗。本研究针对温郁金不同饮片功效相似,但临床应用异同的效应物质变化及作用机制尚未完全明确的科学问题,以气滞血瘀原发性痛经为研究对象,通过研究温郁金不同饮片体内外效应物质变化,药效学评价不同饮片对疼痛相关因子等的调控作用,代谢组学整体角度评价不同饮片对内源性代谢物及代谢通路的影响,网络预测分析筛选出核心成分、核心靶点及核心通路,体内外实验验证预测结果的可靠性和准确性,综合评价有效成分、靶蛋白与通路之间的关联性,阐明温郁金不同饮片化瘀止痛的效应物质及作用机制,为饮片临床应用提供科学依据,也为中药饮片现代研究提供示范。1.温郁金不同饮片体内外效应物质研究（1）采用HPLC定量分析温郁金不同饮片6种代表性成分（莪术烯醇、莪术二酮、吉马酮、呋喃二烯、β-榄香烯、姜黄素）的含量,研究发现不同饮片中各成分含量发生了显着变化,其中莪术二酮、呋喃二烯、β-榄香烯、姜黄素在片姜黄、生莪术、醋莪术中含量依次降低,莪术二酮含量下降最显着;莪术烯醇、吉马酮蒸制后有所升高,经醋制后含量降低。（2）采用UPLC-Q/TOF-MS技术对温郁金不同饮片入血成分进行分析比较,根据分子式、精确分子量、保留时间、碎片离子等与文献及专业数据库匹配,鉴定得36个入血成分,研究结果表明温郁金不同饮片入血成分的含量有明显差异,其中莪术二酮在片姜黄、生莪术、醋莪术含药血浆中含量依次升高;呋喃二烯、莪术烯醇在片姜黄和生莪术含药血浆中含量较低,在醋莪术含药血浆中含量较高;吉马酮、β-榄香烯在生莪术含药血浆中含量比较高,在片姜黄和醋莪术含药血浆中的含量较低。以上研究表明,温郁金不同饮片体内外效应物质发生了显着变化,主要为各成分占比发生了改变,推测可能与炮制过程和提取过程中化学成分相互转化以及炮制过程及辅料影响各成分在大鼠体内吸收、分布、代谢、排泄等有关。其中莪术二酮,莪术烯醇,吉马酮,呋喃二烯,β-榄香烯为温郁金不同饮片入血前后的共有成分,可能为温郁金不同饮片潜在的效应物质。2.温郁金不同饮片化瘀止痛药效学研究 采用皮下注射苯甲酸雌二醇及盐酸肾上腺素,并结合声光刺激等综合法建立气滞血瘀原发性痛经模型。评价温郁金不同饮片给药后各药效指标,比较三者化瘀止痛效应差异。通过扭体反应、血液流变学、凝血功能、抗血小板聚集、疼痛相关因子及子宫组织病理形态学等药效指标评价,表明气滞血瘀原发性痛经模型造模成功。①扭体反应:温郁金三种炮制品均可明显延长气滞血瘀原发性痛经模型大鼠扭体潜伏期,减少扭体次数,其中醋莪术高剂量组疗效最为显着;②血液流变学:温郁金三种炮制品均可显着改善气滞血瘀原发性痛经模型大鼠的全血高黏状态,其中片姜黄高剂量组改善作用最佳;③凝血四项:温郁金三种炮制品均可调控模型大鼠凝血四项指标,其中片姜黄高剂量组延长APTT、TT、缩短FIB更为显着;④血小板聚集:温郁金三种炮制品抗血小板作用显着,醋莪术高剂量组作用更为明显;⑤疼痛相关因子:温郁金三种炮制品均可调控模型大鼠各疼痛相关因子水平,其中醋莪术高剂量组升高PGE2、6-keto-PGF1a、NO、β-EP,降低 PGF2α、TXB2、Ca2+、IL-6、TNF-α 更为明显;⑥子宫病理形态学:温郁金三种炮制品均可改善模型大鼠子宫组织形态,其中醋莪术高剂量组改善作用更为明显。以上研究表明,温郁金不同饮片对气滞血瘀原发性痛经大鼠均有治疗作用,其中莪术醋制后增强对血小板聚集、疼痛相关因子等药效指标的调控作用。温郁金炮制后吉马酮、β-榄香烯等入血成分含量降低而药效作用反而增强,说明中药加工炮制及辅料影响各成分在体内过程,从而导致药效学差异。对莪术醋制后增强化瘀止痛功效这一中药炮制特有现象做出了合理的解释。3.温郁金不同饮片化瘀止痛代谢组学研究 采用代谢组学方法比较温郁金不同饮片对气滞血瘀原发性痛经模型大鼠血浆、尿液、粪便样品中内源性差异代谢物及相关代谢通路的调控作用,从整体角度解释温郁金不同饮片化瘀止痛临床功效的异同。研究表明各组血浆、尿液、粪便样品中分别鉴定得到12、22、28个内源性差异代谢物,其中片姜黄组对炎症相关的类固醇激素的生物合成及花生四烯酸代谢通路调控作用较为明显,醋莪术组对血瘀及组织缺血缺氧疼痛相关的甘油磷脂代谢、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成及代谢、谷胱甘肽代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、组氨酸代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢通路上内源性差异代谢物调控作用更为显着。温郁金不同饮片通过调控色氨酸等内源性差异代谢物,抑制血小板聚集、舒张血管增加子宫血流量、抑制并去除氧自由基以缓解子宫平滑肌收缩从而缓解痛经,其中片姜黄对色氨酸无明显调控作用,生莪术与醋莪术均显着下调色氨酸;片姜黄、生莪术、醋莪术对L-苯丙氨酸均有调控作用;片姜黄对谷氨酸无明显调控作用,生莪术与醋莪术均显着下调谷氨酸;片姜黄组、醋莪术组显着上调鸟氨酸、组氨酸水平而生莪术组调控作用不明显;温郁金不同饮片对L-胱硫醚、D-泛酸基-L-半胱氨酸均有显着上调作用,片姜黄和醋莪术均可显着上调L-半胱氨酸水平而生莪术调控不明显,其中醋莪术调控半胱氨酸及其衍生物作用更为显着;生莪术对甘油磷脂代谢物无明显调控作用,醋莪术下调作用更为明显。温郁金不同饮片对代谢通路中血小板聚集相关的内源性差异代谢物的种类及调控程度均有显着差异,其中醋莪术调控作用更为显着。以上研究表明,气滞血瘀原发性痛经代谢异常及温郁金不同饮片对模型大鼠治疗作用主要与脂质代谢和氨基酸代谢等相关。片姜黄组对炎症相关的花生四烯酸等代谢通路调控作用较为明显;除了花生四烯酸代谢通路、精氨酸和脯氨酸的代谢及组氨酸代谢通路,生莪术组对其他各通路均有调控作用;醋莪术组对血瘀及组织缺血缺氧疼痛相关的甘油磷脂代谢等代谢通路调控作用更为显着。温郁金不同饮片经加工炮制后体内外莪术二酮等效应物质发生了显着变化,中药加工炮制过程及辅料对各成分在大鼠体内吸收、分布、代谢、排泄均产生了不同程度的影响,导致了温郁金不同饮片对相关代谢通路中内源性代谢物的种类及调控程度均有显着差异,可能是导致温郁金不同饮片化瘀止痛临床功效差异的原因。其中醋莪术对代谢通路中血小板聚集相关的内源性差异代谢物的种类及调控作用更为显着。表明与药效学研究莪术醋制后增强抗血小板聚集作用保持一致。4.温郁金不同饮片化瘀止痛网络预测分析 采用网络药理学结合分子对接的方法,以入血成分为研究对象,通过靶点预测、“成分-靶点-疾病”网络构建、通路富集分析,预测温郁金不同饮片治疗原发性痛经作用的分子机制。结合含测结果及文献依据,预测出5个核心入血成分（莪术二酮,莪术烯醇,吉马酮,呋喃二烯,β-榄香烯）,10 个核心靶点（APP,PIK3CA,MAPK1,ADRA2A,ADRA2C,ADRA2B,MAPK3,CCR5,GCGR,STAT3）及排名前20的重要通路,其中温郁金不同饮片入血成分相关核心靶点富集的主要通路包括钙信号通路、MAPK信号通路、cAMP信号通路、PI3K/AKT信号通路均与抗血小板聚集相关;对核心成分与核心靶点进行分子对接,结果表明5个核心成分和10个核心靶点均可自发结合,提示这些成分在温郁金不同饮片治疗原发性痛经中具有重要作用,为温郁金不同饮片的效应物质;其中靶点CCR5及MAPK1为温郁金不同饮片治疗原发性痛经的关键靶点,且均为抗血小板聚集相关通路的重要靶点,表明分子对接的结果与网络药理学的筛选结果是相一致的。以上研究表明,温郁金不同饮片可能通过莪术二酮等效应物质调控抗血小板聚集相关的钙、MAPK、cAMP、PI3K/AKT信号通路,从而发挥化瘀止痛功效。与药效学及代谢组学研究结果保持一致。5.温郁金不同饮片化瘀止痛体内外验证研究 采用体外抗血小板聚集实验和Western blotting方法分别验证温郁金不同饮片核心成分的抗血小板聚集活性及温郁金不同饮片对核心通路的调控作用,验证网络预测结果的准确性和可靠性。结果表明:①除了莪术烯醇因溶解度问题不能准确测定其抗血小板聚集活性外,β-榄香烯,莪术二酮,呋喃二烯,吉马酮具有较强的抗血小板聚集作用,且呈剂量依赖性;5种成分（莪术二酮,莪术烯醇,吉马酮,呋喃二烯,β-榄香烯）在温郁金不同饮片含药血浆中的含量叠加,醋莪术含量最高,片姜黄含量最低,,与药效学研究莪术醋制后增强抗血小板聚集作用保持一致。②Western blotting证实了温郁金不同饮片均可有效调控抗血小板聚集途径相关的MAPK和PI3K/AKT信号通路,从而发挥化瘀止痛功效,从而达到化瘀止痛治疗气滞血瘀原发性痛经的目的,初步阐明温郁金不同饮片化瘀止痛功效的分子机制。温郁金不同饮片之间对相关通路的调控差异有待进一步深入研究。上述体内外验证研究结果与网络预测的核心成分、核心靶点、核心通路基本一致。综上所述,本课题通过温郁金不同饮片体内外效应物质研究、化瘀止痛药效学评价及代谢组学研究、网络预测分析、体内外验证研究,阐明温郁金经过不同加工炮制方法改变三种饮片对效应物质、靶点蛋白、内源性代谢物及相关通路等的调控作用,从而导致化瘀止痛效应的差异变化,揭示了温郁金不同饮片化瘀止痛的效应物质及作用机制,为温郁金不同饮片的临床应用及进一步开发提供了理论参考。

李振钰^[4]（2021）在《脾气虚大鼠心室肌细胞线粒体未折叠蛋白反应的研究》文中进行了进一步梳理目的:脾气虚影响心脏泵血功能已有研究,但其发生机制是否与线粒体损伤,特别是与线粒体未折叠蛋白反应是否相关尚未可知。本研究通过观察左心室射血功能、尾动脉血压、左心室肌细胞线粒体的形态和功能及线粒体未折叠蛋白反应等,探讨脾气虚上扰心主血脉的可能机制。材料与方法:1.实验动物与分组选择16只SPF级SD雄性大鼠,经适应性饲养1周后,根据随机数字表平均分为正常组和脾气虚证模型组（模型组）,每组各8只。2.脾气虚模型复制与评价2.1复制模型组大鼠采用饮食失节法加劳倦刺激法:即饱食24h后禁食48h,循环5次,共15d,全程自由饮水;同时每日于35～37℃水中游泳至力竭。2.2评价（1）消瘦:测量大鼠空腹体质量,当模型组明显低于正常组为达标;（2）纳差:代谢笼记录24h大鼠日进食量,模型组明显低于正常组为达标;（3）神疲乏力:模型组双前肢抓力和5min旷场实验中运动距离和站立次数均显着少于正常组;（4）皮毛枯槁:三人分别独立评价并结果一致,筛除未达标大鼠。3.大鼠尾动脉血压检测采用鼠尾动脉无创测压法。每只大鼠在同一时间段内,均由同一人间隔3min测量5次尾动脉的收缩压,取5次的平均值进行记录。4.大鼠心脏超声检查大鼠经过10%水合氯醛腹腔麻醉后,于左室短轴乳头肌平面进行检测,并同步记录心率。通过图像采集测量左心室舒张末期容积、左心室收缩末期容积、左室舒张末期内径、左室收缩末期内径,按照公式计算左室射血分数（left ventricleejection fraction,LVEF）和左室短轴缩短率（left ventricle fraction shortening,LVFS）。5.取材大鼠禁食24h,经过10%水合氯醛腹腔麻醉,腹部备皮,剪开胸腔取心脏,切取心脏组织-80℃冻存备用。6.左心室肌细胞线粒体超微结构观察4℃下切取1cm3组织,2.5%戊二醛固定24h,PBS缓冲液漂洗,1%锇酸固定,乙醇、丙酮梯度脱水后环氧树脂包埋、制片,3%醋酸铀-枸橼酸铅双重染色,透射电镜观察拍片。7.左心室肌细胞线粒体功能评价取部分心室肌组织,按试剂盒说明书提取线粒体,分别检测并计算三磷酸腺苷（adenosine triphosphatase,ATP）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平。8.左心室肌细胞未折叠蛋白反应相关成分表达采用蛋白质印迹法检测心肌细胞线粒体内的Lon蛋白酶（Lon protease,Lon P）和酪蛋白裂解酶XP（caseinolytic protease XP,Clp XP）复合物（包括Clp X和Clp P）等表达。9.数据处理本实验所得出的数据资料以均数±标准差（—X±s）表示,组间通过SPSS17.0统计软件的t检验分析比较,P<0.05为有统计学意义。结果:1.脾气虚大鼠造模结果与正常组比较,模型组大鼠体质量下降,24h进食水量减少,双前肢抓力下降,旷场中运动距离和站立次数均明显下降。另,三人均独立判定模型组毛色枯槁,显示脾气虚模型复制成功。2.大鼠尾动脉血压及心脏超声检查结果与正常组比较,模型组的心率、收缩压、舒张压、左室射血分数和左室短轴缩短率等5个指标均下降,并具有统计学意义（P<0.01）。3.左心室肌细胞线粒体超微结构变化结果两组线粒体均多呈卵圆形,边缘清楚,无肿胀、变性及空泡现象;嵴呈片状,层次丰富且清晰。但与正常组比较,模型组线粒体内部出现明显致密颗粒,且相互交织。4.左心室肌细胞线粒体功能评价结果与正常组相比,模型组ATP含量下降,MDA水平上升,均有统计学意义（P<0.01）。5.左心室肌细胞未折叠蛋白反应相关成分表达与正常组相比,模型组Lon P和Clp X表达上调,均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,但Clp P表达变化不明显,没有统计学差异。结论:1.脾气虚所致心主血脉功能受损的现代医学机制与心肌工作细胞线粒体未折叠蛋白反应未充分启动所导致的线粒体蛋白失稳态有关。

朱昊如^[5]（2020）在《基于衰老分子机制探讨脾虚证-补中益气汤相关的生物学基础》文中研究表明基于“方证相关”理论剖析复杂方证关系是目前方剂学界面临的主要问题之一,而网络药理学为研究方证关系的现代内涵提供了新方法。中医学认为衰老与脾虚证关系密切,但目前脾虚与衰老关系的分子生物学研究几未有见,脾虚-衰老的分子机制尚不清楚。因此本研究基于方证相关理论,以补中益气汤与脾气虚证高度关联为逻辑依据,从衰老相立论,利用现代网络药理学方法探查补中益气汤分子药理网络;进一步根据该方的作用预测,在整体-系统-分子水平上,动态观察脾虚证模型演变过程中衰老相关病理生理及生物分子变化,以及补中益气汤的相关效用机制。论文分为文献综述和实验研究两部分。文献综述主要涉及近年“方证相关”的研究进展、脾虚证-衰老相关研究进展及补中益气汤现代研究进展三方面内容;实验研究主要包括脾虚证分子内涵与补中益气汤作用相关的网络药理学研究、脾虚证演变与衰老相关的探讨、以及从衰老探察脾虚证现代内涵及补中益气汤效用机制三部分。研究一脾虚证分子内涵与补中益气汤作用相关的网络药理学研究方法:利用TCMSP平台,分别检索补中益气汤组方药味（黄芪、白术、升麻、陈皮、柴胡、人参、甘草、当归、生姜、大枣）活性成分及其关联靶点,利用STRING平台建立靶点PPI网络并导入cytoscape,利用MCODE插件对PPI网络进行聚类来提取核心靶点簇后,使用ClueGO插件对核心靶点进行GO及KEGG富集,提取主要病/生理功能及生物分子信号通路。结果:①筛选得到补中益气汤活性成分143种,关联靶点162个,其中155个靶点之间存在PPI关系,聚类得到核心簇9个。②富集得到GO条目13组,包括NO生物合成、促进平滑肌细胞增殖等;富集得到KEGG条目12组,包括AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、松弛素信号通路等。结论:脾虚证-补中益气汤的关联机制内涵可能涉及由AGE-RAGE通路、IL-17通路及松弛素通路主导的,通过介导核转录因子NF-kB来调节促炎细胞因子分泌的炎性调节过程。研究二脾虚证演变与衰老相关的探讨方法:Wistar大鼠随机分为对照组与模型组,每组各18只。对照组常规饲养,模型组采用“游泳力竭+饥饱失常”法复制脾虚模型。各组大鼠:①隔日观察外观行为评分,每日称量摄食量,每周末观测体质量及粪便含水率。②于实验第2-4周末进行强迫负重游泳实验,测定负重游泳时长;实验第3、4周进行Morris水迷宫实验,测定定位航行实验逃避潜伏期和空间探索实验的游泳速度、潜伏期、平台穿梭次数、目标象限路程比及探索路线。③于实验第14、21、28d灌服D-木糖溶液后收集尿液,ELISA法测定尿D-木糖含量,计算D-木糖排泄率。于实验第15、22、29d随机分三批麻醉处杀:取脾脏、胸腺称重计算脏器指数;取血清,利用ELISA法测定GAS、MTL、AGEs、BDNF、VIP、IL-1β、IL-6、TNF-α水平,利用生化法测定CRP水平;取海马,利用ELISA法测定AGEs、Aβ1-40、Aβ1-42、glu、GABA、IL-1β、IL-6、TNF-α 水平。结果:较之于对照组,模型组大鼠:①a.实验第2-4周皮肤毛发、行为状态、活跃程度、睡眠状态积分显着升高（P<0.01）;第1-4周体质量、摄食量显着降低（P<0.01）;第3、4周粪便含水率升高（P<0.05）。b.实验第4周负重游泳时间显着降低（P<0.01）。c.实验第4周脾脏指数与胸腺指数显着降低（P<0.01）;第2-4周尿D-木糖排泄率显着降低（P<0.01）,血清VIP水平降低;第3、4周血清GAS水平降低;第4周血清MTL水平降低（P<0.05或0.01）。②a.实验第3、4周空间探索潜伏期升高、穿越平台次数减少、目标象限路程比降低（P<0.05）,探索路线呈随机策略。b.实验第2-4周海马GABA水平降低;第3、4周海马IL-1β水平显着升高;第4周海马Aβ140、血清BDNF水平降低（P<0.05 或 0.01）,海马 AGEs、Aβ1-42/Aβ1-40、glu、IL-6、TNF-α 水平升高（P<0.05或0.01）。c.实验第2周血清IL-6、TNF-α水平升高（P<0.05或0.01）;第4周血清IL-1β、TNF-α水平显着降低（P<0.01）。结论:脾虚大鼠模型演化过程逐渐出现学习记忆能力下降的脑衰老表现,其分子特征体现为海马毒性蛋白累积、炎性水平升高与递质稳态兴奋性失衡。研究三从衰老探察脾虚证现代内涵及补中益气汤效用机制方法:Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、低剂量给药组与高剂量给药组,每组各8只。对照组常规饲养,模型组及各给药组按研究二方法持续造模4周,低、高剂量给药组自第15d至第28d起分别按5.85g/kg/d、17.55g/kg/d灌服补中益气汤水煎液。各组大鼠:①按研究二时间及方法观测外观行为评分、摄食量、体质量及粪便含水率。②按研究二方法,于实验第4周末进行强迫负重游泳实验;第4周进行Morris水迷宫实验。③实验第28d按研究二方法测定尿D-木糖排泄率。于实验第29d麻醉处杀后:取脾脏、胸腺计算脏器指数;取血清,ELISA法测定GAS、MTL、BDNF、VIP、IL-1β、IL-6、TNF-α 水平;取海马,ELISA 法测定 AGEs、Aβ1-40、Aβ1-42、glu、GABA、IL-1β、IL-6、TNF-α、TGF-β1 水平,免疫组化法测定 p65NF-kB,Western-blot 测定 p65NF-kB、p-p65NF-kB、RAGE、Iba-1,免疫荧光双标法测定NeuN+cleavedcaspase-3、Iba-1+TNF-α、Iba-1+TGF-β1共表达;取下丘脑,免疫组化法测定p65 NF-kB,Western-blot测定p65 NF-kB、p-p65 NF-kB、Iba-1。结果:①较之于对照组,模型组大鼠:a.皮肤毛发、行为状态、活跃程度、睡眠状态积分升高（P<0.05或0.01）,体质量、摄食量显着降低（P<0.01）;粪便含水率升高（P<0.05）。b.负重游泳时间显着降低（P<0.01）;尿D-木糖排泄率,血清GAS、MTL水平显着降低（P<0.01）;血清VIP水平显着升高（P<0.01）。c.空间探索潜伏期显着增加（P<0.01）,穿梭平台次数与目标象限路程比均降低（P<0.05）,空间探索路线呈随机式策略。d.血清BDNF水平降低（P<0.05）;海马AGEs、Aβ1-42、Aβ1-42/Aβ1-40、RAGE、glu、Iba-1、IL-1β、IL-6、TNF-α 水平上升（P<0.05 或 0.01）;p65NF-kB 表达量及活化程度上升（P<0.05或0.01）,GABA、TGF-β1水平降低（P<0.05或0.01）,NeuN 与 cleaved caspase3、Iba-1 与 TNF-α 共表达数增加（P<0.05 或 0.01）。e.下丘脑Iba-1表达量、p65NF-kB表达量及其活化程度显着上升（P<0.01）,GnRH表达量显着降低（P<0.01）。f.脾脏及胸腺指数显着降低（P<0.01）,血清IL-1β、TNF-α及TGF-β1水平显着降低（P<0.01）。②较之于模型组,各给药组大鼠:a.一般表征行为积分、体质量、摄食量、粪便含水率均有不同程度改善（P<0.05或0.01）。b.负重游泳时间显着增加（P<0.01）;尿D-木糖排泄率,血清GAS、MTL水平均升高（P<0.05或0.01）;血清VIP水平均显着降低（P<0.01）。c.空间探索潜伏期显着缩短（P<0.01）,空间探索路线呈趋向式策略;高剂量组大鼠穿梭平台次数增加（P<0.05）。d.血清BDNF水平升高（P<0.05）;海马NeuN与cleaved caspase3、Iba-1与TNF-α共表达数均降低（P<0.05）,Iba-1与TGF-β1共表达数均增加（P<0.05或0.01）;p65NF-kB表达量及活化程度均下调（P<0.05 或 0.01）;AGEs、Aβ1-42、RAGE、glu、Iba-1、IL-1β 水平均降低（P<0.05或0.01）,其中低剂量组大鼠海马IL-6与TNF-α水平显着降低（P<0.01）;TGF-β1水平显着升高（P<0.01）。e.下丘脑Iba-1表达量、p65NF-kB表达量及其活化程度降低（P<0.05或0.01）,GnRH表达量均升高（P<0.05）。f.高剂量组大鼠胸腺指数、血清IL-1β及TNF-α水平均升高（P<0.05或0.01）;各给药组大鼠血清TGF-β1水平均升高（P<0.05 或 0.01）,IL-6 水平显着降低（P<0.01）。结论:脾虚大鼠同时存在海马炎性衰老与外循环免疫衰老,AGEs/RAGE/NF-kB通路介导的小胶质细胞M1型激活与神经元凋亡可能是脾虚大鼠出现脑衰老表现的潜在机制。补中益气汤具有良好的健脾抗衰效用,其机制可能涉及抑制海马AGEs/RAGE/NF-kB信号通路过度激活及诱导小胶质细胞向M2型转化来保护神经元。本研究将方证相关理论与网络药理学分析手段相结合,以衰老为切入点,从整体-器官-细胞-分子层面系统探察了补中益气汤-脾虚证关联的机制,为探索中医方-证关联的生物学基础提供了新思路。

桑小普^[6]（2020）在《慢性胃炎脾虚证相关lncRNA-miRNA-mRNA调控网络研究》文中研究说明脾虚证本质的研究是中医现代化研究的重要内容之一。随着研究的深入,人们发现脾虚证的致病机理涉及消化系统、免疫系统、内分泌系统、神经系统、血液系统、肠道菌群和能量代谢等多个方面。近年来,系统生物学的方法开始应用于脾虚证本质研究,但尚处于初步阶段。目前已有学者分别使用iTRAQ技术、16S rDNA测序技术和基因芯片技术对脾虚证的蛋白组学、微生物组学和转录组学进行了探索,但是,应用RNA-seq或Small RNA-seq技术进行脾虚证研究的相关报道较少。本论文共分为两部分。由于气虚体质是脾虚证的前驱状态,研究健康人气虚体质的生物学机制将有助于理解脾虚证的早期发生状态。论文的第一部分研究了健康人气虚体质相关差异表达lncRNA、miRNA和mRNA并构建了 ceRNA网络调控。论文第二部分研究了慢性胃炎脾虚证相关差异表达lncRNA、miRNA和mRNA并构建了 ceRNA网络调控,从病证结合的角度,研究脾虚证的病理机制。目的:在本次研究中我们以健康人气虚体质、慢性浅表性胃炎（Chronic Superficial Gastritis,CSG）脾虚证和慢性萎缩性胃炎（Chronic Atrophic Gastritis,CAG）脾虚证人群为研究对象,应用最前沿的RNA-seq技术和ceRNA理论,从转录组学水平上进行了脾虚证内在生物学机制的研究。综合两部分的研究结果,我们试图从体质、证候、疾病的自然进展方向,研究健康人气虚体质、CSG脾虚证和CAG脾虚证内在转录调控机制的相互关联,找到“气虚体质—脾虚证”相关的生物标志物或标志网络,以期阐释脾虚证的生物学基础。本研究也有助于预测疾病的发生与发展,从而为明确脾虚证自身特点及与其他因素（如体质、证候、疾病等）的关系提供了可能。方法:2016年6月～2018年12月期间,在北京中医药大学附属东方医院通过广告或电话进行健康受试者招募,包括健康人平和体质、气虚体质和湿热体质。同期进行慢性胃炎患者招募,包括慢性浅表性胃炎（脾虚证、湿热证）,慢性萎缩性胃炎（脾虚证、湿热证）患者。采集临床研究受试者外周血,分离白细胞后提取总RNA,分别进行RNA-seq和Small RNA-seq分析。获得的测序数据用生物信息学方法进行分析,筛选出差异表达的mRNA、lncRNA和miRNA,对差异表达基因进行生物功能与信号通路富集分析。对差异表达的mRNA、lncRNA和miRNA进行ceRNA网络构建,获得脾虚证相关的ceRNA调控网络关系。本研究经北京中医药大学东方医院临床研究伦理委员会审查,伦理审批号:JDF-IRB-2016031002临床研究注册号:NCT02915393。结果:第一部分:1、在本研究中,我们总共纳入病例25例,分别为健康人平和体质13例、气虚体质7例、湿热体质5例。随机选择了健康人平和体质5例、气虚体质5例、湿热体质4例的外周血白细胞样本的总RNA进行了 RNA-seq和Small RNA-seq分析。2、通过对测序数据的生物信息学分析,我们获得了健康人气虚体质相关的差异表达mRNA60个、lncRNA76个、miRNA42个。功能分析发现,细胞质膜组成成分和细胞质膜在差异表达mRNA和miRNA的GO富集中出现。蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶活性在差异表达lncRNA和miRNA的GO富集中出现。在对健康人气虚体质相关差异基因的通路分析中发现,赖氨酸降解在差异表达lncRNA和miRNA的KEGG富集中出现。3、通过对健康人气虚体质的差异表达miRNA、mRNA和lncRNA进行ceRNA分析,共获得3182个miRNA-lncRNA对,955个miRNA-mRNA对,最终筛选到9514对ceRNA。这些ceRNA调控网络涉及了 36个GO功能和31个KEGG信号通路。4、从健康人气虚体质差异表达的mRNA中筛选出99个免疫相关的基因,涉及了11个GO功能和8个KEGG信号通路。第二部分:1、在本研究中,我们总共纳入病例70例,分别为CSG脾虚证28例、湿热证21例;CAG脾虚证7例、湿热证14例。随机选择了CSG脾虚证6例、CSG湿热证5例、CAG脾虚证5例,CAG湿热证5例的外周血白细胞样本的总RNA进行了 RNA-seq和Small RNA-seq建库和测序。2、通过对测序数据的生物信息学分析,我们获得了CSG脾虚证患者相关的差异表达mRNA7个、lncRNA 103个、miRNA4个。在对CSG脾虚证相关的差异基因的功能分析中发现,细胞质膜在差异表达mRNA和miRNA的GO分析中均显着富集。在对CSG脾虚证相关的差异基因的功能分析中发现,胰岛素分泌以及胰岛素信号通路分别在差异表达mRNA和miRNA的KEGG分析中显着富集。通过对CSG脾虚证的差异表达 miRNA、mRNA 和 lncRNA 进行 ceRNA 分析,共获得 433 个 miRNA-lncRNA 对,226个miRNA-mRNA对,最终筛选到548对ceRNA。这些ceRNA调控网络涉及了10个GO功能和11个KEGG信号通路。从CSG脾虚证差异表达的mRNA中筛选出89个免疫相关的基因,涉及了 66个GO功能和15个KEGG信号通路。3、我们获得了 CAG脾虚证患者相关的差异表达mRNA 20个、lncRNA 79个、miRNA 29个。在对CAG脾虚证相关的差异基因的功能分析中发现,细胞质膜和细胞质膜的组成成分在差异表达mRNA和miRNA的GO分析中均显着富集。通过对CAG脾虚证的差异表达miRNA、mRNA和lncRNA进行ceRNA分析,共获得1028个miRNA-lncRNA对,1123个miRNA-mRNA对,最终筛选到3625对ceRNA。这些ceRNA调控网络涉及了 59个GO功能和34个KEGG信号通路。从CAG脾虚证差异表达的mRNA中筛选出139个免疫相关的基因,涉及了 20个GO功能和28个KEGG信号通路。4、从上述测序结果中进一步挖掘,获得脾虚证相关的差异表达mRNA 570个、lncRNA2009个、miRNA 303个,这些差异基因涉及了 9个GO功能和4个KEGG信号通路。通过对CAG脾虚证的差异表达miRNA、mRNA和lncRNA进行ceRNA分析,共获得6个miRNA-lncRNA对,9个miRNA-mRNA对,最终筛选到4对ceRNA,其中的关键基因CD300H的mRNA水平在气虚体质和脾虚证中显着降低（P=0.03）。从CAG脾虚证差异表达的mRNA中筛选出84个免疫相关的基因,涉及了 9个GO功能和18个KEGG信号通路。结论:健康人气虚体质与慢性胃炎脾虚证存在特异的转录组表达谱,且气虚体质与脾虚证的差异基因表达谱具有一定的相似性,尤其体现在免疫相关的基因表达方面。功能分析提示“气虚体质—脾虚证”涉及多种免疫相关功能异常,此外在激素分泌、细胞质膜、信号转导、物质代谢等多种生命活动中存在差异。转录组学的联合分析揭示了CD300H基因的ceRNA参与“气虚体质—脾虚证”相关的转录调控网络。本研究的结果为挖掘脾虚证潜在的生物学基础提供了重要参考。

张婷^[7]（2020）在《两种不同剂型四君子膏对脾气虚模型大鼠胃肠功能影响的比较研究》文中研究说明目的:比较颗粒四君子膏及传统四君子膏对脾气虚模型大鼠胃肠功能、血清胃泌素（GAS）、胃动素（MTL）含量及空肠乙酰胆碱酯酶（Ach E）、一氧化氮合成酶（NOS）活力水平影响的差异。阐述颗粒剂四君子膏调治脾气虚证的机制,为中药膏方制作优化提供思路。方法:60只SD大鼠（雌雄各半）,采用数字随机法将其分成5组,正常组、模型组、颗粒四君子膏组（颗粒膏组）、传统四君子膏方组（传统膏组）、四君子汤组（汤剂组）。采用耗气破气+劳倦过度+饥饱失常法建立连续造模3周,复制脾气虚大鼠模型。造模成功后,颗粒膏组大鼠每日灌胃颗粒四君子膏2.7 g/kg、传统膏组大鼠每日灌胃传统四君子膏2.7 g/kg、汤剂组大鼠每日灌胃四君子汤3.35 g/kg、正常组和模型组每日灌胃蒸馏水10 m L/kg。于第四周末,各组大鼠腹主动脉取血,取空肠组织,HE染色观察大鼠空肠组织病理形态学变化;通过酶联免疫法（Enzyme-Linked Immμno Sorbent Assay,ELISA）检测各组大鼠血清胃泌素（gastrin,GAS）、胃动素（motilin,MTL）表达含量,免疫组化法检测各组大鼠乙酰胆碱酯酶（acetylcholine esterase,Ach E）、一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase,NOS）活力水平。在实验过程中全程记录各组大鼠体质量、游泳时间、肛温情况,并计算胃残留率、小肠推进率。结果:经不同剂型四君子膏方治疗后,与模型组比较,颗粒膏组、传统膏组、汤剂组的大鼠体质量、游泳时间、肛温、小肠推进率、GAS、MTL、Ach E显着上升,胃残留率、NOS活力显着下降,差异有统计学意义（P<0.05）;颗粒膏组与传统膏组Ach E、NOS活力水平及血清GAS、MTL含量及胃残留率、小肠推进率、大鼠体质量、游泳时间、肛温比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论:颗粒四君子膏和传统四君子膏两种剂型均可以通过改善大鼠体质量、延长游泳时间、提升肛温、减小胃残留率、提高小肠推进率改善大鼠胃肠动力,并提高Ach E活力、降低NOS活力、提升GAS、MTL水平起到益气健脾的功效,调节大鼠胃肠功能紊乱并改善大鼠胃肠平滑肌收缩和舒张运动,达到益气健脾的功效。

张北雪^[8]（2020）在《五种“术”类健脾和抗风湿的药效学和代谢组学研究》文中研究指明目的:通过对朝鲜苍术、关苍术、北苍术、茅苍术、白术健脾和抗风湿的研究,明确五种“术”类的药效差异;通过代谢组学技术,找出大鼠血浆中脾气虚、脾阳虚和类风湿性关节炎相关生物标志物,并分析五种“术”类对相关生物标志物影响的异同。从药效学和代谢组学的角度阐释五种“术”类的健脾及抗风湿机制,为关苍术和朝鲜苍术的合理应用提供科学依据。材料与方法:1.将SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药（参苓白术散）组、朝鲜苍术组、关苍术组、茅苍术组、北苍术组和白术组,采用饮食不节加力竭游泳的方法造成大鼠脾气虚模型。造模完成后除空白组和模型组外,其它6组分别给予参苓白术散、朝鲜苍术、关苍术、茅苍术、北苍术和白术混悬液治疗。考察造模前后大鼠的体重、肛温、免疫器官系数以及行为状态变化情况,并选用酶联免疫分析法（ELISA）测定各组大鼠与消化道炎症有关的白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、γ干扰素（IFN-γ）、免疫球蛋白G（Ig G）,与消化系统有关的胃动素（MTL）、胃泌素（GAS）、淀粉酶（AMS）、琥珀酸脱氢酶（SDH）,与抗氧化酶促系统有关的过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）等生化指标的含量,比较各组间含量差异。采用UPLC-Q-TOF-MS建立大鼠血浆样品总离子流色谱图,结合正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）分析方法寻找脾气虚大鼠机体相关生物标志物,归纳代谢通路,并对比五种“术”类对脾气虚相关生物标志物的调节作用。2.将SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药（平胃散）组、朝鲜苍术组、关苍术组、茅苍术组、北苍术组和白术组,采用饮食不节合并劳累过度,苦寒泻下的方法造成大鼠脾阳虚模型。造模完成后除空白组和模型组外,其它6组分别给予平胃散、朝鲜苍术、关苍术、茅苍术、北苍术和白术混悬液治疗。考察造模前后大鼠的体重、肛温、免疫器官系数以及行为状态变化情况,并选用酶联免疫分析法（ELISA）测定各组大鼠与消化系统有关的生长抑素（SS）、淀粉酶（AMS）、D-木糖、胃动素（MTL）、胃泌素（GAS）、胰蛋白酶（TRY）,与消化道炎症有关的免疫球蛋白G（Ig G）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）,与肠道水液代谢有关的Na+-K+-ATP酶（Na+-K+-ATPase）、水通道蛋白3（AQP3）和水通道蛋白8（AQP8）等生化指标的含量,比较各组间含量差异。采用UPLC-Q-TOF-MS建立大鼠血浆样品总离子流色谱图,结合OPLS-DA分析方法寻找脾阳虚大鼠机体相关生物标志物,归纳代谢通路,并对比五种“术”类对脾阳虚相关生物标志物的调节作用。3.将SD大鼠随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、雷公藤多苷组、朝鲜苍术组、关苍术组、茅苍术组、北苍术组和白术组,采用注射弗氏完全佐剂造成大鼠类风湿性关节炎模型。造模完成后除空白组和模型组外,其它7组分别给予甲氨蝶呤、雷公藤多苷、朝鲜苍术、关苍术、茅苍术、北苍术和白术混悬液治疗。考察各组大鼠的体重、足肿胀度、关节炎指数以及免疫器官系数等变化情况,并选用酶联免疫分析法（ELISA）测定各组大鼠生化指标白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、关节炎因子（RF）、抗环瓜氨酸肽抗体（anti-CCP）、白细胞介素-1β（IL-1β）、核转录因子-κB（NF-κB）、白细胞介素-10（IL-10）和前列腺素E2（PGE2）的含量,比较各组间含量差异。采用UPLC-Q-TOF-MS建立大鼠血浆样品总离子流色谱图,结合OPLS-DA分析方法寻找类风湿性关节炎大鼠机体相关生物标志物,归纳代谢通路,并对比五种“术”类对类风湿性关节炎相关生物标志物的调节作用。结果:1.五种“术”类均能不同程度的降低脾气虚大鼠体内Ig G、TNF-α、IL-6和MDA含量,升高脾气虚大鼠体内IFN-γ、AMS、MTL、GAS、SDH、GSH-PX、CAT和SOD的含量。在消除消化道炎症方面,北苍术和茅苍术作用较好;在调节消化系统方面,关苍术和茅苍术疗效较好且相似。在调节抗氧化酶促系统方面,朝鲜苍术和北苍术疗效较好且相似。脾气虚大鼠机体花生四烯酸、尿嘧啶、胆酸等小分子物质代谢紊乱,直接影响了甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢、原代胆汁酸生物合成等代谢通路,导致大鼠机体能量供应不足、抗氧化活性降低、免疫功能下降等症状。五种“术”类给药干预后,脾气虚模型大鼠的血浆代谢谱轨迹有向空白组移动的趋势,大部分代谢通路趋于正常。其中朝鲜苍术和北苍术在花生四烯酸代谢和原代胆汁酸生物合成途径中的干预回调作用较好且相似,白术对其中牛磺胆酸生物标志物的干预回调作用较强。而关苍术和茅苍术的作用机制较相似,在甘油磷脂代谢、类固醇生物合成和嘧啶代谢途径中发挥较好的作用。2.五种“术”类均能不同程度的降低脾阳虚大鼠体内TNF-α、IL-6、Ig G和SS含量,升高脾阳虚大鼠体内AMS、D-木糖、MTL、GAS、TRY、AQP3、AQP8和Na+-K+-ATP酶的含量。在调节消化系统方面,朝鲜苍术和北苍术调节作用较好且相似。在消除消化道炎症方面,关苍术和茅苍术调节作用较好且相似。在调节水液代谢方面,北苍术、朝鲜苍术和白术比其他两种疗效更好。脾阳虚大鼠机体亚油酸、花生四烯酸和维生素A等小分子物质代谢紊乱,直接影响了亚油酸代谢、花生四烯酸代谢和视黄醇代谢等代谢通路,导致大鼠机体能量供应不足、免疫功能下降、腹泻便溏等症状。五种“术”类给药干预后,脾阳虚模型大鼠的血浆代谢谱轨迹有向空白组移动的趋势,大部分代谢通路趋于正常。其中朝鲜苍术和北苍术在视黄醇代谢、甘油磷脂代谢等途径中的干预回调作用较好且相似。而关苍术和茅苍术相似,在半乳糖代谢途径中干预回调作用较好。白术对发挥免疫调节作用的生物标志物的干预回调作用较强。3.五种“术”类均能不同程度的降低佐剂型关节炎大鼠血浆IL-6、IL-1β、PGE2和NF-κB水平,其中白术调节作用相对较弱。北苍术、茅苍术、朝鲜苍术和关苍术可显着降低TNF-α含量,其中关苍术和茅苍术调节作用较好且相似。北苍术和朝鲜苍术可显着降低关节炎大鼠血浆RF水平,朝鲜苍术、茅苍术和关苍术可显着降低anti-CCP水平,即朝鲜苍术和北苍术调节作用相似。类风湿性关节炎大鼠机体11-脱氧皮质醇、牛磺胆酸等小分子物质代谢紊乱,直接影响了原代胆汁酸生物合成和类固醇激素生物合成等代谢通路,导致大鼠机体免疫功能下降等症状。五种“术”类给药干预后,类风湿性关节炎模型大鼠的血浆代谢谱轨迹有向空白组移动的趋势,大部分代谢通路趋于正常。其中朝鲜苍术和北苍术调节作用相似,而关苍术和茅苍术调节作用相似。白术则几乎无干预回调作用。结论:1.五种“术”类均对脾气虚大鼠具有一定的治疗作用。其中朝鲜苍术和北苍术的治疗机制和对生物标志物的干预回调作用基本一致,而关苍术的治疗机制和对生物标志物的干预回调作用更接近茅苍术。2.五种“术”类均对脾阳虚大鼠具有一定的治疗作用。朝鲜苍术的治疗机制和对生物标志物的干预回调作用基本与北苍术一致,而关苍术治疗机制和对生物标志物的干预回调作用更接近茅苍术,且治疗效果相对较弱。3.北苍术、茅苍术、朝鲜苍术和关苍术均对类风湿性关节炎大鼠具有一定的治疗作用。朝鲜苍术治疗效果最好且对生物标志物的干预回调作用更接近北苍术,而关苍术的治疗机制和对生物标志物的干预回调作用更接近茅苍术。

赵思达^[9]（2019）在《基于cAMP/PKA通路探讨理脾滋阴法干预脾阴虚大鼠脾失健运机理研究》文中研究表明目的:根据中医病因理论,采用经典复合因素造模方法塑造脾阴虚证大鼠模型,检测大鼠回肠组织的相关指标,从病理学及分子生物学等角度,探讨脾阴虚证脾失健运的机理,同时以理脾滋阴法对脾阴虚证大鼠进行干预以反证动物模型的复制和评价情况,进一步丰富脾阴虚证的研究内容,为后续的相关研究提供思路。材料与方法:选用SPF级健康的SD大鼠42只,根据大鼠的性别和体重,用分层随机的方法分为对照组、模型组与反证组,每组各14只,组内雌雄各7只。采用经典的复合因素造模方法,即饮食失宜结合劳力过度再使用伤阴药物。造模分为两个阶段,一阶段通过饮食失宜结合劳力过度塑造脾气虚证模型,二阶段再一步使用伤阴药塑造脾阴虚证模型,每个阶段各8天时间,共16天,并分别在造模第8、第16天运用模糊数学的方法对大鼠造模情况进行评价。取大鼠体内的回肠组织片段制作切片,在镜下观察各组大鼠的回肠组织发生的病理学变化。采用比色法来测定各组大鼠回肠组织中GSH-Px活性、MDA含量,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶的活性,线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅳ的活性,采用ELISA法检测cAMP、PKA、VIP、β-EP的含量,用Western Blot法检测大鼠回肠组织中cAMP、PKA、VIP、β-EP的蛋白相对表达量。结果:1.大鼠游泳耐力、体重、肛温检测结果:模型组与对照组相比,大鼠的游泳耐力和体重两者都有明显的下降（P<0.01）,肛温显着升高（P<0.01）;反证组大鼠的游泳耐力和体重均明显比模型组升高（P<0.01）,肛温显着降低（P<0.01）。2.大鼠回肠组织的病理学改变:观察对照组大鼠的回肠组织可见,回肠黏膜及肠壁都有完整的结构,且边缘清晰,上皮细胞间的排列紧密有序,绒毛排列整齐无缺损;而模型组镜下可见回肠黏膜明显变薄或破损,绒毛长度明显变短,且分布散乱甚至大块缺损,同时上皮细胞也出现坏死等现象,间质血管充血扩张,有炎症发生;反证组大鼠的回肠黏膜形态恢复较好,肠壁结构较完整,绒毛缺损明显减少,长度也有所增加,上皮细胞排列有序,坏死脱落少见,炎症较轻。3.各组大鼠生化指标检测结果:模型组GSH-Px的活性与对照组进行比较有明显的下降（P<0.01）、MDA的含量也有明显上升（P<0.01）,Na+-K+ATP酶和Ca2+-Mg2+ATP酶的活性也均有明显降低（P<0.01）,线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅳ的活性也都显着下降（P<0.01）;反证组GSH-Px的活性与模型组相比则有了明显的提高（P<0.01）、MDA的含量相应明显下降（P<0.01）,Na+-K+ATP酶和Ca2+-Mg2+ATP酶活性也均得到明显增高（P<0.01）,线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅳ的活性都有明显的上升（P<0.05）（P<0.01）。4.ELISA法测定回肠组织中cAMP、PKA、VIP、β-EP含量:模型组cAMP、PKA、VIP三者的含量与对照组相比都明显减少（P<0.01）,β-EP含量显着上升（P<0.01）;反证组与模型组相比,回肠组织中cAMP、PKA、VIP三者的含量都得到了明显的增多（P<0.01）,β-EP含量也显着下降（P<0.01）。5.Western Blot法检测回肠组织中cAMP、PKA、VIP、β-EP蛋白相对表达量:模型组与对照组相比,cAMP、PKA、VIP三者的蛋白相对表达量均明显减少（P<0.01）,β-EP蛋白相对表达量明显增多（P<0.01）;反证组与模型组相比,回肠组织中cAMP、PKA、VIP三者的蛋白相对表达量都显着增大（P<0.01）,β-EP蛋白相对表达量明显减少（P<0.01）。结论:1.脾阴虚证大鼠体内发生了能量代谢障碍,与氧化/抗氧化系统失衡、细胞结构和功能被破坏,以及线粒体氧化磷酸化过程受阻有关。2.脾阴虚证大鼠的消化系统功能减弱,与脑肠轴的信号通路传导作用降低和肠道激素失调,导致肠道水液分泌减少和肠道运动抑制有关。

刘子怡^[10]（2019）在《基于益气健脾法中药复方调控动脉粥样硬化炎症反应的作用研究》文中研究表明目的:本研究应用脂多糖（LPS）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）构建炎症模型,利用分子生物学、细胞生物学等研究方法,从体外实验验证模型细胞炎症反应与5-HT信号通路相关性,同时观察益气健脾方含药血清对模型细胞炎症反应的调控作用并探讨其机制,进一步丰富从脾论治AS,以期为中医药靶向治疗心血管疾病提供了参考和借鉴。材料与方法:1.血清的制备24只SPF级雄性8周龄SD大鼠,随机分为4组:正常组、模型组、益气健脾方组和阿托伐他汀组,正常组与模型组用生理盐水进行灌胃,后两组分别应用益气健脾方、阿托伐他汀灌胃,每日1次,持续7天。在最后一次给药2h后,从腹主动脉取血,离心,收集上清液,合并同组的含药血清,使用0.22μm一次性滤器对其进行无菌过滤,储存在-80℃冰箱中备用。2.益气健脾方对LPS诱导HUVECs炎症反应的作用体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,随机分为4组:正常组、模型组、益气健脾方组和阿托伐他汀组。除正常组外,其余各组均采用LPS（1.5μg/ml）刺激HUVECs24h,同时正常组与模型组应用正常血清、治疗组应用相应药物血清分别对相应组的细胞进行干预,并分为三个干预时间点即2h、4h、8h（分别在22h、20h、16h加入药物）,统一于24h后收集细胞,使用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测分析各组细胞因子IL-6、TNF-α、5-HT表达的变化以及不同干预时间对疗效的影响。3.益气健脾方改善LPS诱导HUVECs炎症水平的机制研究体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,随机分为6组:正常组、模型组、拮抗剂组、益气健脾方组、益气健脾方+拮抗剂组及阿托伐他汀组。除正常组外,其余各组均采用LPS（1.5μg/ml）刺激HUVECs 24h,同时分别用正常血清、正常血清+拮抗剂、益气健脾方血清、益气健脾方血清+拮抗剂和阿托伐他汀血清对相应组细胞进行干预8h（在16h后加药）,统一于24h后收集细胞。应用蛋白质印迹法（Western-blot）检测PKC、p-PKC、NF-κB蛋白的表达;使用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法（Real-time PCR）检测PKC、NF-κB的m RNA的表达。结果:1.HUVECs细胞中白细胞介素-6（IL-6）的表达结果与正常组比较,模型组IL-6表达明显升高（P<0.05）;与模型组比较,益气健脾方组、阿托伐他汀组的IL-6的表达出现下调（P<0.05或p<0.01）。实验将益气健脾方组分三个时间梯队（2h、4h、8h）对模型细胞进行干预,与模型组比较,从统计学分析8h效果相对最佳。2.HUVECs细胞中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达结果与正常组比较,模型组中TNF-α表达升高（P<0.05）;与模型组比较,益气健脾方组、阿托伐他汀组的TNF-α的表达出现下调（P<0.05或p<0.01）。实验将益气健脾方组分三个时间梯队（2h、4h、8h）对模型细胞进行干预,与模型组比较,从统计学分析8h效果相对最佳。8h干预条件下,益气健脾方组与阿托伐他汀组比较,TNF-α表达差异不显着（P>0.05）。3.HUVECs细胞中5-羟色胺（5-HT）的表达结果与正常组比较,模型组中5-HT表达升高（P<0.05）;与模型组比较,益气健脾方组、阿托伐他汀组的5-HT表达出现下降（P<0.05或p<0.01）。实验将益气健脾方组分三个时间梯队（2h、4h、8h）对模型细胞进行干预,与模型组比较,从统计学分析8h效果相对最佳。8h干预条件下,益气健脾方组与阿托伐他汀组比较,5-HT表达差异不显着（P>0.05）。4.HUVECs细胞中蛋白激酶C（PKC）的表达结果与正常组比较,模型组PKC蛋白及m RNA表达量显着升高（P<0.01）;与模型组比较,拮抗剂组PKC蛋白及m RNA的表达量下降（P<0.05）,其余各治疗组PKC蛋白及m RNA表达量均明显下降（P<0.01）;与拮抗剂组比较,益气健脾方组、益气健脾方+拮抗剂组PKC蛋白及m RNA表达量均显着下降（P<0.01）。综上,各治疗组相比疗效依次为益气健脾方+拮抗剂组>阿托伐他汀组>益气健脾方组>拮抗剂组。5.HUVECs细胞中磷酸化蛋白激酶C（p-PKC）的表达结果与正常组比较,模型组p-PKC蛋白表达量显着升高（P<0.01）;与模型组比较,各治疗组p-PKC蛋白表达量均明显下降（P<0.01）;与拮抗剂组比较,益气健脾方组、益气健脾方+拮抗剂组p-PKC蛋白表达量均显着下降（P<0.01）。综上,各治疗组相比疗效依次为益气健脾方+拮抗剂组>阿托伐他汀组>益气健脾方组>拮抗剂组。6.HUVECs细胞中核因子κB（NF-κB）的表达结果与正常组比较,模型组NF-κB蛋白及m RNA表达量显着升高（P<0.01）;与模型组比较,拮抗剂组NF-κB蛋白及m RNA的表达量下降（P<0.01或P<0.05）,其余各治疗组的NF-κB蛋白及m RNA表达量均明显下降（P<0.01）;与拮抗剂组比较,益气健脾方组、益气健脾方+拮抗剂组NF-κB蛋白及m RNA表达量均显着下降（P<0.01）。综上,疗效依次为益气健脾方+拮抗剂组>阿托伐他汀组>益气健脾方组>拮抗剂组。结论:1.经LPS诱导的HUVECs中出现促炎细胞因子IL-6、TNF-α的上调,同时在各组炎症模型细胞中均发现5-HT的分泌增加,提示5-HT的过度分泌与内皮细胞炎症反应可能是共同促进AS发生发展的机制;2.益气健脾法中药复方（益气健脾方）能够通过5-HT2A受体靶向调控动脉粥样硬化免疫炎症过程,改善炎症因子分泌,抑制5-HT及其下游PKC-NF-κB信号通路活化,这可能是该方干预早期AS的重要机制靶点之一;3.益气健脾方与5-HT2A受体拮抗剂均可改善模型细胞的炎症反应,疗效前者优于后者,提示益气健脾方可能是在进一步拮抗5-HT信号转导通路的基础上,以发挥改善内皮细胞炎症反应的作用,从而干预早期AS的发生发展。

二、大鼠脾气虚证模型形成过程中子宫血管舒张—收缩因子的改变（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、大鼠脾气虚证模型形成过程中子宫血管舒张—收缩因子的改变（论文提纲范文）

（1）基于肠道及呼吸道菌群探讨六君子汤治疗哮喘慢性持续期的疗效及机制研究（论文提纲范文）

（2）肺脾为核心脏腑整体辨证支气管哮喘慢性持续期免疫调控研究（论文提纲范文）

（3）温郁金不同饮片化瘀止痛效应物质及作用机制研究（论文提纲范文）

（4）脾气虚大鼠心室肌细胞线粒体未折叠蛋白反应的研究（论文提纲范文）

（5）基于衰老分子机制探讨脾虚证-补中益气汤相关的生物学基础（论文提纲范文）

（6）慢性胃炎脾虚证相关lncRNA-miRNA-mRNA调控网络研究（论文提纲范文）

（7）两种不同剂型四君子膏对脾气虚模型大鼠胃肠功能影响的比较研究（论文提纲范文）

（8）五种“术”类健脾和抗风湿的药效学和代谢组学研究（论文提纲范文）

（9）基于cAMP/PKA通路探讨理脾滋阴法干预脾阴虚大鼠脾失健运机理研究（论文提纲范文）

（10）基于益气健脾法中药复方调控动脉粥样硬化炎症反应的作用研究（论文提纲范文）

四、大鼠脾气虚证模型形成过程中子宫血管舒张—收缩因子的改变（论文参考文献）

• [1]基于肠道及呼吸道菌群探讨六君子汤治疗哮喘慢性持续期的疗效及机制研究[D]. 袁星星. 黑龙江中医药大学, 2021(01)
• [2]肺脾为核心脏腑整体辨证支气管哮喘慢性持续期免疫调控研究[D]. 司东旭. 北京中医药大学, 2021(01)
• [3]温郁金不同饮片化瘀止痛效应物质及作用机制研究[D]. 童黄锦. 南京中医药大学, 2021
• [4]脾气虚大鼠心室肌细胞线粒体未折叠蛋白反应的研究[D]. 李振钰. 辽宁中医药大学, 2021
• [5]基于衰老分子机制探讨脾虚证-补中益气汤相关的生物学基础[D]. 朱昊如. 北京中医药大学, 2020(04)
• [6]慢性胃炎脾虚证相关lncRNA-miRNA-mRNA调控网络研究[D]. 桑小普. 北京中医药大学, 2020(04)
• [7]两种不同剂型四君子膏对脾气虚模型大鼠胃肠功能影响的比较研究[D]. 张婷. 湖南中医药大学, 2020
• [8]五种“术”类健脾和抗风湿的药效学和代谢组学研究[D]. 张北雪. 辽宁中医药大学, 2020(02)
• [9]基于cAMP/PKA通路探讨理脾滋阴法干预脾阴虚大鼠脾失健运机理研究[D]. 赵思达. 辽宁中医药大学, 2019(02)
• [10]基于益气健脾法中药复方调控动脉粥样硬化炎症反应的作用研究[D]. 刘子怡. 辽宁中医药大学, 2019(02)