一氧化氮合成阻断大鼠模型血浆一氧化氮的变化及益气化瘀法的干预作用

一、一氧化氮合成阻滞大鼠模型血浆一氧化氮变化及益气化瘀法干预作用（论文文献综述）

张强^[1]（2021）在《基于肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质研究芪术颗粒抗肝纤维化机制》文中提出肝纤维化（Hverfibrosis,LF）是肝胆系统疾病中的常见病,并且是大多数慢性肝病发展的必然阶段。目前医学界普遍认为早期肝纤维化能够逆转,但如何进行逆转,目前尚未形成普遍的共识。肝纤维化早期产生的诸多病理变化中,人们对肝窦内皮细胞（sinusoidal endothelial cells,SECs）的病理变化给予的关注逐渐增多,其特征性的细胞学行为改变包括“窗口”尺寸与数量的变化以及连续性基底膜的形成,一旦SECs发生去窗口化后,则肝纤维化的进程难以逆转,目前这已是不争的事实。目前针对肝纤维化的治疗,现代医学尚且只能给予病因治疗,针对肝纤维化本身而言,目前还没有疗效肯定的药物或治疗手段问世。中医药学在治疗肝纤维化方面的经验历史较长,并对其发病机制形成了完整的认识,尤其是在治未病思想指导下,针对慢性肝病给予早期干预,这在一定程度上能够降低患者未来发生肝纤维化、肝硬化的风险。芪术颗粒是姚乃礼教授经过多年的临床经验总结,结合目前中医药学界对肝纤维化的普遍认识基础上创制的治疗肝纤维化常用方,本课题在国家自然基金“基于肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质研究芪术颗粒抗肝纤维化机制”（NO:81774282）的资助下,结合课题组前期的研究成果探讨益气活血方芪术颗粒治疗肝纤维化的机制。1.基于益气活血法治疗肝纤维化临床疗效的Meta分析目的:以Meta分析的方法评价益气活血法治疗肝纤维化的临床疗效。方法:1.以PubMed、中国知识基础设施工程数据库、万方数据知识服务平台为检索资料库,检索时间跨度为自建库到2020年12月31日;以检索词“liver fibrosis”、“hepatic fibrosis”为检索词,然后以“effect”或者“efficacy”作为关键词逐篇进行排除;以“肝纤维化”作为检索词进行检索,然后以“临床观察”、“疗效分析”作为关键词逐篇进行排除。以上数据库没有语言限制。2.纳入随机对照临床研究类文献,以肝纤维化四项、肝脏瞬时弹性成像、肝脾脏的形态、门脾静脉的宽度、不良反应、安全性等结局指标作为考核指标。结果:本次研究共纳入合格文献共93篇,其中有86篇文献以肝纤维化四项作为临床评价指标,两组对比显示中药组的临床疗效比对照组更好,结果对比具有统计学差异[MD=51.15,95%CI（56.95,45.35）,P<0.00001]。15篇文献以肝硬度值作为临床考核指标,两组对比显示中药组在改善肝硬度值方面具有更好的疗效,比较结果具有统计学差异[MD=3.52,95%CI（4.78,2.26）,P<0.00001]。33 篇文献研究以门静脉直径作为临床考核指标,两组对比显示中药组在改善门静脉直径方面具有更好的疗效,比较结果具有统计学差异[MD=1.20,95%CI（2.14,0.26）,P=0.01]。31篇文献研究以脾脏厚度作为临床考核指标,两组对比显示中药组在改善脾脏厚度方面具有更好的疗效,比较结果具有统计学差异[MD=6.83,95%CI（9.54,4.12）,P<0.00001]。13篇文献研究以脾静脉直径作为临床考核指标,两组对比显示中药组在改善脾静脉直径方面具有更好的疗效,比较结果具有统计学差异[MD=1.77,95%CI（3.04,0.49）,P=0.007]。结论:以益气活血为主要功效的中药组方在治疗肝纤维化方面相较于西药而言具有更好的临床疗效。2.基于肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质研究芪术颗粒抗肝纤维化机制目的:（1）研究芪术颗粒对肝纤维化大鼠肝脏炎症因子、肝纤维化指标以及病理组织学的调控作用。（2）通过qRT-PCR、Western blot、免疫荧光法明确芪术颗粒对肝窦内皮细胞eNOSmRNA、eNOS、NO表达的影响。（3）基于多相多级次多孔介质理论,明确芪术颗粒干预下肝窦内皮细胞的力学特征。方法:（1）以四氯化碳作为肝纤维化的诱导剂,构建肝纤维化大鼠模型,造模同时给予芪术颗粒进行干预,通过Elisa法、HE以及Masson染色研究芪术颗粒对肝纤维化大鼠的生化、病理组织学的影响。（2）原位胶原酶灌注+离体消化+梯度密度分离法分离提取肝窦内皮细胞。（3）以10%肝纤维化大鼠血清+5%的胎牛血清作为外在损伤因素作用于体外培养状态的肝窦内皮细胞,模拟体内生化环境,构建肝窦内皮细胞损伤模型。将细胞按照正常对照组、损伤组、正常大鼠血清损伤组、芪术颗粒含药血清低、中、高浓度进行分组。（4）采用 qRT-PCR、Western blot、免疫荧光法检测胞内eNOSmRNA、eNOS、NO的表达情况。（5）基于多相多级次多孔介质理论,采用原子力显微镜表征芪术颗粒干预下肝窦内皮细胞的力学属性。结果:（1）芪术颗粒能够改善肝纤维化大鼠生化指标,改善肝脏病理组织形态。（2）经过细胞形态以及免疫荧光鉴定可知,我们所提取的细胞为大鼠肝窦内皮细胞,且纯度较高。（3）经 qRT-PCR、Western blot、免疫荧光法检测胞内 eNOSmRNA、eNOS、NO显示芪术颗粒含药血清能够上调eNOSmRNA、eNOS、NO的表达。（4）经过芪术颗粒含药血清干预后,肝窦内皮细胞的骨架模量、粘度均有所提高,使肝窦内皮细胞向正常力学状态转变,而其扩散系数无明显变化。结论:（1）芪术颗粒能够抑制肝脏炎症状态,恢复肝脏正常组织形态。（2）芪术颗粒能够上调eNOSmRNA、eNOS、NO的表达,从而改善肝窦内皮细胞的病理状态,这可能是其抗肝纤维化的重要机制之一。（3）芪术颗粒能够改善肝窦内皮细胞的力学状态,促进肝窦内皮细胞向正常力学状态恢复,这可能是其发挥抗肝纤维化的另一重要机制。

叶倩伶^[2]（2021）在《补阳解毒化瘀方改善慢性肝衰竭肝内微循环障碍的机制研究》文中研究说明目的:通过建立慢性肝衰竭（Chronic liver failure,CLF）动物模型,观察补阳解毒化瘀颗粒（Buyang Jiedu Huayu granule,BYGDHY）对慢性肝衰竭肝脏微循环的干预作用,研究血管活性物质内皮素1（ET-1）、一氧化氮（NO）在慢性肝衰竭中的表达,并从Gab1-Akt-eNOS信号通路的蛋白基因含量变化探讨补阳解毒化瘀颗粒对慢性肝衰竭的影响及其关联,揭示其可能的改善肝再生微环境,防治慢性肝衰竭的机制。方法:SPF级SD大鼠70只,雄性,体重180-250g,适应性喂养一周。实验动物随机分为4组:对照组（Control）、模型组（Model）、补阳解毒化瘀颗粒干预组（BYGDHY）,eNOS信号通路抑制剂+补阳解毒化瘀颗粒（L-NAME+BYGDHY）干预组,其中对照组大鼠10只,其余每组大鼠20只。除对照组以外,其余各组均以50%四氯化碳植物油混合溶液（CCL4:橄榄油=1:1配比）2.0ml/kg持续腹腔注射8周,后以1.5ml/kg腹腔注射至第10周。成模后BYJDHY治疗组及L-NAME+BYGDHY干预组均予以补阳解毒化瘀颗粒18.9g/（kg·d）灌胃干预2周,L-NAME+BYGDHY干预组再予以L-NAME 8mg/（kg·d）腹腔注射干预一周。同时,每隔3天腹腔注射CCL4植物油溶液1.5ml/kg维持CLF模型时效性。对照组给予等量蒸馏水代替。造模及干预期间观察各组大鼠一般情况,监测大鼠体重、腹围变化。用药结束48h后截取血液,剖取肝脏。HE及Masson染色后用光镜观察大鼠肝组织病理变化,ELISA检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）的水平及肝组织NO、ET-1含量,RT-PCR检测肝组织Gab1、AKT、eNOS mRNA表达水平,Western Blot检测肝组织Gab1、AKT、eNOS蛋白表达水平。结果:（1）一般情况:对照组较实验前无明显区别。随着用药时间的延长,模型组大鼠、中药组大鼠、抑制剂组大鼠与对照组相比毛色暗黄,光泽度降低,并且部分毛发脱落。运动活动减少,对外界刺激反应较迟钝,喜蜷卧,形体消瘦,腹部胀大,腹水明显,精神出现不同程度的萎靡,进食量减少,消化不良,大便稀溏,尿黄,部分大鼠有血尿、皮肤病、脓肿等症状。其中,中药组在10周后大鼠饮食、活动、精神等方面较模型组有所改善。（2）体重变化:实验开始前的初始体重各组组间差异无统计学意义（P﹥0.05）;12周实验后,对照组与模型组、中药组及抑制剂组比较,体重升高幅度大（P<0.05）;中药组与模型组比较,体重升高幅度大（P<0.05）。前四周各组大鼠体重增幅差异大致相同,第五周后对照组大鼠每周体重较其余组增加明显,其余三组大鼠体重有所增加,但增加幅度明显低于对比对照组。10周后随着中药治疗干预后,与同期模型组大鼠相比增长幅度有所提高。（3）腹围变化:实验开始前的各组初始腹围组间差异无统计学意义（P﹥0.05）;12周实验结束后,各组大鼠腹围都有不同程度的增高。对照组与模型组、中药组、抑制剂组比较,腹围较小（P<0.05）;模型组与中药组、抑制剂组比较,腹围较大（P<0.05）。（4）肝组织HE及Masson染色光镜下观察:对照组肝小叶结构正常,肝细胞无明显坏死,无异型,未见核分裂像,无纤维组织增生,未见淤胆,无明显肝血窦炎细胞浸润,汇管区无淋巴细胞浸润,胆管细胞未见明显损伤,病理变化分级为0级。模型组大鼠肝小叶显着纤维组织增生,肝小叶结构破坏,大部分被假小叶替代,假小叶内炎细胞弥漫性浸润,肝血窦及肝内小血管扩张充血,明显水肿,肝细胞排列紊乱,广泛点状坏死,病理变化分级为6级。抑制剂组大鼠肝细胞不同程度浊肿,少量气球样变,可见点状坏死,中央静脉纤维化,肝组织内纤维组织增生,明显假小叶形成,病理变化分级5级。中药组大鼠肝小叶结构紊乱得到一定改善,肝纤维化、肝变性、肝坏死等方面均不同程度得到改善,病理变化分级4级。（5）血清生化结果:与对照组比较,模型组、中药组、抑制剂组ALT、AST、TBIL均明显升高,ALB明显降低（P<0.05）;与模型组比较,中药组、抑制剂组ALT、AST、TBIL均明显低于模型组,ALB明显高于模型组（P<0.05）;中药组TBIL低于抑制剂组（P<0.05）;中药组ALB高于抑制剂组（P<0.05）。（6）NO/ET-1结果:与对照组比较,模型组、中药组、抑制剂组肝组织NO、ET-1含量均明显升高（P<0.05）;与模型组比较,中药组、抑制剂组NO、ET-1水平均低于模型组（P<0.05）;中药组NO水平高于抑制剂组（P<0.05）。（7）RT-PCR:与对照组比较,模型组、中药组、抑制剂组肝组织eNOS、Gab1、Akt mRNA表达均明显下降（P<0.05）;与模型组比较,中药组肝组织eNOS mRNA表达水平均明显高于模型组（P<0.05）;中药组肝组织Gab1、AKT、eNOS mRNA表达水平高于抑制剂组（P<0.05）。（8）WB:与对照组比较,模型组、中药组、抑制剂组肝组织eNOS、Gab1蛋白含量均明显降低（P<0.05）,模型组、抑制剂组肝组织Akt蛋白含量明显降低（P<0.05）;与模型组比较,中药组、抑制剂组肝组织Gab1、Akt、eNOS蛋白含量均明显高于模型组（P<0.05）;中药组肝组织Gab1、Akt、eNOS蛋白含量均高于抑制剂组（P<0.05）。结论:（1）四氯化碳可成功构建慢性肝衰竭模型。（2）补阳解毒化瘀颗粒调节慢性肝衰竭大鼠血管活性物质NO、ET-1浓度,缓解肝脏缺氧状态。其改善慢性肝衰竭大鼠微循环的作用机制可能是通过调控Gab1-Akt-eNOS信号通路,减少肝脏病理性血管生成,维持有效血流量,改善肝脏微循环。

庞琳琳^[3]（2021）在《健脾祛痰法治疗血脂异常的临床研究及作用机制研究》文中研究指明目的:总结导师对血脂异常的中医学认识及治疗方法,采用系统评价的方法评价健脾祛痰法治疗血脂异常的有效性和安全性,同时在细胞分子水平探讨该法对血脂异常脾虚痰浊猪脂蛋白代谢异常及其血管内皮受损致AS的影响及作用机制,为从脾论治血脂异常、动脉粥样硬化性疾病等提供实验依据。材料与方法:1.杨关林教授精通现代医学理论,博采传统医学的各家思想,认为血脂异常与痰浊相关,以血脂异常为切入点,提出血脂异常以“脾虚痰浊”立论,丰富了中医病因病机理论,以健脾祛痰为重点,从“脾主运化”论治血脂异常每获良效。通过跟师学习,总结导师关于血脂异常的中医学理论及治疗方法。2.计算机检索国内外数据库包括:中文文献检索中国知网数据库、万方数据库、重庆维普中文科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库,外文文献检索Pubmed和Cochrane图书馆,检索时间为从各数据库建库至2020年11月19日。搜集健脾祛痰法治疗血脂异常的临床随机对照试验。按照纳入标准与排除标准筛选文献,应用风险评估工具对纳入研究的质量进行评价,采用Rev Man5.4软件进行Meta分析。3.采用高脂饮食单笼饲养建立小型猪血脂异常脾虚痰浊模型,分为对照组、模型组、干预组,模型组和干预组均予高脂饲料喂养,对照组予基础饲料喂饲,且每只小型猪均单笼饲养,限制活动。实验周期为24周。于第0、12、24周,采用全自动生化分析仪检测两组小猪血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白AⅠ（Apo AI）等水平,应用高效液相色谱仪（LC-20AT）测定血中1磷脂鞘氨醇（S1P）含量,采用Elisa法检测小猪血清髓过氧化物酶（MPO）、对氧磷酶1（PON1）、HDL-Apo AI、HDL-SAA、HDL-PON1水平;于第24周采用Elisa法检测小猪血清和内皮组织匀浆内皮型一氧化氮合酶（e NOS）,诱导型一氧化氮合酶（i NOS）,总一氧化氮合酶（t NOS）,一氧化氮（NO）,内皮素-1（ET-1）和细胞间黏附分子1（ICAM-1）水平,采用western blot法测定SIPR1/PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达水平,采用RT-q PCR法测定SIPR1/PI3K/Akt信号通路相关基因表达水平。结果:1.杨关林教授认为,中医膏脂运化失常,多对应现代医学的血脂异常,在治疗的过程中,当紧守“脾虚痰湿、浊脂内生”之病机,有效运用“脾主运化”思想,以“复脾运化、祛痰化浊、调脾胃以调血脂”为治疗原则,总结出从“脾主运化”论治血脂异常的中医理论,并凭借自己多年丰富的临床经验,将血脂异常从“脾主运化”论治学术思想应用于临床,取得良好疗效。2.共纳入18项研究,合计1574例患者。Meta分析结果显示,健脾祛痰法联合西医常规治疗血脂异常在提高临床总有效率,降低血浆TC、TG、LDL-C水平,升高血浆HLD-C、Apo A水平,改善中医症状、减低中医证候积分方面较单纯西医治疗效果更佳,且不良反应发生率低,差异具有统计学意义（P<0.05）;单独健脾祛痰法与西医常规治疗对比,两者降低TC、TG、LDL-C,升高HLD-C、Apo A的疗效相当,无统计学差异（P>0.05）。所纳入研究中报道的不良事件均为轻度,包括便秘、腹胀、腹泻、腹痛、恶心、皮疹、头痛、转氨酶升高等,多在停药后恢复,没有试验报告严重的不良事件。在西医常规治疗的同时联合健脾祛痰法,不良事件的发生率下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。3.在血脂水平疗效方面,健脾祛痰法能显着降低血脂异常脾虚痰浊猪血清TG水平（P<0.01）,降低其LDL-C水平（P<0.05）,显着升高Apo A1水平（P<0.01）;经健脾祛痰法治疗后,血脂异常脾虚痰浊猪血清TC也有所降低（P>0.05）,HDL-C有所升高（P>0.05）。在纠正dy HDL疗效方面,经健脾祛痰中药治疗后,血清MPO、HDL-SAA水平显着降低（P<0.01）,HDL-Apo AI、HDL-S1P、HDL-PON1水平显着升高（P<0.01）,PON1水平升高（P<0.05）,MPO/PON1比值显着减小（P<0.01）,HDL-SAA/HDL-Apo AI比值减小（P<0.05）。在改善内皮功能方面,血脂异常脾虚痰浊猪血清t NOS、i NOS、ET-1、ICAM-1水平显着升高,e NOS、NO水平显着降低;健脾祛痰中药显着降低血脂异常脾虚痰浊猪血清t NOS、i NOS、ET-1、ICAM-1水平（P<0.01）,显着升高e NOS水平（P<0.01）,NO水平也升高（P<0.05）。各组内皮匀浆中内皮功能指标变化一致。表明健脾祛痰中药能改善血脂异常脾虚痰浊猪血管内皮功能。研究发现血脂异常脾虚痰浊猪血管内皮S1PR1、PI3K、Akt的m RNA表达显着降低（P<0.01）,e NOS表达也降低（P<0.05）,健脾祛痰中药显着增加血管内皮S1PR1、PI3K、Akt的m RNA表达（P<0.01）,升高e NOS m RNA表达（P<0.05）。血脂异常脾虚痰浊猪血管内皮S1PR1、PI3K、Akt的蛋白表达降低（P<0.05）,e NOS的蛋白表达显着降低（P<0.01）,i NOS的蛋白表达显着升高（P<0.01）,健脾祛痰中药增加S1PR1、PI3K、e NOS蛋白表达（P<0.05）,显着增加Akt蛋白表达（P<0.01）,降低i NOS的蛋白表达（P<0.05）。结论:1.血脂异常的中医病因病机为“脾虚痰湿、浊脂内生”,导师以“脾主运化”为指导思想,以“复脾运化、祛痰化浊、调脾胃以调血脂”为治疗原则,治疗血脂异常疗效显着。2.健脾祛痰法治疗血脂异常具有良好的疗效和安全性。3.健脾祛痰中药改善血脂异常脾虚痰浊猪血脂水平,减少dy HDL含量,改善血脂异常脾虚痰浊猪血管内皮功能,该作用与活化血脂异常脾虚痰浊猪血管内皮受抑制的S1PR1/PI3K/Akt信号通路有关。

崔鹤蓉^[4]（2021）在《血管生成干预药物筛选及活性检测技术平台的初步建立与应用（一）》文中认为目的:心血管系统是脊椎动物胚胎发育的第一个功能器官系统。血管生成研究方向迄今获批国家自然基金项目合计800余项,资助金额超过3亿,已建立多种评价方法,但现有依赖于体外筛选的评价模式局限了中医药作为研究对象的结果重现性可靠性,亟需建立高效客观的研究方法。本论文采用鹌鹑胚模型（qCAM）、微血管三维成像分析系统、DESI-MSI质谱成像、经典血管内皮细胞实验、代谢组学等多学科技术方法相互佐证,旨在建立适用于中医药的血管生成药物筛选与活性检测技术平台,为相关研究提供技术支持和方法学参考。方法:一、平台的建立。初步建立本平台,完成方法学考察及研究流程示例。本平台包括三个连续的评价环节:（1）基于qCAM模型的药物初步筛选（qCAM筛选）;（2）基于HUVEC实验的活性验证（HUVEC验证）;（3）基于组学分析的调控机制研究（组学分析）。1.方法学考察。考察qCAM模型的相似性、重复性、可靠性、适用性和可控性、易行性和经济性。qCAM模型的主要评价指标包括qCAM死亡率、血管生成形态学观察、血管病理学及超微结构、qCAMVEGFR2mRNA表达及NO含量等,从整体、组织、细胞、亚细胞、分子五个检测水平综合表征受试对象对血管生成的干预作用。（1）给药载体的优化。比较分子筛、硅胶粒、米粒、大孔树脂、甲基纤维素、明胶海绵对qCAM的影响,筛选模型给药载体。（2）给药时间的选择。开窗操作后,观察qCAM连续7天的发育情况,考察模型给药及取材时间。（3）模型稳定性。比较不同批次（2018年1月、3月、5月、7月、9月、11月）相同实验条件下qCAM微血管（三级+四级）计数结果。（4）模型重复性。验证性地评价课题组前期合成试药DG-15（5、20 μg）给药36 h对qCAM微血管数的影响。2.平台流程示例。以甲苯磺酸索拉非尼为研究对象,从实验设计、选择原则、方法学内涵、数据分析等方面详细阐释本平台的建立及研究流程。（1）qCAM筛选。选择40 μg多韦替尼（Dov）作为阳性对照药物,评价甲苯磺酸索拉非尼（ST,40、80 μg）给药36 h对qCAM微血管数、EN-face面血管分布、血管超微结构、VEGFR2表达及NO含量的影响。（2）HUVEC验证。选择2.5 μM Dov作为阳性对照药物,评价40μM ST处理24 h对HUVEC的细胞活力抑制率及划痕愈合百分比的影响。（3）组学分析。采用UPLC-QTOF-MS非靶向代谢组学分析40 μg ST给药36 h主要调节差异代谢产物及通路。二、应用实例。采用本平台解决代表性研究实例的具体科学问题,阐明本平台的特色和优势。1.平台在中药研究中的应用。基于本平台和qCAM模型开展基于血管生成的寒热药性规律研究,以30味中药及生品莪术（广西莪术、蓬莪术、温郁金）、醋莪术为研究对象,初步揭示基于血管生成的中药寒热药性生物学内涵。（1）文献挖掘。采用CNKI国学宝典数据库进行单库古籍检索,检索公式为“FT=（‘血管’+‘生成’）*‘寒热’”,检索类型为“全文”,检索时间不限;采用CNKI国学宝典数据库进行跨库文献检索,检索公式为“SU=（‘血管’+‘生成’）*‘寒热’”,检索类型为“主题”,检索时间不限。（2）qCAM评价。采用t检验和卡方检验评价中药对qCAM的相对血管面积、微血管数、总血管数指标的影响差异。（3）平台验证。qCAM筛选:检测83.33 mg/mL生品莪术和醋莪术水煎液给药36 h后鹌鹑胚的微血管数、VEGFR2 mRNA、NO含量;HBMEC验证:检测83.33 μg/μL生品莪术和醋莪术水煎液处理24 h后40 μM t-BHP造模4 h损伤HBMEC的细胞活力、ROS水平;组学分析:采用GC-MS非靶向代谢组学分析83.33μg/μL醋莪术水煎液处理24h调节HBMEC的差异代谢产物及通路;采用GC-MS代谢组学指认主要差异成分作为醋莪术促血管生成的质量标志物。2.平台在中药活性成分研究中的应用。采用本平台揭示延胡索乙素（THP）对血管生成的干预作用及机制。（1）qCAM筛选。选择16μg天麻素作为阳性对照药物,评价16、32、64 μg THP 给药 36h 对 qCAM 微血管数、EN-face 面血管分布、VEGFR2mRNA的影响。（2）HUVEC验证。采用五种HUVECs细胞损伤模型,造模条件分别是7.2 μM H2O2 处理 12h、3.6 μM H2O2 处理 12h、11 μM 过氧化叔丁醇（t-BHP）处理 4h,5.5μM过氧化叔丁醇（t-BHP）处理4h、320μM的氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）处理12h,造成不同程度的细胞损伤,80μM选择天麻素作为阳性对照,检测20、40、80 μMTHP处理24 h对损伤HUVEC的细胞活力、划痕愈合百分比的影响。（3）组学分析。采用DESI-MSI/GC-MS非靶向代谢组学分析THP调节的差异代谢产物及通路。3.平台在化学药物研究中的应用。采用本平台揭示课题组前期合成药物BA-12对血管生成的干预作用及机制。（1）qCAM筛选。选择40 μg Dov给药36 h作为阳性对照药物,评价20、40、80 μg BA-12给药36 h对qCAM微血管数、VEGFR2 mRNA的影响。（2）HUVEC验证。选择2.5 μM Dov处理24 h作为阳性对照,评价1.25 μM、2.5 μM、5 μM的BA-12处理24h对HUVEC的细胞活力、划痕愈合百分比以及VEGFR2蛋白表达的影响;采用MTT、划痕实验及流式细胞术,选择2.5μMDov处理24h作为阳性对照,评价2.5、5、10 μM BA-12处理24 h对T24的细胞活力、划痕愈合百分比、细胞周期、凋亡率的影响。（3）组学分析。采用UPLC-QTOF-MS/GC-MS非靶向代谢组学分析BA-12调节的差异代谢产物及通路。结果:一、平台的建立1.方法学考察。（1）给药载体的优化。明胶海绵不影响受试药物,准确定量。（2）给药时间的选择。开窗后36h能降低结果假阳性率。（3）模型稳定性。不同批次qCAM微血管计数组间差异没有统计学意义。（4）模型重复性。与空白组比较,高剂量（20 μg）DG-15给药能显着（P<0.05）增加qCAM微血管数,与前期结果一致。2.平台流程示例。（1）qCAM筛选。与空白组比较,80 μg ST给药能显着（P<0.05）抑制qCAM微血管数、VEGFR2 mRNA表达及NO含量,血管内皮细胞间隙增大、线粒体肿胀。（2）HUVEC验证。与溶剂对照组比较,40 μM ST处理24h能显着（P<0.05）抑制细胞活力及划痕愈合百分比。（3）组学分析。ST通过调节甘油酯代谢（P<0.05）,抑制血管生成。二、应用实例1.平台在中药研究中的应用。（1）文献挖掘。味甘性热药多促进生脉,味苦性寒药多抑制;寒热相关eNOS通路参与血管生成。（2）qCAM评价。寒热中药对血管生成的影响差异显着（P<0.05）。（3）平台验证。与空白组比较,醋莪术（VZT,83.33mg/mL）水煎液能显着（P<0.05）促进qCAM微血管数、VEGFR2 mRNA表达及NO含量;与模型组比较,VZT处理24h能显着（P<0.05）保护损伤细胞活力及ROS过表达;VZT通过调控三羧酸循环等代谢通路（P<0.05）,促进血管生成。2.平台在中药活性成分研究中的应用。（1）qCAM筛选。与空白组比较,64μg THP能显着（P<0.05）增加qCAM微血管数及VEGFR2 mRNA表达水平。（2）HUVEC验证。与模型组比较,80 μM THP处理24 h能显着（P<0.05）保护损伤细胞活力及划痕愈合百分比。（3）组学分析。THP通过调节瓜氨酸向精氨酸的转化、影响精氨酸的生物合成（P<0.05）,促进血管生成。3.平台在化学药物研究中的应用。（1）qCAM筛选。与空白组比较,80 μg的BA-12能显着（P<0.05）抑制qCAM微血管数及VEGFR2 mRNA表达。（2）HUVEC验证。与溶剂对照组比较,5 μM BA-12能显着（P<0.05）抑制细胞活力及划痕愈合比,下调VEGFR2蛋白表达。（3）组学分析。BA-12通过调控GSH及甘油磷脂代谢（P<0.05）,抑制血管生成。结论:本课题采用多学科方法技术相互佐证,初步建立了适用于中医药的血管生成干预药物筛选及活性检测技术平台,基于三个连续的研究环节（qCAM筛选、HUVEC验证、组学分析）,提出本平台的基本原则、操作流程及指导原则。本平台的优势包括:实现对中药等复杂研究对象的定性/定量检测,是一种综合研究方法;通过获得受试对象干预血管生成时产生多维立体、实时快速的生物效应信息,实现活体实时检测;在体内外水平上采用多组学分析更准确地识别受试对象对血管生成促进/抑制作用及分子机理。将为相关新药的研发创制提供技术支持和方法学参考。

曾靖^[5]（2020）在《脑心通胶囊通过LXRα抑制NOX/ROS/TNF-α通路改善心梗后心室重构的研究》文中研究指明目的:确证肝X受体α（LXRα）通过抑制NOX/ROS/TNF-α信号通路改善心肌梗死后心室重构;观察脑心通胶囊通过抑制NOX/ROS/TNF-α信号通路改善心室重构和具有上调LXRα mRNA表达的作用;揭示脑心通胶囊通过上调LXRα进而抑制NOX/ROS/TNF-α信号通路从而改善心室重构。方法:1.通过冠状动脉结扎法建立急性心肌梗死大鼠模型。实验一:将大鼠随机分为假手术组、模型组、LXRα激动剂组、LXRα抑制剂组,每组8只。实验二:将大鼠随机分为假手术组、模型组、他汀组、脑心通低剂量组、脑心通中剂量组、脑心通高剂量组,每组8只。实验三:将大鼠随机分为假手术组、模型组、脑心通组、脑心通+LXRα抑制剂组,每组8只。假手术组和模型组给予生理盐水2mL/d灌胃,LXRα激动剂组给予LXRα激动剂SR9238[30mg/kg·d)]灌胃,LXRα抑制剂组给予LXRα抑制剂GSK2033[30mg/kg·d)]灌胃,他汀组给予阿托伐他汀钙片[5mg/kg·d)]灌胃,脑心通低、中、高剂量组分别给予剂量为[0.19g/kg·d)]、[0.38g/kg-d)]、[0.76g/（kg·d）]的脑心通溶液灌胃4周,脑心通+LXRα抑制剂组给予脑心通胶囊[0.38g/kg·d)]+LXRα抑制剂GSK2033[30mg/kg-d)]灌胃,时间为4周。2.检测指标:实验一、实验二、实验三4周后采用心脏彩超检查大鼠左室舒张末期内径（LVIDd）、左室收缩末期内径（LVIDs）、左室射血分数（LVEF）、短轴收缩率（FS）、每搏输出量（SV）、心输出量（CO）。HE染色观察心肌组织病理变化。Masson染色观察心肌纤维化程度。RT-QPCR检测心肌组织LXRα mRNA、还原型辅酶Ⅱ氧化酶（NOX）mRNA、活性氧（ROS）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA、Ⅰ型胶原（COLⅠ）mRNA、Ⅲ 型胶原（COL Ⅲ）mRNA 的表达。结果:1.实验一:①与假手术组比较,模型组和LXRα抑制剂组心脏超声示LVIDd、LVIDs显着升高（P<0.01）,EF、FS、SV、CO显着降低（P<0.01）,HE染色示心肌细胞大量消失、纤维结缔组织大量增生和炎性细胞浸润,masson染色示胶原纤维增生、心肌纤维化,心肌组织LXRα mRNA表达显着降低（P<0.01）,NOX mRNA、ROS、TNF-α mRNA、COL Ⅰ mRNA、COL Ⅲ mRNA表达显着增加（P<0.01）。②与模型组和LXRα抑制剂组比较,LXRα激动剂组心脏超声示LVIDd、LVIDs显着降低（P<0.01）,EF、FS、SV、CO显着升高（P<0.01）,HE染色示纤维结缔组织显着减少,masson染色示胶原纤维显着减少,心肌组织LXRα mRNA表达显着升高（P<0.01）,NOX mRNA、ROS、TNF-α mRNA、COLⅠ mRNA、COL Ⅲ mRNA表达显着降低（P<0.01）。2.实验二:①与假手术组比较,模型组和脑心通低剂量组心脏超声示LVIDd、LVIDs显着升高（P<0.01）,EF、FS、SV、CO显着降低（P<0.01）,HE染色示心肌细胞大量消失、纤维结缔组织大量增生和炎性细胞浸润,masson染色示胶原纤维增生、心肌纤维化,心肌织LXRαmRNA表达显着降低（P<0.01）,NOX mRNA、ROS、TNF-αmRNA、COLⅠmRNA、COLⅢmRNA表达显着增加（P<0.01）。②与模型组和脑心通低剂量组比较,他汀组、脑心通中剂量组和脑心通高剂量组心脏超声示LVIDd、LVIDs显着降低（P<0.01）,EF、FS、SV、CO显着升高（P<0.01）,HE染色示纤维结缔组织显着减少,masson染色示胶原纤维显着减少,心肌组织LXRα mRNA表达显着升高（P<0.01）,NOX mRNA、ROS、TNF-α mRNA、COLⅠ mRNA、COLⅢ mRNA 表达显着降低（P<0.01）。3.实验三:①与假手术组比较,模型组和脑心通+LXRα抑制剂组心脏超声示LVIDd、LVIDs显着升高（P<0.01）,EF、FS、SV、CO显着降低（P<0.01）,HE染色示心肌细胞大量消失、纤维结缔组织大量增生和炎性细胞浸润,masson染色示胶原纤维增生、心肌纤维化,心肌组织LXRαmRNA表达显着降低（P<0.01）,NOX mRNA、ROS、TNF-αmRNA、COL Ⅰ mRNA、COLⅢ mRNA表达显着增加（P<0.01）。②与模型组和脑心通+LXRα抑制剂组比较,脑心通组心脏超声示LVIDd、LVIDs显着降低（P<0.01）,EF、FS、SV、CO显着升高（P<0.01）,HE染色示纤维结缔组织显着减少,masson染色示胶原纤维显着减少,心肌组织LXRα mRNA表达显着升高（P<0.01）,NOX mRNA、ROS、TNF-α mRNA、COL Ⅰ mRNA、COL Ⅲ mRNA 表达显着降低（P<0.01）。结论:1.LXRα可以通过抑制NOX/ROS/TNF-α信号通路改善心肌梗死后心室重构。2.脑心通胶囊通过抑制NOX/ROS/TNF-α信号通路改善心室重构和具有上调LXRαmRNA表达进而改善心肌梗死后心室重构的作用。3.脑心通胶囊通过上调LXRα进而抑制NOX/ROS/TNF-α信号通路从而改善心室重构。

魏惠平^[6]（2020）在《当归醇提物对SHR血压及靶器官的影响及分子机制探讨》文中研究说明目的1.明确当归醇提物对SHR血压和靶器官的作用。2.基于Th17/Treg细胞平衡探讨当归醇提物干预SHR血压和靶器官损伤的分子机制。方法1.系统检索Cochrane、Web of science、PubMed、Embase、中国知网、万方、CBM七个数据库,纳入当归和含有当归的复方制剂治疗高血压及其并发症的相关研究。使用EXCEL 2013和SPSS 21对数据进行整合与处理,并通过气泡图来呈现结果。2.结合70%乙醇热回流法和喷雾干燥法制备当归有机酸;建立高效液相色谱法测定当归醇提物中阿魏酸含量的方法,通过阿魏酸含量控制当归醇提物的质量。3.动物分组:空白组9只WKY大鼠,模型组、阳性对照组（贝那普利）、当归醇提物低、中、高剂量组各9只SHR大鼠。空白组和模型组用等体积生理盐水,阳性对照组用贝那普利片10mg/d,当归醇提物低、中、高剂量组分别用对应剂量,进行灌胃,每日1次,连续8周。监测各组大鼠血压及其他生理参数;通过大鼠心脏彩超、HE染色、Masson染色评估心脏形态结构和功能;采用ELISA、Western Blot、RT-PCR实验方法检测血清中NF-κβ、VCAM-1、ET-1、ICAM-1、eNOS含量,并基于蛋白-基因层面监测RAAS系统和氧化应激成分的表达;评价当归醇取物对SHR肝肾功能的影响。4.基于网络药理学筛选当归治疗高血压及靶器官保护的信号通路。5.建立SHR模型,随机分为模型组、贝那普利组、当归醇提物高剂量组,并设空白组（WKY）。ELISA法检测血清炎症指标IL-6、CRP以及Th17、Treg表达因子IL-17、IL-23、IL-10、TGFβ1含量;流式细胞技术检测外周血中Th17、Treg细胞,并计算Th17/Treg比率;qPCR检测大鼠肾组织转录因子FoxP3和RORγt的表达;Western Blot检测大鼠肾组织p38、p-p38、FoxO1、p-FoxO1、SGK1和IL-23R表达。结果1.Evidence Mapping分析纳入的RCT研究,总有效性结局指标占69.4%,有效率与对照组相比具有统计学差异;纳入研究干预措施中所用的中药药性将其分为补气活血法、补气养血法、补气养阴活血法等八大类,大部分药性类型为活血化瘀方;纳入文献中治疗组与对照组在降压、靶器官保护,不良反应等方面具有统计学差异。2.当归醇提物的制备及质量控制当归醇提物呈棕褐色细粉。高效液相色谱条件为C18色谱柱,流动相由乙腈-0.1%磷酸溶液组成,梯度洗脱,洗脱时间为:0-30 min,A:95%-5%（v/v）,B:5%-95%（v/v）;检测波长为316 nm;该方法专属性强,精密度,回收率能满足体外分析要求;当归醇提物中阿魏酸平均含量为（151.525±0.002）%（μg/g）。3.当归醇提物对SHR的降压效果评价指标及肝肾功能影响血压及一般状况:给药2、4、6、8周后,贝那普利组、当归醇提物高剂量组收缩压和舒张压均低于模型组（P<0.01）。与模型组相比,贝那普利组与当归醇提物中、高剂量组大鼠活动积极,反应灵敏,睡眠少、体毛光泽,弓背表现少,体重升高。心脏形态结构和功能:（1）彩超:与空白组相比,模型组大鼠心脏LVEDD、LVESD减小,IVSTD及LVPWTD均明显增厚,EF、FS、E/A降低（P<0.05）。与模型组相比,贝那普利组LVEDD、LVESD增加,EF、FS、E/A提高,IVSTD、LVPWTD降低,高剂量当归醇提物明显增了LVEDD、LVESD、EF、FS、E/A,差异具有统计学意义（P<0.05）。（2）HE染色:与空白组比较,模型组SHR心肌细胞体积增大、心肌纤维走形紊乱、细胞核染色加深、细胞间隙增大伴明显的组织胶原沉积及炎症细胞浸润;与模型组相比,贝那普利组及当归醇提物高剂量组SHR心肌纤维走形整齐、细胞核染色正常,未见明显的炎症细胞浸润及细胞间质胶原沉积。（3）Masson染色显示:与空白组比较,模型组心肌组织间隙可见大量胶原纤维沉积、细胞间隙增宽、心肌细胞形态受压失去原有的梭形结构、血管周围大量的胶原沉积;与模型组比较,贝那普利及当归醇提物高剂量组心肌纤维间隙、血管周围胶原沉积明显减少、心肌细胞梭形结构清晰可见。血管内皮功能及RAAS系统指标:（1）与空白组比较,模型组大鼠VCAM-1、ET-1、ICAM-1蛋SHR白表达上升,基因表达明显上调,氧化应激因子eNOS蛋白表达下降,基因表达明显下调（P<0.01）;与模型组比较,贝那普利组及当归醇提物高剂量组VCAM-1、ET-1、ICAM-1蛋白表达下降,基因表达下调,而eNOS蛋白表达升高,基因表达上调（P<0.01）。（2）与空白组比较,模型组大鼠AT1-R蛋白表达升高,基因表达上调,AT2-R蛋白表达下降,基因表达下调（P<0.05）;与模型组比较,贝那普利组及当归醇提物组AT1-R蛋白表达下降,基因的表达下调,AT2-R蛋白表达升高,基因表达上调（P<0.05）。肝肾功能影响的初步评价:与空白组比较,实验各组大鼠血清生化指标ALT、AST、BUN、CREA均在同一水平,无统计学差异（P>0.05）。4.网络药理学探讨当归防治高血压的机制研究当归治疗高血压时主要涉及生物膜合成、脑肠轴发育、细胞内钙信号转导、平滑肌收缩、刺激cAMP合成、脂多糖反应、G蛋白耦连的信号转导等生物过程;MAPK/SGK1/FoxO1/RORγt/IL-23R信号通路可能通过调节Th17/Treg细胞的平衡发挥降低SHR模型血压及靶器官保护的作用。5.当归醇提物干预SHR血压和靶器官损伤的作用机制肾脏组织病理:与空白组比较,SHR模型组大鼠肾小球纤维化明显,肾小管上皮细胞肿胀,管腔变窄,肾小管周围的毛细血管受压,形态欠规则,间质肿胀,炎性细胞浸润;与模型组比较,贝那普利组、当归醇提物高剂量组大鼠肾小球纤维化减轻,肾小管形态规则,炎性浸润减少。血清炎症指标:（1）与模型组比较,贝那普利组、当归醇提物高剂量组IL-6、CRP的表达降低（P<0.05）。（2）与空白组比较,模型组大鼠Th17细胞百分比上升,Treg细胞百分比明显下降,Th17/Treg细胞比值上升;与模型组大鼠比较,贝那普利组、当归醇提物高剂量组Th17细胞百分比下降,Treg细胞百分比上升,Th17/Treg细胞比值明显下降（P<0.05）。（3）与模型组比较,贝那普利组、当归醇提物高剂量组IL-17、IL-23均降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（4）与模型组比较,贝那普利组、当归醇提物高剂量组IL-10、TGFβ1均降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。RORγt、FoxP3的表达:（1）与空白组相比,模型组RORγt表达降低（P<0.05）;贝那普利组、当归醇提物高剂量组RORγt表达均低于模型组（P<0.05）。（2）与空白组相比,模型组Fox P3表达升高（P<0.05）;贝那普利组、当归醇提物高剂量组Fox P3表达均升高于模型组（P<0.05）。p38/MAPK通路相关因子的表达:与空白组比较,模型组SHR肾脏组织中p-p38、SGK1、p-FoxO1和IL-23R的表达水平升高（P<0.05）;与模型组相比,贝那普利组、当归醇提物高剂量组大鼠肾脏组织中p-p38、SGK1、p-FoxO1和IL-23R的表达水平降低（P<0.05）。结论1.目前的研究现状提示当归对高血压治疗的降压及靶器官保护有效且不良反应较低,但其疗效有待更多的研究进一步证明。2.当归醇提物可以改善SHR一般情况,一定程度上降低SHR血压,能够逆转SHR心肌重塑、改善内皮功能,且无明显肝、肾功能影响。3.Th17/Treg平衡失调是SHR模型高血压发病的关键因素,当归醇提物高剂量组通过调节p38MAPK/SGK1/FoxO1/RORγt/IL-23R介导的Th17/Treg平衡,降低SHR血压,防治其靶器官损伤。

张缘会^[7]（2020）在《清肾颗粒对慢性肾衰竭湿热证患者及5/6肾切除大鼠内皮细胞炎性损伤的干预作用》文中认为目的:观察慢性肾衰竭（chronic renal failure,CRF）湿热证患者血e NOS、ET-1、IL-1β、MCP-1、v WF、TM的水平表达情况及清肾颗粒干预作用。方法:将64例CRF湿热证患者（预计60例,增加<15%的剔除和脱落病例数）作为研究对象,随机分为治疗组与对照组,各32例,试验过程中共剔除4例,完成临床试验共60例,两组各30例。选取30例健康人员作为正常对照组（选自我院健康管理中心,用来检测血清e NOS、ET-1及IL-1β、MCP-1及血浆v WF、TM水平）。受试两组均予降压、纠正贫血、调节钙磷代谢紊乱、中药保留灌肠等对症治疗。治疗组加用清肾颗粒,每天三次,一次一包,连续给药12周。12周后观察CRF患者血肌酐（Serum creatinine,Scr）、估算肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate,e GFR）、e NOS、ET-1及IL-1β、MCP-1及v WF、TM的变化情况并进行疗效评价。应用SPSS 23.0进行数据分析。结果:1.临床疾病疗效:治疗组总有效率（80.00%）,对照组（60.00%）,有明显差异（P<0.05）。2.中医证候疗效:治疗组总有效率（86.67%）,对照组（53.33%）,有明显差异（P<0.05）。3.中医证候积分:治疗前,两组积分值差异不明显（P>0.05）;连续给药12周后,治疗组积分呈明显下降（P<0.01）,且积分值低于同期对照.组（P<0.01）;对照.组前后积分值无明显变化（P>0.05）。4.肾功能（Scr、e GFR）:治疗前,两组肾功能差异不明显（P>0.05）;连续给药12周后,治疗组患者Scr显着下降（P<0.01）,e GFR显着升高（P<0.01）,较对照组比较,Scr水平降低,e GFR升高,差异明显（P<0.01）;对照组治疗前后肾功能无明显变化（P>0.05）。5.e NOS、ET-1水平比较:5.1治疗前:CRF湿热证患者e NOS水平明显低于正常组（P<0.01）,ET-1水平明显高于正常组（P<0.01）,治疗组与对照组之间差异无显着性（P>0.05）;5.2治疗12周后:两组受试患者血清e NOS水平均较前升高（P<0.05或0.01）,且治疗组升高幅度明显大于对照组（P<0.01）;治疗组与对照组患者血清ET-1水平均较前下降（P<0.05或0.01）,且治疗组降低幅度明显大于对照组（P<0.01）。6.IL-1β、MCP-1水平比较:6.1治疗前:与正常组相比,CRF湿热证患者IL-1β、MCP-1水平均明显升高（P<0.01）,治疗组与对照组之间差异无显着性（P>0.05）;6.2治疗12周后:两组受试患者血清IL-1β、MCP-1水平不同程度下降（P<0.05或0.01）,且治疗组降低幅度明显大于对照组（P<0.01）。7.TM、v WF水平比较:7.1治疗前:与正常组相比,CRF湿热证患者TM、v WF水平均明显升高（P<0.01）,治疗组与对照组之间差异无显着性（P>0.05）;7.2治疗12周后:两组受试患者血浆TM、v WF水平均较前降低（P<0.05或0.01）,且治疗组降低幅度明显大于对照组（P<0.01）。8.安全性观察:药物干预12周后,治疗组患者各项安全性指标无明显变化。结论:1.CRF湿热证患者血清e NOS水平降低、ET-1水平升高,血清IL-1β、MCP-1及血浆TM、v WF水平均升高;2.清肾颗粒可调节CRF湿热证患者血清e NOS、ET-1水平,降低血清IL-1β、MCP-1及血浆TM、v WF水平,改善血管内皮细胞炎性损伤;3.清肾颗粒可提高CRF湿热证患者生活质量及延缓肾衰进程,减轻血管内皮炎性损伤是其机制之一;4.本研究使用清肾颗粒期间未出现药物不良反应,证实该药良好的安全性。目的:检测5/6肾切除大鼠肾组织血管内皮损伤标志分子（e NOS、ET-1）及炎性细胞趋化因子（IL-8、MCP-1）的表达情况及肾脏病理变化;观察不同剂量清肾颗粒对5/6肾切除大鼠肾组织血管内皮细胞炎性损伤及肾纤维化的干预作用。方法:选用雄性SD大鼠72只,2月龄,清洁级,体重200±20g。适应性饲养1周后以单纯随机抽样分为6组,各12只,包括假手术组,模型组,清肾颗粒低、中、高剂量组,氯沙坦组。除假手术组外,其余60只大鼠均制作5/6肾切除模型。各组动物均在造模成功后第1天开始灌胃给药,清肾颗粒各组分别给予相应剂量清肾颗粒水溶液;氯沙坦组给予氯沙坦钾片混悬液;假手术组、模型组以生理盐水灌胃。每次4ml,每天1次,连续给药12周后,代谢笼收集24小时尿液,无菌采取腹主动脉血及左肾,检测血肌酐（serum Creatinine,Scr）、血尿素氮（Blood urea nitrogen,BUN）、24小时尿蛋白定量（24-hoururine protein,24h Upro）,计算内生肌酐清除率（Creatinine Clearance,Ccr）;RT-PCR法检测肾组织中一氧化氮合酶（Endothelial nitric oxide synthetase,e NOS）和内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）的m RNA表达水平;免疫组化法检测肾脏组织中白细胞介素-8（Interleukin8,IL-8）和单核细胞趋化因子-1（monocyte chemotactic protein-1,MCP-1）、e NOS、ET-1的阳性表达;免疫荧光三染检测CD31（血小板-内皮细胞粘附分子）+IL-8+MCP-1、CD31+e NOS+ET-1在肾组织中的表达情况;采用HE、MASSON、PAS染色在光镜下观察各组大鼠肾组织病理改变。结果:1.肾功能:1.1血Scr、BUN、24h Upro:模型组与各药物干预组大鼠血Scr、BUN及24h Upro水平较假手术组显着升高（P<0.01）;各治疗组大鼠血Scr、BUN及24h Upro水平较模型组均有所下降（P<0.01或0.05）;清肾颗粒各剂量组比较,高剂量组上述指标下降幅度最大（P<0.01）;清肾颗粒高剂量组上述指标较氯沙坦组均有所降低（P<0.05）,清肾颗粒中、低剂量组较氯沙坦组差异不明显（P>0.05）。1.2 Ccr:与假手术组比较,模型组与各药物干预组大鼠Ccr降低,差异显着（P<0.01）;各药物干预组Ccr较模型组均有所升高（P<0.01）;清肾颗粒各剂量组比较,高剂量组Ccr升高幅度最大（P<0.01）;与氯沙坦组比较,清肾颗粒高剂量组大鼠Ccr升高（P<0.05）,清肾颗粒中、低剂量组Ccr无显着性差异（P>0.05）。2.血浆TM、v WF:与假手术组比较,模型组与各药物干预组大鼠血浆TM、v WF水平显着升高（P<0.01）;与模型组比较,各药物干预组上述指标均有所降低（P<0.01或0.05）;清肾颗粒各剂量组比较,高剂量组上述指标降低幅度最大（P<0.01）;与氯沙坦组比较,清肾颗粒高剂量组大鼠血浆TM、v WF水平降低（P<0.05）;清肾颗粒中、低剂量组无显着差异（P>0.05）。3.肾组织e NOSm RNA、ET-1m RNA表达情况（RT-PCR）:3.1 e NOSm RNA:与假手术组比较,模型组与各药物干预组大鼠肾脏e NOSm RNA表达显着降低（P<0.01）;各药物干预组大鼠e NOSm RNA表达较模型组不同程度升高（P<0.01）;清肾颗粒各剂量组相比,高剂量组升高幅度最大（P<0.01）;与氯沙坦组比较,清肾颗粒高剂量组大鼠肾脏e NOSm RNA表达升高（P<0.05）,清肾颗粒中、低剂量组无显着差异（P>0.05）。3.2 ET-1m RNA:与假手术组比较,模型组与各药物干预组大鼠肾脏ET-1m RNA表达显着升高（P<0.01）;各药物干预组大鼠ET-1m RNA表达较模型组不同程度降低（P<0.01）;清肾颗粒各剂量组相比,高剂量组降低幅度最大（P<0.01）;与氯沙坦组比较,清肾颗粒高剂量组大鼠肾脏ET-1m RNA表达降低（P<0.05）,清肾颗粒中、低剂量组无显着差异（P>0.05）。4.肾组织e NOS、ET-1、IL-8、MCP-1免疫组化染色:4.1 e NOS:假手术组肾小球及部分肾小管可见棕黄色颗粒沉积;模型组沉积明显减少;相较于模型组,各药物干预组可见棕黄色颗粒沉积不同程度增加,以清肾颗粒高剂量组沉积最多,氯沙坦组次之。4.2 ET-1、IL-8、MCP-1:假手术组肾小球及部分肾小管均可见棕黄色颗粒沉积;模型组沉积明显增多;相较于模型组,各药物干预组可见棕黄色颗粒沉积不同程度减少,以清肾颗粒高剂量组沉积最少,氯沙坦组次之。5.肾组织中e NOS,ET-1,IL-8,MCP-1的平均密度:5.1 e NOS:与假手术组比较,模型组及各药物干预组大鼠肾组织e NOS平均密度明显降低（P<0.01）;与模型组比较,清肾颗粒各剂量组及氯沙坦组大鼠e NOS平均密度均有所增加（P<0.01）;..清肾颗粒各剂量组比较,高剂量组增加幅度最大（P<0.01）;与氯沙坦组比较,清肾颗粒高剂量组大鼠e NOS平均密度升高（P<0.05）,清肾颗粒中、低剂量组无显着性差异（P>0.05）。5.2 ET-1、IL-8、MCP-1:与假手术组比较,模型组及各药物干预组大鼠肾组织ET-1、IL-8、MCP-1平均密度均显着增加（P<0.01）;.清肾颗粒各剂量组及氯沙坦组上述指标较模型组均有所降低（P<0.01或0.05）;清肾颗粒各剂量组比较,高剂量组降低最显着（P<0.01）;与氯沙坦组比较,清肾颗粒高剂量组上述指标均有所降低（P<0.05）,清肾颗粒中、低剂量组上述指标无显着性差异（P>0.05）。6.肾组织CD31+e NOS+ET-1、CD31+IL-8+MCP-1免疫荧光三染表达情况6.1 CD31+e NOS+ET-1:CD31在假手术组呈明亮绿色荧光,模型组及各药物干预组呈不同程度下降;e NOS和ET-1在假手术组均有表达,分别呈橙色和红色荧光;e NOS在模型组表达明显减弱;各药物干预组e NOS表达较模型组不同程度增强,其中以清肾颗粒高剂量组表达最显着,可见明亮橙色荧光;ET-1在模型组表达显着增强,呈明亮红色荧光;各药物干预组ET-1表达较模型组不同程度减弱,其中以清肾颗粒高剂量组表达最弱。6.2 CD31+IL-8+MCP-1:CD31在假手术组呈明亮绿色荧光,模型组及各药物干预组呈不同程度下降;IL-8和MCP-1在假手术组均有表达,分别呈橙色与红色荧光;二者在模型组表达显着增强,呈明亮橙色与红色荧光;二者各药物干预组表达不同程度减弱,其中以清肾颗粒高剂量组表达最弱。7.肾脏病理改变:假手术组大鼠肾组织未见明显病理改变;模型组大鼠肾组织可见肾小球结构不完整,部分肾小球硬化,肾小管管腔扩张及上皮细胞空泡变性,甚至萎缩、坏死及脱落,肾间质区域增宽,可见大量炎性细胞浸润及蓝染胶原纤维分布;相较于模型组,各药物干预组上述病理改变均有所减轻,其中以清肾颗粒高剂量组及氯沙坦组减轻最为明显。结论:1.5/6肾切除大鼠存在肾组织内皮细胞活性因子表达失衡,炎性因子表达增加;2.清肾颗粒可显着降低5/6肾切除模型大鼠血Scr、BUN及24h Upro水平,升高Ccr,延缓肾功能损害进程;3.清肾颗粒可减轻5/6肾切除大鼠肾组织病理损伤程度;4.清肾颗粒可通过调节肾组织血管内皮衍生性舒缩因子e NOS、ET-1之间的平衡,抑制炎症因子IL-8、MCP-1的表达,从而减轻血管内皮炎性损伤,发挥其抗肾纤维化的作用。

陈星^[8]（2020）在《早期应用益气活血法防止脑出血大鼠血肿扩大及其作用机制的研究》文中指出目的:实验通过立体定位,以IV型胶原酶构建大鼠脑出血模型,分别予以生理盐水、生理盐水、益气活血法（人参、三七提取液）及活血化瘀法（丹红注射液）对各组进行干预。首先,观察脑出血24h时各组大鼠神经功能缺损、颅内血肿量及脑水肿的情况等,明确益气活血法是否适用于脑出血早期的治疗,以及该法是否具有防止脑出血早期血肿扩大、改善预后的作用。其次,探索益气活血法影响早期血肿扩张率、改善神经功能及预后可能的作用机制,为今后在脑出血治疗中的应用提供转化依据。方法:1.实验分组:将158只体重范围在300±20g的雄性SD级大鼠,随机分为假手术组（32只）、空白对照组（42只）、益气活血组（42只）及活血化瘀组（42只）;2.造模:通过脑立体定位仪立体定位基底节区（坐标:前囟点前0.2mm,右侧旁开3.5mm,深度为5.5mm）,尔后以微量注射泵控制微量注射器,缓慢向颅内推注1ul IV型胶原酶（0.5U/ul）;3.模型评价及给药:术后2小时依据bederson评估法对模型进行评估,确定造模成功后纳入研究,于造模3h后,以相应药物对各组大鼠进行干预(假手术组:给予等比生理盐水灌胃,10ml/Kg·d-1,空白对照组:给予等比生理盐水灌胃,10ml/Kg·d-1,益气活血组:给予人参、三七浓缩提取液灌胃,10ml/Kg·d-1,活血化瘀组:给予丹红注射液腹腔注射,2.0ml/Kg·d-1,本试验中各组大鼠一次性给药量均以一天用药量给药);4.凝血功能及血生化检测:模型评估完成后经由下腔静脉抽取血液进行检测,观察药物干预前各组间凝血和生化功能有无差异;5.神经功能缺损评价:ICH24h后依照改良神经功能缺损评分法对各组大鼠进行神经功能缺损评分,判定神经损伤情况（分值越高,神经功能缺损越严重）;6.脑血肿量测定:通过组织学检测测定血肿体积,对大鼠脑组织进行石蜡包埋切片,然后以多田法计算血肿量（血肿体积=Π/6×纵径*横径×切片厚度（mm）×切片数量）;7.脑水肿情况检测:ICH24h后分别测定患侧及健侧脑组织的干重及湿重,根据脑组织含水量（%）=（湿重-干重）/湿重×100%得出各组大鼠脑组织含水量;8.血脑屏障通透性检测:借助酶标仪制作伊文思蓝分光光度标准曲线,通过测定样本脑组织内EB含量,来判断血脑屏障通透性受损情况。利用透射电镜观察各组大鼠血脑屏障超微结构特征;9.脑组织苏木精-伊红染色:通过HE染色观察ICH24h后脑组织形态及神经细胞情况,同时测定变性细胞数,计算变性细胞指数;10.免疫组化检测:通过免疫组化检测ICH24h后血肿周围MMP-2及claudin-5含量;11.统计学分析:通过spass19.0统计软件进行统计学分析,各检测指标以均数加减标准差（?x±s）进行描述,以单因素方差分析比较两两之间的数据差异,以P<0.05作为具有统计学差异的标志。结果:1.凝血功能及血生化水平:在进行药物干预前,各组凝血功能及血生化水平没有显着差异（P>0.05）;2.神经功能缺损评价:假手术组无明显神经功能障碍,脑出血各组与假手术相比神经功能缺损显着（P<0.05）,ICH24h后,进行药物干预的两组与空白对照组相比,前两者神经功能评分分值均显着低于空白对照组（P<0.05）,而两实验组相比,益气活血组神经功能的改善情况更优于活血化瘀组（P<0.05）;3.血肿量测定:ICH24h后两实验组与空白对照组比较,两实验组颅内血肿量明显低于空白对照组,而两实验组相比,益气活血组防止血肿扩大的作用优于活血化瘀组（P<0.05）;4.脑水肿情况检测:健侧各组别间含水量未见明显差距,各组间对比P值均大于0.05,患侧脑含水量测定显示假手术组与其余各组相比,其含水量显着低于其他三组（P<0.05）,两实验组与空白对照组相比,前两者均可降低脑组织含水量,减轻脑水肿（P<0.05）,但两实验组相比,对脑水肿的影响并无显着差异（P>0.05）;5.血脑屏障通透性检测:ICH24h后,与脑出血各组比较,假手术组未见明显的EB渗出（P<0.05）,空白对照组EB渗出量显着高于两实验组（P<0.05）,益气活血组与活血化瘀组相比,两者EB含量无显着区别（P>0.05）。透射电镜超微结构显示假手术组神经元细胞胞核呈圆形,染色质分布均匀,胞浆中可见完整的线粒体、粗面内质网和核糖体等细胞器,血管内皮细胞各结构亦清晰完整且内皮细胞之间可见紧密连接结构,微血管基膜连续。空白对照组则见其神经元细胞凋亡,细胞体积缩小,核固缩,胞浆电子云密度增大,微血管基膜不连续等损害,两实验组上述情况则有明显改善,益气活血组更较为明显,但两者间差距不大;6.HE染色及变性细胞指数测定:脑出血各组均可见组织间隙扩大、水肿、神经细胞排列紊乱等,但益气活血组与活血化瘀组上述表现明显轻于空白对照组,两实验组对比,益气活血组又更轻于活血化瘀组。就变性细胞指数而言,脑出血各组均明显高于假手术组（P<0.05）,益气活血组与活血化瘀组变性细胞指数显着低于空白对照组（P<0.05）,益气活血组变性细胞指数显着低于活血化瘀组（P<0.05）;7.免疫组化检测:假手术组血肿周围claudin-5蛋白表达量要显着高于各实验组（P<0.05）,空白对照组和活血化瘀组血肿周围claudin-5蛋白表达量明显低于益气活血组（P<0.05）,而空白对照组与活血化瘀组相比claudin-5蛋白表达量没有显着差异（P>0.05）;假手术组仅有少量MMP-2表达,脑出血各组MMP-2表达量均显着高于假手术组（P<0.05）,与空白对照组相比,MMP-2在益气活血组及活血化瘀组的表达量均明显偏低（P<0.05）,且益气活血组MMP-2蛋白表达量又显着低于活血化瘀组（P<0.05）。结论:1.益气活血法及活血化瘀法均可适用于脑出血早期的治疗,二者均可降低血肿扩大的发生率,改善脑出血大鼠神经功能。2.实验中各项研究指标表明,益气活血法对于脑出血早期的治疗效果优于活血化瘀法（包括神经功能的改善、防止血肿扩大、降低脑组织变性细胞指数等）。3.益气活血法（人参、三七提取液）和活血化瘀法（丹红注射液）可能通过降低MMP-2蛋白的表达或促进claudin-5蛋白的表达,从而发挥其对脑组织及血脑屏障的保护作用,以降低早期血肿扩张的发生率,改善神经功能。

栾海燕^[9]（2019）在《针刺对“痰瘀毒”致动脉粥样硬化家兔腹腔巨噬细胞脂质沉积的影响》文中研究表明目的:通过观察针刺对动脉粥样硬化家兔血脂、血液流变学、炎症因子水平、氧化应激标志物、腹腔巨噬细胞脂质沉积情况的影响,探究针刺治疗动脉粥样硬化的作用机理,为针刺治疗动脉粥样硬化提供实验依据。材料与方法:26只雄性新西兰兔（2-3月龄,2-2.5kg/只）适应性喂养1周后,随机分为空白组和造模组,其中空白组7只,造模组19只。空白组以标准兔饲料喂养,造模组高脂喂养4周后,行颈动脉球囊损伤术,术后继续高脂喂养。4周后,随机从空白组和造模组中各取一只家兔,采用HE染色观察家兔颈动脉病理形态学变化,确认造模成功。然后将造模组余下的18只兔随机分为模型对照组、电针治疗组（AS模型+电针）、阳性对照组（AS模型+阿托伐他汀钙片）,每组6只。空白组不施加干预因素,以标准兔饲料喂养;模型组不予任何治疗,继续高脂喂养;电针组给予电针内关、足三里、关元穴处理,药物组给予含阿托伐他汀钙片的混悬液灌胃,治疗结束取材后,采用化学法检测血液中血脂含量;使用全自动血液流变仪检测血流变指标;应用酶联免疫吸附法测定血清CRP、TNF-α、IL-6、ox-LDL含量;硫代巴比妥酸法测定MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力;采用免疫组化法检测腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的蛋白表达,油红O染色观察腹腔巨噬细胞内脂质沉积情况。结果:1.HE染色结果模型评价:显微镜下观察颈动脉,可见空白组颈动脉结构正常,内皮完整,未见炎性细胞浸润及泡沫细胞形成;造模组动脉内膜明显增厚,内膜下可见大量泡沫细胞聚集,提示AS造模成功。治疗结果:与空白组比较,模型对照组动脉内膜明显增厚、结构受损,可见炎症细胞浸润,泡沫细胞聚集,粥样斑块形成;与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组粥样斑块面积明显减小。2.血脂水平与空白组比较,模型对照组TG、CHO、LDL-C均明显升高（P<0.01）;HDL-C明显降低（P<0.01）,与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组CHO、TG、LDL-C含量降低（P<0.01）,HDL-C明显升高（P<0.01）。3.血液流变学指标与空白组比较,模型对照组全血黏度（高切、中切、低切）,毛细管血浆粘度,全血还原粘度（高切、中切、低切）,红细胞聚集指数,红细胞压积均明显增高（P<0.01）。与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组全血黏度（高切、中切、低切）,毛细管血浆粘度,全血还原粘度（高切、中切、低切）,红细胞聚集指数,红细胞压积均明显降低（P<0.01）。4.炎症因子水平与空白组比较,模型对照组CRP、TNF-α、IL-6均明显升高（P<0.01）;与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组CRP、TNF-α、IL-6含量降低（P<0.05或P<0.01）。5.氧化应激标志物水平与空白组比较,模型对照组SOD含量明显降低（P<0.01）,ox-LDL、MDA含量升高（P<0.01）;与模型组对照比较,电针治疗组、阳性对照组的SOD含量升高（P<0.01）,ox-LDL、MDA含量降低（P<0.01）。6.腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的蛋白表达水平与空白组比较,模型对照组的腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1蛋白的表达均明显升高（P<0.05）;与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组的腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1蛋白的表达均明显降低（P<0.05）。7.腹腔巨噬细胞脂质沉积情况与空白组比较,模型对照组巨噬细胞内脂滴明显增多;与模型对照组比较,电针治疗组、阳性对照组巨噬细胞内脂滴明显减少。结论:1.针刺能有效调节动脉粥样硬化家兔血脂水平和血液流变学指标,有改善血脂代谢和血液流变学的作用。2.针刺能有效调节动脉粥样硬化家兔炎症因子水平和氧化应激标志物,有一定的抗炎、抗氧化作用。3.针刺能减少动脉粥样硬化家兔腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的蛋白表达,减少巨噬细胞内脂质蓄积,抑制泡沫细胞形成,从而治疗动脉粥样硬化。

高媛^[10]（2019）在《妇炎舒胶囊对醋酸致痛小鼠的镇痛作用及其机制的研究》文中指出目的:通过观察妇炎舒胶囊对醋酸致痛小鼠模型的扭体阳性率、扭体潜伏时间、扭体次数及镇痛率的影响,探讨妇炎舒胶囊的镇痛作用,同时观察小鼠血清前列腺素E2（Prostaglandin E2,PGE2）、一氧化氮（Nitric oxide,NO）及脑组织β-内啡肽（Beta endorphins,β-EP）的含量,进一步探讨妇炎舒胶囊的镇痛机制。方法:选取SPF级KM小鼠72只,常规饲养7天后按随机数字表随机分为妇炎舒低剂量组、妇炎舒中剂量组、妇炎舒高剂量组、康妇炎胶囊组、阿司匹林组、空白组,每组各12只。分组当日开始灌胃,每天1次,连续7天。末次灌胃结束60min后,各组腹腔注射0.9%冰醋酸以诱导小鼠扭体反应,记录注射致痛剂后20min内各鼠扭体潜伏期和扭体次数,计算扭体阳性率及镇痛率。观察扭体行为结束后每组随机抽取8只小鼠采集标本,通过ELISA法检测小鼠血清中PGE2、NO及脑组织中β-EP的含量。结果:1.与空白组比较,妇炎舒高、中剂量组均能够显着地延长小鼠扭体潜伏时间以及减少小鼠的扭体次数（P<0.05）,妇炎舒高剂量组的扭体潜伏时间明显的长于低剂量组（P<0.05）,其最低扭体阳性率最低为33.33%,最高镇痛率为95.26%,且妇炎舒中剂量组对小鼠扭体反应的抑制作用与阿司匹林组和康妇炎组无明显差别（P>0.05）。2.与空白组比较,妇炎舒高剂量组能够显着地降低小鼠血清中PGE2的含量（P<0.05）,且妇炎舒中剂量组降低PGE2的效果与阿司匹林组和康妇炎组之间无明显差别（P>0.05）。3.与空白组比较,妇炎舒高、中剂量组血清中的NO的含量均显着降低（P<0.05）,且妇炎舒中剂量组降低NO的效果与阿司匹林组和康妇炎组无明显差别（P>0.05）,妇炎舒高剂量组血清中NO明显低于低剂量组（P<0.05）。4.与空白组对比,各组小鼠脑组织中β-EP的含量并无明显趋势,各组间的差异亦无统计学意义（P>0.05）。结论:1.妇炎舒胶囊能够明显地抑制小鼠的扭体次数、缩短扭体潜伏时间,具有明显的镇痛作用。2.妇炎舒胶囊可能通过降低PGE2的含量发挥镇痛作用。3.妇炎舒胶囊可能通过降低NO的含量发挥镇痛作用。

二、一氧化氮合成阻滞大鼠模型血浆一氧化氮变化及益气化瘀法干预作用（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、一氧化氮合成阻滞大鼠模型血浆一氧化氮变化及益气化瘀法干预作用（论文提纲范文）

（1）基于肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质研究芪术颗粒抗肝纤维化机制（论文提纲范文）

（2）补阳解毒化瘀方改善慢性肝衰竭肝内微循环障碍的机制研究（论文提纲范文）

（3）健脾祛痰法治疗血脂异常的临床研究及作用机制研究（论文提纲范文）

（4）血管生成干预药物筛选及活性检测技术平台的初步建立与应用（一）（论文提纲范文）

（5）脑心通胶囊通过LXRα抑制NOX/ROS/TNF-α通路改善心梗后心室重构的研究（论文提纲范文）

（6）当归醇提物对SHR血压及靶器官的影响及分子机制探讨（论文提纲范文）

（7）清肾颗粒对慢性肾衰竭湿热证患者及5/6肾切除大鼠内皮细胞炎性损伤的干预作用（论文提纲范文）

（8）早期应用益气活血法防止脑出血大鼠血肿扩大及其作用机制的研究（论文提纲范文）

（9）针刺对“痰瘀毒”致动脉粥样硬化家兔腹腔巨噬细胞脂质沉积的影响（论文提纲范文）

（10）妇炎舒胶囊对醋酸致痛小鼠的镇痛作用及其机制的研究（论文提纲范文）

四、一氧化氮合成阻滞大鼠模型血浆一氧化氮变化及益气化瘀法干预作用（论文参考文献）

• [1]基于肝窦内皮细胞微尺度生物力学性质研究芪术颗粒抗肝纤维化机制[D]. 张强. 中国中医科学院, 2021(02)
• [2]补阳解毒化瘀方改善慢性肝衰竭肝内微循环障碍的机制研究[D]. 叶倩伶. 广西中医药大学, 2021(02)
• [3]健脾祛痰法治疗血脂异常的临床研究及作用机制研究[D]. 庞琳琳. 辽宁中医药大学, 2021(02)
• [4]血管生成干预药物筛选及活性检测技术平台的初步建立与应用（一）[D]. 崔鹤蓉. 北京中医药大学, 2021(02)
• [5]脑心通胶囊通过LXRα抑制NOX/ROS/TNF-α通路改善心梗后心室重构的研究[D]. 曾靖. 广州中医药大学, 2020(06)
• [6]当归醇提物对SHR血压及靶器官的影响及分子机制探讨[D]. 魏惠平. 甘肃中医药大学, 2020(08)
• [7]清肾颗粒对慢性肾衰竭湿热证患者及5/6肾切除大鼠内皮细胞炎性损伤的干预作用[D]. 张缘会. 安徽中医药大学, 2020(03)
• [8]早期应用益气活血法防止脑出血大鼠血肿扩大及其作用机制的研究[D]. 陈星. 成都中医药大学, 2020(02)
• [9]针刺对“痰瘀毒”致动脉粥样硬化家兔腹腔巨噬细胞脂质沉积的影响[D]. 栾海燕. 辽宁中医药大学, 2019(01)
• [10]妇炎舒胶囊对醋酸致痛小鼠的镇痛作用及其机制的研究[D]. 高媛. 成都中医药大学, 2019(04)