周阳[1]（2021）在《脂联素对冠脉搭桥术后静脉桥血管再狭窄的抑制作用及利用脂联素转基因家蚕蚕丝制备血管外支架的研究》文中进行了进一步梳理第一部分脂联素抑制冠脉搭桥术后静脉桥血管再狭窄的研究目的冠状动脉粥样硬化性心脏病（CAD）是如今患病人类死亡的重要原因,CABG是CAD的有效外科治疗手段。大隐静脉因取材方便、易于处理等优点而作为常用的桥血管之一,但其容易发生术后再狭窄或闭塞而难以维持通畅性。血栓形成、内膜增生、动脉粥样硬化等诸多机制导致大隐静脉再狭窄,如何预防再狭窄并维持其通畅性有着极其重要的临床意义。脂联素（ADP）是具有抗炎、抗动脉粥样硬化、抗凋亡、促血管生成作用的生物因子,由脂肪组织特异性分泌。最新研究表明,脂联素受体可在内皮细胞和成纤维细胞表面表达,并参与静脉移植术后再狭窄过程。本章拟通过建立大鼠自体静脉移植模型进而模拟CABG手术过程,使用不同剂量的ADP蛋白涂抹于移植静脉的血管表面,旨在探讨ADP对移植术后静脉桥血管再狭窄发生过程的影响。方法利用吻合袖带技术将SD大鼠自体颈静脉移植于颈动脉间,建立大鼠自体静脉移植模型。两组不同剂量的ADP（2.5μg和7.5μg）以30%Pluronic F-127凝胶作为载药材料,均匀涂抹于大鼠移植静脉血管表面,以不治疗组（仅自体移植）和涂抹30%Pluronic F-127凝胶组作为对照。观察并比较术后不同处理组间移植静脉管壁厚度,PCNA、VCAM-1和ICAM-1免疫组织化学表达及Western Blot检测等方法评价ADP对移植静脉的影响。结果各组手术均成功,术后28天采集标本对照组移植静脉增厚、管壁僵硬、周围组织粘连较明显,高剂量ADP组静脉无明显扩张,周围组织分离容易。术后从第3天起,ADP处理组移植血管内膜和外膜PCNA指数均明显低于对照组和胶水组（P<0.01）,移植后28天免疫组化检测表明ADP处理组移植静脉VCAM-1和ICAM-1表达明显下调（P<0.01）,Western Blot检测结果呈现相同趋势。术后28天,两组ADP处理组移植静脉的内膜、中膜和外膜厚度均低于对照组和胶水组（P<0.01）,且高剂量ADP相较于低剂量ADP抑制管壁增厚效果更明显（P<0.05）。结论本研究通过建立大鼠自体静脉模型,利用移植静脉表面局部涂抹不同剂量ADP的方式探究ADP对静脉再狭窄的抑制作用。结果显示,脂联素处理可达到抑制内膜和外膜细胞增殖的效果,并下调VCAM-1和ICAM-1的表达。该结果暗示ADP可减轻移植静脉内膜、中膜和外膜增生,并联合下调与再狭窄过程相关的VCAM-1和ICAM-1蛋白的表达,最终达到抑制移植静脉再狭窄的作用。本研究结果为深入研究ADP作用于血管再狭窄的过程奠定基础,为实验阶段研究血管再狭窄提供可行的操作方法。第二部分脂联素转基因家蚕品系的建立及蚕丝材料血管外支架制备目的为解决CABG术后移植静脉再狭窄问题,大量研究致力于明确再狭窄的机制及预防改善的措施。医学跨生物材料等学科交叉领域的兴起,为解决临床医学难题提供了新的视角。ADP在抑制静脉再狭窄方面的作用本研究前半部分已证明,此外,血管外支架也在抑制桥血管再狭窄维持通畅性方面具有重要意义。血管外支架可创造保护性环境促进静脉富含微血管的新外膜形成,还可限制移植静脉植入后的迅速扩张,并向血管施加对称性压力以减轻血管壁张力,形成层流并减少异常血流动力。联动ADP和血管外支架的作用共同抑制桥静脉再狭窄是本研究的主要问题。蚕丝优异的力学性能、良好的生物相容性和可调节的生物降解性等特点,符合防治移植静脉再狭窄的血管外支架材料应具备的条件。生物学领域,利用转基因技术以家蚕作为生物学反应器重组表达外源蛋白的技术日趋成熟。本章研究通过家蚕中部丝腺表达系统重组表达外源蛋白策略,构建可遗传的ADP转基因家蚕品系,高效、快速获得大量具有生物学活性的ADP;在此基础上,应用ADP转基因蚕丝制备非限制性ADP蚕丝血管外支架,并通过材料学研究方法分析其性能,为开发使用转基因蚕丝的血管外支架新型材料防治移植静脉再狭窄奠定研究基础。方法利用家蚕丝胶表达系统构建rh ADP转基因表达载体,通过显微注射技术注入Dazao家蚕蚕卵中,荧光筛选rh ADP转基因蚕茧。通过SDS-PAGE和Western Blot检测及定量rh ADP蛋白,获得稳定的rh ADP转基因家蚕品系。提取基因组以明确ADP基因的插入位点,通过免疫荧光实验检测rh ADP蛋白在蚕丝中的分布。调查rh ADP转基因家蚕品系的经济性状,比较rh ADP转基因蚕茧与WT蚕茧微观结构、二级结构及力学性能。提取并浓缩rh ADP蛋白,通过毒性实验、促细胞增殖及抗炎活性检测rh ADP的生物学活性。使用rh ADP转基因蚕茧作为材料制备血管外支架,并通过扫描电镜、FTIR、力学性能检测和吸水性检测对血管外支架进行表征。结果成功建立rh ADP转基因家蚕品系并在转基因蚕丝中检测到rh ADP蛋白的表达;通过Western Blot定量估算得到每克蚕丝中约含有7mg rh ADP蛋白,同时发现家蚕对rh ADP的表达存在修饰,蛋白存在聚体结构。鉴定rh ADP基因插入位点时发现ADP基因以单拷贝形式插入家蚕第10号染色体。从rh ADP转基因蚕茧中提取并浓缩蛋白,细胞水平实验结果显示家蚕表达的rh ADP蛋白无明显细胞毒性,可促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,并可抑制LPS诱导巨噬细胞raw264.7的炎症反应。rh ADP转基因蚕丝与WT蚕丝相比,微观结构、二级结构及力学性能无明显差异,且不影响蚕茧产量。成功制备rh ADP转基因蚕茧制备的血管外支架,扫描电镜显示外支架纵切面成蜂窝状结构,二级结构分析外支架β-折叠含量明显升高,力学性能检测显示血管外支架断裂强度达到0.14MPa,吸水性检测显示外支架吸水随着时间延长逐渐饱和,未发生明显形变,最终重量达到初始重量的100倍左右。结论本研究以家蚕作为生物反应器利用ser-1表达系统在家蚕丝胶层表达rh ADP蛋白,建立rh ADP转基因家蚕品系。同时提取浓缩获得大量具有生物学活性的rh ADP蛋白。此外,鉴于蚕丝具备作为血管外支架的条件,创新性的利用rh ADP转基因蚕丝材料研制出非限制性血管外支架,通过医学与生物材料交叉研究初探其可行性与应用性。
袁田月[2]（2020）在《调肝补肾活血方联合雌孕激素序贯疗法预防宫腔粘连TCRA术后再复发的临床研究》文中研究表明目的:通过临床研究,观察调肝补肾活血方联合雌孕激素序贯疗法对预防宫腔镜下分离术后宫腔粘连再复发的临床疗效,拟阐释调肝补肾活血方的疗效及其作用机制。方法:选择40例肝郁肾虚血瘀型宫腔粘连患者,在月经干净后3-5天行宫腔镜下粘连分离术,术后随机分为试验组20例和对照组20例。试验组给予调肝补肾活血方联合补佳乐+地屈孕酮序贯疗法治疗3个月经周期,对照组予补佳乐+地屈孕酮的序贯治疗方法治疗3个月经周期。观察2组患者治疗前后的月经及中医证候改善状况,IL-6、APTT、FIB、PI、RI、子宫内膜厚度、宫腔镜下宫腔粘连评分等的变化情况,来评估调肝补肾活血方的疗效,探讨其作用机制。结果:（1）治疗后2组的总有效率分别为95%及75%,试验组明显优于对照组;经量、经期、色质、中医证候总有效率,试验组分别为80%、95%、85%、90%,对照组为75%、60%、75%、70%,试验组明显优于对照组,中医证候积分均有显着下降,且试验组明显优于对照组,有显着性差异（P<0.05）;（2）治疗后试验组IL-6较前下降,对照组疗效不显,组间比较有显着性差异（P<0.05）;（3）治疗后2组APTT均较前延长,试验组明显优于对照组,有显着性差异（P<0.05）:治疗后2组FIB均较前下降,试验组明显优于对照组,有显着性差异（P<0.05）;（4）2组治疗后子宫内膜厚度均较疗前增厚,但组间比较无统计学意义（P>0.05）;2组治疗后PI、RI均较前降低,试验组明显优于对照组,有显着性差异（P<0.05）;（5）宫腔镜下IUA评分:治疗后2组宫腔镜评分均较前下降,试验组明显优于对照组,有显着性差异（P<0.05）。结论:结合研究结果认为调肝补肾活血方联合雌孕激素序贯疗法对宫腔粘连的临床疗效显着,且作用较单纯的雌孕激素序贯疗法有明显优势。调肝补肾活血方可以增加患者的月经量,改善其临床症状,可以降低炎症指标,改善患者凝血功能,恢复子宫血液运行,达到帮助子宫内膜修复、恢复宫腔形态的目的,治疗过程中无明显不良反应,因此认为调肝补肾活血方安全有效,是治疗和预防宫腔粘连的有效措施。
李卫华[3]（2019）在《转录协同因子SRC-3促进动脉粥样硬化及其机理研究》文中指出转录协同因子类固醇激素受体辅激活子3（Steroid Receptor Coactivator 3,SRC-3）是p160辅激活子家族一员,它通过与多种核受体及其它转录因子相互作用,进而增强其靶基因的转录活性。虽然SRC-3的许多生理和病理作用已经被揭示,但是它在动脉粥样硬化中的作用未见报道。而动脉粥样硬化是一种大动脉慢性疾病,是心肌梗死、脑卒中和外周动脉粥样硬化的主要原因。最近,我们发现SRC-3在SRC3+/-ApoE-/-小鼠主动脉根处的血管平滑肌细胞和内皮细胞中存在高表达,并且在喂高脂食物后主动脉中SRC-3的蛋白水平显着上调,提示SRC-3可能参与动脉粥样硬化过程。在本研究中,我们比较分析SRC-3-/-ApoE-/-小鼠和SRC-3+/+ApoE-/-小鼠喂高脂食物后主动脉的病理变化来研究SRC-3在动脉粥样硬化中的作用。我们发现喂高脂食物12周后,与SRC-3+/+ApoE-/-小鼠相比,SRC-3-/-ApoE-/-小鼠主动脉和主动脉根处表现出较少的动脉粥样硬化斑块和较小的坏死核心,而且SRC-3-/-ApoE-/-小鼠主动脉根处病灶部位纤维帽的厚度和胶原蛋白含量要显着大于SRC-3+/+ApoE-/-小鼠。虽然SRC-3-/-ApoE-/-小鼠和SRC-3+/+ApoE-/-小鼠主动脉根处病灶部位的内皮细胞、中性粒细胞和CD4+T细胞并没有显着变化,但是SRC-3-/-ApoE-/-小鼠主动脉根处病灶部位巨噬细胞和血管平滑肌细胞的浸润显着减少,进一步研究发现SRC-3-/-ApoE-/-小鼠主动脉根处病灶部位内皮细胞中粘附分子ICAM-1和VCAM-1的表达以及促炎因子IL-6和IL-1β水平显着减少。另外,SRC-3-/-ApoE-/-小鼠原代腹腔巨噬细胞形成泡沫细胞的能力要显着低于SRC-3+/+ApoE-/-小鼠,进一步研究发现敲低SRC-3能显着降低巨噬细胞中CD36的表达。另一方面,SRC-3-/-ApoE-/-小鼠血浆和肝脏中甘油三酯的含量显着降低,而且SRC-3的缺失能显着降低肝脏中CD36的表达。在分子水平,我们发现SRC-3能协同AP-1在转录水平上促进CD36的表达。另外,SRC-3在人含斑块主动脉组织标本中存在高表达,而且SRC-3抑制剂蟾毒灵缓解动脉粥样硬化。因此,这些结果表明SRC-3能够通过促进炎症,增加巨噬细胞的浸润,泡沫细胞的形成等途径促进动脉粥样硬化。
严名扬[4]（2018）在《从气的时序性事态认知探讨骨骼肌撞击伤模型纤维化进程的特点》文中研究指明背景:撞击伤是临床上最常见的急性骨骼肌损伤（Acute skeletal muscle injury,ASMI）类型之一。因撞击损伤时的环境、外力大小方向、肢体状态等因素的不同,骨骼肌撞击伤的发病机制仍尚未明确阐述。尤其是并发于骨折、神经血管损伤时,骨骼肌损伤常常被忽视,或者被置于次要的地位;而骨骼肌损伤后的不完全性修复,如纤维化、慢性炎症等,常常导致肢体疼痛、功能恢复不全等后遗症,成为临床上面临的主要难题和挑战。而对骨骼肌撞击伤发病机制的研究需要建立在良好的撞击伤模型基础上。大量的实验模型被建立以适用于不同的研究目的,但对骨骼肌撞击伤系统模拟、描述、评价的实验模型尚很不足,尤其是对撞击伤本身致病的力学撞击反应的相关研究尚缺乏。中医药治疗跌打损伤（骨骼肌损伤）具有悠久的历史和丰富的实践经验,并建立了完善的学科体系。针对ASMI,中医骨伤科学以气血为病机核心的修复特点,常采用三期辨证的治疗策略;并以“调和气血”为原则,“即筋伤辨治,气血为要”。但在不同损伤程度的ASMI模型中,以及机体表现出的在炎症反应、增殖修复和替代塑性等阶段的差异性,就要求中医药的辨证施治对“气”在此语境中展现出其理论学说的诠释和临床决策的指导作用;为中医药的治疗策略和现代化提供话语角度,即为骨骼肌损伤的认知、治疗提供中医药的现代性思路,而不是相当于现代技术的被“悬置”。目的:探讨“气”理论的现代性话语体系,为中医药诊治疾病提供新的认知角度。通过分析外力作用于大鼠腓肠肌的撞击反应、力学传导和组织损害的关系、以及腓肠肌不同程度损伤模型修复过程中的病理组织学特点和纤维化进程等方式,建立稳定有效的骨骼肌撞击伤模型系统。利用对撞击伤模型系统的描述与评价,在以“气”为核心的病机中,探讨骨骼肌损伤的中西医结合治疗在认识、诊断等层面的交汇点;并以此建立的骨骼肌撞击伤模型系统为进一步的实验研究提供理论和实践依据。方法:理论探讨:从“气”的语词指称的认知模式出发,使用分析哲学的语词指称和现象学的意向性还原等方法,结合“气”作为汉语词所具有的自身特点,探讨“气”语词的所指形式和内容,并以此角度尝试对气的相关理论进行现代性的语言诠释。实验研究:①测量并比较大鼠腓肠肌与胫腓骨的解剖关系,并据此探讨大鼠小腿的几何动力学特点;根据大鼠小腿的解剖动力学特点,开展木质支持盾的设计和撞击伤造模系统的技术改进。②通过改进重物坠落技术（Drop-mass technique,DMT）,根据不同参数的撞击能量检测撞击能量和撞击反应（包括:峰值力、最大速度、脉宽、位移、冲量和吸收能量等变量）的严重程度是否存在关联以及如何关联,明确撞击伤造模系统的稳定性和撞击反应的力学特性。③使用大鼠腓肠肌模型,探讨不同参数的致伤能量（1.18J:G1kg24cm,2.35J:G0.5kg48cm、G1kg24cmm、G2kg12cm,4.71J:G1kg48cm）诱发的撞击反应、力学特点和腓肠肌损伤的严重程度是否存在关联以及如何存在关联;并探讨腓肠肌在离体和在体情况下撞击反应的差异。④通过在不同时间点（撞击伤后第1、3、7、14、35、56天）观察损伤后大鼠肢体的功能恢复情况、肌纤维损伤的组织形态学变化、以及纤维化程度等方面,结合撞击伤的力学特点,探讨不同严重程度的腓肠肌撞击伤模型在组织修复、肌纤维再生、功能恢复等时序性过程中的事态性差异。结果:理论探讨:通过对“气”语词指称的事态性分析,阐述了气在传统思维下“象-事-是”对应“语词-意义-指称对象”的认知模式;“气”作为时序性事态的把握主要表现为时序性现象流和空间性体验流的组织形式,并以此形成客体对象,如基本事态和复杂事态。实验研究:①实验造模的腓肠肌肌腹正处于大鼠胫腓骨几何形态和力学传导的薄弱区域;并且大鼠小腿存在多个肌性和骨性的动力学三角结构为骨骼肌创伤时提供了缓冲空间;据此本研究改进了的DMT,设计了包括木质支持盾的撞击伤造模系统。②以木质平台为被试对象,分析了在不同程度撞击反应中各变量的差异和相互关系。证实了撞击的峰值力决定撞击间期（P<0.05）,脉宽与撞击强度呈负相关（P<0.05）;冲量是反映撞击强度最有效的指标（P<0.05）,而吸收的能量最能体现撞击对被试的破坏程度（P<0.05）。同时,撞击反应强度遵循能量和动量守恒定律,并具有自身特点;相比速度的增加,撞击重物的质量对撞击结果影响更大。③伴随腓肠肌撞击伤造模损伤能量的升高,撞击反应越强烈,骨骼肌损伤的程度越严重（P<0.05）。根据肌内膜、肌束膜、肌外膜和深筋膜等膜性结构的损伤情况,结合外力传导的分布特点以及损伤的形态学观察,腓肠肌损伤归纳出三级不同损伤程度（中度损伤模型根据肌纤维裂口情况表现出三类亚型）,和力学传导分布（挤压区、剪切区、牵张区）对应着损伤分区（核心区、交替区、边缘区）等特点。在本撞击伤造模系统中,腓肠肌在体比离体的刚度更高、撞击反应稍强烈（P<0.05）,但两者的组织损伤无差异（P>0.05）。④随着腓肠肌撞击伤模型损伤程度的加重,在伤后不同的时间区间内的肢体运动功能恢复情况变差（P<0.05）、病理组织学改变以及纤维化程度越严重（P<0.05）,说明了组织微观损伤和撞击反应、力学传导特点、以及解剖观察的对应关系。对骨骼肌撞击伤的分区分度描述在损伤修复过程中表现出不同的时序性差异（P<0.05）,说明了重度损伤模型核心区存在的“二次修复”反应是导致功能恢复不全的病理性修复的关键。同时,重度损伤模型的病理性修复结局呈现出纤维化、脂肪替代、萎缩变性等类型。结论:1.以时序性事态为内涵的“气”概念性指称使与“气”相关的术语在同一视角下呈现层次性的外延体系,并为中医理论的研究和应用提供了一个新途径。2.基于DMT改进的撞击伤造模系统具有稳定性的撞击反应的力学特性;撞击能量参数的不同决定了撞击反应的独特性。3.该撞击伤造模系统复制的腓肠肌撞击伤模型稳定、准确和成熟,并有效排除了骨骼因素。同时,肌肉张力和刚度的升高能有效降低撞击反应,具有一定的保护作用。4.结合外力传导的分布和分区,更有利于对骨骼肌损伤程度的描述和评估,并为撞击伤模型系统提供不同层次的模型表征,如肌肉的断裂、肌束的断裂、肌纤维的断裂、胶原纤维的撕裂、弹性变形和微结构损伤等。这些为对骨骼肌不同程度损伤的深入研究提供了理论基础和实验依据。5.本实验发现了本撞击伤造模系统存在的“二次撞击”及其特点,为相关的具有二次撞击的各种损伤,提供了理论依据和实践模型。同时,本实验还发现了重度损伤模型表现出的“二次修复”和慢性炎症病灶区等特点,为临床相关研究提供了实验依据。6.通过对腓肠肌撞击伤后肢体运动功能的时序性评价、病理组织学的时序性描述、胶原纤维程度的时序性判断,使实体在相关范畴内的时序性事态的把握被呈现出来。使“气”的时序性事态认知理论在实践中得到应用、验证,并为中医药基础理论融入现代化研究提供一个可参考的角度和行之有效的科学途径。本实验为从“气”治“伤”提供新的认识途径和诠释角度;并结合不同程度损伤的修复差异,试图阐述“气机”不畅的丰富内容,为骨骼肌损伤后的分区分型辨证论治提供理论和实验基础。。最后通过对“气”语词指称的事态性分析,探讨ASMI修复过程在中医“气”学理论中的话语诠释和认知方式。
崔园园[5]（2018）在《Ti表面固定SEMA4D/heparin构建抗凝及促原位内皮化微环境的研究》文中研究指明当前经皮冠状动脉介入术使用主流是不可生物降解的金属支架,随着心血管疾病患者逐年增加,短期和未来较长时期内金属基药物洗脱支架（DES）依然会被广泛使用,虽然DES不断优化使得植入后并发症减少,但依然存在晚期血栓和再狭窄的情况,直接影响患者生活质量,甚至威胁患者生命安全。进一步优化DES,提高其抗凝性能同时保证支架有效快速内皮化是解决术后并发症的关键。本论文主要研究钛基血管支架材料表面的抗凝促原位内皮化修饰,肝素（heparin）引入主要用于材料植入后前期抗凝,而因子SEMA4D引入用于诱导周围内皮细胞（EC）向材料上的迁移、粘附和增殖,便于材料表面快速内皮化。为进一步优化原位内皮化的速度,在SEMA4D/heparin材料抗凝促原位内皮微环境构建成功后,进一步引入对内皮祖细胞（EPC）具有动员、捕获、促增殖和分化的趋化因子CXCL12（即SDF-1α）来模拟机体损伤修复环境下多趋化因子协同促进作用,此外对SEMA4D/heparin微环境动态捕获EC和巨噬细胞（MA）的机理进行了探索,同时对多趋化因子促进原位内皮化的作用机理进行了初步探讨。论文主要内容如下。首先,在Ti材料表面构建SEMA4D/heparin微环境,并采用多种检测手段（如FTIR、XPS、AFM、水接触角及粒径及电位分析等）对微环境的理化性进行了表征。FTIR和XPS结果显示SEMA4D构建浓度增加将增加材料表面肝素的量,增加SEMA4D/heparin复合物的有效负载量,同时增加材料表面肝素总负载量。其次,进一步通过生物学方法对SEMA4D/heparin微环境的血液相容性、细胞相容性及免疫相容性等生物相容性进行评价。SEMA4D/heparin微环境能抑制血小板粘附和激活,抑制纤维蛋白原粘附和变性,同时能够有效延长aPTT及TT,具有较好的抗凝血作用;SEMA4D/heparin微环境能促进EC的增殖及趋触、趋化性迁移,SEMA4D构建浓度越高EC增殖和迁移的效果越好;SEMA4D/heparin微环境能促进MA分泌免疫抑制因子IL-10,减少促炎症因子IL-6及TNF-α的分泌,具有较好的正向免疫调节作用,体内实验表明SEMA4D/heparin微环境能够有效促进原位内皮化。再次,通过模拟多因子调控的机体损伤修复原理,引入因子CXCL12优化SEMA4D/heparin微环境,构建SEMA4D/CXCL12微环境并对其理化性和生物相容性进行评估。结果表明虽然SEMA4D/CXCL12微环境修饰表面血小板激活程度得到优化,但整体血液相容性要略微低于SEMA4D/heparin微环境修饰的表面;相对于SEMA4D/heparin微环境,SEMA4D/CXCL12微环境对ECs趋化性迁移减弱,但是能够进一步增强EC在材料表面的粘附和增殖,并促进EPC的捕获,使原位内皮化进程进一步提高。最后,采用石英晶体微天平（QCM-D）技术研究动态条件下EC和MA两种血液循环细胞在SEMA4D/heparin微环境表面粘附铺展,探讨了不同结构的SEMA4D/heparin复合物对细胞生理的调控及多趋化因子对原位内皮化的调节作用。动态条件下EC在SEMA4D/hepaim微环境表面的粘附和铺展由材料表面肝素决定,而MA在SEMA4D/hepaim微环境表面的粘附和铺展与材料表面SEMA4D量相关;SEMA4D/hepaim复合物结构不同导致内皮化过程中细胞生理反应不同,4D50样品上的SEMA4D/hepaim复合物主要调节CD72受体的细胞生理,4D100样品上的SEMA4D/hepairn复合物主要调节PLEXINB1受体的细胞生理;多趋化因子调控下的原位内皮化主要取决于因子所动员细胞的活性,SEMA4D/CXCL12共修饰的微环境中SEMA4D和CXCL12因子具有协同促进作用,使得修饰材料能够实现快速高效的原位内皮化,但CXCL12对原位内皮化起着主导作用。本工作基于抗凝促原位内皮化设计理念,并模拟机体损伤后的仿生修复原理,在支架材料表面成功构建了抗凝促原位内皮微环境,对材料表面抗凝修饰具有重要的理论价值和实际意义。
张静[6]（2017）在《丹参有效成份配伍配比对血管外膜成纤维细胞和自发性高血压大鼠模型的作用及其机制研究》文中进行了进一步梳理第一部分均匀设计与正交设计联用筛选丹参有效成份抑制成纤维细胞增值的最佳配伍配比目的:丹参是我国用于治疗心脑血管疾病的传统中药,包含4种主要水溶性成份:丹参素（DSS,S）、丹酚酸A（Sal-A,A）、丹酚酸B（Sal-B,B）和原儿茶醛（PAL,P）,我们简称为（SABP）。大量的研究已经证实,每种成份都可通过不同的作用机理起到心血管保护作用。血管外膜成纤维细胞（adventitial fibroblast,AF）作为一个生物学处理中心从外向内（outside-in）调节血管的结构和功能,血管在应答应激和损伤的过程中,AF首先被快速激活,通过本身改编而显示不同功能和结构的行为,被视为血管应答的始动因素。目前中药有效成份配伍研究已经成为中药创新研究的一种新模式。因此,我们设想运用均匀设计和正交设计联合应用的方法,通过观察其对AF增殖的作用,找出丹参4种主要水溶性成份的最佳配伍配比关系。方法:本实验选用成年Sprague Dawley（SD）大鼠,培养其胸主动脉外膜成纤维细胞,运用MTT方法,观察药物对其增殖的抑制作用,应用酶标仪读取结果并计算抑制率。筛选步骤如下:1、初步筛选注射用丹参（冻干）粉（salvia miltiorrhiza lyophilized powder,SMLP）及丹参的四种有效成份各自的有效应用剂量范围。2、采用均匀设计和正交设计联用的方法,进行成份剂量和配伍的筛选。3、把实验得到的最优组合再次排列组合进行验证。结果:1药物浓度初筛结果:每种药物对AF的抑制率最显着的有效浓度范围是:Sal-A,Sal-B,DSS的有效浓度范围都是（10-3 mol/L,10-4 mol/L,10-5 mol/L）,PAL的有效浓度范围是（10-2 mol/L,10-3 mol/L,10-4 mol/L）,但是SMLP对血管外膜成纤维细胞无明显的抑制作用,且各浓度之间没有统计学差异;2均匀设计实验结果:结合初筛药物浓度实验得到的结果,四个成份各选取有效剂量范围内6个不同浓度,然后按照均匀设计表,即4因素6水平均匀表u6（64）安排实验,结果显示第3组是最有效的配伍组合,抑制作用最显着,有统计学差异。即:s3（10-4mol/l）,a6（10-6mol/l）,b2（5×10-4mol/l）,p4（5×10-4mol/l）;3正交设计实验结果:结合均匀设计实验得到的结果,在最优的处理中,根据各成份对应剂量相距较近的范围内,再次选择低、中、高3个不同剂量,对dss、sal-a、sal-b、pal四个成份的有效剂量低、中、高进行正交设计实验研究,选择l9（34）正交表,结果显示第6组是抑制作用最显着的配伍组合,具有统计学差异。即:s2（1.5×10-4mol/l）,a3（7×10-6mol/l）,b1（3×10-4mol/l）,p2（5×10-4mol/l）;4将丹参4种成份再次进行排列组合,进一步验证最佳配伍配比。根据均匀设计和正交设计的结果,为各成份确定一个最适宜有效剂量,对dss、sal-a、sal-b、pal四个成份再次排列组合:s、a、b、p,sa、sb、sp、ab、ap、bp、sab、sap、sbp、abp、sabp共15个,再次考察各种配伍组合对af增殖的影响,结果显示sabp组的抑制率最大,为最佳配伍配比组合。结论:本实验运用均匀设计和正交设计联合应用的实验方法,筛选出丹参的四种主要水溶性成份（dss、sal-a、sal-b、pal）,抑制血管外膜成纤维细胞增殖的最佳配伍配比关系和浓度,即s（1.5×10-4mol/l）,a（7×10-6mol/l）,b（3×10-4mol/l）,p（5×10-4mol/l）,比例为（150︰7︰300︰500）,且四种成份之间还存在一定的协同作用。第二部分丹参有效成份的最佳配伍配比对自发性高血压大鼠血管重构的保护作用目的:血管重构（vascularremodeling,vr）是高血压病心、脑、肾等靶器官损害的共同病理基础,主要表现有血管壁中层平滑肌细胞（vascularsmoothmusclecell,vsmc）肥大、增生及细胞外基质（extracellularmatrixc,ecm）增多,外膜增厚不规则,导致管壁增厚变硬、顺应性下降等,随即导致血管功能的异常。血管紧张素Ⅱ（angiotensin,ang-ii）和内皮素（endothelin,et）是主要的缩血管因子,α-sma是vsmc和af转化成肌成纤维细胞（migratorymyofibroblasts,mf）的标志物,Ⅰ型胶原蛋白（collagentypeⅠ,col-Ⅰ）是ecm的主要成份,它们都与血管结构改变密切相关。本实验选用与人类高血压发病机制相似的自发性高血压大鼠为模型（spontaneouslyhypertensiverats,shr）,观察sabp对其血压的影响以及血管重构的作用。方法:实验动物随机分为5组:（1）正常对照组（wky）;（2）模型组（shr）;（3）西药培哚普利（pd）组（shr）;（4）注射用丹参（冻干）粉组（salviamiltiorrhizalyophilizedpowder,smlp）组（shr）;（5）丹参四成份最佳配伍配比（sabp）组（shr）。每天腹腔注射给药:smlp（1g/kg/d）;pd（0.4mg/kg/d）;sabp（dss:5mg/kg/d,sal-a:0.233mg/kg/d,sal-b:10mg/kg/d,pal:17mg/kg/day）;shr和wky对照组给予等量的生理盐水。给药前及给药期间,每2w测量一次动物尾动脉血压。给药8w后,留取每只动物的血浆及胸主动脉,用于酶联免疫吸附剂测定（elisa）、常规he染色、免疫组织化学染色、r-tpcr和westernblot实验。结果:1sabp可显着降低shr收缩压,但最终并没有降至正常水平。sabp组与pd组在整个给药过程中,都使血压稳步下降。两组相比降压效果无明显差别。smlp无明显降压效果,其与shr组相比无明显差别,无统计学意义;2sabp可显着降低shr血浆中ang-ii和et-1的含量。pd组ang-ii、et-1下降效应与sabp组类似。smlp组血浆中ang-ii和et-1含量与正常shr组无明显变化,无统计学差异;3sabp可显着改善shr胸主动脉重构。he染色观察显示:shr组胸主动脉内皮细胞偶有脱落,vsmc肥大增生明显,外膜及管壁显着增厚;sabp组胸主动脉内皮细胞未脱落,无血细胞粘附,vsmc增生不明显,管壁无明显增厚;pd组血管病理形态观察与sabp组和wky组相似。smlp组与shr组相似;sabp组较shr主动脉管壁厚度（mediathickness,mt）、管壁厚度/半径（vesselwallthickness/radius,vt/va）、外膜厚度（adventitiathicknessofthethoracicaorta,at）均显着降低,此效应与pd组相似。而smlp组对动脉结构的作用相比shr组无明显变化;4免疫组化观察显示:sabp组较shr组col-i和et-1的表达显着降低,与wky组相比较,col-i和et-1表达无明显变化。但是smlp组col-i和et-1较shr组比较,变化无统计学差异;5sabp可明显降低shr胸主动脉上col-i、et-1和α-sma的mrna的表达,sabp的这一效应与西药培哚普利和wky组无显着差异;6sabp可显着降低shr胸主动脉上col-i、et-1和α-sma蛋白的表达。结论:sabp可明显降低shr收缩压,降低血浆中ang-ii和et-1水平,显着改善胸主动脉的血管重构,减少血管壁α-sma、col-Ⅰ和et-1的表达,从而减少血管壁厚度和外膜的厚度。其具有明显的降压和血管重构的保护作用。第三部分丹参有效成份的最佳配伍配比减缓自发性高血压大鼠血管重构的作用机制目的:氧化应激是导致高血压的重要因素之一,是由于体内蓄积过量的活性氧（reactiveoxygenspecies,ros）而触发细胞损伤,从而导致血管重构。nadph氧化酶（nox）是心血管系统产生ros的主要来源,且主要集中在血管外膜上。研究表明nox4在血管壁全层都有表达。超氧化物歧化酶（sod）是体内主要的抗氧化酶,主要用来反映机体内的抗氧化能力;丙二醛（mda）通常用来表示机体总的脂质过氧化水平。转化生长因子-β（transforminggrowthfactor-beta,tgf-β）是调节af/mf以及col-i的最重要的因子之一。tgf-β/smad是其经典的信号转导通路,smad7是这一通路中重要的负向调节因子。本研究选用shr和sd大鼠af为模型,探讨sabp对其氧化应激的影响,并观察其对胸主动脉上nox4、tgf-β1和smad7表达的影响。方法:实验动物随机分为5组:（1）正常对照组（wky）;（2）模型组（shr）;（3）pd组（shr）;（4）smlp组（shr）;（5）sabp组（shr）。每天腹腔注射给药:smlp（1g/kg/d）;pd（0.4mg/kg/d）;sabp（dss:5mg/kg/d,sal-a:0.233mg/kg/d,sal-b:10mg/kg/d,pal:17mg/kg/day）;shr和wky对照组给予等量的生理盐水。给药8w后,留取每只动物的血浆及胸主动脉,用于elisa、免疫组织化学染色、r-tpcr和westernblot实验。培养SD大鼠胸主动脉外膜AF,并分为四组:（1）Ang-Ⅱ（10-6 mol/L）组;（2）荧光剂对照组,荧光剂为DCFH-DA（10-5 mol/L）;（3）Ang-Ⅱ+SABP组,Ang-Ⅱ药物浓度同上,SABP（DSS:1.5×10-4 mol/L,Sal-A:7×10-6 mol/L,Sal-B:3×10-4 mol/L,PAL:5×10-4 mol/L）组。（4）SABP组（药物浓度同上）。每组均加用荧光剂。用荧光酶标仪在502nm处检测荧光值,并用荧光显微镜拍照。结果:1 SABP可显着降低SHR血浆中MDA和TGF-β1的含量,并显着升高SOD的含量;2免疫组化染色显示:SABP可显着降低SHR组胸主动脉上NOX4和TGF-β1的表达,且与WKY组相比较,NOX4和TGF-β1表达无明显变化,差异无统计学意义。这一效应与PD组相似;3 SABP可明显降低SHR胸主动脉上NOX4的mRNA水平及蛋白表达。与西药培哚普利和WKY组的NOX4的表达效应相似;4 SABP可显着降低用Ang-Ⅱ刺激的SD大鼠AF中ROS含量。SABP组和Ang-Ⅱ+SABP组与空白对照组相比均无明显差别,没有统计学意义;5 SABP可明显降低SHR胸主动脉上TGF-β1mRNA水平及蛋白表达,且显着升高Smad7的mRNA及蛋白的表达。结论:SABP既可显着降低SHR体内的氧化应激水平,降低血浆中MDA水平,升高SOD水平;降低胸主动脉NOX4表达;也可降低Ang-Ⅱ刺激的SD大鼠AF中ROS含量;而且SABP还可降低TGF-β1表达,升高Smad7蛋白表达。SABP通过抑制氧化应激和TGF-β1的表达,升高Smad7蛋白表达,进而抑制高血压大鼠的血管重构。
张雯翔[7]（2016）在《FAM3B介导高血糖诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的分子机制研究》文中进行了进一步梳理糖尿病病人长期处于高血糖状态,使得其血管组织发生明显的病变,最终导致心血管疾病（Cardiovascular disease,CVD）的发生。在此过程中,血管平滑肌细胞（Vascular smooth muscle cells,VSMCs）的增殖和迁移发挥着举足轻重的作用。如何抑制高血糖情况下VSMCs的异常活化,从而降低糖尿病人的CVD发生率,是当下亟待解决的公共卫生问题。另一方面,胰腺衍生因子（FAM3B,family with sequence similarity 3,member B）是一个具有独特二级结构的蛋白分子（α-四螺旋索）,能及时响应葡萄糖刺激,与胰岛素共分泌,以维持机体血糖稳态。然而,FAM3B在VSMCs中,是否也能应答高血糖,调节其生理行为,目前仍不清楚。本文以原代培养的大鼠VSMCs为研究对象,结合FAM3B过表达腺病毒和小分子干扰RNA（siRNA,small interfering RNA）,人为操控FAM3B表达水平,研究其在高血糖诱导的VSMCs增殖与迁移过程中的作用。细胞增殖方面,我们采用5-乙炔基-2’-脱氧尿苷（EdU,5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）掺入法和细胞计数法检测细胞的增殖速率,联合使用流式细胞仪检测技术对于VSMCs的细胞周期进行分析。此外,我们还通过划痕痊愈法（Wound-healing）和迁移小室（Transwell）侵袭实验,对VSMCs的迁移表型进行了全面分析。分子水平上,通过Western blot技术,深入分析了细胞增殖周期相关蛋白（PCNA,CDK2/6,CyclinE/D1,p27等）和迁移相关蛋白（MMP2/9,ICAM-1/VCAM-1等）的表达水平。鉴于miRNAs在维持VSMCs生理稳态中的重要作用,我们还利用miRNAs微阵列芯片,分析并筛选出FAM3B下游的靶miRNAs。结合上述实验手段,探究了靶miRNAs在介导FAM3B功能中的作用。我们的研究发现,在大鼠VSMCs中,葡萄糖可以时间和剂量依赖性地促进FAM3B的表达。不仅如此,它还能增加FAM3B蛋白稳定性。腺病毒介导的FAM3B过表达能激活VSMCs的增殖和迁移,并加速细胞周期,使得其从G1期向S期转变。分子水平上,FAM3B能增加细胞增殖周期相关蛋白（PCNA,CDK2/6,CyclinE/D1）以及迁移相关蛋白（MMP2/9,ICAM-1/VCAM-1）的表达。反之,降低了周期抑制因子p27的表达。另一方面,当使用FAM3B siRNA干扰其表达后能显着拮抗高糖对于VSMCs的增殖、迁移及细胞周期的激活效应。通过微阵列分析,我们还筛选出FAM3B的下游靶miRNA,miR-322-5p。研究发现,miR-322-5p能被葡萄糖信号所抑制。而过表达miR-322-5p明显阻断了 FAM3B诱导的VSMCs激活进程,暗示着它在FAM3B活化VSMCs进程中的重要媒介作用。综上所述,我们的研究发现高糖通过FAM3B/miR-322-5p轴诱导了 VSMCs的增殖和迁移。本研究首次揭示FAM3B在VSMCs生理功能中的作用,拓展了FAM3B的分子功能,为治疗糖尿病导致的CVD并发症提供了新的理论依据和分子靶点。
李宝龙,张煜[8]（2015）在《壮医经验方火把螺旋汤组成药物现代研究进展》文中研究表明壮医药是我国传统民族医药的重要组成部分。壮医经验方火把螺旋汤是广西壮族地区民间医生根据壮族医学的"三道两路"理论出发,用火把果、螺旋藻、石葫芦、野沙柑、鸡屎藤、两面针、金不换、鸡内金等广西特色壮药配伍而成。该方用药配伍严谨、疗效确切。方中火把果、螺旋藻、鸡矢藤3味药物近些年来备受国内外学者关注,已开展了药理学、化学成分等多方面研究,现将相关进展综述如下。1火把果火把果为蔷薇科植物火棘的果实,又称为赤阳子、救军
陶杰[9]（2013）在《CREG调控内皮细胞周期的作用机制研究及其在小鼠下肢缺血模型中的作用》文中研究表明目的：内皮损伤是动脉粥样硬化、心肌梗死、经皮冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄、下肢动脉硬化闭塞症（PAD）、休克等各种血栓性疾病的始动病因。促进内皮细胞（EC）的完整性，维持其正常功能，将为此类疾病提供新的防治手段。本研究探讨了一个新近发现的调控细胞转录的基因——E1A激活基因阻遏子（CREG）调控人脐静脉内皮细胞（HUVEC）周期的作用和机制，并在小鼠下肢缺血模型中初步探讨了其对血管新生的影响。方法：（1）以绿色荧光蛋白（GFP）腺病毒感染HUVEC作为对照，应用CREG腺病毒使HUVEC过表达CREG，以细胞计数、BrdU掺入实验、流式细胞术（FCM）检测CREG对HUVEC增殖的影响，Western blot检测HUVEC中CREG、信号通路、细胞周期蛋白（Cyclins）及细胞周期蛋白依赖性激酶（CDKs）的表达，RT-PCR检测Cyclins在转录水平上的表达差异。（2）以表达短发卡RNA （shRNA）序列的阴性空载体为对照，将CREG表达沉默的shRNA载体转染至逆转录病毒，产生病毒后感染HUVEC，经嘌呤霉素筛选，得到CREG表达下调的HUVEC；应用细胞计数、BrdU掺入实验、FCM检测从功能缺失角度验证CREG下调对HUVEC增殖的影响。（3）根据信号通路Western blot结果的提示，应用信号通路阻断剂阻断可被CREG明显影响的信号通路，以BrdU掺入实验及FCM检测细胞增殖并确定CREG发挥生物学作用的通路，Westernblot检测蛋白表达及信号通路蛋白及Cyclins的表达，确定CREG相关的信号通路及Cyclins。（4）在腺病毒感染造成CREG过表达的HUVEC中使用血管内皮生长因子中和抗体（VEGF NA）阻断VEGF的作用；在CREG被干扰造成其表达下调的HUVEC中添加重组人血管内皮生长因子（rhVEGF165），以细胞计数、BrdU掺入试验、FCM检测细胞增殖，同时以Western blot检测信号通路以及Cyclins的表达，确定血管内皮生长因子（VEGF）是否参与了CREG调控HUVEC增殖及Cyclins表达的作用。（5）以正常的以及感染GFP腺病毒的HUVEC作为对照，应用体外及小鼠在体matrigel血管生成实验检测HUVEC感染CERG腺病毒后对血管生成的影响；制作小鼠下肢缺血模型后，以PBS、GFP腺病毒做为对照，应用CREG腺病毒感染局部缺血肌肉组织，观测术肢体温、自体截肢率，以病理切片观测肌纤维形态改变，应用血流灌注成像仪检测术肢/健肢灌注比，检测CREG对小鼠下肢缺血的治疗作用以及对血管新生的影响。结果：（1）与对照组相比，HUVEC经腺病毒感染过表达CREG后，细胞计数增多，BrdU掺入实验中BrdU阳性细胞百分比增多，FCM分析提示S+G2期占全部细胞比例增多；而在shRNA导致CREG表达下调后，与对照组相比，发现细胞计数减少，BrdU阳性细胞百分比减少，FCM分析可见S+G2期占全部细胞比例减少。（2）Wstern blot提示：与对照组相比，CREG可使ERK、PI3K/Akt信号通路激活，Cyclin E表达增多，RT-PCR发现CREG可在转录水平影响Cyclin E的表达。（3）信号通路阻断剂添加后，BrdU掺入实验及FCM检测提示：尽管PI3K/Akt、ERK信号通路都可影响CREG调控的HUVEC增殖，但ERK通路特异性的介导了CREG对HUVEC增殖的调控，Western blot检测也证实了ERK特异性的介导了CREG对Cyclin E的调控。（4）体外及在体matrigel血管生成实验发现CREG过表达可使毛细血管密度明显增多；小鼠下肢缺血模型制作成功后，以腺病毒感染缺血区肌肉组织，经检测发现过表达CREG的腺病毒感染组与PBS组以及GFP腺病毒相比，术肢体温升高、自体截肢率降低、病理切片提示肌纤维萎缩程度明显减轻，血流灌注成像仪检测结果提示与对照组相比，CREG过表达组术肢/健肢灌注比升高。结论：（1）CREG可促进体外培养HUVEC的增殖；（2）ERK/Cyclin E通路介导了CREG对HUVEC增殖的调控作用；（3）CREG过表达能促进小鼠缺血下肢的血管新生。本研究为PAD的治疗提供了一个新的靶点，也为CREG在缺血性心肌病、经皮冠脉内介入治疗术后支架内再狭窄及迟发性血栓的防治中的应用提供了新的证据。
静亮[10]（2013）在《特异性平滑肌p27基因对颈动脉支架术后再狭窄的影响及机制研究》文中研究指明目的：研究表明药物涂层支架术后再狭窄的形成主要表现为内膜增生和血管重塑,而血管平滑肌细胞（VSMCs）的过度增殖在其中起到了重要作用。本研究旨在通过构建SM22alpha-p27-EGFP重组慢病毒载体,探讨SM22alpha启动子对VSMCs p27蛋白过表达及特异性选择作用,选择重组慢病毒感染细胞最适宜MOI,为慢病毒调控细胞周期机制研究提供进一步依据。方法：鼠尾基因组钓取sm22alpha,构建携带p27基因的慢病毒和无p27基因的对照空病毒。感染原代培养平滑肌细胞和内皮细胞,流式细胞术确定病毒的选择性感染能力及感染复数；免疫荧光法和Western Blot检测p27基因在两种细胞中的表达及细胞形态变化。结果:1)从大鼠基因组中提取SM22alpha启动子,构建SM22alpha-p27-EGFP及SM22alpha-null-EGFP重组慢病毒,病毒滴度为5×108U/ml。2)FACs示SM22alpha启动子具有平滑肌细胞特异性选择作用,选定最适MOI为103)免疫荧光染色示SM22alpha promoter-p27-EGFP病毒能够有效过表达p27蛋白4)Western Blot提示p27蛋白过表达且证实存在重组蛋白。结论：SM22alpha启动子介导的重组慢病毒载体具有平滑肌特异性选择作用且能够有效过量表达p27蛋白。目的：第一部分的研究表明,重组慢病毒SM22alpha-p27-EGFP能够选择性感染平滑肌细胞并过表达p27蛋白。本部分研究同紫杉醇相比,重组慢病毒是否能够通过p27的过表达有效达成细胞周期阻滞、抑制细胞增殖的作用。探讨重组慢病毒和紫杉醇对细胞周期调控机制,为临床DES改进提供新的思路。方法：BrdU染色分析紫杉醇与重组慢病毒对血管平滑肌细和血管内皮细胞增殖能力的影响。采用流式细胞术检测正常培养和不同药物干预组血管内皮细胞和血管平滑肌细胞细胞周期分布。结果：BrdU结果示平滑肌细胞组中：紫杉醇与SM22alpha-p27过表达病毒均能够有效抑制vsmc增殖（p<0.05）,其中紫杉醇与过表达病毒对于vsmc增殖的抑制更加明显（p<0.01）；内皮细胞组,紫杉醇能够有效抑制vsmc增殖（p<0.05）,但阴性对照病毒及过表达病毒抑制增殖能力并没有统计学意义。流式结果示紫杉醇干预后的内皮细胞和平滑肌细胞均表现出G2/M期阻滞现象,伴随S期分布减少,G0/G1期细胞分布减少（p<0.05）；SM22alpha-p27重组慢病毒特异性的对平滑肌细胞产生G1/S期阻滞,G0/G1期分布增加（p<0.05）,S期细胞分布显着减少（p<0.01）。结论：同紫杉醇广泛的抑制细胞增殖相比,SM22alpha-p27-EGFP重组慢病毒能够高效、特异性的抑制平滑肌细胞增殖,且能够阻滞细胞周期G1/S期终止细胞周期进展。
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
| 中英文缩略词对照表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 脂联素抑制冠脉搭桥术后静脉桥血管再狭窄的研究 |
| 1 前言 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 再狭窄机制研究 |
| 1.3 脂联素 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 各组大鼠手术及存活状况 |
| 3.2 脂联素抑制移植静脉内膜、中膜和外膜增生 |
| 3.3 脂联素抑制静脉移植PCNA表达 |
| 3.4 脂联素下调静脉移植后VCAM-1和ICAM-1的表达 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 第二部分 脂联素转基因家蚕品系的建立及蚕丝材料血管外支架制备 |
| 1 前言 |
| 1.1 脂联素 |
| 1.2 血管外支架 |
| 1.3 蚕丝生物材料及家蚕生物反应器 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 rhADP转基因品系构建 |
| 3.2 转基因蚕茧rhADP表达检测 |
| 3.3 rhADP基因插入位点的鉴定 |
| 3.4 rhADP蛋白的分离浓缩 |
| 3.5 rhADP毒性实验及促增殖作用 |
| 3.6 rhADP抑制LPS诱导巨噬细胞raw264.7的炎症反应 |
| 3.7 rhADP转基因家蚕品系经济性状调查 |
| 3.8 rhADP转基因家蚕品系特性分析 |
| 3.9 rhADP转基因蚕丝血管外支架的制备及特性分析 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
| 综述 冠心病危险因素和治疗方法的研究进展 |
| 参考文献 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1 中医对宫腔粘连的认识 |
| 1.1 中医病名起源发展 |
| 1.2 中医病因病机 |
| 1.3 中医药治疗进展 |
| 1.4 小结 |
| 2 西医对宫腔粘连的认识 |
| 2.1 宫腔粘连的病因及发病机制 |
| 2.2 分子学研究进展 |
| 2.3 宫腔粘连的诊断 |
| 2.4 宫腔粘连的分类 |
| 2.5 TCRA术后的西医治疗 |
| 2.6 小结 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1 病例选择 |
| 2 研究方法 |
| 3 疗效评定标准 |
| 4 统计学方法 |
| 5 结果 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 立题依据 |
| 2 宫腔粘连的病因病机特点 |
| 2.1 肾虚、肝郁是宫腔粘连发病的基础 |
| 2.2 血瘀是宫腔粘连的病机关键 |
| 3 以“调肝补肾、活血化瘀”为治法的分析 |
| 3.1 肝肾同源 |
| 3.2 “调肝、补肾、活血化瘀”的作用机制研究 |
| 4 调肝补肾活血方的组方意义及药理学研究 |
| 4.1 调肝补肾活血方的组方 |
| 4.2 调肝补肾活血方的方义 |
| 4.3 中药的药理研究 |
| 4.4 中药药对的药理研究 |
| 5 以雌孕激素序贯疗法为对照 |
| 6 调肝补肾活血方治疗肝郁肾虚血瘀型宫腔粘连的疗效机制探讨 |
| 7 创新点 |
| 8 本研究存在的问题及展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 核受体 |
| 1.1.1 核受体分类 |
| 1.1.2 核受体结构 |
| 1.1.3 配体调控核受体功能机制 |
| 1.1.4 核受体调节子以及选择性调节子 |
| 1.1.5 核受体辅调节子 |
| 1.1.6 核受体与动脉粥样硬化 |
| 1.2 类固醇受体辅激活子(SRC)和类固醇受体辅激活子3(SRC-3) |
| 1.2.1 类固醇激素受体 |
| 1.2.2 SRC家族概述 |
| 1.2.3 SRCs翻译后修饰 |
| 1.2.4 类固醇受体辅激活子3(SRC-3) |
| 1.3 动脉粥样硬化 |
| 1.3.1 动脉粥样硬化病理生理学 |
| 1.3.2 脂蛋白和胆固醇在动脉粥样硬化中的作用 |
| 1.4 立题背景 |
| 第二章 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 小鼠 |
| 2.1.2 质粒 |
| 2.1.3 菌株 |
| 2.1.4 细胞 |
| 2.1.5 主要试剂 |
| 2.1.6 主要仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 DNA相关实验及方法 |
| 2.2.2 RNA相关实验及方法 |
| 2.2.3 蛋白相关实验及方法 |
| 2.2.4 细胞相关实验 |
| 2.2.5 小鼠相关实验及方法 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 SRC-3在主动脉根处中的血管平滑肌细胞和内皮细胞中有高表达,并且喂高脂后表达量上调 |
| 3.2 SRC-3促进动脉粥样硬化 |
| 3.2.1 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉处的病灶面积显着小于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.2.2 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根部的病灶面积显着小于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.2.3 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根病灶处的坏死核心面积显着小于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.2.4 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处病灶部位胶原蛋白显着多于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.2.5 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处病灶部位纤维帽厚度要显着大于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-) |
| 3.3 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动根处病灶部位巨噬细胞和血管平滑肌细胞的浸润要显着低于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-),而内皮细胞、中性粒细胞和CD4~+T细胞并没有显着变化 |
| 3.3.1 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处病灶部位巨噬细胞的浸润要显着少于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.3.2 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处病灶部位血管平滑肌的浸润要显着少于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.3.3 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠和SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处内皮细胞的数目无显着差异 |
| 3.3.4 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE-/-小鼠和SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处病灶部位中性粒细胞的含量没有显着差异 |
| 3.3.5 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠和SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处病灶部位CD4~+T细胞数量并无显着变化 |
| 3.4 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠和SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉中CCL2 mRNA表达无显着变化 |
| 3.5 喂高脂食物12周后,SRC-3的缺失减少主动脉根处病灶部位粘附分子ICAM-1和VCAM-1以及炎症因子的表达 |
| 3.5.1 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处病灶部位ICAM-1的表达要显着小于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.5.2 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处病灶部位VCAM-1的表达要显着低于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.5.3 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处病灶部位内皮细胞中ICAM-1和VCAM-1的表达显着低于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-) |
| 3.5.4 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠血浆中IL-6和IL-1β的水平要显着低于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.6 SRC-3促进巨噬细胞形成泡沫细胞 |
| 3.6.1 SRC-3的缺失减轻了原代巨噬细胞形成泡沫细胞 |
| 3.6.2 敲低SRC-3减轻了巨噬细胞株RAW264.7细胞形成泡沫细胞 |
| 3.6.3 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉中CD36 mRNA的表达显着低于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.6.4 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠主动脉根处CD36阳性细胞数目要显着低于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠 |
| 3.7 SRC-3缺失减少肝脏中脂类的摄取和合成 |
| 3.7.1 SRC-3能影响血浆中TG的水平 |
| 3.7.2 SRC-3缺失减少了肝脏中甘油三酯的积累 |
| 3.7.3 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠肝脏中脂类摄取、合成和存储甘油三酯的基因显着低于SRC-3~(+/+)ApoE~(-/-)小鼠并且SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠表现出更轻肝炎 |
| 3.7.4 喂高脂食物12周后,SRC-3~(-/-)ApoE~(-/-)小鼠肝脏中合成脂类的基因表达无显着差异 |
| 3.7.5 SRC-3不影响肝脏中FXR、LXR、PXR和CAR的表达 |
| 3.8 SRC-3调节CD36的表达 |
| 3.8.1 敲低SRC-3减少RAW264.7细胞中清道夫受体CD36的表达 |
| 3.8.2 SRC-3在转录水平上能促进CD36的表达 |
| 3.8.3 SRC-3能增强AP-1诱导的CD36表达 |
| 3.8.4 突变CD36启动子上AP-1位点显着降低CD36启动子活性 |
| 3.8.5 SRC-3能够与AP-1相互作用 |
| 3.8.6 SRC-3和AP-1能被募集到CD36启动子AP-1结合位点 |
| 3.9 SRC-3在人含斑块主动脉组织标本中存在高表达 |
| 3.10 SRC-3抑制剂蟾毒灵(bufalin)缓解了动脉粥样硬化 |
| 3.11 SRC-3在动脉粥样硬化中作用模式图 |
| 第四章 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录I 图表索引 |
| 附录II 缩略语及中英文对照 |
| 致谢 |
| 在学期间的主要科研成果 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 综述一 骨骼肌创伤性纤维化的信号通路与临床防治 |
| 1 临床表现 |
| 1.1 创伤性肌肉骨骼损伤与修复 |
| 1.2 老化、退变与代谢紊乱 |
| 1.3 遗传性疾病 |
| 2 治疗策略 |
| 2.1 一般处理 |
| 2.2 手术修复 |
| 2.3 药物治疗 |
| 2.4 细胞生物制剂治疗 |
| 2.5 中医药治疗 |
| 3 纤维化和细胞介质的传导研究 |
| 3.1 卫星细胞 |
| 3.2 卫星细胞龛室 |
| 3.3 单核/巨噬细胞 |
| 3.4 纤维化母细胞 |
| 4 在纤维化发育过程中信号通路的作用 |
| 4.1 Notch和Wnt |
| 4.2 转化生长因子 |
| 4.3 p38丝裂原活化蛋白激酶 |
| 4.4 骨形态发生蛋白 |
| 4.5 神经肌肉接头 |
| 4.6 肌肉生长抑制素 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述二 急性骨骼肌损伤动物实验模型和技术应用 |
| 1 骨骼肌损伤动物实验模型 |
| 1.1 骨骼肌损伤与炎症反应 |
| 1.2 骨骼肌损伤的动物模型 |
| 2 动物模型和肌肉的选择 |
| 2.1 非侵入性的模型更合理 |
| 2.2 肌群的选择 |
| 2.3 实验动物的选择 |
| 3 结束语 |
| 参考文献 |
| 综述三 从“气”论治骨骼肌损伤 |
| 1 中医对“骨骼肌损伤”的认识—名正气顺 |
| 1.1 对“筋”和“肉”的认识 |
| 1.2 筋伤-骨骼肌损伤的病因 |
| 2 骨骼肌损伤的病机—气机 |
| 3 骨骼肌损伤的治则—调气 |
| 4 骨骼肌损伤后中医气机失常的现代研究 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 理论探讨 |
| 从认知模式谈中医“气”语词指称的概念性与时序性事态的对象化 |
| 1 “气”语词指称的出发点和模式 |
| 1.1 “气”语词指称与物质世界的“极精微物质” |
| 1.2 认知模式供给侧的理论重构 |
| 2 “气”语词指称的形式与意义 |
| 2.1 初始对象—“气”语词指称的意向性分析 |
| 2.2 语词指称是关于气的命题 |
| 2.3 论证“气”作为时序性事态的语词指称 |
| 3 “气”时序性事态的对象化呈现中医语词的概念化 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 实验正文 |
| 实验一 大鼠腓肠肌与胫腓骨的解剖关系和几何动力学特点 |
| 材料和方法 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 结果 |
| 1 胫腓骨与腓肠肌复合物的解剖形态学测量 |
| 2 撞击伤造模系统和支持盾的设计 |
| 讨论 |
| 1 大鼠小腿解剖与动力学三角 |
| 2 撞击伤造模系统和支持盾 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验二 撞击伤造模系统撞击反应的力学特性 |
| 材料和方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 实验地点和环境 |
| 1.3 实验仪器与设备 |
| 1.4 实验数据处理软件 |
| 2 方法 |
| 2.1 撞击伤造模系统撞击反应的数据收集与处理 |
| 2.2 撞击反应的动力学性能检测 |
| 2.3 数据统计 |
| 2.4 实验流程图 |
| 结果 |
| 1 撞击能量与撞击反应强度的关系 |
| 2 撞击反应变量间的相互关系 |
| 3 相同撞击势能,冲量对撞击反应的影响 |
| 4 相同撞击冲量,势能对撞击反应的影响 |
| 讨论 |
| 1. 撞击伤造模系统具有稳定的力学特性 |
| 2. 撞击伤造模系统的构件设计与测量原理 |
| 3 被试对象木质材料性能 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验三 腓肠肌撞击伤模型不同程度撞击事件的力学反应和传导特点 |
| 材料和方法 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 结果 |
| 1 腓肠肌损伤的离体撞击反应情况 |
| 2 在体腓肠肌损伤的撞击反应情况 |
| 3 腓肠肌状态(离体与在体)对撞击反应变量的影响 |
| 4 不同能量级别损伤后腓肠肌的形态学观察 |
| 讨论 |
| 1 在不同参数的损伤能量中腓肠肌的撞击反应具有稳定的力学特性 |
| 2 肌肉状态对骨骼肌撞击伤的影响 |
| 3 不同程度腓肠肌撞击伤的形态分型与力学分区 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验四 不同程度腓肠肌撞击伤模型的组织修复与纤维化进程的时序性分析 |
| 材料和方法 |
| 1 材料 |
| 2 实验步骤与方法 |
| 结果 |
| 1 腓肠肌损伤后肢体运动功能恢复的时序性评价 |
| 2 大鼠腓肠肌撞击伤后病理组织学改变的时序性描述 |
| 3 大鼠腓肠肌撞击伤后纤维化的时序性评价 |
| 讨论 |
| 1 腓肠肌撞击伤模型原理的综合分析 |
| 2 肢体功能恢复与组织修复 |
| 3 骨骼肌损伤的“形”与“气” |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 附录 |
| 附录1 英文缩略词表 |
| 附录2 实验四实验性图片 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 CVD致病机理---动脉粥样硬化 |
| 1.3 经皮冠状动脉介入术(PCI) |
| 1.4 支架发展历程 |
| 1.4.1 裸金属支架(BMS) |
| 1.4.2 药物洗脱支架(DES) |
| 1.4.3 生物可降解支架 |
| 1.4.4 小结 |
| 1.5 支架表面血液相容性优化 |
| 1.5.1 凝血机理 |
| 1.5.2 抗凝药物修饰 |
| 1.5.3 抗血小板粘附、激活修饰 |
| 1.5.4 内皮化抗凝修饰 |
| 1.5.5 小结 |
| 1.6 课题的研究目标与意义、主要内容及技术路线 |
| 1.6.1 课题的研究目标与意义 |
| 1.6.2 研究内容 |
| 1.6.3 技术路线 |
| 第2章 Ti表面SEMA4D/heparin微环境的构建及理化性质 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 SEMA4D/heparin微环境的构建 |
| 2.3 SEMA4D/heparin微环境的表征 |
| 2.3.1 傅里叶变换红外光谱(FTIR) |
| 2.3.2 X射线光电子能谱(XPS) |
| 2.3.3 表面形貌观察 |
| 2.3.4 SEMA4D/heparin粒径分析 |
| 2.3.5 表面亲水性检测 |
| 2.3.6 表面胺基定量 |
| 2.3.7 表面肝素定性定量分析 |
| 2.3.8 SEMA4D/heparin复合物模拟定量 |
| 2.4 结果及分析 |
| 2.4.1 FTIR |
| 2.4.2 XPS |
| 2.4.3 AFM |
| 2.4.4 WCA |
| 2.4.5 SEMA4D/heparin复合物粒径、分散系数(PDI)及Zeta电位 |
| 2.4.6 表面胺基定量 |
| 2.4.7 表面肝素定量及释放 |
| 2.4.8 SEMA4D/heparin复合物定量 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 本章小结 |
| 第3章 Ti表面SEMA4D/heparin微环境的生物相容性 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 SEMA4D/heparin微环境的血液相容性 |
| 3.2.1 aPTT,PT及TT检测 |
| 3.2.2 血小板粘附和激活 |
| 3.2.3 纤维蛋白原粘附和变性 |
| 3.3 细胞相容性评价 |
| 3.3.1 EC培养 |
| 3.3.2 EC粘附和铺展 |
| 3.3.3 EC增殖检测 |
| 3.3.4 趋触性 |
| 3.3.5 趋化性 |
| 3.4 SEMA4D/heparin微环境的免疫相容性评价 |
| 3.5 SEMA4D/heparin微环境的组织修复和再生评价 |
| 3.5.1 划痕实验 |
| 3.5.2 体内植入实验 |
| 3.6 结果与分析 |
| 3.6.1 aPTT、PT及TT |
| 3.6.2 血小板粘附和激活 |
| 3.6.3 纤维蛋白原粘附和变性 |
| 3.6.4 EC粘附铺展 |
| 3.6.5 EC增殖 |
| 3.6.6 趋触性 |
| 3.6.7 趋化性(Boyden小室实验) |
| 3.6.8 免疫相容性评价 |
| 3.6.9 划痕实验 |
| 3.6.10 体内植入实验 |
| 3.7 讨论 |
| 3.8 本章小结 |
| 第4章 SEMA4D与CXCL12多趋化因子作用下的原位内皮化 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 材料和试剂 |
| 4.2.2 SEMA4D和CXCL12的修饰 |
| 4.2.3 XPS分析 |
| 4.2.4 血液相容性评价 |
| 4.2.4.1 血小板粘附和激活 |
| 4.2.4.2 纤维蛋白原粘附和变性 |
| 4.2.5 EC增殖检测 |
| 4.2.6 趋触性 |
| 4.2.7 趋化性 |
| 4.2.8 半体内EPC捕获 |
| 4.2.9 体内植入实验 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 XPS |
| 4.3.2 血液相容性评价 |
| 4.3.3 EC增殖 |
| 4.3.4 EC趋触性迁移 |
| 4.3.5 EC趋化性迁移 |
| 4.3.6 EPC捕获 |
| 4.3.7 体内原位内皮化 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 第5章 SEMA4D/heparin复合物及多趋化因子下原位内皮化的调控 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 动态条件下SEMA4D/heparin微环境与EC或MA的相互作用 |
| 5.2.1 实验方法 |
| 5.2.1.1 材料和试剂 |
| 5.2.1.2 Ti石英晶片表面SEMA4D/heparin微环境修饰 |
| 5.2.1.3 EC和MA细胞悬液制备及QCM-D细胞检测 |
| 5.2.2 结果与分析 |
| 5.2.2.1 EC与SEMA4D/heparin微环境表面的相互作用的△f和△D曲线 |
| 5.2.2.2 EC与SEMA4D/heparin微环境表面的相互作用的DF曲线 |
| 5.2.2.3 动态培养后EC形貌 |
| 5.2.2.4 MA与SEMA4D/heparin微环境表面的相互作用的△f和△D曲线 |
| 5.2.2.5 MA与SEMA4D/heparin微环境表面的相互作用的DF曲线 |
| 5.2.2.6 动态培养后的MA形貌 |
| 5.2.3 讨论 |
| 5.2.4 小结 |
| 5.3 SEMA4D/heparin复合物结构变化对细胞生理反应的调控 |
| 5.4 多趋化因子下原位内皮化的调控 |
| 5.5 本章小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及科研成果 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 均匀设计与正交设计联用筛选丹参有效成份抑制成纤维细胞增值的最佳配伍配比 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 丹参有效成份的最佳配伍配比对自发性高血压大鼠血管重构的保护作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 丹参有效成份的最佳配伍配比减缓自发性高血压大鼠血管重构的作用机制 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 外膜成纤维细胞介导的血管病变的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 糖尿病相关的心血管疾病 |
| 1.1.1 内膜功能损伤 |
| 1.1.2 高血糖 |
| 1.1.3 血管高血糖记忆 |
| 1.1.4 胰岛素抵抗 |
| 1.1.5 高血压 |
| 1.1.6 炎症 |
| 1.1.7 血脂异常 |
| 1.2 VSMCs和心血管疾病 |
| 1.2.1 VSMCs的增殖 |
| 1.2.2 VSMCs的迁移 |
| 1.3 FAM3B |
| 1.3.1 FAM3B,一个新型的内分泌激素 |
| 1.3.2 FAM3B的发现 |
| 1.3.3 FAM3B组织特异性分布在内分泌胰腺中 |
| 1.3.4 转录调节表达 |
| 1.3.5 葡萄糖和胰岛素调节的分泌 |
| 1.3.6 体内体外FAM3B的生物功能 |
| 1.4 microRNA |
| 1.4.1 miRNAs调节VSMCs的分化和表型 |
| 1.4.2 miRNAs调节VSMCs的增殖 |
| 1.4.3 miRNAs调节VSMCs的迁移 |
| 1.5 本章小结 |
| 第2章 FAM3B促进血管平滑肌细胞的增殖和迁移 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验动物饲养与处理 |
| 2.2.3 实验方法 |
| 2.2.4 实验方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 大鼠胸主动脉血管层中FAM3B的分布 |
| 2.3.2 高糖时间依赖性地促进VSMCs中FAM3B的表达 |
| 2.3.3 葡萄糖剂量依赖性地促进VSMCs中FAM3B的表达 |
| 2.3.4 葡萄糖增加FAM3B的蛋白稳定性 |
| 2.3.5 FAM3B过表达效率的验证 |
| 2.3.6 过表达FAM3B促进VSMCs增殖 |
| 2.3.7 过表达FAM3B加速VSMCs的细胞周期 |
| 2.3.8 过表达FAM3B促进VSMCs的迁移 |
| 2.3.9 过表达FAM3B诱导VSMCs粘附相关蛋白活化 |
| 2.3.10 FAM3B干扰效率的验证 |
| 2.3.11 干扰FAM3B抑制高糖诱导的VSMCs的增殖 |
| 2.3.12 干扰FAM3B未影响VSMCs的凋亡 |
| 2.3.13 干扰FAM3B抑制高糖诱导的VSMCs细胞周期加速 |
| 2.3.14 干扰FAM3B抑制高糖诱导的VSMCs的迁移 |
| 2.3.15 干扰FAM3B抑制高糖诱导的VSMCs粘附相关蛋白活化 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 FAM3B促进血管平滑肌细胞增殖和迁移的机制研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.2.3 实验方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 FAM3B诱导VSMCs激酶蛋白的活化 |
| 3.3.2 ERK1/2磷酸化抑制剂U0126效率检测 |
| 3.3.3 ERK1/2介导FAM3B诱导的VSMCs活化 |
| 3.3.4 ERK1/2抑制FAM3B诱导的VSMCs细胞周期及粘附相关蛋白表达 |
| 3.3.5 FAM3B激活VSMCs中ROS的生成 |
| 3.3.6 FAM3B过表达的VSMCs miRNA微阵列分析结果 |
| 3.3.7 过表达FAM3B抑制miR-322-5p的转录 |
| 3.3.8 葡萄糖抑制miR-322-5p的表达 |
| 3.3.9 MiR-322-5p mimic过表达效率验证 |
| 3.3.10 MiR-322-5p抑制FAM3B诱导的VSMCs的增殖 |
| 3.3.11 MiR-322-5p抑制FAM3B诱导的VSMCs的迁移 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 结论与讨论 |
| 附录 |
| 附录1 实验相关试剂列表 |
| 附录2 实验相关仪器列表 |
| 附录3 蛋白抗体信息及稀释比例 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 |
| 致谢 |
| 1 火把果 |
| 2 螺旋藻 |
| 3 鸡屎藤 |
| 4 结语 |
| 缩略语表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 CREG 对 HUVEC 增殖的影响 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 结论与讨论 |
| 第三章 CREG 调控内皮细胞周期的机制研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 结论与讨论 |
| 第四章 CREG 对血管新生的影响以及在小鼠下肢缺血模型中的治疗作用 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 结论与讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 重组慢病毒SM22alpha_p27-EGFP构建及其对平滑肌细胞特异性选择作用 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料及方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 重组慢病毒SM22alpha-p27-EGFP对平滑肌增殖和细胞周期作用机制的研究 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料及方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 全文缩略词 |
| 发表论文情况 |
| 致谢 |
