宋赏[1]（2021）在《一步扩张法建立经皮肾通道对猪积水肾损伤的影响》文中研究表明目的:探讨一步到位筋膜扩张法建立经皮肾通道对积水肾损伤的影响,为一步到位筋膜扩张法在经皮肾镜取石术中的临床应用提供参考。方法:1.小型猪可逆性单侧输尿管部分梗阻模型建立成年健康雄性贵州小型猪9头,选择套管法建立输尿管部分梗阻模型,切除左肾,随机分为分为假手术组（S组）、持续性单侧输尿管部分梗阻组（CPUUO组）和可逆性单侧输尿管部分梗阻组（RPUUO组）,RPUUO组和CPUUO组用套管法造成右侧输尿管部分梗阻。术后第14天,RPUUO组解除梗阻,CPUUO组不解除梗阻。通过检测血清学指标尿素氮、肌酐反应肾功能改变情况,通过肾脏彩超反应肾积水改变情况,通过苏木精-伊红（HE）染色,观察肾脏病理损伤改变情况,采用单因素方差分析,并进行组间对比,分析套管法建立可逆性输尿管部分梗阻模型成功情况。2.一步扩张法建立经皮肾通道对猪积水肾损伤的影响成年健康雄性贵州小型猪24头,贵州中医药大学动物研究所提供,采用套管法建立输尿管部分梗阻建立双侧肾积水模型,分为16F微通道组和24F标准通道组,根据建立通道扩张方式不同分为一步扩张组（O组）和逐步扩张组（M组）,根据建立标准通道扩张方式不同分为一步扩张组（C组）和逐步扩张组（T组）,通过检测血清学指标尿素氮、肌酐、胱抑素C反应肾功能改变情况,通过注入亚甲蓝液标记左肾裂伤通道,测量左肾裂伤体积,右肾行苏木精-伊红（HE）染色及Masson染色,测算微通道的瘢痕体积大小。采用独立样本T检验进行组间对比,分析积水肾脏中使用一步扩张法建立经皮肾通道肾损伤情况。结果:1.可逆性单侧输尿管部分梗阻肾积水模型RPUUO组SCr和BUN在术后第3天较术前明显升高,第14天达最高值,在第28天恢复到接近术前水平;在术后第7、14天较S组高（P<0.05）;在术后28天比CPUUO组低（P<0.05）。RPUUO组DRCSS在术后第7天增加,14天达最大值,在28天恢复到接近术前水平;在术后第7天、第14天较S组增大（P<0.05）;在术后第28天比CPUUO组低（P<0.05）。S组肾脏组织结构未见明显病理改变。CPUUO组肾脏组织结构重度异常,肾小球数量明显减少,肾小管大面积萎缩消失,残存肾小管明显扩张,肾间质内大量成纤维细胞增生及炎症细胞浸润。RPUUO组肾小球变化不明显,肾小管轻度扩张,肾间质未见明显炎症细胞浸润。2.一步扩张法建立经皮肾通道对猪积水肾损伤的影响O组通道建立时间低于M组（P<0.05）。O组肉眼血尿的持续时间相比于M组,差异无统计学意义（P>0.05）。O组术后第7、14、30、90d SCr、BUN、Cys C相比M组差异无统计学意义（P>0.05）。术后即刻,O组左肾裂伤体积相比M组为（P>0.05）,O组左肾裂伤体积百分比相比于M组为（P>0.05）;术后第90d,O组右肾瘢痕形体积相比M组（P>0.05）,瘢痕体积百分比为（P>0.05）,均无显着性差异。C组通道建立时间低于T组（P<0.05）。C组肉眼血尿的持续时间相比于T组,差异存在统计学意义（P<0.05）。C组术后第7、14、30、90d SCr、BUN、Cys C相比T组,差异无统计学意义（P>0.05）。术后即刻,C组左肾裂伤体积相比T组为（P>0.05）,C组左肾裂伤体积百分比相比于T组为（P>0.05）;术后第90d,C组右肾瘢痕形体积相比T组（P>0.05）,瘢痕体积百分比为（P>0.05）,均无显着性差异。结论:1、从肾功能、肾脏形态与肾脏结构改变来看,本实验选用套管法在小型猪上建立RPUUO模型,这种动物模型安全可行。2、相比逐步扩张法,在积水肾脏中使用一步扩张法建立经皮肾微通道时间短,操作安全,并不会造成更多肾损伤,值得在临床工作中推广。3、相比逐步扩张法,在积水肾脏中使用一步扩张法建立经皮肾标准通道加重血尿情况,临床上应谨慎选择。
贾国荣[2]（2021）在《基于131I标记的BaGdF5@PDA纳米粒子实现TACE+TARE协同治疗兔肝VX2肿瘤》文中进行了进一步梳理背景:原发性肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）在我国发病率高且预后欠佳。经肝动脉化疗栓塞（transarterial chemoembolization,TACE）是无法手术切除且未远处转移肝癌的首选治疗方法,但目前临床使用的常规肝动脉化疗栓塞（conventional-TACE,c-TACE）和药物缓释微球肝动脉化疗栓塞（drug eluting bead-TACE,DEB-TACE）复发率较高、远期疗效欠满意。经肝动脉放射栓塞（transarterial radioembolization,TARE）使用介入方法向肝动脉注入放射性药物,使放射性核素潴留在肿瘤局部发出β-射线治疗肿瘤,已在临床得到初步应用。TARE作为一种新型经肝动脉治疗方法,有希望与TACE协同治疗提高对肝癌的疗效。目的:设计一种新型纳米材料体系,采用影像学手段观察纳米材料在肿瘤部位聚集,监测TACE+TARE协同治疗肿瘤疗效,探索其效能的优化和治疗机制,实现诊疗一体化。方法:本研究分为三部分:（1）131I-BaGdF5@PDA-CDDP纳米复合物合成及表征;（2）细胞水平放化疗协同治疗效果评价;（3）TACE+TARE协同治疗兔肝VX2瘤,包括动物模型制备、显像条件摸索、TACE+TARE术的实施、术后多手段评价治疗效果。具体步骤为:（1）通过水热法合成具有CT/MR显像功能的BaGdF5纳米粒子,表面包裹聚多巴胺（polydopamine,PDA）使其实现自聚集,在材料表面装载顺铂（cisplatin,CDDP）以及标记131I,最终合成131I-BaGdF5@PDA-CDDP纳米复合物。（2）使用CCK-8法研究BaGdF5纳米粒子、CDDP、131I不同材料组合对人肝癌细胞Huh7的治疗效果。使用细胞免疫荧光观察各治疗组在常氧以及乏氧条件下细胞治疗后DNA双链断裂相关的蛋白γ-H2AX表达水平。（3）将纳米复合物与碘油混合后经肝动脉选择性注入兔肝VX2肿瘤区域,实现纳米复合物在肝内肿瘤的直接高效药物递送以及栓塞治疗。治疗效果评价包括18F-FDG PET/CT以及TUNEL免疫荧光。治疗后3天及5天使用18F-FDG PET/CT观察各组肿瘤术后病灶糖代谢活性,即平均糖代谢标准摄取值（mean standard uptake value,SUVmean）变化。通过肿瘤样本的TUNEL免疫荧光表达阳性率判断肿瘤细胞凋亡程度。使用SPECT/CT、MRI、生物电镜从不同角度观察纳米复合物在肿瘤部位以及全身的分布代谢情况。通过SPECT/CT观察不同时间点131I以及含131I纳米复合物在肿瘤部位滞留情况,通过MRI的T1WI显像验证纳米粒子BaGdF5@PDA在肿瘤部位的沉积效果,使用生物透射电镜在细胞水平了解131I-BaGdF5@PDA-CDDP以及碘油进入VX2瘤细胞的分布情况。最后使用99mTc-HL-91 SPECT乏氧显像初步验证TAE术后肿瘤局部乏氧情况。结果:（1）BaGdF5纳米粒子直径10 nm左右,PDA均匀包裹纳米材料并发生自聚集后达到亚微米级别,粒径160 nm左右。BaGdF5@PDA的X线衰减系数为4.73,MR纵向驰豫率为0.45。纳米粒子装载化疗药物CDDP的载药率为10.3%。对BaGdF5@PDA进行131I标记,标记率达到90%,131I-BaGdF5@PDA在PBS中稳定性略优于在胎牛血清、生理盐水中。（2）CCK-8细胞实验结果证明131I-BaGdF5@PDA-CDDP具有良好的肿瘤细胞杀伤效果,共孵育48小时后人肝癌Huh7细胞存活率为7.58%±1.06%。细胞免疫荧光实验结果γ-H2AX荧光表达强度为BaGdF5@PDA-CDDP组（199.41±44.65）,131I-BaGdF5@PDA组（171.16±44.40）,高于CDDP组（115.31±34.77）以及131I组（96.44±26.88）。表明纳米材料装载CDDP或者标记131I后的治疗效果优于单药CDDP或单纯131I治疗组。乏氧条件下131I-BaGdF5@PDA-CDDP组治疗γ-H2AX表达荧光强度为201.51±49.67,高于其他各组。（3）将各组纳米粒子与碘油混匀后通过肝动脉注入VX2肿瘤供血动脉并栓塞,治疗后5天18F-FDG PET/CT复查结果显示,131I-BaGdF5@PDA-CDDP组肿瘤区域SUVmean为治疗前肿瘤SUVmean的16.03%±5.67%,效果最明显,其次为碘油+BaGdF5@PDA-CDDP组（32.96%±3.54%）。TUNEL法评价VX2瘤细胞凋亡情况,131I-BaGdF5@PDA-CDDP组染色阳性率为101.47%±4.77%,高于BaGdF5@PDA-CDDP组（81.70%±3.40%）以及131I-BaGdF5@PDA组（46.64%±7.83%）。SPECT/CT结果表明术后72小时131I-BaGdF5@PDA-CDDP组的肿瘤病灶中131I的放射性计数明显高于131I-BaGdF5@PDA组以及单独131I组。MRI图像显示BaGdF5@PDA组和131I-BaGdF5@PDA-CDDP组肿瘤与肝脏T1信号之比相较于术前分别增加8.00%±1.29%、6.71%±1.42%,对照组未出现明显变化。生物电镜结果显示碘油和纳米粒子进入肿瘤细胞。H&E染色结果表明纳米材料在体内没有表现出明显的器官毒性。99mTc-HL-91 SPECT乏氧显像初步验证了TAE术后肿瘤局部存在乏氧,较未治疗肝VX2瘤显着。结论:本实验成功合成纳米复合物131I-BaGdF5@PDA-CDDP,在细胞以及活体水平探究了该纳米复合物对于兔肝VX2瘤的TARE+TACE协同治疗效果,证明该材料同时具有放化疗协同并显像的诊疗一体化功能。
李宇轩[3]（2021）在《靶向分子探针99mTc-3PRGD2 SPECT/CT显像在碘难治性分化型甲状腺癌诊疗中的应用研究》文中进行了进一步梳理背景资料:甲状腺癌（Thyroid Cancer,TC）是最常见的内分泌系统恶性肿瘤之一,近年来发病率呈持续上升的趋势,且发病年龄年轻化。甲状腺癌中有90%以上是分化型甲状腺癌,其中碘难治性分化型甲状腺癌的患者无法很好地从131I诊疗中受益。RGD多肽是近年来肿瘤分子探针显像的热门靶点,能特异性识别在恶性肿瘤新生血管表皮细胞上高表达的整合素及其配体,因此放射性核素标记的RGD分子探针能高效、特异的探测肿瘤及转移病灶,可以应用在甲状腺癌诊疗工作中。目的:对于碘难治性分化型甲状腺患者,131I不能起到应有的诊断及治疗作用,因此需要寻求新的方法对这部分患者进行诊疗。本研究旨在研究99mTc-3PRGD2SPECT/CT显像诊断碘难治性分化型甲状腺癌复发/转移灶及其影响因素,并与18F-FDG PET/CT检查方法进行比较,探讨99mTc-3PRGD2SPECT/CT显像在碘难治性分化型甲状腺癌中的应用。材料与方法:纳入2019年10月至2020年12月就诊我院可疑复发/转移的碘难治性分化型甲状腺癌患者24例,进行99mTc-3PRGD2SPECT/CT显像。分析显像的影响因素、阳性结果的预测值以及灵敏度、特异度等,并评估靶向药物的疗效;依据随访的血清学及影像学检查等临床资料对患者做出临床诊断,分析患者病灶的T/N值与临床诊断的关系。对9例同期行18F-FDG PET/CT检查的患者进行分析,比较两种检查方法的灵敏度、特异度等,研究两种检查方法诊断复发/转移灶的差异。结果:24例患者的99mTc-3PRGD2SPECT/CT显像中检出病灶135个,其中肺部病灶占多数（69.6%）;病灶的T/N值与病灶部位无关（P=0.071>0.05）,但与病灶大小有显着的相关性（相关系数为0.425,P=0.01<0.05）。通过ROC工作曲线分析计算,99mTc-3PRGD2SPECT/CT显像阳性和阴性结果的最佳临界值是T/N值=2.434,灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值分别为81.6%,96%,89.6%,94.2%,86.7%。临床诊断甲状腺癌复发/转移组病灶的T/N值高于排除复发/转移组,且差异具有统计学意义（P=0.001<0.05）。不同Tg水平组病灶的T/N值具有统计学差异（P=0.018<0.05）。患者病灶的T/N值与Tg水平无明显相关性（相关系数为0.236,P=0.362>0.05）,与Tg的动态变化趋势无明显相关性（相关系数0.259,P=0.257>0.05）。经靶向药物治疗的患者,治疗前后病灶的大小（F=22.472,P=0.009<0.05）及T/N值（F=27.762,P=0.002<0.05）均具有统计学差异。9例行同期行18F-FDG PET/CT检查的碘难治性甲状腺癌患者,18F-FDG PET/CT显像诊断复发/转移灶的灵敏度、特异度分别为94.7%、84.2%;99mTc-3PRGD2SPECT/CT显像诊断复发/转移灶的灵敏度、特异度分别为89.5%、89.5%;病灶的T/N值与最大标准摄取值SUVmax无明显相关性（相关系数为0.273,P=0.368>0.05）。结论:碘难治性分化型甲状腺癌诊疗中,99mTc-3PRGD2SPECT/CT显像与18F-FDG PET/CT诊断复发和（或）转移灶的灵敏度与特异度相近;99mTc-3PRGD2摄取增加表明靶病灶血管内皮细胞增殖活跃,与18F-FDG各有优势,互为补充。99mTc-3PRGD2 SPECT/CT显像可以应用在碘难治性分化型甲状腺癌患者的诊疗工作中,进行甲状腺癌的复发/转移灶的定位及诊断,并评估肿瘤新生血管靶向药物的疗效,帮助临床制定个体化的治疗方案,使患者获益最大化。
韩静雅[4]（2021）在《肿瘤HER2靶向分子影像及其介导靶向化疗的实验研究》文中提出目的:恶性肿瘤的发病率和死亡率在世界范围内逐年增加,严重威胁人类健康。肿瘤的早期特异性诊断、个体化精准治疗和及时的疗效评价是提高肿瘤患者生存期的重要方面。肿瘤分子影像以及基于分子影像的靶向个体化治疗拓展了肿瘤精准诊疗新领域,成为肿瘤研究的热点之一。人表皮生长因子受体2（Human epidermal growth factor receptor 2,HER2）是表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor,EGFR）家族成员之一。HER2扩增及过表达与肿瘤的高侵袭性、高复发性及高死亡率密切相关,其在多种恶性肿瘤中高表达,是肿瘤诊疗的特异性靶点。HER2亲和体（Affibody）与HER2具有高度亲合力,放射性核素标记HER2亲和体及其耦联物在肿瘤精准诊疗中可发挥重要作用。本研究制备18F标记的HER2亲和体靶向分子探针、研究其体外靶向结合特性、荷瘤裸鼠体内分布,并进行荷瘤裸鼠体内分子显像,探讨其用于HER2阳性肿瘤显像的价值。同时将HER2亲和体与细胞毒性药物耦联,观察用HER2靶向亲和体-化疗药物耦联物治疗HER2阳性荷瘤裸鼠肿瘤的效果。并用核素99mTc标记HER2亲和体-化疗药物耦联物进行显像以评价疗效。方法:1.应用Fmoc/t Bu多肽固相合成法合成NOTA-HER2亲和体,应用[18F]Al F法进行标记,制备[18F]Al F-NOTA-HER2分子影像探针,并进行质量控制。将[18F]Al F标记的HER2分子探针分别与生理盐水或5%人血白蛋白37℃条件下共同孵育,观察[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针随时间变化的体外稳定性。并行[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针在HER2阳性人胃癌NCI-N87细胞及HER2阴性人胃癌MKN74细胞中的摄取率及滞留率的差异;并用醋酸冲洗细胞表面结合的分子探针,研究HER2阳性及阴性细胞对其内化率的差别;同时在体外用过量未标记的NOTA-HER2亲和体将HER2阳性细胞表面的HER2受体阻断,研究阻断组与未阻断组NCI-N87细胞对[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针的摄取率的差异,观察HER2阳性肿瘤细胞对[18F]Al F标记HER2分子探针摄取的特性及靶向性。此外,在HER2阳性人胃癌NCI-N87细胞中进行放射性配体-受体饱和结合测定,计算不同浓度梯度下细胞对分子探针的特异性摄取,确定[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针的解离常数（Kd）,评价[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针与HER2阳性肿瘤细胞表面HER2受体的亲和力。2.建立HER2阳性NCI-N87细胞及HER2阴性MKN74细胞荷瘤裸鼠模型。荷瘤裸鼠尾静脉注射[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针30min后取血液进行HPLC分析,研究[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针的体内稳定性。随机选取肿瘤大小较一致、无坏死的NCI-N87及MKN74细胞荷瘤裸鼠各9只,尾静脉注射[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针后在30min、60min及120min分别随机取3只,处死后取肿瘤组织及部分正常器官称重、测量放射性计数,并计算每克组织百分注射剂量率（%ID/g）。观察[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针在两组荷瘤裸鼠中的体内生物分布情况及随时间变化探针在裸鼠体内代谢情况。3.随机选取HER2阳性NCI-N87及HER2阴性MKN74细胞荷瘤裸鼠各6只,尾静脉注射[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针,于注射后30min、60min及120min进行PET显像,观察两组荷瘤裸鼠的肿瘤显像效果,并比较肿瘤与对侧同等大小区域的最大标准化摄取值（Maximum standardized uptake value,SUVmax）的比值（Target to nontarget ratios,T/NT）。另随机取3只NCI-N87细胞荷瘤裸鼠尾静脉注射过量未标记NOTA-HER2亲和体阻断细胞表面HER2受体,同时注射[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针,观察肿瘤显像效果并与未阻断组进行对比。4.将HER2:V2亲和体N末端与化疗药物培美曲塞连接,C末端连接短肽-CCCG,合成ZHER2:V2-培美曲塞耦联物,应用HER2:V2亲和体C末端的短肽-CCCG序列为螯合基团,进行99mTc标记,构建99mTc-ZHER2:V2-培美曲塞分子探针。构建HER2阳性肺腺癌A549肿瘤模型,分别用ZHER2:V2-培美曲塞、培美曲塞及生理盐水对动物模型进行治疗,并应用99mTc-ZHER2:V2-培美曲塞SPECT显像、流式细胞分析、H&E染色、免疫组织化学等方法观察治疗效果。并对各组裸鼠毒副作用进行比较。结果:1.[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针在30min内即可制备完成,标记率最高可达32.69%,放射化学纯度>98%,在生理盐水及人血白蛋白中孵育4h其放射化学纯度仍在90%以上。HER2阳性NCI-N87细胞在5min、30min、60min和120min对[18F]Al F-NOTA-HER2分子的探针的摄取率、滞留率及内化率明显高于HER2阴性MKN74细胞,差异有统计学意义（P=0.000,0.000,0.000,0.000;0.000,0.000,0.000,0.000;0.000,0.000,0.000,0.000）。HER2阳性NCI-N87细胞对[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针的摄取可被6倍及35倍过量未标记的NOTA-HER2亲和体所阻断,阻断前后各时间点的摄取率有明显差异,且差异有统计学意义（P=0.040,0.000和P=0.000,0.000）,表明[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针与HER2的结合具有靶向特异性。此外,饱和结合试验得出Kd值为52.25±3.68n M,说明该分子探针与HER2亲和力较高。2.[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针在荷瘤裸鼠体内具有良好的稳定性,在荷瘤裸鼠体内注射标记分子探针后30min,血液中[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针放射化学纯度依然大于90%。体内分布实验证实在注射30min、60min、120min后[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针在NCI-N87肿瘤组织的分布显着高于MKN74肿瘤组织（P=0.003,0.016,0.010）。除肿瘤组织外肾脏摄取[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针较多,表明肾脏为其排泄器官。其余正常非靶器官中分子探针的分布较少,且血液清除较快,适于显像。3.[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针PET显像结果与体内分布一致,注射标记的分子探针30min后HER2阳性NCI-N87肿瘤即可清晰显影且在120min内始终显影明显。而在显像时间内HER2阴性MKN47肿瘤始终未见明显显影。HER2阳性NCI-N87荷瘤裸鼠在共同注射过量未标记的NOTA-HER2分子探针及[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针后30min、60min及120min PET显像中T/NT比值比未阻断组明显降低（P=0.003,0.016,0.010）,表明过量未标记的NOTA-HER2亲和体可以封闭HER2阳性NCI-N87肿瘤组织的HER2受体,证明[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针与HER2阳性肿瘤组织的结合具有靶向特异性。4.分别用ZHER2:V2-培美曲塞、培美曲塞及生理盐水对HER2阳性人肺腺癌A549细胞荷瘤裸鼠进行实验治疗,并用99mTc-ZHER2:V2-培美曲塞SPECT显像评估疗效。治疗后14天,99mTc-ZHER2:V2-培美曲塞SPECT结果显示ZHER2:V2-培美曲塞的抗肿瘤效果优于单纯培美曲塞治疗组（P=0.005）。细胞凋亡实验显示ZHER2:V2-培美曲塞治疗组肿瘤细胞凋亡最显着（P=0.015）。H&E染色显像ZHER2:V2-培美曲塞治疗组肿瘤坏死较明显。肿瘤流式细胞分析及免疫组织化学HER2检测结果显示ZHER2:V2-培美曲塞治疗后HER2表达与培美曲塞治疗后无明显差异（P=0.602,0.072）。在ZHER2:V2-培美曲塞治疗组裸鼠出现的毒副作用明显小于培美曲塞治疗组。结论:1.[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针制备简单,放射化学纯度较高,体内外稳定性好,在体外可与HER2阳性NCI-N87细胞靶向特异性结合,是很有潜力的HER2靶向分子探针。2.在HER2阳性荷瘤裸鼠体内分布显示[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针可在肿瘤组织靶向特异性聚集,血液清除率高,靶/非靶比值高,经泌尿系统排泄。3.[18F]Al F-NOTA-HER2分子探针在HER2阳性荷瘤裸鼠动物模型中肿瘤显像效果较好。HER2阳性肿瘤组织显影明显,本底较低,可反映机体肿瘤HER2表达状态,是较好的肿瘤HER2靶向特异性分子探针。4.99mTc-ZHER2:V2-培美曲塞显像可敏感、无创监测ZHER2:V2-培美曲塞的靶向化疗疗效。ZHER2:V2-培美曲塞有较好的HER2靶向抗肿瘤能力,且毒副作用较单纯培美曲塞小。该分子探针集HER2靶向分子显像和靶向化疗于一体。
隋时[5]（2021）在《99mTc-3PRGD2靶向整合素αvβ3分子显像评价多柔比星所致大鼠心肌纤维化》文中研究指明目的:蒽环类药物可通过多种途径引起心肌纤维化。肌成纤维细胞（myofibroblast,MFB）是心肌纤维化过程中过度胶原沉积的主要来源。通过对特异性细胞标志物的成像来监测MFB是预测心肌纤维化的有效方法。99mTc-3PRGD2是一种99mTc标记的靶向MFB表面整合素αvβ3的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸成像肽。本研究由两部分组成,拟分别探讨（1）99mTc-3PRGD2评价在多柔比星诱导的心肌纤维化的可行性;（2）99mTc-3PRGD2对于心肌纤维化进展过程的诊断价值。研究方法:第一部分:雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠20只,随机分为对照组（n=10）和实验组（n=10）,实验组大鼠每周2次多柔比星按1.25mg/kg体重予以腹腔注射,共计给药6周。对照组予以等量生理盐水。用SPECT扫描仪经尾静脉“弹丸”式注射99mTc-3PRGD2（74-111MBq）后,即刻进行平面动态图像采集。采集共60min,获得60帧连续图像。通过整合素受体抑制实验证实显像的特异性。应用GE Xeleris 3.0工作站进行图像处理。获得心脏的半排时间(half life time of heart,Heartt1/2)、心脏计数百分比（heart counts percent,%Heart）、心脏与本底ROI的放射性计数比值（heart-to-background ratio,HBR）。HE染色用于评价心肌损伤程度,根据7分量表进行评估和评分。通过Masson染色测定细胞外胶原体积分数（collagen volume fraction,CVF,%）以评价心肌纤维化程度。石蜡切片免疫荧光用于检测实验组及对照组整合素αvβ3在心肌表达的部位;免疫印迹分析检测两组的蛋白表达,包括α-SMA、整合素αv亚基、整合素β3亚基,内参蛋白为GAPDH。使用Student t检验或Mann-Whitney检验对实验组和对照组的显像参数进行比较。P<0.05具有统计学意义。第二部分:雄性SD大鼠30只,随机分为基线组（n=6）和模型组（n=24）。模型组大鼠每周2次多柔比星按1.25mg/kg体重予以腹腔注射,共计给药6周。基线组不予处理。单光子显像前48h内进行心脏超声检查。应用左室缩短率（fraction shortening,FS）和左室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）评价左室收缩功能,用二尖瓣舒张早期峰值速度（E）、二尖瓣侧壁瓣环舒张早期峰值速度（e’）和E/e’评价舒张功能。首先（记为第0周）进行基线组（n=6）的单光子显像。随后,模型组在给药后的第3周、第6周及第9周分别在存活大鼠中随机最多选取6只进行单光子显像,分别记为3周组、6周组和9周组。单光子显像后,立即从尾静脉采集血样（约0.2m L）,然后处死大鼠,取出心脏和其他主要器官（肝、脾、肺、肠和肾）。γ计数器测定静脉血和器官组织标本中99mTc-3PRGD2的摄取量,并计算每克组织的注射剂量百分比（percent injected dose per gram of the tissue,%ID/g）。基线组、3周组、6周组和6周组每组随机选取3只进行免疫印迹分析。检测的蛋白包括α-SMA、整合素αv亚基、整合素β3亚基、CD31（内皮标记物）、CD68（巨噬细胞标记物）,内参蛋白为GAPDH。采用单因素方差分析（ANOVA）和post-hoc Student-Newman-Keuls检验,或Kruskal-Wallis检验和post-hoc Conover检验,比较各组间的心功能参数、心肌损伤评分、CVF、%ID/g和显像参数是否具有差异。采用Pearson检验分析各组心肌组织%ID/g与整合素β3亚基表达的相关性。P<0.05具有统计学意义。结果:第一部分:实验组及对照组各有6只大鼠完成全部扫描。两组中,心脏ROI的放射性在第一帧时最高,然后逐渐降低,放射性示踪剂通过泌尿系统排出。%Heart及HBR曲线开始快速下降,然后逐渐减慢。在各时间点图像中,实验组心脏ROI核素浓聚程度高于对照组。应用c（RGDy K）阻断受体后,软组织和实体器官对99mTc-3PRGD2的摄取明显减少,与本底相似。同时,显像剂的排泄明显加快。对照组及实验组组Heartt1/2以及每个评价时间点（20min,40min和60min）的%Heart、HBR均具有统计学差异。与实验组相比,实验+抑制组大鼠在前述评价时间点的%Heart和HBR均显着降低。HE染色显示实验组心肌细胞排列紊乱,肌纤维丢失,空泡化,评分中位数0.5分（1.0,2.0）。对照组细胞排列整齐,无明显上述表现,评分中位数0分（0,0）。两组间有统计学差异（M-W检验,P<0.0001）。Masson染色显示实验组心肌间质纤维化明显,对照组除血管周围心肌间质纤维化外,其余均少见。实验组CVF明显高于对照组（8.00±2.18%vs1.91±0.26%,MW检验,P<0.0001）。对照组整合素αvβ3主要表达于血管结构,主要与α-SMA+/desmin+血管平滑肌重叠。实验组除血管结构外,纤维化心肌MFBs（α-SMA+/desmin-）表达整合素αvβ3。免疫印迹提示实验组整合素αv、β3亚基和α-SMA的表达均显着高于对照组。第二部分:基线组（n=6）动物均顺利完成实验。模型组中,3周组、6周组、9周组分别有6只、6只、5只动物完成实验。心脏超声结果表明3周组各心功能参数均较基线组无显着统计学差异,提示在该组左室收缩功能和舒张功能均维持正常。6周组的FS、LVEF、E和e’均低于基线组,E/e’显着高于基线组,提示出现有意义的的收缩和舒张功能减低。在第9周组,FS、LVEF较6周组进一步下降,E/e’较6周组进一步上升,提示9周组的收缩功能和舒张功能均较6周组进一步减低。在各时间点图像中,各模型组心脏ROI核素浓聚程度均高于基线组。9周组的Heartt1/2明显长于其他各组。3周组各评价时间点（20min、40min和60min）的%Heart较基线组无显着差异;6周组和9周组各评价时间点的%Heart高于基线组或3周组。与基线组相比,3周组各评价时间点的HBR显着升高,6周组相应HBR较3周组进一步升高,9周组相应HBR则较6周组下降。HE染色显示3周组出现心肌细胞排列紊乱,肌丝溶解,空泡化,随后心肌损伤程度随时间延长而加重。Masson染色显示3周组心肌间质纤维化较基线组轻度增加,6周组明显加重,9周组更为严重。模型组整合素αv、β3亚基和α-SMA的表达均显着高于基线组。模型组中αv、β3亚基和α-SMA的表达在6周组中达到峰值。各模型组CD31表达均较基线组下降。CD68表达在3周组中较基线组轻度增加,但在6周组和9周组中恢复到基线组水平。这表明模型组与基线组相比,整合素αvβ3表达的上调主要是由于MFB的激活。与基线组相比,3周组的心肌%ID/g显着增加,6周组心肌%ID/g较3周组进一步增加。与6周组相比,9周组的心肌%ID/g平均值略低,但无统计学意义（p=0.42）。6周组和9周组的肝脏%ID/g和9周组的血液%ID/g高于基线组,而各组间脾脏、肺、肠和肾脏的%ID/g没有显着差异。心肌%ID/g与整合素β3表达显着相关,相关系数r=0.90（95%CI:0.68～0.97,P=0.0001）。由于在9周组中,高血%ID/g可影响心肌显像剂摄取,本研究进一步评估整合素β3表达与心肌/血%ID/g比值的相关性（Pearson检验,系数r=0.91,95%CI:0.71～0.98,P<0.0001）。结论:（1）99mTc-3PRGD2单光子显像能够特异地靶向多柔比星诱导的心肌纤维化过程中MFB进行分子显像;（2）99mTc-3PRGD2单光子显像对多柔比星诱导的心肌纤维化具有早期诊断价值,能够早于常规心脏超声测定的心功能参数进行诊断。HBR是较好的半定量参数。
熊隆江[6]（2020）在《D—二聚体、CRP、ESR作为诊断关节置换术后并发症假体周围感染生物标记物价值研究》文中研究指明D-二聚体、CRP、ESR诊断假体周围感染临床价值分析背景和目的:人工关节置换术后假体周围感染（Periprosthetic joint Infection,PJI）是灾难性的并发症,严重影响患者身心健康。翻修术前诊断为PJI亦或是无菌性松动非常重要,在临床上具有重要的意义。本研究通过血D-二聚体、CRP及ESR的具体检测结果,采用ROC曲线分析上述单一指标和联合检测在PJI诊断过程中灵敏度及特异性的差异性,为血D-二聚体在临床开展PJI诊断提供参考价值分析及评价,为临床探索PJI和无菌性松动的鉴别诊断提供参考价值高的方法。方法:研究纳入2017年4月到2018年8月在我院接受过全关节置换术的患者80例,根据MSIS标准将其分为PJI组（26例,14例膝关节置换术+12例髋关节置换术）;Non-PJI组（54例,33例膝关节置换术+21例髋关节置换术）;分析两组患者术前及术后静脉血内D-二聚体、CRP及ESR表达水平,采用受试者工作特征曲线ROC分析各组患者血D-二聚体、CRP及ESR表达水平的敏感度及特异性,确定各个指标单独检测及联合检测的价值性,确定血D-二聚体作为PJI在临床上的诊断价值,为进一步研究做基础。结果:1.临床基本资料分析:两组患者性别比例、平均年龄、BMI指数以及手术部位等,指标数据差异性较小,P值分别为0.120,0.089,0.112,0.078,均大于0.05,数据差异不具有统计学意义;2.血D-二聚体、CRP及ESR浓度表达分析:血D-二聚体:患者血D-二聚体检测结果数据是非正态分布的连续性变量,以中位数（四分位数）进行表示;PJI组血D-二聚体浓度要明显的高于Non-PJI组,PJI组中位浓度为1953.35ng/ml,Non-PJI组中位浓度为336.50ng/ml,Z值为17.78,P<0.001,差异具有统计学意义。CRP:患者CRP检测结果数据是非正态分布的连续性变量,以中位数（四分位数）进行表示;PJI组CRP浓度要明显的高于Non-PJI组,PJI组CRP中位浓度为5.61mg/L,Non-PJI组CRP中位浓度为1.9 mg/L,Z值为13.73,P<0.001,差异具有统计意义。ESR:患者ESR检测结果数据是非正态分布的连续性变量,以中位数（四分位数）进行表示;PJI组ESR浓度要明显的高于Non-PJI组,PJI组ESR中位浓度为40.4mm/h,Non-PJI组ESR中位浓度为13.87mm/h;Z=7.89,P<0.001,差异具有统计学意义。3.ROC曲线分析:血D-二聚体:血D-二聚体在临界值处所对应的灵敏度及特异性分别为80.77%,79.63%,AUC的面积值为0.890,并在95%置信区间（0.8140.966）内,统计学数据分析,P<0.001,差异具有统计学意义。CRP:CRP在临界值处所对应的灵敏度及特异性分别为84.61%,64.81%,AUC的面积值为0.831,并在95%置信区间（0.7370.926）内,统计学数据分析,P<0.001,差异具有统计学意义。ESR在临界值处所对应的灵敏度及特异性分别为73.08%,90.47%,AUC的面积值为0.838,并在95%置信区间（0.7320.944）内,统计学数据分析,P<0.001,差异具有统计学意义。4.各指标单独检测及联合检测结果分析:单独检测及联合检测结果:在PJI组阳性检测例数准确性比较趋势为血D-二聚体最高,CRP次之,ESR最低,三者联合检测要明显的高于其任何一项,P<0.001,差异具有统计学意义;在Non-PJI检测组体现出相同的趋势,其阳性检测准确性为血D-二聚体最高,CRP次之,ESR最低,三者联合检测要明显的高于其任何一项,数据分析,P<0.001,差异具有统计学意义。诊断价值:血D-二聚体的AUC面积最大,CRP及ESR次之,三者联合AUC面积最大,且灵敏度及特异性均较高。结论:1、在临床PJI诊断中,血D-二聚体展示出较高的诊断价值,和CRP、ESR临床诊断价值相比较,可作为关节置换术假体周围感染的诊断依据。2、三者联合诊断灵敏度及特异性均最高,值得在临床推荐;但是有效确定血D-二聚体相对于其他成熟血清标志物更加优良的检测性能尚需要进一步工作验证。D-二聚体、CRP、ESR诊断假体周围感染临床价值动物模型研究目的:通过兔关节置换后假体周围感染模型,探究血D-二聚体在关节置换术后PJI诊断中的价值性,明确其诊断阈值,并且与其他指标进行比较,为血D-二聚体在临床上应用提供进一步的实验基础与依据方法:选取45只日本大白兔随机分成三组,设置空白对照组:大白兔不做任何处理;实验组A:建立兔膝关节置换模型;实验组B:建立兔膝关节置换+金黄色葡萄球菌感染模型。两周后取各组大白兔耳缘静脉血用于血D-二聚体、CRP及ESR检测。空气栓塞后将实验组B大白兔处死,经关节腔穿刺抽取关节液样本。大白兔模型成功率检测:分别取各组大白兔关节内滑膜组织进行免疫组化分析,确定其炎性程度;X线分析实验组A和实验组B大白兔膝关节假体松动情况;模型建立成功后对实验组B大白兔关节液进行CRP的ROC曲线分析,有效评价D-二聚体作为生物标记物对关节置换后PJI的诊断价值。结果:1.关节置换模型成功性验证:术后即刻X线检查,证实假体位置良好;术后1周及2周后行X线检查,未见假体有明显松动现象,关节周围软组织可见肿胀。大体标本情况:空白对照组见膝关节软骨较为光滑,且关节囊及周围的组织等无明显的肿胀以及炎症反应出现;实验组A可见膝关节软骨较为光滑,假体周围出现肉芽组织增生现象,关节囊和周围组织出现明显肿胀,滑膜较为肥厚,水肿略微出现,炎症程度较低;实验组B炎症现象较为明显,关节腔内见较多脓性渗出液,假体周围出现炎性组织包裹,关节囊和滑膜水肿严重。空白对照组及实验组A大白兔均无死亡,实验组B大白兔死亡两只。ELISA检测:实验组B炎性因子IL-6、IL-1β浓度表达最高,实验组A组次之,空白对照组最低,各组数据之间比较,P<0.05,数据差异具有统计学意义。2.各组动物静脉血中D-二聚体、CRP及ESR浓度表达:实验组B中血D-二聚体、CRP及ESR浓度表达最高,中位浓度分别为8.35μg/L、2.15mg/L、20.33mm/h;实验组A中血D-二聚体、CRP及ESR浓度表达次之,中位浓度分别为5.67μg/L、1.58mg/L、15.64mm/h;空白对照组中学D-二聚体、CRP及ESR浓度表达最低,中位浓度分别为3.20μg/L、1.15mg/L、5.18mm/h;数据比较分析,P<0.01,差异具有统计学意义。3、静脉血中D-二聚体、CRP及ESR诊断关节周围感染灵敏度、特异性分析:血D二聚体在诊断PJI方面灵敏度为84.61%（95%CI:68.90-94.92%）%,特异性为86.67%（95%CI:65.68-92.37%）;CRP在诊断PJI方面灵敏度为79.62%（95%CI:68.74-96.77%）,特异性为80.00%（95%CI:53.50-76.88%）;ESR在诊断PJI方面灵敏度为61.53%（95%CI:55.98-91.13%）,特异性为73.33%（95%CI:80.99-95.67%）;血D-二聚体、CRP、ESR诊断PJI的AUC面积分别为0.890,0.812及0.798。4、各组动物关节液中CRP浓度表达分析:实验组B的CRP表达浓度最高,中位浓度为2.35mg/L,实验组A的CRP表达浓度次之,中位浓度为1.48mg/L,空白对照组CRP表达浓度最低,中位浓度为0.75mg/L,数据比较分析,Z值分别为3.88,3.29,P<0.01,差异具有统计学意义。5、各组动物关节液中CRP浓度表达ROC曲线分析:CRP在临界值处所对应的灵敏度及特异性分别为84.61%,80.00%,AUC的面积值为0.856,在95%置信区间（0.8090.923）内,统计学数据分析,P<0.001,差异具有统计学意义。6、血D-二聚体、关节液CRP诊断PJI灵敏度、特异性分析:血D-二聚体在诊断PJI方面灵敏度为84.61%（95%CI:68.90-94.92%）%),特异性为86.67%（95%CI:65.68-92.37%）,AUC面积为0.890（0.8110.923）;CRP在诊断PJI方面灵敏度为84.61%（95%CI:70.58-97.89%）,特异性为80.00%（95%CI:53.50-76.88%）,AUC面积为0.856（0.8090.923）。7、各诊断指标单独及联合检测效果分析:各个诊断指标诊断单独分析中,血D-二聚体的灵敏度、特异性及AUC面积均要优于CRP及ESR,三者联合检测灵敏度、特异性及AUC面积最大;血D-二聚体的灵敏度与关节液CRP的灵敏度相同,特异性及AUC面积均要高于关节液CRP,二者联合诊断体现出最大的灵敏度、特异性以及AUC面积。结论:1、大白兔关节置换及置换后感染模型中,术后2周X线检查,假体位置良好,未见松动。实验组B炎症反应明显,其关节腔出现脓肿,IL-6及IL-1β表达水平明显升高,实验组A炎症反应轻,IL-6及IL-1β表达水平轻微升高,提示大白兔关节置换及置换后感染模型成功;2、实验组B的血D-二聚体、CRP及ESR浓度表达最高,实验组A次之,空白对照组最低;血D-二聚体较CRP和ESR诊断PJI体现出最高的灵敏度、特异性及AUC面积;三者联合诊断PJI灵敏度、特异性及AUC面积最高,与临床研究结论一致;3、血D-二聚体与关节液CRP相比,诊断PJI灵敏度等同,而特异性及AUC面积较高;综上可以看出血D-二聚体在诊断PJI方面具有较高的临床价值,值得在临床进一步探究。
蒋雯[7]（2020）在《复合TGF-β1抑制剂PHBHHx微球对ACLT-OA大鼠膝关节软骨下骨骨重塑的影响》文中指出目的:通过利用复合TGF-β1抑制剂PHBHHx微球对实验大鼠膝关节进行软骨下骨局部注射的方法,观察复合TGF-β1抑制剂PHBHHx微球通过调控成骨细胞及破骨细胞的耦合过程来改善软骨下骨局部骨重塑的功能,从而进一步探讨软骨下骨对影响骨性关节炎疾病发生发展的可能作用。方法:制备载有TGF-β1抑制剂的PHBHHx微球混悬液,并选取健康清洁级SD雄性大鼠60只,随机均分为TβR1I+PHBHHx组（n=15）、TβR1I组（n=15）、PHBHHx组（n=15）、Control组（n=15）。TβR1I+PHBHHx组:ACLT-OA术后在实验大鼠右后肢膝关节胫骨平台软骨下骨区域注射复合TGF-β1抑制剂PHBHHx微球混悬液,连续注射4周,每周1次。TβR1I组:ACLT-OA术后在实验大鼠右后肢膝关节胫骨平台软骨下骨区域注射TGF-β1抑制剂单体,连续注射4周,每周1次。PHBHHx组:ACLT-OA术后在实验大鼠右后肢膝关节胫骨平台软骨下骨区域注射空白微球混悬液,连续注射4周,每周1次。对照组:ACLT-OA术后不做任何处理,仅作观察。于术后4W、8W、12W分三次各取材5只实验动物,取材后（1）采用高分辨率Micro-CT对实验动物骨骼矿物质定量及体视学参数进行分析;（2）应用番红固绿染色检测透明软骨,行软骨细胞计数,并进行OARSI评分,明确造模术后各组实验动物OA发展程度;（3）应用TRAP染色观察破骨细胞不同时期数量变化;（4）应用RCP技术检测不同时期Smad2/3及Osterix+表达水平变化。结果:（1）Micro-CT数据显示TβR1I+PHBHHx组在造模术后12W时骨密度（BMD）与Control组相比结果有显着差异,数据具有统计学意义（P<0.05）;（2）番红固绿染色提示12W时TβR1I+PHBHHx组软骨层中红染的糖胺多糖成分较多且软骨细胞排列较整齐,修复效果为最接近正常关节软骨结构;（3）TRAP染色提示术后4W破骨细胞数量各组无明显统计学差异（P>0.05）,术后12W破骨细胞在TβR1I+PHBHHx组数量较各组减少,骨吸收明显减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;（4）TβR1I+PHBHHx组与对照组的Smad2/3蛋白表达量相比在术后4W、8W、12W均明显下降,具有统计学意义（P<0.05）;Osterix+基因表达量则与对照组相比明显增加,具有统计学差异（P<0.05）。结论:（1）TβR1I+PHBHHx微球体形态表面光滑无明显粘连,粒径分布较均匀,微球内药物分布较均匀,具有良好包封率和载药量;（2）TβR1I+PHBHHx组术后8-12W实验动物体内TGF-β1活性持续性低表达,提示体内缓释性能良好;（3）PHBHHx微球生物降解性能良好,对实验大鼠膝关节软骨下骨区域骨重塑无明显影响;（4）TβR1I+PHBHHx微球在ACLT-OA大鼠体内可以通过TGF-β通路抑制成骨细胞与破骨细胞非耦合的骨重塑,从而间接改善大鼠OA病程的进展。
龚爱迪[8]（2020）在《PF14介导的CXCR4靶向分子探针制备及其在MDA-MB-231乳腺癌荷瘤鼠显像中的实验研究》文中进行了进一步梳理目的制备99mTc标记新型细胞穿膜肽介导的靶向趋化因子受体4（CXC Chemokine Receptor 4,CXCR4）信使 RNA（mRNA）靶向小干扰 RNA（Small interference RNA,siRNA）分子探针（99mTc-PF14/siRNA）,并研究其在乳腺癌荷瘤鼠基因显像中的价值。方法设计合成CXCR4 mRNA靶向的siRNA和无关序列的对照组siRNA。采用间接标记法,首先将双功能螯合剂HYNIC与siRNA进行耦联,然后再对siRNA进行99mTc标记,获得CXCR4 mRNA的单体靶向探针99mTc-HYNIC-siRNA和单体对照探针99mTc-HYNIC-control-siRNA。通过PD-10柱对标记产物进行分离纯化,采用纸层析法测定其放射化学纯度。将细胞穿膜肽PF14（PepFect14,PF14）与单体探针室温下孵育得到多价的分子探针99mTc-PF1 4/siRNA和对照探针99mTc-control-PF14/siRNA。体外培养人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,将处于对数生长期的细胞制成PBS细胞悬液,浓度为1×107细胞/ml,按0.2 ml/只的量接种到BALB/c裸鼠右前腋下构建荷瘤动物模型。当瘤体直径约1.0～1.5 cm时,取36只MDA-MB-231荷瘤鼠,利用随机数字表法分为 3 组,每组 12 只。通过尾静脉分别注射 99mTc-PF1 4/siRNA、99mTc-control-PF14/siRNA和99mTc-HYNIC-siRNA,分别于注药后1h、2h、4h、6h各取3只荷瘤鼠眼球采血后脱颈处死,取各组织器官及肿瘤称重并采用γ计数器测量相应的放射性计数。计算探针在各组织器官及肿瘤的每克组织百分摄取率（%ID/g）,比较三组探针在乳腺癌动物模型的体内分布情况。取15只MDA-MB-231细胞荷瘤鼠,随机分为3组,每组5只,分别注射 99mTc-PF 1 4/siRNA、99mTc-control-PF14/siRNA 和 99mTc-HYNIC-siRNA。于尾静脉给药后的1 h、2 h、4 h、6 h行SPECT显像,观察各组肿瘤部位放射性浓聚随时间变化情况。通过感兴趣区技术测量各时间点肿瘤部位放射性计数与对侧正常部位同等区域放射性计数的比值（Target to nontarget ratio,T/NT）,比较三组间显像的差异。所有实验数据采用统计学软件SPSS 23.0进行统计分析,采用两样本t检验比较两组之间的差异性,认为P<0.05为差异有统计学意义。结果 本实验成功制备了靶向探针99mTc-HYNIC-siRNA及对照探针99mTc-HYNIC-control-siRNA,标记率为 57.28±1.54%、55.09±2.81%,纸层析法测其放射化学纯度均达 93%。室温下将 99mTc-HYNIC-siRNA、99mTc-HYNIC-control-siRNA 与PF14 孵育 30 分钟,得到多价分子探针 99mTc-PF1 4/siRNA 和 99mTc-control-PF1 4/siRNA。生物学分布实验结果显示,靶向探针99mTc-PF 1 4/siRNA及99mTc-HYNIC-siRNA主要分布在肿瘤、肝脏、肾脏。两组探针在肿瘤组织中的放射性分布随着时间延长而逐渐增加,在其它器官和组织中的放射性分布逐渐减低。任意时间点,99mTc-PF1 4/siRNA组肿瘤组织的%ID/g值均高于99mTc-HYNIC-siRNA组,差异有统计学意义（1 h:10.73±0.26%ID/g vs.3.26±0.13%ID/g,P<0.01;2 h:11.36±0.15%ID/g vs.4.49±0.12%ID/g,P<0.01;4 h:12.45±0.08%ID/g vs.5.21±0.23%ID/g,P<0.01;6 h:13.61±0.14%ID/g vs.6.41±0.10%ID/g,P<0.01）。对照探针 99mTc-control-PF14/siRNA 主要分布在肝脏、肾脏,在肿瘤组织中分布较低。SPECT显像结果显示乳腺癌MDA-MB-231细胞荷瘤鼠注射99mTc-PF 1 4/siRNA及99mTc-HYNIC-siRNA 1 h后,两组荷瘤鼠肿瘤部位均可见明显放射性浓聚,随着时间延长至6 h,肿瘤显像更加清晰,而其它组织或器官放射性分布逐渐稀疏。于注射后 1h、2h、4h、6h,99mTc-PF1 4/siRNA 组 T/NT 比值（11.58±0.18、14.72±0.50、22.31±0.98、26.03±0.94）均明显高于 99mTc-HYNIC-siRNA 组 T/NT 比值（3.58±0.21、6.17±0.54、6.46±0.24、7.64±0.47）,差异有统计学意义（t=49.18、19.96、27.03、30.05,P均<0.01）。注射对照组99mTc-control-PF1 4/siRNA后,放射性主要浓聚在腹腔、膀胱,1～6 h内在荷瘤鼠肿瘤部位未见明显放射性浓聚。结论PF14介导的CXCR4 mRNA靶向分子探针99mTc-PF1 4/siRNA制备简单,在乳腺癌模型中表现出较好的CXCR4 mRNA靶向显像性能,且优于99mTc-HYNIC-siRNA,具有较好的应用潜能。
张庆[9]（2020）在《两种新型99mTc标记硝基咪唑类显像剂的制备及体内外乏氧靶向性研究》文中进行了进一步梳理背景与目的:乏氧是恶性肿瘤普遍存在的一个病理生理特征,乏氧可以促进肿瘤侵袭和转移,以及对放化疗等多种治疗更加耐受。肿瘤内乏氧情况的检测一直是重要的研究热点。在核医学领域,尽管开发出的用于乏氧显像的放射性药物有很多,但目前用于临床的只有18F-MISO、123I-IAZA、99mTc-HL91等少数几种,而且受化学结构和生物学特性等影响,它们作为乏氧显像剂也并非十分理想。更新的、药代动力学更优秀的、肿瘤/本底比值更高的放射性药物尚需进一步开发。近年来探测器等硬件和重建算法的改进使核素单光子显像可定量分析的时代也已到来,在不久的将来,利用SPECT/CT一体机完全可能获得分辨率高、组织结构清晰的肿瘤图像,并可能指导放疗勾划乏氧生物靶区。锝(99mTc)具有众多优点,99mTc标记的乏氧放射性药物可与PET正电子药物优势互补。本课题设计合成一种新型5-硝基咪唑-天冬氨酸酰胺衍生物,研究化合物的结构修饰和99mTc标记方法,进行元素分析验证及物理化性质质控的检测,并从分子水平、体外细胞和小鼠移植瘤模型三个层面进行肿瘤乏氧选择性研究,并与当前SPECT乏氧药物中性能优良而又未在国内进行过研究的2-硝基咪唑类代表99mTc-BRU59-21进行对比研究,为开发结构简单、便于制备、性价比高、乏氧选择性好的SPECT新型放射性药物提供依据。方法:设计合成5-硝基咪唑天冬氨酸酰胺衍生物（3-氨基-4-[2-（2-甲基-5-硝基-1H-咪唑基）-乙胺基]-4-氧代-丁酸,代号NASn）和2-硝基咪唑HMPAO衍生物（代号BRU59-21）,用NMR与MS进行验证。探讨并优化了99mTc核素标记方法。用放射性TLC及HPLC对标记物进行质控并检测标记物的体内外稳定性、脂水分配系数、电荷分布、血浆蛋白结合率、异常毒性等一般性质。通过CCK-8法细胞活性检测、Western Blot及RT-PCR检测内源性乏氧标志物HIF-1α确定了A549肺腺癌细胞的最佳乏氧培养时间。通过体外细胞摄取实验、荷A549肺腺癌裸鼠体内生物分布实验,研究上述两种标记物在乏氧细胞和各组织中的聚集情况以及在正常小鼠体内的血液清除情况,比较两种标记物在瘤体积不同的荷A549肺腺癌裸鼠模型体内分布及SPECT断层显像结果的差异。最后通过肿瘤病理组织切片乏氧标志物哌莫硝唑（Pimonidazole,PIMO）和HIF-1α的免疫组化染色与相同瘤组织切片的放射自显影结果两者对比,定性、定量检测上述两种放射性标记物在肿瘤中的分布是否反映肿瘤的乏氧情况。结果:（1）两种配体化合物的NMR与MS分析显示与设计的结构一致,NASn通过两步法99mTc标记形成[99mTcN]-NASn,BRU59-21直接99mTc标记形成99mTc-BRU59-21,优化了NASn的放射性标记条件,两种标记产物放射性化学纯度均>95%。（2）[99mTcN]-NASn、99mTc-BRU59-21均为电中性化合物,其脂水分配系数logP为1.7和1.38,均为亲脂性。在室温、人血白蛋白37℃、小鼠肝匀浆中37℃三种条件下放置4h,标记物的放化纯均无明显下降。两种标记物的血浆蛋白结合率分别为68.8%和50.5%。两种标记物74MBq尾静脉注入实验小鼠并持续观察7天,小鼠全部存活且未见明显不良反应。（3）A549细胞乏氧培养不同时间的存活率比较,差异有显着性（P=0.009）,以乏氧24 h组细胞存活率最高（96.30±2.79）%。正常氧和缺氧条件下将A549细胞培养不同时间（4h?48h）,乏氧状态下培养4h HIF-1a蛋白表达开始增加,到24h达到峰值,48h后其表达有所降低,与常氧条件下的表达有统计学差异（峰值24h 3.69±0.37 vs 1.01±0.04,P=0.000）;在12h HIF-1a mRNA表达开始明显增加,24h表达达到峰值,与常氧条件下的表达有统计学差异（3.27±0.32 vs 1.03±0.28,P=0.000）。体外细胞摄取实验表明:加入标记物后l0min,乏氧体系中A549细胞对标记物的摄取百分数随时间延长而逐渐增高,且均高于相应时相常氧体系中细胞对标记物的摄取百分数。99mTc-NASn摄取的达峰时间在60min,99mTc-BRU59-21的细胞摄取达峰时间在120min,分别为（28.51±2.36）%和（24.34±2.65%）;摄取值都为常氧状态的5倍左右,差异有统计学意义（p<0.05）。（4）血液清除实验表明两种标记物99mTc-NASn、99mTc-BRU59-21在正常小鼠体内的血液清除符合二室代谢模型,消除相半衰期分别为112.47min和61.28min。荷肺腺癌A549裸鼠体内分布数据表明:进入血液后清除较慢,标记物主要经肝肠排泄,还有部分经肾脏排泄。肿瘤摄取随时间延长逐渐升高,NAsn至120min时摄取达峰值（4.57±0.29）%ID/g,瘤体/肌肉摄取比（T/M）为6.80;NAsn的肿瘤绝对摄取值优于BRU-5921,后者于60min时摄取达峰值（2.66±0.22）%ID/g,T/M为3.54。BRU-5921血液清除更快,60min前肿瘤与血液比值（T/B）都高于NASn（3.09±0.88 vs 1.87±0.67）。荷A549腺癌裸鼠SPECT/CT显像与体内分布结果大致类似,统计检验发现0.5cm和1.5cm两种瘤体积的荷A549裸鼠显像对比,同体积肿瘤两种标记物显像的瘤/本底比（T/N）有统计学意义（1.5cm-5.17土0.68 vs 2.45±0.53,0.5cm-4.53土0.55 vs 2.09土0.48,p均<0.005）。对比相同瘤组织切片HIF-1a免疫组化的结果与显像发现瘤体积越大（1.5cm vs 0.5 cm）,HIF-1a表达含量越高（88.23%±4.78%vs 48.62%±3.48%）,显像T/N越高（NASn 5.17土0.68 vs 4.53土0.55;BRU59-21 2.45±0.53vs 2.09土0.48）,表明两种标记物在肿瘤中均有较好的乏氧选择性。（5）这两种核素标记物摄取与免疫组织化学PIMO的染色均具有显着正相关:放射自显影中的肿瘤99mTc-NASn摄取与PIMO阳性的相关性（Pearson相关系r=0.861,P=0.000）;99mTc-BRU59-21摄取与PIMO阳性的关系（r=0.71,P=0.002）。99mTc-NASn和PIMO之间的相关性高于99mTc-BRU59-21和PIMO之间的相关性（χ2=8.38,P=0.001）。结论:[99mTcN]-NASn、99mTc-BRU59-21均为电中性的脂溶性化合物,几无异常毒性,且在体内外条件下稳定性好。体外细胞摄取及荷瘤动物模型SPECT显像、免疫组化及放射性自显影研究表明二者均具有较好的乏氧选择性。[99mTcN]-NASn相对较慢的血液清除模式和结构内两个乏氧还原基团可能使肿瘤摄取与滞留更佳,值得进一步开发为肿瘤乏氧显像的放射性药物。
宋宁宁[10]（2020）在《LyP-1介导的主动靶向分子探针诊疗三阴性乳腺癌》文中研究指明临床上尚缺乏对三阴性乳腺癌有效的诊断和治疗手段。主动靶向分子探针是一种可以将显像剂或药物输送到特定病变组织中,同时又能减少在正常组织中聚集的方法,因此有望为三阴性乳腺癌提供有效的诊疗手段。由于其受体p32可异常高的表达在三阴性乳腺癌上,LyP-1可作为该分子探针中的靶向肽,并具细胞内化、促凋亡和乏氧区域识别的特点。构建主动靶向分子探针可以直接将显像剂或药物与靶向分子连接,也可以建立在纳米颗粒（nanoparticles,NPs）的基础上。对于后者,由于可同时携带靶向分子、显像剂和治疗药物,树状大分子NPs被广泛地用作主动靶向分子探针的纳米载体。另外,研究表示,多靶向分子修饰的树状大分子比单个靶向分子对其受体的结合能力更强。综上所述,本研究拟制备两种主动靶向分子探针,一种将锝-99m(technetium-99m,99mTc)直接标记在LyP-1上制备诊断型分子探针;另一种以第五代树状大分子为纳米载体,修饰LyP-1和标记碘131(Iodine 131,131I)用于制备诊疗型分子探针。内容如下:（1）以LyP-1为靶向肽,制备99mTc-LyP-1。LyP-1氨基末端额外修饰一个6组氨酸标签,与三羰基锝中间体反应从而合成99mTc-LyP-1,具有产率高、无需纯化和稳定性好的优点。在荷瘤裸鼠中,99mTc-LyP-1展示出了令人满意的单光子发射计算机断层成像术（single-photon emission computed tomography,SPECT）显像效果。（2）以第五代树状大分子为纳米平台,修饰LyP-1,并通过氯胺T（chloramine T,ch-T）法标记131I,最终合成131I/LyP-1-dendrimer NPs。表征后可知单个树状大分子上修饰有33.1个LyP-1分子。131I标记的材料经纯化后,产物的放化纯（radiochemical purity）>99%,且体外稳定性好。在体外和体内,SPECT均表明131I/LyP-1-dendrimer NPs对4T1细胞或者4T1肿瘤具有较好的显像效果。（3）在4T1细胞和荷瘤裸鼠中,我们评估了131I/LyP-1-dendrimer NPs诊疗体系的抗肿瘤增殖和抗转移疗效。结果表明131I/LyP-1-dendrimer NPs能够显着地抑制4T1肿瘤生长,而且能够明显地降低4T1肿瘤的转移能力。在肿瘤微环境中,131I/LyP-1-dendrimer NPs能够降低肿瘤增殖与转移相关标记物,提高凋亡率,降低血管生成和改善乏氧状态。综上所述,本研究制备的LyP-1介导的主动靶向分子探针可用于三阴性乳腺癌的SPECT显像、抗增殖和抗转移治疗。
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 小型猪可逆性单侧输尿管部分梗阻模型 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 一步扩张法建立经皮肾微通道对猪积水肾损伤的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 综述 经皮肾镜术通道建立的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 研究背景 |
| 第一部分 ~(131)I-BaGdF_5@PDA-CDDP纳米复合物合成及表征 |
| 1.1 BaGdF_5@PDA合成及表征 |
| 1.1.1 实验耗材 |
| 1.1.2 BaGdF_5@PDA纳米粒子合成 |
| 1.1.3 BaGdF_5@PDA的表征 |
| 1.1.4 BaGdF_5@PDA造影剂性能研究 |
| 1.1.5 BaGdF_5@PDA细胞毒性评价 |
| 1.2 ~(131)I-BaGdF_5@PDA-CDDP纳米复合物合成及表征 |
| 1.2.1 BaGdF_5@PDA装载顺铂以及标记~(125)I |
| 1.2.2 BaGdF_5@PDA-CDDP 的 纳米材料表征 |
| 1.2.3 BaGdF_5@PDA顺铂装载率 |
| 1.2.4 ~(125)I-BaGdF_5@PDA标记率以及标记稳定性 |
| 1.3 本章小结 |
| 第二部分 细胞水平放化疗协同治疗效果评价 |
| 2.1 ~(131)I-BaGdF_5@PDA-CDDP的肿瘤细胞疗效评估与探索 |
| 2.1.1 CCK-8 实验方法 |
| 2.1.2 CCK-8 实验结果 |
| 2.2 细胞免疫荧光实验 |
| 2.2.1 细胞免疫荧光实验方法 |
| 2.2.2 细胞免疫荧光实验结果 |
| 2.3 乏氧条件下细胞水平的实验研究 |
| 2.3.1 化学模拟乏氧条件下细胞免疫荧光实验方法 |
| 2.3.2 化学模拟乏氧条件下的细胞免疫荧光结果 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三部分 TACE+TARE协同治疗兔肝VX2瘤 |
| 3.1 动物实验模型制备以及显像条件摸索 |
| 3.1.1 兔下肢肌肉 VX2 肿瘤模型 |
| 3.1.2 兔肝VX2 肿瘤模型 |
| 3.1.3 影像学评估肝VX2 瘤生长情况 |
| 3.1.4 经股动脉穿刺肝动脉栓塞术技术条件摸索 |
| 3.2 TACE+TARE实验 |
| 3.2.1 兔肝动脉介入实验结果 |
| 3.2.2 术后 ~(18)F-FDG PET/CT 扫描以及 TUNEL 染色法评估肿瘤治疗效果 |
| 3.2.3 术后的 SPECT/CT 扫描以及 MRI 观察 ~(131)I-BaGdF5@PDA-CDDP 在肿瘤部位的沉积效果 |
| 3.2.4 术后肿瘤组织生物电镜 |
| 3.2.5 术后安全性评价 |
| 3.2.6 初步探索TAE术后肿瘤乏氧情况 |
| 3.3 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 纳米颗粒和微球在基于 TAE 技术的肝肿瘤局部治疗及其诊疗一体化研究中的应用 |
| 攻读学位期间发表论文 |
| 致谢 |
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 第一部分 ~(99m)Tc-3PRGD_2 SPECT/CT显像诊断碘难治性分化型甲状腺癌复发/转移灶及其影响因素的研究 |
| 1 引言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 临床资料 |
| 2.2 ~(99m)Tc-3PRGD_2检查方法 |
| 2.3 图像分析 |
| 2.4 Tg动态变化参数计算 |
| 2.5 验证标准 |
| 2.6 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 ~(99m)Tc-3PRGD_2SPECT/CT显像结果 |
| 3.2 ~(99m)Tc-3PRGD_2SPECT/CT显像检出病灶T/N值与病灶部位关系 |
| 3.3 ~(99m)Tc-3PRGD_2SPECT/CT显像阳性结果的预测因子的最佳临界值 |
| 3.4 ~(99m)Tc-3PRGD_2SPECT/CT显像病灶的T/N值与患者临床诊断关系 |
| 3.5 ~(99m)Tc-3PRGD_2SPECT/CT显像检出病灶T/N值与病灶直径关系 |
| 3.6 ~(99m)Tc-3PRGD_2SPECT/CT显像检出病灶T/N值与Tg水平关系 |
| 3.7 ~(99m)Tc-3PRGD_2SPECT/CT显像病灶T/N值与Tg动态变化趋势关系 |
| 3.8 ~(99m)Tc-3PRGD_2SPECT/CT显像结果评估靶向药物疗效 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 ~(99m)Tc-3PRGD_2 SPECT/CT与18F-FDG PET/CT诊断碘难治性分化型甲状腺癌复发/转移的效能比较 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 临床资料 |
| 2.2 ~(18)F-FDG PET/CT检查方法 |
| 2.3 ~(99m)Tc-3PRGD_2检查方法 |
| 2.4 图像分析 |
| 2.5 验证标准 |
| 3 结果 |
| 3.1 两种检查方法检出复发/转移灶情况比较 |
| 3.2 两种检查方法检出的病灶显像剂浓聚程度情况比较 |
| 4 讨论 |
| 不足之处及后续工作 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 综述参考文献 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 ~(18)F标记HER2 靶向分子探针及体外靶向性研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 ~(18)F标记HER2 靶向分子探针荷瘤裸鼠体内分布研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 ~(18)F标记HER2 靶向分子探针荷瘤裸鼠体内显像研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 HER2 亲和体介导靶向化疗的初步探索 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 [~(18)F]AlF标记分子探针PET肿瘤显像的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分:~(99m)Tc-3PRGD2 靶向整合素αvβ3 分子显像评价多柔比星所致大鼠心肌纤维化的可行性 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要试剂和仪器 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 建立大鼠心肌纤维化模型 |
| 2.2.2 单光子显像及图像分析 |
| 2.2.3 心肌组织取材 |
| 2.2.4 心肌病理染色、免疫荧光及图像分析 |
| 2.2.5 免疫印迹分析 |
| 2.2.6 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 实验动物一般情况 |
| 3.2 单光子显像 |
| 3.2.1 显像一般情况 |
| 3.2.2 图像分析 |
| 3.3 病理染色和图像分析 |
| 3.4 免疫荧光 |
| 3.5 免疫印迹 |
| 4 讨论 |
| 4.1 多柔比星致心肌毒性的机制 |
| 4.2 心肌纤维化分子成像的进展 |
| 4.3 靶向整合素行心肌纤维化成像的分子基础 |
| 4.4 多柔比星所致心肌病的大鼠模型构建 |
| 4.5 ~(99m)Tc-3PRGD2 心肌显像方法的建立 |
| 4.6 本研究的不足 |
| 5 结论 |
| 第二部分: ~(99m)Tc-3PRGD2 靶向整合素αvβ3 分子显像评估多柔比星所致大鼠心肌纤维化的进展的研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要试剂和仪器 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 建立大鼠心肌纤维化模型 |
| 2.2.2 心脏超声检查 |
| 2.2.3 单光子显像 |
| 2.2.4 生物分布测定 |
| 2.2.5 心肌组织取材 |
| 2.2.6 心肌病理染色及图像分析 |
| 2.2.7 免疫印迹分析 |
| 2.2.8 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 实验动物一般情况 |
| 3.2 心脏超声检查 |
| 3.3 单光子显像 |
| 3.2.1 显像一般情况 |
| 3.2.2 图像分析 |
| 3.4 病理染色和图像分析 |
| 3.5 免疫印迹 |
| 3.6 生物分布测定 |
| 4 讨论 |
| 4.1 多柔比星引起的左室功能异常及其影像学评价 |
| 4.2 多柔比星所致心肌纤维化进程中整合素αvβ3 表达的变化 |
| 4.3 ~(99m)Tc-3PRGD2 心肌显像参数的诊断意义 |
| 4.4 本研究的不足 |
| 5 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 影像学手段评价肿瘤治疗所致心脏损伤的现状及研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 前言 |
| 1.1 人工关节置换术后并发症假体周围感染(Periprosthetic jointinfection,PJI) |
| 1.2 假体周围感染发生率及临床检测 |
| 1.3 血D-二聚体、CRP、ESR评估假体周围感染 |
| 1.4 课题研究的目的与意义 |
| 第2章 D-二聚体、CRP、ESR诊断假体周围感染临床价值分析 |
| 2.1 研究背景 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 研究对象 |
| 2.2.2 假体周围感染相关诊断标准 |
| 2.2.3 实验试剂及仪器 |
| 2.2.4 实验方法 |
| 2.2.5 统计学分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 临床基本资料分析 |
| 2.3.2 D-二聚体、CRP及 ESR浓度表达分析 |
| 2.3.3 ROC曲线分析 |
| 2.3.4 各指标单独检测及联合检测结果分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 PJI及其机制分析 |
| 2.4.2 PJI临床诊断及结果分析 |
| 2.5 结论与展望 |
| 第3章 D-二聚体、CRP、ESR诊断假体周围感染临床价值动物模型研究分析 |
| 3.1 研究背景 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 .实验动物 |
| 3.2.2 .实验试剂及仪器 |
| 3.2.3 .实验方法 |
| 3.2.4 .统计学分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 .关节置换模型成功性验证 |
| 3.3.2 .各组动物静脉血中D-二聚体、CRP及 ESR浓度表达分析 |
| 3.3.3 .静脉血中D-二聚体、CRP及 ESR诊断PJI灵敏度、特异性分析 |
| 3.3.4 .各组动物关节液中CRP浓度表达分析 |
| 3.3.5 .各组动物关节液中CRP浓度表达ROC曲线分析 |
| 3.3.6 .血液中D-二聚体、关节液中CRP诊断PJI灵敏度、特异性分析 |
| 3.3.7 .各诊断指标单独及联合检测效果分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 人工关节术及PJI |
| 3.4.2 假体周围感染临床诊断 |
| 3.4.3 小结 |
| 3.5 结论与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述:人工关节置换术后假体周围感染早期诊断方法的研究进展 |
| 参考文献 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 试剂与耗材 |
| 1.3 实验仪器设备 |
| 2 方法 |
| 2.1 复合TGF-β1 抑制剂PHBHHx微球载体的制备 |
| 2.1.1 含有LY2109761 药物分子的PHBHHx微球的制备 |
| 2.1.2 PHBHHx微球表面形貌观察及分析 |
| 2.1.3 PHBHHx微球吸水率测定 |
| 2.1.4 体外药物释放研究 |
| 2.2 实验动物分组与ACLT-OA大鼠损伤模型制备 |
| 2.3 Micro-CT扫描及数据分析 |
| 2.4 ACLT-OA大鼠膝关节标本的处理和固定 |
| 2.5 番红固绿染色及OARIS组织学评分 |
| 2.6 TRAP染色 |
| 2.7 Real-Time PCR实验步骤 |
| 2.7.1 软骨组织RNA的提取 |
| 2.7.2 cDNA的合成 |
| 2.7.3 荧光定量PCR测定 |
| 2.8 统计学分析 |
| 实验结果 |
| 1 复合TGF-β1 抑制剂的PHBHHx微球的表征 |
| 1.1 复合TGF-β1 抑制剂的PHBHHx微球的理化性质 |
| 1.2 复合TGF-β1 抑制剂PHBHHx微球的扫描电镜形貌图及粒径统计分析 |
| 1.3 PHBHHx微球的吸水率、载药率及包裹率 |
| 1.4 复合TGF-β1 抑制剂PHBHHx微球的体外释放动力学研究 |
| 2 Micro-CT对骨骼矿物质定量、体视学参数及结构模型指数分析 |
| 3 番红固绿染色及OARSI组织学评分 |
| 4 TRAP染色中破骨细胞数量变化 |
| 5 PCR检测Osterix~+及Smad2/3在4W、8W、12W的表达量变化 |
| 讨论 |
| 结论与展望 |
| 1.结论 |
| 2.展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 骨、软骨在骨关节炎中的结构和功能改变 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师评阅表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 siRNA合成 |
| 1.2 PF14合成 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 实验细胞及动物 |
| 2. 实验仪器与器材 |
| 3. 实验方法 |
| 3.1 HYNIC-siRNA的制备 |
| 3.2 ~(99m)Tc-HYNIC-siRNA及~(99m)Tc-HYNIC-control-siRNA的制备 |
| 3.3 标记物特性分析 |
| 3.3.1 放射性化合物的标记率 |
| 3.3.2 放射化学纯度分析 |
| 3.4 ~(99m)Tc-PF14/siRNA及~(99m)Tc-control-PF14/siRNA的制备 |
| 3.5 人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞培养 |
| 3.5.1 细胞复苏 |
| 3.5.2 细胞培养及传代 |
| 3.6 荷瘤鼠模型构建 |
| 3.6.1 细胞处理 |
| 3.6.2 对动物进行荷瘤 |
| 3.7 生物学分布实验 |
| 3.8 荷瘤鼠SPECT显像 |
| 3.9 统计学分析 |
| 4. 实验结果 |
| 4.1 ~(99m)Tc-HYNIC-siRNA及~(99m)Tc-HYNIC-control-siRNA放射性标记情况 |
| 4.2 人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞培养 |
| 4.3 荷瘤动物模型构建 |
| 4.4 荷瘤鼠生物学分布结果 |
| 4.5 荷瘤鼠SPECT显像 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第1章 两种配体的合成、鉴定、~(99m)Tc标记及质控 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.2.1 实验试剂 |
| 1.2.2 实验仪器 |
| 1.2.3 实验方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.3.1 配体化合物质控 |
| 1.3.2 ~(99m)Tc-配合物的质控 |
| 1.4 讨论 |
| 第2章 标记物物理化性质表征 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试剂与材料 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.1.3 实验方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 标记物的体外稳定性 |
| 2.2.2 ~(99m)Tc-NASn和~(99m)Tc-BRU59-21 的脂水分配系数lgP测定 |
| 2.2.3 ~(99m)Tc-NASn和~(99m)Tc-BRU59-21 的电荷测定 |
| 2.2.4 ~(99m)Tc-NASn和~(99m)Tc-BRU59-21 的血浆蛋白结合率测定 |
| 2.2.5 标记物的异常毒性检测 |
| 2.3 讨论 |
| 第3章 确定A549 细胞的最佳缺氧时间及细胞摄取实验 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 试剂与仪器 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 乏氧培养不同时间对A549 细胞活性的影响 |
| 3.3.2 WB检测结果 |
| 3.3.3 RT-PCR mRNA检测结果 |
| 3.3.4 细胞摄取标记物的结果 |
| 3.4 讨论 |
| 第4章 标记配合物的小鼠生物分布及肿瘤乏氧显像 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试剂与仪器 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 小鼠标记物药代动力学参数 |
| 4.2.2 生物分布结果 |
| 4.2.3 荷瘤裸鼠SPECT显像结果 |
| 4.2.4 放射自显影与免疫组化结果 |
| 4.3 讨论 |
| 结论和展望 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 不足 |
| 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果及荣誉 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 全文主要缩略词中英文对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 三阴性乳腺癌的简介 |
| 1.2 基于LyP-1的主动靶向分子探针 |
| 1.3 LyP-1的特异性靶向、内化和促凋亡的特点 |
| 1.4 基于LyP-1的诊断型主动靶向分子探针的研究进展 |
| 1.4.1 肿瘤 |
| 1.4.2 转移癌 |
| 1.4.3 动脉粥样硬化斑块 |
| 1.5 基于LyP-1的治疗型主动靶向分子探针的研究进展 |
| 1.5.1 肿瘤 |
| 1.5.2 转移癌 |
| 1.5.3 动脉粥样硬化斑块 |
| 1.6 科学问题及研究内容 |
| 第二章 ~(99m)Tc-LyP-1的合成以及其在三阴性乳腺癌中的SPECT显像研究 |
| 2.1 材料和仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 ~(99m)Tc-LyP-1的合成、稳定性和放化纯分析 |
| 2.2.2 细胞毒性实验 |
| 2.2.3 体外靶向性实验 |
| 2.2.4 体外SPECT实验 |
| 2.2.5 体内免疫荧光实验 |
| 2.2.6 体内SPECT显像 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 放射性核素~(99m)Tc标记 |
| 2.3.2 LyP-1对4T1细胞的细胞毒性实验 |
| 2.3.3 流式细胞术检测LyP-1对4T1细胞的靶向性 |
| 2.3.4 激光共聚焦检测LyP-1对4T1细胞的靶向性 |
| 2.3.5 SPECT检测LyP-1对4T1 细胞的靶向性 |
| 2.3.6 LyP-1 在肿瘤微环境中的生物学分布 |
| 2.3.7 ~(99m)Tc-LyP-1在4T1三阴性乳腺癌裸鼠中的SPECT显像效果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 ~(99m)Tc-LyP-1的合成与放射稳定性 |
| 2.4.2 LyP-1 在肿瘤微环境中的分布 |
| 2.4.3 ~(99m)Tc-LyP-1在三阴性乳腺癌荷瘤鼠中的SPECT显像研究 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 ~(131)I标记的LyP-1修饰的多功能化树状大分子的合成以及其在三阴性乳腺癌中SPECT显像研究 |
| 3.1 材料和仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 G5.NHAc-HPAO-(PEG-LyP-1)纳米材料的合成与表征分析 |
| 3.2.2 放射性核素~(131)I标记、稳定性和放化纯分析 |
| 3.2.3 体外毒性分析 |
| 3.2.4 体外靶向性实验 |
| 3.2.5 体外SPECT显像 |
| 3.2.6 体内SPECT显像 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 LyP-1-dendrimer NPs的合成与表征分析 |
| 3.3.2 LyP-1-dendrimer NPs的生物相容性 |
| 3.3.3 放射性核素~(131)I标记和稳定性分析 |
| 3.3.4 流式细胞术评估FITC/LyP-1-dendrimer NPs对4T1细胞的靶向性 |
| 3.3.5 共聚焦显微镜评估FITC/LyP-1-dendrimer NPs对4T1细胞的靶向性.. |
| 3.3.6 体外SPECT检测FITC/LyP-1-dendrimer NPs对4T1细胞的靶向性 |
| 3.3.7 体内SPECT显像 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 诊疗一体化和树状大分子的优点 |
| 3.4.2 LyP-1-dendrimer NPs的合成与表征分析 |
| 3.4.3 ~(131)I放射性标记、稳定性和放化纯 |
| 3.4.4 ~(131)I/LyP-1-dendrimer NPs在荷瘤鼠的SPECT显像效果 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 ~(131)I标记的LyP-1修饰的多功能化树状大分子在三阴性乳腺癌中放射性核素治疗和抗转移的研究 |
| 4.1 材料和仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 体外治疗实验 |
| 4.2.2 体外划痕实验 |
| 4.2.3 体外Transwell侵袭实验 |
| 4.2.4 体内治疗实验 |
| 4.2.5 体外抗转移实验 |
| 4.2.6 病理学检测 |
| 4.2.7 免疫组化 |
| 4.2.8 TUNEL凋亡检测 |
| 4.2.9 乏氧检测 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 ~(131)I/LyP-1-dendrimer NPs对4T1细胞的体外治疗效果 |
| 4.3.2 划痕实验评估~(131)I/LyP-1-dendrimer NPs对4T1细胞的体外抗迁移作用 |
| 4.3.3 Transwell侵袭实验评估~(131)I/LyP-1-dendrimer NPs对4T1细胞的体外抗侵袭能力 |
| 4.3.4 体内放射性核素治疗 |
| 4.3.5 体内抗转移治疗 |
| 4.3.6 ~(131)I/LyP-1-dendrimer NPs对肿瘤微环境的调控 |
| 4.3.7 体内毒性分析 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 ~(131)I/LyP-1-dendrimer NPs的抗肿瘤增殖疗效 |
| 4.4.2 ~(131)I/LyP-1-dendrimer NPs的抗肿瘤转移的疗效 |
| 4.4.3 ~(131)I/LyP-1-dendrimer NPs对肿瘤微环境的调控 |
| 4.4.4 ~(131)I/LyP-1-dendrimer NPs在体内的毒性 |
| 4.5 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 博士研究生期间发表的文章及参与的课题项目 |
