邢博民,郭娜,宁海慧,高翠敏,马玉清[1]（2021）在《脓毒症肝损伤与自噬》文中指出肝脏作为维持人体生命活动的重要器官之一,参与生物合成、新陈代谢、生物转化和免疫防御等过程,易受感染、创伤和休克等因素的侵害,是脓毒症早期易受损害的器官之一。自噬是真核生物内普遍存在的生命现象,在生理状态下自噬保护细胞免受外来刺激。在脓毒症所致的多器官损伤过程中,自噬有一定的保护作用。本文就自噬与脓毒症肝损伤的最新研究进展进行综述。
王欢,王丽,谭睿陟,雷贤英[2]（2021）在《右美托咪定对早期内毒素休克大鼠肝组织NF-κB表达及对炎症调控影响》文中提出目的研究右美托咪定（Dex）对早期内毒素休克大鼠肝组织核因子κB（NF-κB）表达及炎症因子的影响,以期为治疗脓毒症寻找新的治疗靶点。方法将40只Wistar大鼠随机分为正常对照组（生理盐水组）、脂多糖（LPS）组、Dex低剂量治疗组（DL）、中剂量治疗组（DM）和高剂量治疗组（DH）。生理盐水组注射0.9%生理盐水,LPS组注射LPS复制内毒素休克大鼠模型,DL、DM和DH治疗组在注射脂多糖建模成功后立即静脉泵入Dex（6.5μg/kg）,再分别以4.5、1.5和0.5μg/（kg·h）的速度持续泵入6h。各组大鼠均在6h后处死,取下肝组织,免疫组织化学和蛋白质印迹法分析NF-κB表达情况,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肝组织相关细胞因子,并在显微镜下观察肝组织的显微结构改变。结果免疫组织化学检测结果显示,LPS组NF-κB蛋白表达光密度D值为0.141 9±0.014 5,高于正常对照组的0.098 3±0.015 8,差异有统计学意义,P=0.001;DH组NF-κB蛋白表达光密度D值为0.119 5±0.016 9,低于LPS组,差异有统计学意义,P=0.044。LPS组阳性细胞百分比值为32.527 3±7.446 9,高于正常对照组的27.128 4±4.639 4,差异有统计学意义,P=0.015;DH组阳性细胞百分比值为29.308 0±4.778 9,低于LPS组,差异有统计学意义,P=0.044。蛋白质印迹法检测结果显示,LPS组NF-κB条带较其余各组明显增强,各治疗组中条带亮度均较弱,以DH组最明显。大鼠肝组织病理学结果显示,各治疗组与LPS组相比,DH组肝小叶结构清楚,肝细胞排列整齐,个别肝细胞内有脂滴,未见明显变性坏死肝细胞。LPS组大鼠肝组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）为（13.016 1±1.684 8）pg/mL,高于正常对照组的（4.122 2±1.095 0）pg/mL,差异有统计学意义,P=0.011;DH治疗组TNF-α为（7.671 1±1.253 9）pg/mL,低于LPS组,差异有统计学意义,P=0.001。LPS组大鼠肝组织中白介素-6（IL-6）为（6.402 8±1.190 4）pg/mL,高于正常对照组的（3.325 0±1.252 3）pg/mL,差异有统计学意义,P<0.001;DH治疗组IL-6为（3.512 1±0.653 8）pg/mL,低于LPS组,差异有统计学意义,P=0.015。结论高剂量Dex能使早期内毒素休克大鼠肝组织NF-κB的表达降低,并抑制炎症因子释放,减轻肝损伤,具有肝保护作用。
宋远[3]（2021）在《穿心莲内酯对酒精性肝损伤保护作用的研究》文中研究表明背景酒精性肝损伤是由于酒精所致肝细胞功能受损的动态病理过程,随着其病理变化过程的加重,酒精性肝损伤可逐渐形成酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝硬化,甚至肝细胞癌等酒精性肝病,进而导致较为严重的临床结局。目前,酒精性肝损伤发生发展过程的分子机制尚不完全清楚,也无明确的治疗靶点。从流行病学角度看,由过量饮酒所致酒精性肝病的患病率存在明显的地域差异,目前尚无全国性统计数据,如有研究报道辽宁省部分城市酒精性肝病的患病率为6.10%,高于浙江省的4.34%。目前临床上治疗酒精性肝损伤的药物主要包括:糖皮质激素、抗氧化剂、营养补充剂、中药以及天然活性成分、抗体类药物等,药物治疗费用不一,且疗效报道也存在争议。目前明确酒精性肝损伤的病理进程和分子机制以及探索有效的治疗药物仍是需要解决的问题。穿心莲内酯是临床常用的具有抗炎、抗病毒、免疫调节等功效的中药成分,近年来的研究报道,穿心莲内酯还可能具有保肝利胆、保护心脑血管等作用,提示药物作用可能存在某些新功效值得开发,可以产生“老药新用”的生物学效应。作者通过前期课题研究基础以及临床观察发现,穿心莲内酯可能对肝脏酶学指标的改善具有较好的效果,但其具体的作用靶点尚未被明确阐述。因此,本研究首先利用文献计量学描述穿心莲内酯与肝损伤的研究现状,同时收集并分析了某三甲医院应用穿心莲内酯的病例现状,研究探讨穿心莲内酯在临床中的应用情况;其次,本研究构建了酒精性肝损伤细胞模型和动物模型,从体外和体内两个层面对酒精性肝损伤发生发展的过程和具体的发病机制进行了实验研究,利用穿心莲内酯进行干预,探讨其对酒精性肝损伤的保护作用,从而为阐明酒精性肝损伤的发病机制和探寻新的临床治疗药物提供理论依据和实验数据。目的:（1）通过文献计量学以及分析某三甲医院应用穿心莲内酯成品药物开展临床治疗的病例情况,明确穿心莲内酯的研究热点和临床适应症以及可能的药理作用机制,为深入探寻穿心莲内酯药物在酒精性肝损伤中的应用提供研究路径。（2）分别构建酒精性肝损伤细胞模型和动物模型,应用穿心莲内酯进行干预,探讨穿心莲内酯对酒精性肝损伤保护作用的可能机制。方法:（1）以CNKI、GNBR,Drugbank,Hetionet数据库为数据来源,检索主题词为“穿心莲内酯”和“肝损伤”或“Andrographolide”和“Liver Injury”,检索时间范围为2000年1月1日-2020年12月31日,文献类型为期刊文献,提取其中的发表年份、引证关系及关键词等信息,通过自行编制的计算机代码进行可视化分析。（2）回顾性分析吉林省某三甲医院2015年1月至2019年12月期间住院治疗,且在院期间应用穿心莲内酯注射液的患者,通过方差分析、卡方检验、秩和检验等方法比较分析患者入院和出院时的血常规、肝功、肾功、血糖、血脂和血离子水平的变化情况。（3）选择健康成年雄性C57BL/6J小鼠,麻醉后,用75%酒精全身消毒放入超净工作台中,解剖小鼠,取出肝脏,制备小鼠原代肝细胞悬液并进行培养。经酒精染毒,同时应用低、中、高剂量（0.05、0.1、0.2mmol/L）穿心莲内酯进行干预,采用ELISA法检测细胞培养液中炎症相关因子的含量,q RT-PCR和Western Blot方法检测细胞内炎症相关信号通路基因和蛋白的表达变化情况。（4）选择8周龄雄性C57BL/6J小鼠,体重16-20g,随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、穿心莲内酯低、中、高剂量组,共六组,每组15只。空白对照组小鼠给予生理盐水灌胃,模型组小鼠给予市售高度白酒灌胃12w,阳性对照组小鼠给予高度白酒灌胃,同时给予水飞蓟宾灌胃,剂量为0.1g/kg·BW·d-1,穿心莲内酯低、中、高剂量组除给予高度白酒灌胃,同时分别给予穿心莲内酯0.05、0.1、0.2g/kg·BW·d-1灌胃。成模后,检测各组小鼠血清转氨酶、肝脏组织脂质代谢、抗氧化等各项生化指标的变化情况,同时利用q RT-PCR、Western Blot等方法检测小鼠肝组织中炎症相关信号通路基因和蛋白的表达情况。结果:（1）本研究利用文献计量学方法,以“穿心莲内酯”和“肝损伤”或“Andrographolide”和“Liver Injury”为主题词,搜集2000年以来,发表在CNKI、GNBR、Drugbank和Hetionet数据库的全部期刊文献,结果表明,在CNKI数据库中穿心莲内酯与肝损伤相关的研究共34篇,年度发文数量逐渐上升,结合外文数据库研究结果发现,穿心莲内酯与肝损伤研究的作用机制与抗炎信号通路有关。（2）本研究纳入了2015年1月至2019年12月在某三甲医院住院治疗期间应用过穿心莲内酯注射液患者的病历资料,共207例,通过比较用药前后患者血常规、肝功能、肾功能、血糖、血脂及离子水平的变化情况发现,穿心莲内酯对患者血常规指标中白细胞、单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞以及肝功能指标中谷草转氨酶、前白蛋白等的改善具有明显效果,而用药前后患者的肾功能、血脂及离子水平无明显变化,提示穿心莲内酯具有一定的抗炎和保护肝脏的作用。（3）酒精对体外培养的小鼠原代肝细胞具有一定的毒性作用,且呈现明显的剂量依赖性。酒精对体外培养的小鼠原代肝细胞24h毒性作用的IC50值约为400 mmol/L,且酒精可导致小鼠原代肝细胞内的炎症反应相关因子IL-1β、IL-4、IL-5、IL-6、NF-κB、TNF-α和CYP2E1的表达水平显着升高,而经不同浓度的穿心莲内酯干预表现对肝脏细胞的保护作用,尤以高剂量（0.2mmol/L）组作用效果最为显着。（4）本研究成功建立了小鼠酒精性肝损伤动物模型,给予8周龄雄性C57BL/6J小鼠4mg/d·kg·BW高度白酒一周后过渡至6mg/d·kg·BW灌胃共12w后,可诱导小鼠出现肝脏重量和肝脏指数增加,血清转氨酶相关指标AST、ALT和γ-GT的水平显着升高（P<0.05）;肝脏组织氧化应激指标MDA显着升高、SOD和GSH显着下降（P<0.05）;肝组织内总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）以及ROS蓄积,表明经高度白酒灌胃12w后,小鼠出现明显的肝组织损伤。（5）穿心莲内酯对小鼠酒精性肝损伤具有明显的保护作用。分别给予酒精模型组小鼠不同浓度（0.05、0.1、0.2g/kg·BW）的穿心莲内酯,结果发现,高剂量穿心莲内酯（0.2g/kg·BW）组可显着降低小鼠的肝脏重量和肝脏指数,差异具有统计学意义（P<0.05）;且高剂量穿心莲内酯组小鼠血清转氨酶AST、ALT和γ-GT水平显着低于酒精模型组,而与空白对照组和阳性对照组无明显统计学差异;穿心莲内酯中、高剂量组小鼠肝组织中脂质过氧化指标MDA水平显着低于酒精模型组,差异具有统计学意义（P<0.05）,抗氧化指标SOD和GSH水平在高剂量穿心莲内酯组显着高于模型组,与阳性对照组无明显差异;穿心莲内酯可在一定程度上有效降低酒精诱导的肝组织脂质紊乱,且以高剂量组,即0.2g/kg·BW穿心莲内酯的保护效果最为明显,高剂量组穿心莲内酯组小鼠肝组织中TC和TG水平与阳性对照组相比,无统计学差异（P>0.05）;与模型组相比,穿心莲内酯各剂量组小鼠肝脏ROS均明显下降,特别是中、高剂量组下降更加明显,差异具有统计学意义（P<0.05）,以高剂量组效果最为明显。且高剂量穿心莲内酯组小鼠肝组织ROS水平与阳性对照组无明显差异（P>0.05）。（6）从各组小鼠肝组织病理学（HE染色）结果可以看出,空白对照组和阳性对照组小鼠肝细胞大小一致,肝细胞索以小叶中央动脉为中心呈辐射状排列;胞核大呈圆形,胞浆均匀红染;胆小管细胞结构完整,未见病变。与空白对照组小鼠相比,模型组小鼠肝组织结构紊乱,肝小叶和肝索结构消失,其中有大量脂肪空泡和炎细胞浸润,肝细胞胞浆稀疏,呈纤维化状态。与模型组相比,穿心莲内酯各剂量组小鼠肝组织形态有所改善,尤以高剂量（0.2g/kg·BW）组小鼠表现最为明显,肝组织接近阳性对照组结构,其脂肪空泡、炎细胞浸润和纤维化状态均有明显改善。（7）穿心莲内酯对各组小鼠肝组织NF-κB、TNF-α和CYP2E1蛋白水平的表达均有明显影响,从免疫组化结果看,模型组小鼠肝组织中有大量NF-κB和TNF-α的原位表达。与模型组相比,随着干预剂量的增高,穿心莲内酯各剂量组NF-κB和TNF-α的蓄积逐渐减少,且呈现明显的剂量依赖性,穿心莲内酯高剂量组小鼠肝组织NF-κB和TNF-α的表达量已接近空白对照组和阳性对照组水平。从Western Blot结果看,模型组小鼠肝组织中NF-κB、TNF-α和CYP2E1表达水平均显着升高（P<0.05）,而经穿心莲内酯干预后,NF-κB、TNF-α和CYP2E1的表达水平均有所下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。穿心莲内酯各剂量组NF-κB、TNF-α和CYP2E1的表达水平与阳性对照组无明显差异（P>0.05）。结论:（1）通过文献计量学分析得出,穿心莲内酯与肝损伤相关研究可能的信号通路主要是炎症信号分子,如NF-κB p100、NF-κB p105、TNF-α等。（2）通过对穿心莲内酯的临床应用现状分析得出,穿心莲内酯是目前临床上常用的抗炎药物,对改善肝脏功能具有一定的作用。（3）酒精对体外培养的小鼠原代肝细胞具有一定的毒性作用,呈现明显的剂量依赖性,穿心莲内酯高剂量组（0.2 mmol/L）对酒精所致原代肝细胞损伤具有明显的保护作用。（4）本研究成功建立了小鼠酒精性肝损伤动物模型,即给予4mg/d·kg·BW高度白酒一周后过渡至6mg/d·kg·BW灌胃共12w,可诱导小鼠出现血清转氨酶升高、肝脏脂质过氧化、ROS生成等肝脏功能受损及组织病理改变。（5）穿心莲内酯高剂量组（0.2g/kg·BW）可有效降低小鼠酒精性肝损伤时的血清转氨酶水平、氧化应激水平、肝脏脂质水平以及ROS生成。（6）穿心莲内酯对酒精性肝损伤的保护作用机制可能是通过抑制CYP2E1/ROS/NF-κB信号通路相关蛋白的表达实现的。
李祥[4]（2021）在《乌司他丁通过抑制NLRP3活化减轻脓毒症肠道炎症反应的研究》文中研究表明目的:探讨NLRP3炎症小体活化在脓毒症大鼠肠道黏膜屏障破坏中的作用及乌司他丁（UTI）对脓毒症大鼠肠道核转录因子-κB（NF-κB）/NLRP3炎症小体信号通路表达的影响。方法:64只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分成假手术（Sham）组、盲肠结扎穿孔术（CLP）组、UTI及UTI预处理组,16只/组。UTI组于CLP术后1、6、12、18 h以100 k U/kg UTI腹腔注射;UTI预处理组于CLP术前1 h 100 k U/kg UTI腹腔注射,其余处理同UTI组。苏木素-伊红（HE）染色进行回肠病理评分;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肠型脂肪酸结合蛋白（I-FABP）水平;应用蛋白质免疫印迹试验（Wertern Blot,WB）检测小肠组织NF-κB p65、NLRP3、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（Caspase-1）、凋亡相关斑点蛋白（ASC）、肠道紧密连接蛋白-1（Claudin-1）水平;免疫组化（IHC）法检测Claudin-1、闭合蛋白（Occludin）以及NLRP3、ASC、Caspase-1的表达。结果:相比Sham,CLP组术后24h存活率下降;肠道病理学评分升高;I-FABP及IL-1β、TNF-α水平均明显升高;WB提示NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白明显增加而Claudin-1的明显降低;IHC提示组织Claudin-1、Occludin表达减少,NLRP3、Caspase-1、ASC增加。与CLP组相比,UTI干预或UTI预处理后,24h存活率无明显差别（均P>0.05）,但肠道损伤明显缓解,Chiu评分及血浆中TNF-α、IL-1β、I-FABP水平明显降低（均P<0.05）,小肠NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、ASC的表达明显下降（均P<0.05）;IHC提示,小肠组织Claudin-1、Occludin阳性表达面积百分比（Area%）升高（均P<0.05）。NLRP3、Caspase-1、ASC阳性Area%降低（均P<0.05）。但UTI组与UTI预处理组的改善作用差异均无统计学意义。结论:脓毒症时肠道屏障功能障碍可能与肠黏膜中NLRP3炎症小体活化有关;UTI肠道黏膜保护作用可能与抑制肠黏膜中NLRP3炎症小体活化有关,但UTI预处理与UTI干预比较无明显优势。
郭威[5]（2020）在《谷氨酰胺对酒精诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及分子机制》文中进行了进一步梳理目的本课题旨在研究谷氨酰胺在急性酒精性肝损伤中所起的作用及分子机制方法（一）动物实验:健康清洁C57BL/6雄性小鼠40只,正常喂养后随机分为正常对照组（10只）、酒精组（10只）、谷氨酰胺+酒精组（10只）、谷氨酰胺+酒精+PDTC（NFκB抑制剂）组（10只）:正常对照组连续七天每天给与蒸馏水灌胃后灌入与白酒等量体积蒸馏水和腹腔注射与PDTC等量生理盐水;酒精组连续七天每天给与蒸馏水灌胃,酒精灌胃前30min,腹腔注射与PDTC等量生理盐水然后使用56度白酒（24m L/kg）灌胃;谷氨酰胺+酒精组连续七天每天给与L-谷氨酰胺（100mg/kg）溶于蒸馏水灌胃,酒精灌胃前30min,腹腔注射与PDTC等量生理盐水,然后使用56度白酒（24m L/kg）灌胃后腹腔注射与PDTC等量生理盐水;谷氨酰胺+酒精+PDTC（NFκB抑制剂）组连续七天每天给与L-谷氨酰胺（100mg/kg）溶于蒸馏水灌胃然,酒精灌胃前30min,腹腔注射PDTC(120mg/kg后使用56度白酒（24m L/kg）灌胃。在24小时后脱颈处死（禁止饮食）。收集眼球血清检测谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和肝脏指数情况;苏木精和伊红染色（HE染色）观察小鼠肝组织受损情况;过碘酸希夫染色试验来观察小鼠肝糖原变化情况;天狼猩红染色后观察小鼠肝纤维变化;Hoechst33258染料染色后荧光显微镜观察肝细胞凋亡情况;细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase3,热应激蛋白70（HSP70）,细胞色素CYP2E1,NFκB通路相关蛋白IκBα、NFκB-p65,TNF-α的免疫印迹检测。（二）细胞实验:正常肝细胞L02常规培养后分为四组,正常对照组:正常培养长满细胞后换入无谷氨酰胺培养基培养24小时;酒精组:正常培养长满细胞后换入无谷氨酰胺和酒精浓度为30ul/ml的培养基培养24小时;谷氨酰胺+酒精组:正常培养长满细胞后换入谷氨酰胺浓度0.01mol/L和酒精浓度为30ul/ml的培养基培养24小时;谷氨酰胺+酒精+PDTC组:正常培养长满细胞后换入谷氨酰胺浓度0.01mol/L、PDTC浓度为20umol/L和酒精浓度为30ul/ml的培养基培养24小时。CCK-8细胞活性增殖检测;免疫印迹检测相关蛋白表达:细胞凋亡相关蛋白Caspase-3,热应激蛋白70（HSP70）,细胞色素CYP2E1、IκBα、NFκB-p65。结果动物实验:1.谷丙、谷草转氨酶结果以及肝脏指数情况:谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组小鼠血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶水平以及肝脏指数显着降低（P<0.05或P<0.01）而酒精组较正常对照组则显着升高（P<0.05或P<0.01）,其中谷氨酰胺+酒精+PDTC组较谷氨酰胺+酒精组则是降低（P<0.05）,但是肝脏指数却不明显（P>0.05）,表明谷氨酰胺显着减轻了酒精诱导的小鼠急性肝损伤程度,与PDTC组的趋势相同;2.苏木精-伊红染色结果:谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组小鼠肝损伤程度减轻（P<0.05）,而酒精组较正常对照组小鼠出现明显的肝损伤现象（P<0.01）,表明谷氨酰胺减轻了酒精诱导的急性肝损伤,与PDTC组的趋势相同;3.过碘酸希夫染色法染色结果:谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组肝脏糖原明显增加（P<0.01）而酒精组较正常对照组肝脏糖原明显减少（P<0.01）,其中谷氨酰胺+酒精+PDTC组较谷氨酰胺+酒精组则增加（P<0.05）表明是由于谷氨酰胺缓解了肝损伤减少了肝糖原损失且与PDTC组趋势相同;4.天狼猩红染色结果:谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组小鼠肝纤维化程度明显减轻（P<0.01）而酒精较正常对照组则显着增加（P<0.01）,表明谷氨酰胺能够抑制肝纤维化进展;5.Hoechst33528染色结果:谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组肝细胞凋亡率显着下降（P<0.01）而酒精组较正常对照组肝细胞出现了明显的凋亡现象（P<0.01）,其中谷氨酰胺+酒精+PDTC组较谷氨酰胺+酒精组则下降更明显（P<0.05）表明谷氨酰胺能够减少肝细胞凋亡,与PDTC组趋势相同;6.蛋白印迹结果:谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组小鼠肝细胞Bax,Caspase-3,CYP2E1,NFκB-p65和TNF-α的表达含量明显减少（P<0.01）而酒精组较正常对照组表达含量则显着增加（P<0.01）,其中谷氨酰胺+酒精+PDTC组较谷氨酰胺+酒精组表达含量则减少（P<0.05）。谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组小鼠肝细胞Bcl-2,IκBα的蛋白表达量显着增加（P<0.05或P<0.01）而酒精组较正常对照组则显着减少（P<0.01）,其中谷氨酰胺+酒精+PDTC组较谷氨酰胺+酒精组则显着增加（P<0.05）。谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组小鼠肝细胞HSP70的蛋白表达量显着增加（P<0.01）,而酒精组较正常对照组显着增加,其中谷氨酰胺+酒精+PDTC组较谷氨酰胺+酒精组表达含量无明显差异（P>0.05）。NFκB-p65是NFκB信号通路激活的标志物IκBα是NFκB信号通路抑制的标志物,我们的结果表明:谷氨酰胺通过抑制NFκB信号通路减轻酒精诱导的小鼠急性肝损伤;细胞实验:1.CCK-8结果显示:谷氨酰胺+酒精组、谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组肝细胞生存率显着升高（P<0.01）而酒精组较正常对照组肝细胞生存率明显降低（P<0.01）,其中谷氨酰胺+酒精+PDTC组的生存率比谷氨酰胺+酒精组高（P<0.05）说明谷氨酰胺能够显着提高细胞生存率且与PDTC组趋势相同;2.蛋白印迹结果:谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组细胞HSP70的蛋白表达量明显增加（P<0.01）,酒精组较正常对照组明显增加（P<0.05）,其中谷氨酰胺+酒精+PDTC组较谷氨酰胺+酒精无统计学差异（P>0.05）。谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组细胞IκBα的蛋白表达量明显增加（P<0.05或P<0.01）而酒精组较正常对照组明显减少（P<0.01）,其中谷氨酰胺+酒精+PDTC组较谷氨酰胺+酒精组也是明显增加（P<0.05）。谷氨酰胺+酒精组和谷氨酰胺+酒精+PDTC组较酒精组细胞Caspase-3,CYP2E1,NFκB-p65的蛋白表达量明显减少（P<0.05或P<0.01）,而酒精组较正常对照组显着增加（P<0.01）,其中谷氨酰胺+酒精+PDTC组较谷氨酰胺+酒精组则显着减少（P<0.05）,表明谷氨酰胺能够减轻酒精诱导的肝细胞损伤且与NFκB信号通路相关。结论谷氨酰胺能够通过调控NFκB信号通路减轻酒精诱导的小鼠急性肝损伤。
赖芳[6]（2020）在《从胆碱能抗炎通路探讨电针足三里对脓毒症肺损伤的作用及机制》文中指出急性肺损伤（ALI）是危重症常见并发症,临床可引发急性呼吸窘迫综合征,脓毒症是引发ALI的主要病因之一。脓毒症ALI发病率高,死亡率高,临床救治困难,目前仅保护性通气策略、限制性液体管理是有循证医学证据支持可改善预后的措施,尚无药物可明确改善脓毒症ALI预后。寻求对脓毒症ALI有效的干预措施是研究的热点之一。中医药治疗脓毒症、ALI等危重症有着悠久的历史,现代中医救治危重症亦有较多进展。目前多数医家将其归于“暴喘”、“喘脱”范畴,无论中医内治法、外治法均多有长足发展。通过系统整理脓毒症ALI的中西医研究进展,我们发现,针刺足三里在干预脓毒症ALI有一定优势。为进一步系统整理现有文献情况,本研究参考SYRCLE动物实验系统评价的方法对文献中针刺足三里干预脓毒症ALI的动物实验文献进行整理,并在此基础上优化设计动物实验并开展研究,提出从胆碱能抗炎通路探讨针刺足三里对脓毒症ALI的作用及机制,为进一步临床研究及应用提供科学依据。目的:1.全面、系统、客观地评价目前针刺足三里干预脓毒症ALI的已有文献报道情况,总结证据特点,在此基础上优化设计动物实验。2.实验证实针刺足三里对脓毒症ALI的作用,并从胆碱能抗炎通路（CAP）探讨针刺足三里对脓毒症ALI的作用机制。方法:1.参考SYRCLE动物实验系统评价的方法,在PubMed、Cochrane图书馆（CENTRAL）、Embase（Excerpt Medica Database）、中国生物医学文献服务系统（CBM）、中国知网（China National Knowledge Infrastructure,CNKI）、万方医学网（Wanfang Data）和维普数据库（VIP Database）7个数据库从建库到2019年5月31日的文献进行系统地检索、筛选、整理有关针刺足三里干预脓毒症ALI的动物实验文献,总结现有实验结果设计、结果情况,分析影响实验结果的因素,结合文献调研情况,优化设计动物实验方案设计,以进一步探讨针刺足三里对脓毒症ALI的作用及机制。2.参照美国胸科协会对脓毒症ALI动物造模的推荐方式及造模成功评判标准,采用脂多糖（LPS）气道内滴入的方法构建大鼠脓毒症ALI模型,进行生存分析,共60只大鼠随机分为4组:假模型组、电针组、模型+同期麻醉组、模型+非同期麻醉组,每组15只。假模型组给予生理盐水气道内滴入;电针组于气道内滴入LPS造模后30min给予执行电针30min,每日1次,共执行3次;模型+同期麻醉组于LPS气道内滴入造模后,每次电针组执行电针时同期给予麻醉药麻醉;模型+非同期麻醉组于造模后不予任何干预。观察各组大鼠生存情况至造模后第7天。3.同上方法及标准构建大鼠脓毒症ALI模型,进行机制探讨,共35只大鼠随机分为7组:假模型组、模型组、电针组、PNU组（使用CAP通路关键受体α 7nAChR激动剂PNU-282987）、MLA组（使用α 7nAChR拮抗剂甲基牛扁亭）、PNU+电针组、MLA+电针组,每组5只。假模型组给予生理盐水气道内滴入;电针组于造模后30min给予电针30min 1次、造模后24h取材前30min执行电针治疗1次,PNU组、MLA组于造模后30min分别给予PNU-282987、甲基牛扁亭腹腔注射,PNU+电针组、MLA+电针组分别于造模后30min给予相应药物腹腔注射并给予电针30min 1次,造模后24h取材前30min执行电针治疗1次。造模后24h取材,收集大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）,离心后上清液用于BALF蛋白含量测定,细胞沉淀重悬后涂片行白细胞、中性粒细胞计数;称取肺组织湿重及烤干至恒重重量计算肺组织湿干重比;血液离心取上清测定血清蛋白含量,与BALF蛋白含量比较计算肺毛细血管蛋白渗漏程度;取采用肺组织切片HE染色观察肺组织病理改变;采用ELISA法检测血清炎症因子IL-6、IL-10含量;采用Western Blot方法检测肺组织NF-κB蛋白水平、α 7nACHR蛋白水平;以组织活性测试盒（南京建成）测定肺组织ChAT、AChE活性。结果:1.动物实验系统评价结果:从7个数据库共检索获得4417篇文献,按照纳入、排除标准,通过标题、摘要筛选获得74篇文献,通过全文获取及阅读最后共纳入19篇文献。（1）目前关于针刺足三里干预脓毒症肺损伤的动物实验文献大多数（约63%）为5年之前发表,肺损伤评价指标相对粗浅、单一,疗效评估未足够全面;（2）19篇文献中仅4篇文献采用足三里单穴进行干预,其余均配以其他穴位进行干预,针刺足三里穴的作用效果未能充分明确;（3）针刺干预时机89.5%的文献为造模前预处理,仅10.5%为造模后立即针刺干预,与临床实际可切入干预时机相距甚远;（4）机制研究方面不够深入,可结合针刺足三里在脓毒症方面的其他研究结果进一步深入探讨;（5）文献的总体质量较低,偏倚风险较高。根据当前研究进展及系统评价结果,提出采用合适、稳健的脓毒症肺损伤模型,通过死亡率、较全面的肺损伤评价指标评价通过足三里单穴进行造模后等待再行干预处理的效果,并从胆碱能抗炎通路对作用机制进行探讨。2.动物实验结果:（1）生存分析:无论是与模型+同期麻醉组还是与模型+非同期麻醉组相比,电针组7天生存率明显提高（P<0.05）。（2）肺组织病理评分:模型组较假模型组明显升高（P<0.01）;与模型组相比,电针组、PNU组、PNU+电针组大鼠肺组织病理评分明显下降,差异有统计学意义（P<0.01）,电针组下降趋势更明显;MLA组、MLA+电针组与模型组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。（3）肺组织湿/干重比:模型组较假模型组明显升高（P<0.01）;与模型组相比,电针组肺湿/干重比明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）,其余各组差异无统计学意义（P>0.05）。（4）BALF白细胞计数、中性粒细胞计数:模型组较假模型组均明显升高（白细胞,P<0.05;中性粒,P<0.01）;与模型组相比,电针组BALF中白细胞、中性粒细胞有下降趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）。（5）肺毛细血管蛋白渗漏程度:模型组较假模型组明显升高（P<0.01）;与模型组相比,电针组肺毛细血管蛋白渗漏程度下降,差异有统计学意义（P<0.05）,其余各组差异无统计学意义（P>0.05）。（6）ELISA炎症因子检测:血清IL-6、IL-10水平模型组较假模型组均明显升高（均P<0.01）;与模型组相比,电针组血清IL-6水平明显下降（P<0.05）,其余各组差异无统计学意义（P>0.05）;IL-10水平各组间差异无统计学意义（P>0.05）。（7）肺组织ChAT活性检测:模型组较假模型组明显降低（P<0.01）;与模型组相比,电针组肺组织ChAT活性明显升高（P<0.05）。（8）肺组织AChE活性检测:模型组较假模型组明显降低（P<0.01）;与模型组相比,电针组肺组织AChE活性有上升趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）。（9）肺组织NF-κ B蛋白表达:模型组较假模型组明显升高（P<0.05）;与模型组相比电针组肺组织NF-κ B表达明显下降（P<0.05）,其余各组与模型组差异无统计学意义（P>0.05）。（10）肺组织α 7nAChR蛋白表达:假模型组、模型组、电针组肺组织α 7nAChR蛋白表达无明显差异（P>0.05）,其余各组较上述三组均明显升高（P<0.05）。结论:1.目前文献研究提示电针足三里可能可减轻脓毒症肺损伤,但尚未较全面、系统进行验证,机制研究不够深入,胆碱能抗炎通路可能是电针足三里发挥作用的重要通路。2.本研究以LPS气道内滴入建立脓毒症ALI大鼠模型,模型构建成功。在模型构建成功的基础上验证电针足三里干预的有效性,与模型组相比,电针足三里可改善脓毒症ALI大鼠7天死亡率,造模后24h肺损伤明显减轻。3.通过检测胆碱能抗炎通路关键调控因子的活性,本研究发现,电针足三里可显着提高脓毒症肺损伤大鼠肺组织ChAT活性,降低肺组织NF-κ B表达水平,降低炎症因子IL-6的水平,进一步通过与使用胆碱能抗炎通路关键受体α 7nAChR激动剂及拮抗剂的组别比较,发现电针足三里可能是通过神经电刺激促进神经递质乙酰胆碱的生成和释放而产生激活胆碱能抗炎通路发挥抗炎作用,而不是通过影响α 7nAChR表达或增强α 7nAChR与受体激动剂结合等机制产生作用。
孙立娟[7]（2020）在《超声二维斑点追踪技术评价柚皮苷对LPS诱导心肌损伤的保护作用及其分子机制研究》文中提出目的:脓毒症是由宿主对感染的反应失调引起的危及生命的器官功能障碍。脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）是革兰氏阴性细菌外膜的主要成分,可导致人或动物脓毒症,进而导致多器官损伤和功能衰竭,而心脏是最常受累的器官之一,可导致心肌收缩力减弱、心率减慢等,严重地影响了心脏的功能,这成为脓毒症患者发病率和死亡率的主要原因。因此,弄清脓毒症和心肌损伤之间的发病机理,并进一步找到有效的治疗方法来缓解脓毒症心肌损伤是非常重要的。柚皮苷（naringin,Nar）属于一种天然的类黄酮,芸香科植物葡萄柚、橙及橘等是其主要来源,同时Nar也是许多中草药的主要活性成分之一。研究表明,类黄酮的摄入与心血管疾病的发病率和死亡率呈负相关。二维斑点追踪成像技术（two dimensional speckle tracking imaging,2D-STI）属于超声心动图一种相对较新的技术,不受心脏前后负荷、声束方向、角度及取样位置的影响,具有更高的敏感性和可重复性,可以定量评估整体和（或）局部心肌功能,并能够早期发现“亚临床”心功能障碍。相对于整体应变,分层应变更符合左心室心肌的三层心肌带解剖结构,对功能的评价更加全面。本研究的目的是采用2D-STI评价Nar对脓毒症心肌病大鼠的左室心肌整体及局部应变的影响,检测Nar是否对脓毒症心肌损伤起到保护作用及其可能的分子作用机制,为Nar治疗脓毒症心肌损伤提供实验依据。研究方法:1、二维斑点追踪技术评价柚皮苷对LPS诱导心肌损伤大鼠左室功能的影响:（1）采用LPS腹腔注射诱导脓毒症心肌损伤大鼠模型,将75只雄性SD大鼠随机分为5组:对照组;LPS组;Nar低剂量治疗(LPS+Nar50)组;Nar高剂量治疗(LPS+Nar100)组;阳性对照（LPS+Dexa）组,每组15只。于LPS注射6 h后行戊巴比妥钠麻醉,采用GE Vivid E9彩色超声诊断仪对五组大鼠进行常规超声心动图及二维斑点追踪成像技术检查。常规超声心动图测定项目包括:左室舒张末内径（left ventricular end diastolic diameter,LVEDd）、左室舒张末容积（end diastolic Volume,EDV）、左室收缩末内径（left ventricular end systolic diameter,LVEDs）、左室收缩末容积（end-systolic volume,ESV）、左室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）、左室短轴缩短率（short axis shortening rate,FS）等。二维斑点追踪成像技术测定项目包括:左室纵向、圆周及径向三个维度心肌整体及分层运动变化情况。（2）大鼠超声检查后于麻醉状态下采血,全自动生化分析仪检测血清肌酸激酶（creatine kinase,CK）及乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）水平。（3）HE染色观察5组大鼠心肌组织病理变化情况,并依据损伤程度进行组织病理学评分。（4）心肌组织匀浆后检测髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）的活性。2、柚皮苷对LPS诱导心肌损伤大鼠炎症反应的抑制作用。利用第一部分大鼠脓毒症心肌损伤模型,采用Elisa法检测血清中TNF-α蛋白的表达水平,通过Real-time PCR检测心肌组织中TNF-α,IL-6,IL-1β,iNOS的mRNA表达水平,免疫组织化学法检测心肌组织NF-κB p65在胞浆及胞核的表达情况并进行评分,之后提取各组心肌组织总蛋白及核蛋白,通过Western Blot法检测SIMD大鼠心肌组织中NF-κB/iNOS的蛋白表达水平及NF-κB核移位情况。3、调节PI3K/AKT/NF-κB通路影响柚皮苷在LPS诱导的H9c2心肌细胞损伤的作用。（1）培养H9c2心肌细胞系,加入不同浓度的柚皮苷和（或）LPS孵育后,采用CCK-8比色法检测H9c2心肌细胞活力,筛选出柚皮苷有效保护心肌细胞的最佳浓度。（2）根据不同药物处理将H9c2心肌细胞分为四组:对照组;LPS组;柚皮苷低剂量治疗(LPS+Nar40)组;柚皮苷高剂量治疗(LPS+Nar80)组,采用Real-time PCR检测H9c2心肌细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6,iNOS的mRNA表达水平,应用Western blot法检测H9c2心肌细胞中NF-κB,p-NF-κB,IκBα,p-IκBα,iNOS的蛋白表达水平。（3）加入PI3K抑制剂LY294002,检测下游通路蛋白表达。将细胞分为五组:对照组;LPS组;LPS+Nar80组;LPS+Nar80+LY294002;LY294002。细胞免疫荧光检测五组细胞中NF-κB p65的蛋白表达及核移位情况,Western blot检测各组细胞中p-AKT,AKT,NF-κB p65核、浆蛋白的表达水平。结果:1、二维斑点追踪技术评价柚皮苷对LPS诱导心肌损伤大鼠左室功能的影响:（1）造模6 h后,对照组及LPS+Dexa组大鼠无明显异常,其余3组大鼠均行动迟缓,其中LPS组大鼠出现呼吸增快,精神萎靡,嗜睡,竖毛,排稀水样便等,LPS+Nar50组、LPS+Nar100组大鼠一般状况较模型组减轻,LPS+Nar50组大鼠精神稍萎靡,竖毛,排少量稀水样便,LPS+Nar100组大鼠精神尚好,排少量稀水样便。（2）LPS组左室较对照组增大,EF降低。LPS+Nar50组LVEDd、EDV及ESV较LPS组得以改善,LVEDs、LVEF及FS三指标在两组间无明显统计学差异,而LPS+Nar100组及LPS+Dexa组改善显着。（3）LPS组整体应变及应变率较对照组均减低,LPS+Nar50组整体纵向应变及应变率、圆周应变较LPS组增高,而整体圆周应变率、径向应变及应变率两组间无统计学差异,LPS+Nar100组及LPS+Dexa组各整体应变及应变率均升高。（4）系统自动描记心肌的内、中、外三层,圆周及纵向应变从心内膜下心肌层到心外膜下心肌层逐渐降低,与对照组相比,LPS组各参数降低,且心内膜下心肌损伤最重,LPS+Nar50组除心外膜下心肌层圆周应变外,余指标均升高,高剂量治疗组及阳性对照组缓解了心肌的损伤。（5）LPS组心肌酶CK及LDH较对照组显着升高,LPS+Nar50组、LPS+Nar100组及LPS+Dexa组的CK及LDH较LPS组均降低,差异有统计学意义。（6）HE染色显示,对照组大鼠心肌细胞结构正常,心肌纤维肌丝束排列整齐,横纹清晰;而LPS组大鼠中心肌细胞水肿,细胞间隙变宽,心肌纤维部分断裂,炎性细胞增多,组织病理学评分升高;柚皮苷治疗组及阳性对照组大鼠上述病理改变明显缓解,评分降低。MPO活性是炎症部位中性粒细胞聚集的指标,LPS组心肌组织中MPO活性较对照组升高,治疗组及阳性对照组显着降低。2、柚皮苷对LPS诱导心肌损伤大鼠炎症反应的抑制作用。（1）与对照组相比较,LPS组大鼠血清中TNF-α蛋白水平明显升高,柚皮苷低、高剂量治疗组及阳性对照组较LPS组均减低。（2）LPS组心肌组织中炎症因子TNF-α,IL-1β,IL-6及iNOS较对照组的mRNA表达水平显着升高,LPS+Nar50组心肌组织TNF-α,IL-1β及IL-6较LPS组均减低,两组间iNOS的m RNA表达水平无统计学差异,LPS+Nar100组及LPS+Dexa组均降低,差异有统计学意义。（3）IHC染色检测LPS处理6小时后大鼠心脏组织中NF-κB p65的表达。对照组黄染的NF-κB p65蛋白大部分出现在细胞质中,LPS组中NF-κB p65在心肌细胞核中表达增强,胞核黄染,胞质染色变浅。LPS+Nar组以及LPS+Dexa组中NF-κB p65在细胞核中的表达均减低。LPS处理后,IHC评分较对照组显着增加,Nar和Dexa治疗后,IHC评分明显降低。（4）LPS组中NF-κB p65核、浆表达比值较对照组升高,Nar治疗组和LPS+Dexa组比值较LPS组降低。（5）LPS组大鼠中iNOS蛋白表达水平较对照组明显升高,LPS+Nar100治疗组和阳性对照组iNOS水平均降低。3、调节PI3K/AKT/NF-κB通路影响柚皮苷在LPS诱导的H9c2心肌细胞损伤的作用。（1）CCK-8法检测Nar对H9c2心肌细胞活力的影响。加入10μM、20μM、40μM、80μM、160μM及320μM的Nar并不影响心肌细胞的存活力。用LPS（10μg/ml）处理24小时之后检测心肌细胞活力下降到62.33%±0.02%。与对照组相比,两组间存在统计学差异（P<0.05）。LPS+Nar组中,10μM及20μM的Nar治疗组与LPS组相比无统计学差异,40μM、80μM、160μM及320μM的Nar治疗组细胞存活率明显升高,与LPS组相比,两组具有统计学差异。（2）与对照组相比较,LPS组H9c2心肌细胞TNF-α,IL-1β,IL-6及iNOS的mRNA表达水平显着增高,LPS+Nar40组及LPS+Nar80组均降低,差异有统计学意义。（3）LPS组NF-κB、IκB磷酸化水平及iNOS表达较对照组均升高,LPS+Nar40组NF-κB磷酸化水平及iNOS蛋白表达降低,与LPS组相比,两组具有统计学意义,而IκB磷酸化水平无统计学意义,LPS+Nar80组中NF-κB p65、IκB磷酸化水平及iNOS表达均明显减低。（4）LPS组AKT磷酸化蛋白水平较对照组减低,NF-κB p65在胞核、胞浆中表达比值（N/C值）升高,免疫荧光检测可见NF-κB p65在细胞核的荧光表达增多。LPS+Nar80组AKT磷酸化水平较LPS组升高,NF-κB p65的N/C值降低,NF-κB p65在细胞核的荧光表达减少。LPS+Nar80+LY294002组心肌细胞AKT磷酸化水平较LPS+Nar80组减低,NF-κB p65的N/C值升高,免疫荧光检测可见NF-κB p65在胞核中的荧光表达增多。结论:1、基于2D-STI的分层应变技术可用于评价柚皮苷预处理对脓毒症心肌损伤大鼠早期左室功能的影响,且对于脓毒症心肌损伤大鼠来说,心内膜下心肌损伤最重,从心内膜下心肌层至心外膜下心肌层逐渐下降;2、柚皮苷抑制了脓毒症心肌损伤大鼠的炎症反应,起到了保护作用;3、柚皮苷通过调节PI3K/AKT/NF-κB途径抑制LPS诱导的H9c2心肌细胞损伤,为柚皮苷治疗脓毒症心肌损伤提供了实验依据。
马俊勋[8]（2012）在《严重创伤后胰岛素强化治疗临床实验研究》文中提出背景：严重创伤后应激性高血糖将导致创伤患者死亡率增加和预后不良。研究表明，严重创伤后患者可产生促炎细胞因子TNF-α、IL-6，加重内皮系统与肝组织损伤，最终导致机体凝血功能紊乱，死亡率明显增加，具体机制可能与核转录因子NF-κB有密切关系，但其确切机制尚不清楚。严重创伤后胰岛素强化治疗降低死亡率是否与抑制高炎状态、降低NF-κB水平、保护危重患者内皮及肝功能有关联，目前没有统一的认识。因此，本研究探讨胰岛素强化治疗是否抑制创伤后NF-κB水平，保护内皮细胞、纠正凝血功能紊乱、保护脏器及降低病死率具有重要的临床意义。本文分两个部分，第一部分进行胰岛素强化治疗对严重创伤患者炎症介质、内皮系统及凝血功能影响的临床实验研究；第二部分进行胰岛素强化治疗对高血糖大鼠模型肝损伤保护机制的基础实验研究。目的：1、探讨胰岛素强化治疗对临床严重创伤患者应激性高血糖的炎症介质、外周血核转录因子κB的影响；2、胰岛素强化治疗对临床严重创伤患者应激性高血糖的内皮系统、凝血功能的影响；3、从动物学水平研究胰岛素强化治疗对肝脏损伤的保护作用。方法：第一部分中,实验一TNF-α、IL-6和NF-κB分别通过ELISA和PCR检测；实验二VEGF、ET-1、CRP和CEC计数分别通过ELISA检测、梯度密度分离计数;实验三PC、PS、TM、t-PA和PAI-1通过ELISA检测，AT（III）通过酶联免疫吸附试验法检测。第二部分中，实验一的ALT、 AST、TBi、ALB、TP和ALP全自动生化仪检测；通过HE染色和组织透射电镜观察肝组织损伤情况；实验二NF-κB表达通过组织免疫组化、IκB通过蛋白电泳检测表达。结果：在第一部分临床实验研究中，胰岛素强化治疗能缩短患者的抗生素使用时间、入住ICU时间和平均住院天数，降低院内感染、多脏器衰竭发生率，降低死亡率；能降低血清炎症介质TNF-α、IL-6水平；能显着降低NF-κB表达；能降低VEGF、ET-1、CRP和外周血CEC计数；能显着缩短APTT、PT、TT，升高FBG、PC、PS，降低TM、PAI-1、DD。在第二部分动物实验研究中，成功建立高血糖肝损伤大鼠模型，胰岛素强化治疗能保护大鼠受损伤肝脏功能，增加白蛋白和总蛋白的含量；病理及透射电镜显示能有效减轻肝细胞的损伤，促使肝细胞再生；免疫组化能明显降低肝细胞NF-κB的表达；能使肝细胞内磷酸化的IκB表达减少，有效保护肝脏功能。结论：1、胰岛素强化治疗可有效下调创伤后炎症介质水平，降低NF-κB的转录水平；2、胰岛素强化治疗可保护创伤后机体内皮细胞损伤；3、胰岛素强化治疗能有效改善严重创伤凝血系统功能紊乱；4、胰岛素强化治疗能显着降低高血糖肝损伤模型大鼠的肝功能，有效保护肝细胞。
秦志丹[9]（2012）在《SD大鼠腹腔高压动物模型建立及肝损伤的实验研究》文中提出目的：建立大鼠腹腔高压（Intra-abdominal hypertension, IAH）模型，观察不同腹腔压力（Intra-abdominal pressure, IAP）及持续不同时间对肝脏的影响，为进一步研究IAH与多器官功能障碍关系作准备，为临床监测IAP的频率提供实验依据。方法：通过往腹腔内注入氮气建立大鼠IAH模型；以一次性使用静脉输液针穿刺腹腔，连接一次性输液器，通过三通管连接血压计、氮气储气袋和50ml注射器。将45只健康雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠，随机分为对照组（15只）和模型组（30只）。模型组按不同IAP水平分为10mmHg组和20mmHg组，该两组以IAP维持1h、2h和4h三个时间点再随机分为三个组，每组5只SD大鼠。对照组仅行腹腔穿刺置针处理，不往腹腔内注入氮气，亦随机分为1h、2h和4h组。比较模型组初次达相应IAP并稳定30s不变时，氮气注入量的变化。所有大鼠达预定实验时间点时，迅速腹主动脉采血检测血清AST、ALT的含量变化，并取肝右叶组织行组织病理学检查。结果：1.动物模型：本研究制作的大鼠IAH模型制作简便，费用低，IAP稳定可靠，副作用少，克服了以往实验所采用的IAH动物模型的缺点。2.两模型组大鼠质量比较，差异无统计学意义（IAP10mmHg组:311.73±35.18g vs. IAP20mmHg组:295.67±19.99g，t=1.538，P＞0.05）。IAP20mmHg组大鼠腹腔内氮气注入量（146.87±14.25）ml明显大于IAP10mmHg组（127.73±12.00）ml（t=3.978，P＜0.001）。3.IAP10mmHg4h组血清AST、ALT含量分别为（297.40±48.42）U/L、（173.60±73.67）U/L，均显着高于IAP10mmHg1h组（169.40±47.69）U/L、（74.00±22.57）U/L（均P＜0.01）和IAP10mmHg2h组（223.40±61.78）U/L、（103.60±40.44）U/L（均P＜0.05）；但IAP10mmHg2h组与1h组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。IAP20mmHg4h组血清AST、ALT含量分别为（398.80±83.35）U/L、（237.20±74.40）U/L，均显着高于IAP20mmHg1h组（199.60±33.95）U/L、（81.40±30.53）U/L（均P＜0.01）和IAP20mmHg2h组（306.40±72.40）U/L、（154.20±42.03）U/L（均P＜0.05）；IAP20mmHg2h组血清AST、ALT含量与IAP20mmHg1h组相比，差异亦有统计学意义（均P＜0.05）。模型组IAP维持1h血清AST、ALT含量变化与对照组1h组比较，差异无统计学意义（均P＞0.05）。IAP维持2h血清AST、ALT含量变化：IAP20mmHg2h组血清AST、ALT含量分别为（306.40±72.40）U/L、（154.20±42.03）U/L，均显着高于对照组2h组（158.00±33.92）U/L、（77.60±7.16）U/L （均P＜0.01）和IAP10mmHg2h组（223.40±61.78）U/L、（103.60±40.44）U/L（均P＜0.05）。IAP维持4h血清AST、ALT含量变化：IAP20mmHg4h组血清AST、ALT含量分别为（398.80±83.35）U/L、（237.20±74.40）U/L，与对照组4h组（160.80±21.30）U/L、（75.20±18.43）U/L比较，差异具有统计学意义（均P＜0.01），与IAP10mmHg4h组血清AST（297.40±48.42）U/L比较，差异亦有统计学意义（P＜0.05），但与IAP10mmHg4h组血清ALT（173.60±73.67）U/L比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；IAP10mmHg4h组血清AST、ALT含量与对照组4h组比较，差异具有统计学意义（P＜0.01，P＜0.05）。4.肝组织病理形态学变化：IAP10mmHg4h组中央静脉周边少许肝细胞轻度浊肿变性，可见空泡变性，核肿胀，近中央静脉区肝窦轻度扩张、充血。IAP20mmHg1h组，肝小叶结构清楚，中央静脉周边少许肝细胞轻度浊肿变性，排列稍紊乱，细胞边界欠清晰，肝窦轻度充血；IAP20mmHg组随IAP持续时间延长肝细胞损伤范围增大。IAP20mmHg4h组，肝小叶结构紊乱，可见肝细胞点状坏死，少许炎症细胞浸润。结论：1.成功制作了稳定可靠的大鼠IAH动物模型，本IAH模型制作、操作简单，耗费低，容易复制，对肝功能损伤效果明显。2.IAP达一定程度时，较小的腹腔内容积变化亦可引起较大的IAP变化。3.IAH可导致肝损伤，同一IAP，IAP持续时间越长，肝损伤越严重；同一作用时间，IAP越高，肝损伤越重。IAP10mmHg作用4h中央静脉周边少许肝细胞轻度水肿；IAP20mmHg作用1h可能已有轻度肝损伤，IAP20mmHg作用4h，可见肝细胞点状坏死，少许炎症细胞浸润。
丁文博,王飞[10]（2012）在《脓毒症大鼠肝损伤机制及参附注射液治疗作用研究》文中研究说明目的:通过大白鼠肠穿孔建立脓毒血症模型,观察大白鼠肝组织中核因子-κB（NF-κB）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,并使用参附注射液治疗,探讨大白鼠脓毒血症引起肝损伤的发病机制和参附注射液的治疗作用。方法:手术造成大白鼠肠穿孔并引发脓毒血症。健康大白鼠65只,随机分为正常对照组（NS组）、实验组（CLP组）和治疗组（SF组）。NS组开腹,分离出盲肠,穿线不结扎-穿孔,然后关腹,术后腹腔注射生理盐水（20mL/kg）。CLP组开腹,分离出盲肠,结扎并穿孔,然后关腹,术后腹腔注射生理盐水（20mL/kg）,然后关腹。SF组术后腹腔注射参附,然后关腹,并每隔10h追加一次给药。根据不同时间点将CLP组和SF组分为3h、6h、12h、24h四个亚组,每个亚组各5只大鼠,在4个不同手术时间点分别通过腹主动脉取血,并无菌提取肝组织标本,检测单个核细胞中NF-κB活性、TNF-α水平。结果:与NS组对比,CLP组:①单个核细胞中NF-κB活性明显增高,6h最明显（P<0.01）;②血清TNF-α浓度明显升高,6h最明显（P<0.01）;SF组与CLP组对比,参附注射液可显着降低NF-κB活性、TNF-α水平（P<0.01）。结论:①NF-κB和TNF-α参加了脓毒血症的发生发展,导致肝脏损伤;②参附注射液可能通过减少NF-κB以及TNF-α的释放,减轻肝脏损伤,对脓毒血症起治疗作用。
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
| 1 脓毒症肝损伤的相关机制 |
| 1.1 肝脏微循环改变 |
| 1.2 线粒体损伤 |
| 1.3 炎症反应亢进 |
| 1.4 内质网应激 |
| 1.5 库普弗细胞 |
| 2 自噬及其作用 |
| 2.1 杀灭病原体 |
| 2.2 参与免疫反应 |
| 3 自噬相关调节机制 |
| 3.1 自噬胆碱能抗炎通路 |
| 3.2 自噬相关信号转导通路 |
| 3.3 自噬调节凝血功能 |
| 4 自噬与脓毒症肝损伤 |
| 5 总结与展望 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 分组及处理 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 免疫组化法实验步骤 |
| 1.3.2 蛋白质印迹法实验步骤 |
| 1.3.3 肝组织相关细胞因子检测 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 免疫组织化学检测大鼠肝组织NF-κB蛋白表达 |
| 2.2 蛋白质印迹法检测NF-κB蛋白表达 |
| 2.3 大鼠肝组织病理学情况 |
| 2.4 大鼠肝组织TNF-α及IL-6水平 |
| 3 讨论 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 肝脏疾病 |
| 1.2 酒精性肝损伤 |
| 1.2.1 酒精消费的现状 |
| 1.2.2 长期饮酒的危害 |
| 1.2.3 酒精性肝病的临床诊断 |
| 1.2.4 酒精性肝病的流行病学特征 |
| 1.2.5 酒精性肝损伤的危险因素 |
| 1.2.6 酒精性肝损伤的发生机制 |
| 1.2.7 酒精性肝损伤的药物治疗 |
| 1.3 穿心莲内酯 |
| 1.3.1 穿心莲内酯的生物学活性 |
| 1.3.2 穿心莲内酯的临床应用研究 |
| 1.4 选题内容、目的及创新点 |
| 1.4.1 主要研究内容 |
| 1.4.2 本论文的研究目标 |
| 1.4.3 本论文的特色及创新之处 |
| 第2章 穿心莲内酯的文献研究及临床应用现状分析 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 穿心莲内酯相关研究的文献计量分析 |
| 2.2.1 材料与方法 |
| 2.2.2 结果 |
| 2.3 穿心莲内酯临床应用的病例分析 |
| 2.3.1 对象与方法 |
| 2.3.2 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 穿心莲内酯对酒精性肝损伤的保护作用及其机制研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 细胞学实验 |
| 3.2.1 材料与方法 |
| 3.2.2 结果 |
| 3.3 动物实验 |
| 3.3.1 材料与方法 |
| 3.3.2 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 酒精性肝损伤的模型 |
| 3.4.2 酒精性肝损伤的判定指标 |
| 3.4.3 酒精性肝损伤的分子机制 |
| 3.4.4 酒精性肝损伤的保护药物 |
| 3.5 不足与展望 |
| 第4章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间取得的科研成果 |
| 致谢 |
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研方内容与方法 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 物品准备及实验分组 |
| 2.2 脓毒症模型的构建 |
| 2.3 标本的获取及保存 |
| 2.4 ELISA法测各组大鼠血清中IL-1β、TNF-α、I-FABP的表达水平 |
| 2.5 苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肠道病理改变 |
| 2.6 Western Blot 法测定大鼠小肠组织 NF-κB p65 及 NLRP3 炎症小体蛋白的表达 |
| 2.7 免疫组化(IHC)法检测肠道组织 Claudin-1、Occludin、NLRP3、Caspase-1、ASC 的表达水平 |
| 3 质量控制 |
| 4 统计方法 |
| 5 技术路线图 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 脓毒症肠道功能障碍的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间的成果 |
| 导师评阅表 |
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 酒精性肝损伤概述 |
| 1.1.1 酒精性肝损伤的流行病学 |
| 1.1.2 酒精性肝损伤的病理学特点 |
| 1.1.3 酒精性肝损伤的影响因素 |
| 1.2 酒精性肝损伤的机制 |
| 1.2.1 乙醇导致的肝损伤 |
| 1.2.2 对损伤的炎症反应 |
| 1.2.3 胃肠道通透性变化与微生物群 |
| 1.2.4 NFκb与酒精性肝损伤 |
| 1.3 谷氨酰胺 |
| 1.3.1 谷氨酰胺概述 |
| 1.3.2 谷氨酰胺的功能与应用 |
| 1.4 酒精性肝损伤动物模型 |
| 第2章 前言 |
| 第3章 材料与方法 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 细胞 |
| 3.1.2 实验动物 |
| 3.1.3 仪器设备 |
| 3.1.4 实验试剂 |
| 3.1.5 溶液配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 实验流程图 |
| 3.3 动物实验 |
| 3.3.1 检测谷丙谷草转氨酶活性 |
| 3.3.2 制作小鼠肝组织切片 |
| 3.3.3 HE染色检测各组小鼠的肝脏损伤情况 |
| 3.3.4 过碘酸希夫染色法染色后观察小鼠肝脏中糖原的情况 |
| 3.3.5 天狼猩红染色法染色后观察小鼠肝组织纤维化 |
| 3.3.6 Hoechst33258 试剂盒检测小鼠肝细胞中凋亡情况 |
| 3.3.7 蛋白免疫印迹 |
| 3.4 细胞实验 |
| 3.4.1 细胞培养 |
| 3.4.2 免疫印迹蛋白检测 |
| 3.4.3 免疫印迹法检测细胞蛋白表达结果 |
| 3.4.4 CCK-8细胞活性检测 |
| 3.5 实验数据的统计学分析 |
| 第4章 结果 |
| 4.1 动物试验 |
| 4.1.1 谷丙转氨酶、谷草转氨酶酶活性以及肝脏指数的检测 |
| 4.1.2 HE染色结果及肝细胞坏死评分 |
| 4.1.3 过碘酸希夫氏染色结果 |
| 4.1.4 天狼猩红染色结果 |
| 4.1.5 肝组织Hoechst33258 染色结果 |
| 4.2 细胞试验 |
| 4.2.1 L02细胞生存率检测 |
| 4.2.2 免疫印迹法检测细胞蛋白表达结果 |
| 第5章 讨论 |
| 5.1 小鼠急性酒精性肝损伤中谷氨酰胺与转氨酶和肝组织损伤的关系 |
| 5.2 小鼠急性酒精性肝损伤中谷氨酰胺和糖原储备的关系 |
| 5.3 小鼠急性酒精性肝损伤中谷氨酰胺和细胞凋亡的关系 |
| 5.4 小鼠急性酒精性肝损伤中谷氨酰胺对肝细胞应激分子HSP70的影响 |
| 5.5 小鼠急性酒精性肝损伤中谷氨酰胺和CYP2E1的关系 |
| 5.6 急性酒精性肝损伤过程谷氨酰胺与NF-κB的关系 |
| 5.7 谷氨酰胺与酒精诱导的细胞毒性作用 |
| 5.8 问题与展望 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 第7章 英文缩写词表 |
| 第8章 附录Ⅰ图及说明 |
| 第9章 致谢 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 1.1 脓毒症急性肺损伤的现代医学研究进展 |
| 1.1.1 定义及流行病学 |
| 1.1.2 发病机制 |
| 1.1.3 脓毒症急性肺损伤的西医治疗进展 |
| 1.2 脓毒症急性肺损伤的中医研究进展 |
| 1.2.1 祖国医学对脓毒症急性肺损伤的认识 |
| 1.2.2 祖国医学对脓毒症急性肺损伤的治疗进展 |
| 1.3 针刺足三里干预脓毒症急性肺损伤的研究进展 |
| 1.3.1 针刺足三里干预脓毒症急性肺损伤的中医理论基础 |
| 1.3.2 针刺足三里干预脓毒症急性肺损伤的西医理论依据及研究进展 |
| 1.4 小结 |
| 第二章 针刺足三里对实验性脓毒症急性肺损伤的系统评价 |
| 2.1 研究目的 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 检索策略 |
| 2.2.2 纳入与排除标准 |
| 2.2.3 数据提取与偏倚风险评价 |
| 2.3 研究结果 |
| 2.3.1 纳入文献筛选流程及结果 |
| 2.3.2 纳入研究的基本特征 |
| 2.3.3 研究质量和发表偏倚 |
| 2.3.4 疗效评价 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 影响针刺足三里改善脓毒症急性肺损伤作用的因素 |
| 2.4.2 针刺足三里改善脓毒症急性肺损伤的结局指标的选择及机制探讨 |
| 2.4.3 局限性 |
| 2.4.4 进一步实验研究的方案优化 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 从胆碱能抗炎通路探讨电针足三里对脓毒症急性肺损伤的作用及机制研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 主要仪器 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要试剂配制 |
| 3.2 实验动物 |
| 3.3 实验流程及方案 |
| 3.3.1 实验流程图 |
| 3.3.2 实验分组 |
| 3.3.3 造模方法 |
| 3.3.4 干预措施 |
| 3.4 取材、指标观察与检测 |
| 3.4.1 血清样本收集 |
| 3.4.2 支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)收集 |
| 3.4.3 BALF白细胞计数及中性粒细胞计数计算 |
| 3.4.4 肺组织取材 |
| 3.4.5 肺组织病理切片、苏木素-伊红(HE)染色 |
| 3.4.6 肺组织毛细血管蛋白渗漏程度评估 |
| 3.4.7 肺湿/干重比值 |
| 3.4.8 酶联免疫吸附法(ELISA)检测 |
| 3.4.9 肺组织病理评分 |
| 3.4.10 肺组织乙酰胆碱转移酶(ChAT)活性检测 |
| 3.4.11 肺组织乙酰胆碱酯酶(AChE)活性检测 |
| 3.5 统计分析 |
| 3.6 结果 |
| 3.6.1 一般现象观察及生存分析 |
| 3.6.2 肺组织病理结果 |
| 3.6.3 大鼠肺组织湿/干重比(wet/dry ratio,W/D) |
| 3.6.4 BALF白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)计数 |
| 3.6.5 肺毛细血管蛋白渗漏程度 |
| 3.6.6 ELISA检测结果 |
| 3.6.7 ChAT、AChE活性检测 |
| 3.6.8 Western Blot检测结果 |
| 3.7 小结 |
| 3.8 讨论 |
| 3.8.1 ALI动物模型的评判标准 |
| 3.8.2 本实验采用的脓毒症ALI动物造模方式的理论依据及模型构造情况 |
| 3.8.3 干预措施以外的影响因素 |
| 3.8.4 肺脏局部CAP参与电针足三里对脓毒症ALI的调节 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间科研成果及奖励 |
| 致谢 |
| 附件 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分:二维斑点追踪技术评价柚皮苷对LPS诱导心肌损伤大鼠左室功能的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要试剂和仪器 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.1.3 主要试剂的配置 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 动物模型的制备 |
| 2.2.3 常规超声心动图检查 |
| 2.2.42 D-STI检测分析 |
| 2.2.5 心肌酶检测 |
| 2.2.6 心肌病理检查 |
| 2.2.7 髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性检测 |
| 2.2.8 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 各组大鼠一般情况的比较 |
| 3.2 常规超声指标的对比 |
| 3.3 各组大鼠左心室整体应变及应变率的比较 |
| 3.4 各组大鼠左心室分层应变结果的比较 |
| 3.5 大鼠STI指标的重复性检验 |
| 3.6 Nar降低了SIMD大鼠血清心肌酶水平 |
| 3.7 各组大鼠心肌组织病理检查的比较 |
| 3.8 Nar降低了SIMD大鼠心肌组织MPO的活性 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分:柚皮苷对LPS诱导心肌损伤大鼠炎症反应的抑制作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要试剂和仪器 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.1.3 主要试剂的配置 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 大鼠SIMD模型的制备及取材 |
| 2.2.2 酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, Elisa)检测血清中TNF-α蛋白表达水平 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR)检测SIMD大鼠心肌组织中TNF-α,IL-1β,IL-6和iNOS的mRNA表达水平 |
| 2.2.4 免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)检测心肌组织NF-κBp65的表达 |
| 2.2.5 Western Blot检测SIMD大鼠心肌组织中NF-κB/i NOS的蛋白表达及NF-κB核移位 |
| 2.2.6 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 Nar对SIMD大鼠血清中炎症因子TNF-α蛋白水平的影响 |
| 3.2 Nar对SIMD大鼠心肌组织中TNF-α、IL-1β、IL-6及iNOS的mRNA表达水平的影响 |
| 3.3 Nar降低了SIMD大鼠心肌组织中NF-κB/i NOS的蛋白表达及NF-κB核移位 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三部分:调节PI3K/AKT/NF-κB通路影响柚皮苷在LPS诱导的H9c2 心肌细胞损伤的作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要试剂和仪器 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.1.3 细胞用药的配置 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞培养 |
| 2.2.2 CCK-8 法检测Nar对 H9c2 心肌细胞活性的影响 |
| 2.2.3 Real-time PCR检测Nar对 LPS诱导的H9c2 心肌细胞中TNF-α,IL-1β,IL-6,i NOS的m RNA表达水平的影响 |
| 2.2.4 Western Blot检测Nar对 LPS诱导的H9c2 心肌细胞中NF-κB/i NOS通路蛋白的影响 |
| 2.2.5 Western Blot检测Nar对 LPS诱导的H9c2 心肌细胞中PI3K/AKT/NF-κB通路的影响 |
| 2.2.6 细胞免疫荧光检测心肌细胞中NF-κBp65的蛋白表达及核移位情况 |
| 2.2.7 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 Nar提高了LPS诱导的H9c2 心肌细胞活性 |
| 3.2 Nar降低了LPS诱导的H9c2 心肌细胞炎症因子的m RNA表达水平 |
| 3.3 Nar抑制LPS诱导的H9c2 心肌细胞中NF-κB/i NOS通路蛋白的表达 |
| 3.4 Nar对 LPS诱导的H9c2 心肌细胞PI3K/AKT/NF-κB通路蛋白的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 胰岛素强化治疗对严重创伤患者的临床实验研究 |
| 实验一 胰岛素强化治疗对严重创伤患者 TNF-α、IL-6 及外周血 NF-κB 的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 胰岛素强化治疗对严重创伤患者内皮系统的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 胰岛素强化治疗对严重创伤患者凝血功能的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 胰岛素强化治疗对高血糖大鼠肝损伤模型基础实验研究 |
| 实验一 高血糖大鼠肝损伤模型建立和胰岛素强化治疗对其肝功能影响及病理、电镜的观察 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 胰岛素强化治疗对高血糖大鼠肝损伤模型 NF-κB 的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 文献综述一 严重创伤后早期胰岛素强化治疗的临床价值 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 胰岛素强化治疗在创伤中的最新进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述三 胰岛素强化治疗对严重创伤后应激性高血糖治疗策略 |
| 参考文献 |
| 英文缩写一览表 |
| 攻读博士学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
| 中英文缩写索引 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述：脓毒症肝损伤机制及防护探讨 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文情况 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 仪器和主要试剂 |
| 1.2 实验分组 |
| 1.3 模型制作和标本采集 |
| 1.4 观察指标与检测方法 |
| 1.4.1 NF-κB活性测定 |
| 1.4.2 肝组织TNF-α的检测 |
| 1.5 数据处理与统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 肝组织中NF-κB 的表达和分布 |
| 2.2 肝组织中TNF-α的水平 |
| 3 讨论 |
| 3.1 NF-κB在脓毒症大鼠肝损伤中的作用 |
| 3.2 TNF-α在脓毒症大鼠肝损伤中的作用 |
| 3.3 参附注射液对脓毒症大鼠肝损伤的保护作用 |
| 4 结论 |
