白细胞分类计数是将血液中的白细胞分类统计的一种方法,白细胞分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞共五种。
其中中性粒细胞占全部白细胞总数的50%~70%,因此中性粒细胞的增减必然影响到白细胞总数的增减。它们都有各自的特殊功能。
中性粒细胞:杆状核1%-5%(05)×10/L,分叶核50%-70%(2-7)×10/L,嗜酸粒细胞:00%(05)×10/L;嗜碱粒细胞:0%-1%(0-02-008-0Keyword: hematology analyzer,red blood cell,platelet,white blood cell,counter 自50年代初库尔特先生发明了粒子计数技术的专利,制造了第一台血细胞分析仪并应用于临床以来,血细胞分析仪的发展已有50年的历史。血细胞分析仪实质上是指对一定体积内血细胞数量及异质性进行分析的仪器。最初的血细胞计数仪(Cell Counter)仅能计数红细胞(RED)和白细胞(WBC),后来又有了血红蛋白(HBG)、血小板(PLT)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)等几个参数。而发展成为血细胞分析仪(Hematology Analyzer)后,又增加了许多分析和计算参数,如红细胞体积分布宽度(RDW)、平均血小板体积(MPV)、血小板体积分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)、大血小板比率、白细胞三分群、白细胞五分类、血红蛋白浓度分布宽度、异常淋巴细胞提示、幼稚细胞提示等各种参数和功能也不断地添加到一些品牌的仪器上。电阻检测法的基本原理是:在待测液体中置一微孔,在微孔的两端各加一定电压的电极,当液体中的颗粒巾进经过微孔时,电极间的电阻就会产生训瞬间的变化,以因而产生电脉冲,对这种电脉冲进行计数就可得到颗粒的数量,脉冲幅度的大小表示颗粒的体积的大小,经过对各种细胞所产生脉冲的大小的电子的选者择,可以区分出不同种类的细胞;在液体中加上一定的负压就能使经过微孔的液体流动。随着电子技术、流式细胞技术、激光技术、电子计算机技术和新荧光化学物质等多种高科技技术在临床检验工作的应用,使血细胞分析仪在自动化程度、先进功能和完美设计方面提高到了一个崭新的阶段,血细胞分析仪已经不仅仅局限在进行常规的血细胞分析,还增加了许多扩展功能,例如将网织红细胞(RET)的计数和分析功能加入其中,一些仪器还另外增加了幼稚细胞分析和有核红细胞分析功能,甚至对血液细胞中某些寄生虫进行提示,更有一些仪器把流式细胞分析仪的某些功能和并到血细胞分析仪上,在进行常规血细胞分析时可得到某些淋巴细胞亚群的分析结果。在常规血细胞计数仪上,红细胞(RBC)、血小板(PLT)共用一个测量通道,血红蛋白含量(HGB)的测定在任何类型、档次的仪器中其测试原理都是相同的。白细胞的计数和分类有其专用的通道,现我们就对分析仪上各测试项目所使用的技术方法和原理作些简要介绍。一、血红蛋白含量测定血红蛋白含量的测定是在被稀释的血液中加入溶血剂后,使红细胞释放出血红蛋白,后者与溶血剂结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白测试系统,在特定波长(一般在530-550nm)下比色,吸光度的变化与液体中Hb含量成比例,仪器便可显示Hb浓度。不同系列的血液分析仪配套溶血剂配方不同,形成的血红蛋白衍生物也不同,但大多数的最大吸收光谱接近540nm。近年来许多高档的分析仪上采用了激光散射法进行单个血红细胞血红蛋白的分析,以尽量减少高WBC、乳糜血、高胆红素等对HBG比色的影响。二、血红细胞及血小板的检测血红细胞的检测是血液分析仪的重要组成部分,红细胞的检测以往主要还是使用阻抗法对红细胞的数目和体积计数,以此分选出不同大小的信号并打印出红细胞体积分布直方图。但现在也采用光学和电阻抗法结合的处理方法对红细胞体积进行三维空间分析(3D)以期得到更正确的结果。如拜尔的ADVIA 120以光散射法检测红细胞,以低角度前向光散射和高角度散射两个测量系统同时测量1个红细胞,根据低角度光转换能量的大小测量单个红细胞体积与总数;根据高角度的光散射得出单个血红蛋白浓度,可准确得出MCV(平均红细胞体积)、MCH(平均血红蛋白含量)、MCHC(平均血红蛋白浓度)测定值,并绘出红细胞散射图,单个红细胞体积及红细胞内Hb含量的直方图及求出RWD(红细胞体积分布宽度)、HDW(红细胞血红蛋白分布宽度)等参数。 由于血小板和红细胞体积的明显差异,很容易用一个限定阈值将两者同时测得的光电信号区分。因此,迄今为止全血分析中血小板、红细胞检查均采用一个共用的分析系统。但由于血小板和红细胞测量信号常有交叉,如大血小板的脉冲信号可能被误认为红细胞而计数、小红细胞的脉冲信号可能进入血小板通道,造成实验误差。各血细胞分析仪生产厂家采用多种先进技术以减少血小板计数的干扰,以下我们就分别给予介绍:1、扫流技术(sweep flow):由于血小板和红细胞在同一个计数池中计数,红细胞体积较大,在通过正中计数感应区时会形成一个大脉冲,若有回流会同时又产生一个因涡流再度进入感应区边缘而形成的小脉冲使电极可能感应到相当于血小板大小的小脉冲,使血小板计数假性增多。扫流技术是在进行红细胞和血小板计数的同时,在红细胞计数小孔的后面有一个稳定的液流通过,这样可以使后的红细胞被立即冲走,以防止回到感应区被计数为血小板。2、防反流装置:为防止以被计数的红细胞又回到感应区,在红细胞计数池小孔的内侧按装一块带孔的小板,板上小孔的直径比红细胞计数孔略大,正好位于计数孔的后方、感应区以外。当进行细胞计数时,由于负压的作用细胞快速通过小孔感应区并穿过挡板小孔,即使挡板外侧产生涡流,红细胞也会被阻挡在感应区之外,不影响血小板计数。3、鞘流技术(sheath flow):为了避免计数中血细胞从小孔边缘处流过及湍流、涡流的影响,发明了鞘流技术。具体做法是用一毛细管对准小孔管,细胞混悬液从毛细管喷出,同时与四周流出的鞘液一起流过敏感区,保证细胞混悬液在中间形成单个排列的细胞流,四周被鞘液围绕。鞘流技术可应用于两种细胞计数原理:一为电阻抗原理,鞘流通过小孔的敏感区进行细胞计数;另一种为激光计数原理,细胞液流室较长,与激光垂直相交,激光光束对流经的每一个细胞照射后产生光散射,利用此原理进行细胞计数。4、浮动界标:正常标本中红细胞与血小板体积相差较大,一般将红细胞与血小板的界限定于35fl,大的为红细胞,小的为血小板,也有以30fl或20fl为界限的。但在某些病理情况下可能有大血小板超过35fl界限,造成血小板漏计使结果偏低;反之,如果红细胞体积偏小(如缺铁性贫血、地中海性贫血),则可能将部分小红细胞误计为血小板,使血小板计数偏高。为了结果准确一些,计数仪利用计算机在5-35fl间寻找直方图最低点,以此定为红细胞和血小板的界限。由此可使所计数的数值符合实际情况。因为各种细胞间的界限可以随细胞实际大小而向左或右移动,故称为浮动界标技术(floating threshold)。此外,还有延时计数(extended count)、拟合曲线(fitting curve)等技术以确保计数结果和体积分布图的准确性。三、白细胞计数及分类在早期的单分类仪器中,WBC的计数是将病人的血样经抗凝后按一定比例稀释,再加入溶血剂(作用是使细胞膜皱缩,周围的胞浆慢慢从细胞内扩散,但细胞颗粒仍在),使经过这样预处理的病人血样成为有悬浮颗粒的液体,并使其在一定时间内流过一个用红宝石做成的微孔。不同的颗粒可用不同大小的微孔来测试,一般情况下测量白细胞的微孔尺寸长*直径为100*70微米左右。后来,许多公司在单分类仪器的基础上利用经过溶血处理后的白细胞体积大小不同,将产生大小不同的电脉冲,通过仪器内电脑的各个通道运算可初步确认相应的细胞参数,将细胞分成淋巴细胞(小细胞亚群)、中性细胞(单核细胞亚群)和粒细胞群(大细胞亚群)三个分类计数。由于采用液流聚焦电阻法克服了微孔易堵、液体返流等问题,采用了定容积方法来克服由于负压不稳引起的误差,并将样本稀释、添加溶血剂等多道手续在机内一次完成,提高了自动化程度。在电路上,还在通道中对多个颗粒同时进入微孔敏感带而造成的误差进行自动校正,数据经CPU处理后在显示器、打印机上用数据图表、直方图等形式读出,仪器软件提供人机对话界面,能方便地完成定标、质控、测量、冲洗等日常操作,报告参数有近20项。此类仪器由于结构和电路上都较单分类仪器作了较大改进,性能稳定,在中小医院得到了广泛使用。近期血细胞分析仪测试原理的改进,主要体现在白细胞分类方面的改进。对WBC来说,从单分类到三分类、五分类甚至九分类,血细胞的测定和分析方法已经不仅仅局限于某一单一的方法,已发展到利用多种物理化学方法处理白细胞,用先进的电脑技术区分、辨别经上术方法处理后的各细胞间的细胞差别,综和分析实验数据,得出较为准确的白细胞分群结果。联合检测法代表了血细胞分析仪的最新发展趋势。如库尔特公司的STKS和GEN961)。Technicon H*3测试网红则先将3ul血液加入已标准化的染液中孵育15分钟,将仪器转换到网红计数程序进行检测,即可得到网红细胞的实验参数。包括RET#、RET%、MCVr、RDWr(网红体积分布宽度)、CHr(网红内血红蛋白量)、HDWr(网红内血红蛋白分布宽度)及网红细胞分类。根据荧光强度,可将网红细胞分成低(LFR)、中(MFR)、高(HFR)三部分。幼稚的网红显示最强的荧光,反之成熟红细胞极少或没有荧光。 综上所述,由于近年来综合性高科技的飞速发展,血细胞分析仪上也不断采用最新的电子、光学、化学和计算机技术,从而不断满足临床工作对血细胞分析的要求,各厂家朝着高速度、多参数、多功能合成及操作更灵活和方便上发展,近期各厂家更是推出了血液分析仪的全自动流水线化,将血液常规分析、网织红细胞分析、血片的制备(选择、涂片、编号、染色、干燥)等系列步骤通过仪器自动完成。血液先经血细胞分析仪检测,根据红细胞情况决定是否作网红计数,根据HCT改变涂片机的角度和速度,以保证合格的血涂片。根据实验数据和直方图的变化,计算机选择是否需要进一步的显微镜检查,特别是自动加样系统和真空采血管的应用,不但可能避免实验的随机误差,加快标本的处理速度,而且避免了某些实验环节造成的血行感染,对工作人员的劳动保护起了关键作用,同时使许多操作更加的标准化,成为仪器使用和发展的潮流。 参考文献:1、许文融,谷俊侠主编,《临床血液学检验》,南京:东南大学出版社出版2、丛玉隆等主编,《血细胞分析技术与临床》,天津:天津科学技术出版社3、王淑娟等主编,《现代血细胞学图谱》,人民卫生出版社4、 拜尔公司《拜尔诊断》5、 BECKMAN COULTER公司及Sysmex公司等产品通讯本回答被提问者和网友采纳
你好,这最好去正规的大医院治疗,保持精神愉快,心情舒畅,充足睡眠,少熬夜,避免脑力过度,注意头发护理,经常用鬃刷梳头,作头皮按摩,刺激头皮促进毛囊血液循环 。血细胞分析仪的工作原理及其近期发展姜穗(温州医学院附属第二医院临床工程科 浙江省 温州市 325027) [摘要]本文简要介绍了血细胞分析仪的主要工作原理,各主要厂家在血细胞分析仪上采用的白细胞分类技术及业界的技术进展。[关键词]血细胞分析仪,红细胞,血小板,白细胞,计数The Work Principle Of Hematology AnalyzerAnd Its Near Period The DevelopmentJiang Sui(Clinical Engineering Department of The Second Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou Zhejiang ,China)Abstract:Tise paper introduces the major principle of hematology analyzer,the categorized technology of white blood cell mainly used by manufacturer and the development of analyzing technologyS采用电阻抗、激光及电磁波技术,拜尔公司的ADVIA系列采用化学反应与激光技术结合原理进行白细胞五分类测定,雅培公司的CD-3500采用电阻抗与光散射结合技术,希森美康公司的XE-2100/SE-9500用硫化氨基酸和特殊溶血剂及电阻抗与射频技术检测幼稚细胞等,这些仪器的问世大大提供了自动化仪器进行白细胞分类的准确性,使仪器的发展进入了新阶段。下面就各大厂家对白细胞的分类采用的各种不同方法做些介绍。1、 Coulter公司的VCS联合检测技术VCS技术即体积测量、高能电磁波传导性和激光散射技术(见原理图1)。V代表体积。Coulter公司仍采用电阻抗法进行血细胞计数和体积测量。C代表一束电磁波穿透细胞的传导性,它取决于细胞的大小及内部结构。通常我们用较正后的传导性来反映细胞的内部结构,如核的大小、核浆比例及细胞内质粒的大小和密度,所以传导性可辨别体积完全相同的两组细胞群。例如直径均在9-12um的小淋巴细胞和嗜碱性粒细胞。S代表光散射,可以依据细胞表明光散射的特点对细胞进行分类。用激光光源产生的单色光束直接进入计数池的敏感区,在不同角度(10°~70°)对每个细胞进行扫描分析,测定其散射光强度,从而提供细胞结构、形态的光散射信息。由于粗颗粒细胞的散射强度比细颗粒细胞更强,故光散射对细胞颗粒的构型和颗粒质量具有很好的区别能力。 图1、VCS法白细胞分类原理 VCS技术可使白细胞处于与机体完全相同的自然条件下得出检验结果。首先在样本内加入只作用于红细胞的溶血剂(erythrolya)使红细胞溶解,然后加入抗溶血剂(stabilyse)起中和溶血剂的作用,使白细胞表面、胞质及细胞大小等特点仍保持与体内相同的状态,由于不同的细胞在细胞体积、表面特征、内部结构如核浆比例和颗粒构型及质量等方面完全一致的几率很小,加上仪器配备了先进软件,可与流式细胞仪一样调较,设置门限,可在三维图像上将各细胞较好的分开,达到较准确的分类,同时可提示幼稚白细胞、异型淋巴细胞等。此外,还可将包被了抗CD4和CD8单克隆抗体的聚苯乙烯微球加到血液中,使含有相应表面(抗原)标志的淋巴细胞结合相应的微球而改变该细胞的VCS性质,在分析仪上直接计数CD4和CD8淋巴细胞,并计算比率。以此原理生产的仪器以GEN﹒S细胞分析仪为代表。2、 Bayer公司的光散射与细胞化学联合技术以ADVIA120为代表的此类仪器联合应用激光散射与过氧化物酶染色技术进行白细胞分类计数。用激光散射技术计数血细胞,因细胞表面结构不同,在不同角度上所测散射光会有所差别。此仪器有四个测量通道:血红蛋白测量通道、红细胞/血小板测量通道、嗜碱性粒细胞测量通道、过氧化物酶测量(白细胞分类)通道。其利用五种白细胞过氧化物酶活性的差异对白细胞进行染色,测定其酶反应强度,对白细胞进行分析。在测试过程中,每个细胞产生两个信号:组化染色结果与光散射结果。它以X轴代表吸光率(组化染色酶反应强度),Y轴代表光散射(细胞大小),一起定位于细胞图上(cytogram)见图二。计算机系统对存储资料进行分析处理,并结合嗜碱性或分叶细胞通道结果计算出白细胞总数及分类。血液中五种白细胞的过氧化物酶活性排列顺序为:嗜酸性粒细胞>中性粒细胞>单核细胞。淋巴细胞和嗜碱性粒细胞均无过氧化物酶。将待测血液加入清洗剂和甲醛的等渗液体内经孵育,再加入过氧化氢(H2O2)和四氯-萘酚,细胞内过氧化酶分解产生〔O〕-,使四氯-萘酚显色并沉淀,并定位于酶反应部位。由于酶反应强度不同,激光束照射细胞在低角度(0°-5°)和高角度(5°-14°)测定散射强度也不同。低角度反映细胞大小:由于嗜碱性粒细胞在此溶血剂中保持不溶(细胞大),故散射强;高角度反映核叶数目及大小,核叶多、核图2、过氧化物酶通道白细胞分类原理图 大则散射强。最后由计算机综合处理分析,给出较准确的白细胞总数及分类计数,其中还包括了大型不染色细胞群、即非典型淋巴细胞或过氧化物酶阴性的幼稚细胞,故称六分类。该仪器采用激光散射法检测红细胞和血小板,均需加入试剂;同时还可在红细胞稀释液中加入可染RNA的荧光染料,经激光照射激发后,对其中的网织红细胞进行计数、分类,得到八个网织红细胞参数。由于其采用化学染色方法来分析细胞类别,故其共使用了11种试剂来进行测试,运行成本较高。3、 雅培(Abbott)公司采用的多角度偏振光散射(MAPSS)技术以CD-3500和CD-3000型血细胞分析仪为代表的此类仪器采用了多角度偏振光散射技术进行白细胞分类计数。其原理是利用鞘流液与血标本按适当的比例混合后,使其白细胞内部结构基本保持不变(只有碱性粒细胞颗粒因有吸湿特性而其结构有较微改变),红细胞在该鞘流液中细胞膜完整且和鞘流液的吸光指数相等,故不会干扰白细胞的检测。用偏振激光束射照单个排列细胞(集中于一直径30um的小股液流中),并进一步分辨细胞。该技术采用了其他仪器很少用的10°窄角和偏振加消偏振检测法,分辨能力有所提高。它第一步先测试中性/单核细胞,用0°-90°的散射数据,再测90°D的衍射差,将嗜酸性和中性细胞分开,而嗜碱性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞,则按其大小和内部结构的复杂性不同,所产生的散射光也各异,用可调较的门限加以区分。其采用特定程序自动储存分析数据,并经电脑软件处理,在屏幕上显示6个散点图和两个直方图。4、Sysmex公司的射频(RF)加直流阻抗式(DC)的白细胞分类技术典型机型如SysmexSE-9000/SE-9500/XE-2100等。这类仪器共有四个不同的检测系统,将标本用特殊细胞染色技术处理后再应用RF和DC技术对白细胞进行分类和计数。其共采用如下四个检测系统:1) 淋巴、单核、粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)检测系统:该系统采用电阻抗与射频联合检测方式,使用作用较温和的溶血剂,对核及细胞型态影响不大。在内外电极上存在直流和高频两个发射器。由于直流电不能达到细胞质及核质,而射频电能透入胞内测量核大小和颗粒多少,因此这两种不同的脉冲信号的个数及高低综合反映了细胞数量、大小(DC)和核及颗粒密度(RF)。由于淋巴细胞、单核细胞及粒细胞的大小、细胞质含量、核形态与密度均有较大差异,故可通过扫描得出其比例。2) 嗜酸性粒细胞检测系统:该系统是利用电阻抗方式计数。血液经分血器分血后部分与嗜酸性粒细胞计数溶血剂混合,特异的溶血剂使嗜酸性粒细胞以外的所有细胞均溶解或萎缩,这种含完整嗜酸性粒细胞的液体经阻抗电路计数。3) 嗜碱性粒细胞系统:该系统检测原理与嗜酸性粒细胞相同,不同的是其溶血剂只能保留血液中的嗜碱性粒细胞。4) 幼稚细胞检测系统:该系统也是利用电阻抗方式计数。其原理是由于幼稚细胞上的脂质较成熟细胞少,在细胞悬液中加入硫化氨基酸后,由于脂质占位不同,结合在幼稚细胞上的硫化氨基酸较成熟细胞多,且对溶血剂有抵抗作用,故能保持幼稚细胞的形态完整而溶解成熟细胞,即可通过阻抗法检测。四、网织红细胞计数 网织红细胞(简称网红)计数是反映骨髓造血功能的重要指标。迄今国内仍多采用显微镜目测法,由于受主观影响,其计数精度较差。20世纪90年代初,日本SYSMEX公司首先推出R-1000网红细胞分析仪,开始用分析仪代替目测法,无论从实验方法还是临床应用,均取得了良好的效果。 网红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞之间的过渡细胞,由于其胞浆中残存嗜碱性物质,在活体可被蓝染成蓝色细颗粒或网状物而得名。,在红细胞的发育过程中,RNA含量有明显规律性的变化,即由原始阶段较为丰富逐渐减低,至细胞完全成熟后消失或接近消失。在流式细胞仪的测量中,一般用某些染料与网红中RNA结合发出特定颜色的荧光,进行RNA的测定,RNA可精确表示网红细胞占成熟红细胞的百分率(RET%)。 1993年以来,可进行网红计数的血细胞分析仪相继问世,使血细胞分析仪的应用进入了新的阶段。Coulter、Abbott、Bayer、Sysmex等众多厂家的高端机型皆有网红细胞计数和分析的功能。检测原理大致以Coulter Maxam和Technicon H*3型为代表。Coulter Maxam采用了两种试剂,一为新亚甲蓝着染红细胞内的RNA,另一为“透明”剂使红细胞内血红蛋白溢出,成为“影细胞”减少测试干扰。处理后的血液在仪器上通过VCS原理进行网红细胞的检测,可得出RET#、RET%、网红平均体积(MCVr)和网红成熟指数(MI)。实验证明其结果与FCM法高度相关(r=0抽筋。
一般人抽筋都会想到是缺钙,其实血脂高了也会抽筋。因为血脂高了以后,胆固醇不能正常代谢,就聚集在肌肉里,刺激肌肉抽搐。还有一个原因是血脂高造成动脉硬化,血管狭窄,影响了正常的人体供血,像小腿、脚等末端部位可能会缺血,就有可能抽筋。
如果抽筋以后,补钙还是没效果,建议去查一下有没有血脂异常。
2听力下降。
有时候我们会忽视老年人听力下降,以为是衰老的正常现象,其实也可能是高血脂变得严重了。
耳朵附近有丰富的毛细血管,如果老年人血脂异常,再伴随有高血压、糖尿病等病症,会进一步影响耳朵附近的血液供给,如果供给不足就会对听力神经造成损伤,使患者耳鸣、听力下降等。
随着现代化的生活方式普及,大家都没有时间运动,天天坐在办公室里吃外卖,血脂异常已经不只影响到老年人,很多年轻人也应该定期检查血脂,而且胖瘦体形的人都要查。血脂异常是病,大多数病人都是在常规体检中发现的,所以还是建议大家定期体检,对自己的身体负责。
公众号:爱多iodl。
高血脂有如下症状:1、手指关节出现黄色的条纹手指关节等部位出现橘色、黄色疹子、结节,手掌有黄色的条纹,需要进一步到医院诊断,了解血脂的健康水平,也许是高血脂的症状。如果高血脂的症状得不到缓解,还会伴随头晕,嗜睡等情况。2、凸起的肿疮脚跟、大腿等等部位可能出现水肿的症状,而且颜色发黄,表面光滑。另外运动的时候,如果经常出现小腿肚刺痛以及抽筋的感觉,可能是高血脂的症状。3、甲状腺疾病如果出现了缺乏碘元素的问题,常常影响甲状腺的功能,引起血甘油三酯水平增高,导致高血脂的症状。因为血液中甲状腺激素不足,胆固醇的分泌会大大提升,影响血液中的脂肪和胆固醇水平。4、腿肚经常抽筋如果体内含有大量的胆固醇,容易积累在肌肉和骨骼当中,在活动的时候容易出现抽筋的现象。如果病情比较严重时,往往还会伴随记忆力和反应力减退的现象,主要是因为血液黏稠度变高,血液流速减慢,而大脑的反应能力出现明显衰退。高血脂症是一种全身性疾病。它是指血液中一种或几种脂肪成分的增加,有高胆固醇血症,高脂蛋白血症,高甘油三酯等。 根据程度不同,高血脂的症状也表现不一,高血脂的症状主要表现可分为以下几个方面: 首先:轻度高血脂通常没有任何不舒服的感觉,但没有症状不等于血脂不高,定期检查血脂至关重要。 第二:一般高血脂的症状多表现为:头晕、神疲乏力、失眠健忘、肢体麻木、胸闷、心悸等,还会与其他疾病的临床症状相混淆,有的患者血脂高但无症状,常常是在体检化验血液时发现高脂血症。另外,高脂血症常常伴随着体重超重与肥胖。这个时候就要开始用中药调理了,如“曾氏降脂汤”。 第三,高血脂较重时会出现头晕目眩,头痛,胸闷,气短,心慌,胸痛,乏力,口角歪斜,不能说话,肢体麻木等症状,最终会导致冠心病,脑中风等严重疾病,并出现相应表现。 第四,长期高血脂的症状,长期血脂高,脂质在血管内皮沉积所引起的动脉粥样硬化,会引起冠心病和周围动脉疾病等,表现为心绞痛,心肌梗死、脑卒中和间歇性跛行。 以上是患有高血脂症的基本临床表现,仅供参考,详细可询问专业医生。血液中的葡萄糖与碱性硫酸铜溶液共热,铜离子即被血液中的葡萄糖还原成氧化亚铜,后者又可使钼酸试剂还原成低价的钼蓝(蓝色)资料-实验一 血糖的斐林法测定一,实验目的掌握Folin-Wu法测定血糖含量的原理和方法血糖指的是血液中哪一种糖 葡萄糖是血液主要的糖类,因此测血糖含量就是测血液中葡萄糖的含量用什么方法测定 测定血液中葡萄糖的含量,即测复杂组分中一种物质的量,根据生化实验基本技术的原理,可采用分光光度法(比色法)进行测定葡萄糖可以用比色法直接测定吗 不行,可以用间接的方法血糖的含量与产生的氧化亚铜成正比,氧化亚铜的量与形成的钼化合物的量成正比,可以用比色的方法进行测定33mol/L硫酸溶液四,实验操作:133mol /L 硫酸,随加随摇,加完放置5~15min,至沉淀由鲜红变为暗棕色,滤纸过滤1ml全血血糖的测定取具25ml刻度的血糖管3只,编号,用奥氏吸管吸取无蛋白血滤液2ml,放入第一只血糖管中,于第二只血糖管中加2ml标准葡萄糖溶液然后各加2ml新配置的碱性硫酸铜溶液,同时置沸水浴内煮6min,取出,在流水中迅速冷却,各加入4ml酸性钼酸盐溶液,1min后以蒸馏水稀释至25ml,混匀,倒入比色杯,用722型风光光度计于420~440nm波长比色(先以空白管调节零点,然后测标准管和样品管)m= A1C0A0 / 0欲得准确结果,所取血液的量必须准确2如血沉淀放置后不变为棕红色或重滤后仍混浊,可在钨酸与血混合液中加入10%硫酸1~2滴,待变为暗棕色后再滤采血时机和部位的选择 生化血样的采血时间,通常要求空腹时静脉采血,一般都是于清晨早餐前或进食12 h后抽血[1]。这是因为进食后的不同时间内,血液中的某些化学成分有较大波动,例如糖类、脂类、蛋白质及氨基酸等,而饮水又可使血液暂时性稀释,虽然人体具有完善的调节机制,但进食后的数小时内机体正处于代谢活跃阶段,此期间血液成分的波动不应忽视;且血液生化指标参考值的调查与界定,通常以空腹血样的检测值为统计样本。为了尽可能取得检验条件的一致性,临床生化血样原则上必须坚持空腹采血[2]。 就实验室检测角度而言,进食后血液化学成分的改变还可给检验操作的本身造成困难而带来误差。例如,进食后血中脂质的增加不仅是使甘油三酯的含量升高,还可导致血清(血浆)呈乳白色样浑浊(脂浊),这可给测定的比色、比浊或滴定等带来一定干扰,然而许多生化检验都是用比色等分析方法进行的,这就可能干扰检验的准确性;又由于乳糜微粒所占容积影响检测加样量的准确,故几乎能对除甘油三酯以外的所有检项造成负误差;此外,血液粘度的变化也可给某些检项带来干扰。 另一方面,受试者抽血的空腹时间不应超过16 h,因过度饥饿会使血清蛋白、补体C3、运铁蛋白、葡萄糖含量下降,而血胆红素因清除率减少而上升[3]。 某些试验有着严格的饮食和采血时间规定,如糖耐量试验等,如不认真掌握,可使整个试验失去意义。 国内有作者曾研究了空腹及餐后1~3 h部分常规生化指标的变化[4,5],结果大多数指标变化并无统计学意义,少数有显著变化的指标除TG、Glu外亦无实际意义,但同时认为,对于中国人常食后采集生化血样的问题,需要更多的实验室和更大量的实验数据来论证[4]。因此,在目前对该问题尚需充分论证和未取得广泛共识前,生化血样仍应以空腹采集为宜。 文献报道ACTH、皮质醇、血胆红素、血清铁清晨高,血钙中午最低,某些成分如胆固醇、纤维蛋白原等随月经周期而改变[6],对于这些生理性波动亦需有所了解。 必须强调注意某些药物对生化检验的干扰,药物干扰的方式可分为药理学干扰和化学性干扰,其原理及情形相当复杂,国内外都进行了许多研究,并有专著论述[1,6~10]。例如,Vit-C对许多实验的干扰和右旋糖酐对蛋白质测定的干扰是我们较熟知的。由于临床诊治用新药的不断应用,使药物干扰的问题愈加复杂,许多相关问题正在或尚待研究,故临床医护和检验人员都应当熟悉可能产生干扰的各种药物,力求避免药物干扰性误差。 还有一个常被忽略的因素即体力活动,它对某些检项结果有显著的影响,许多与肌肉有关的酶如CK、LDH、AST等可在运动后增加,剧烈运动后血液中Cr、Bun、K+、P的含量可增加25%以上[6]。若不认识到运动将使CK显著增高的特点,可能会把最健康的人误为心肌梗塞的可疑者。 生化血样通常抽取肘静脉血,必要时也可采颈或股静脉血,血气分析的血样则必须抽采动脉血或经充分动脉化的毛细血管血[1,12]。抽血十应避开局部水肿、炎症部位,严禁于正在输液输血的同一肢体抽血。 受试者采血时的体位对于与蛋白质结合有关的物质及高分子量物质的浓度有一定影响,如TP、Alb、Pro、Fe、Cho、ALP、ACP及总脂等在站立时会增加5%以上[3, 6],某些激素变化更明显,从仰卧该为站立,含量在数分钟内增加数倍[3]。有作者研究了站、坐、卧三种体位的不同组合变化对血脂7种成分的影响,认为血脂采样当以坐姿为佳[13,14]。从兼顾多数受试者的情况而言,生化血样的抽采体位应以坐姿为宜。 有作者主张抽血时不束扎止血带[1],因扎带可造成局部淤血、缺氧、水肿、溶血等而影响检验结果[1,3,6]。若确需扎带,则不宜过紧,且不能超过1分钟。 由上可见,医生在决定病人做血液生化检验时,需要向病员进行必要的解释,例如饮食问题、应停用的某些药物、避免体力运动等,以取得病人的主动配合。但更重要的是:医护技工作者应对上述诸问题有着明确的认识,并需对检验结果进行全面的分析、综合与应用。21 对血细胞内外物质浓度不同的相应项目的影响 由于相当一些化学成分在红细胞与血清(浆)中的浓度分布有一定差异[1,10,17],当标本溶血后,RBC中的成分大量进入血清(浆)中,必然使其相应成分的浓度增高,且比值(红细胞内浓度/血浆浓度)越大,溶血越严重,增高就越显著。例如K+、ALT、AST 、LDH的浓度分布比(红细胞/血浆)分别为222 血细胞成分进入血清(浆)中因化学反应而引起的浓度改变 例如,溶血后RBC的磷脂进入血清而使血清中的磷酸酯酶水解,其结果造成血清无机磷浓度显著增高。又如Hb能将胆红素氧化成胆绿素使血清胆红素降低[3]。 24 Hb本身颜色对检测的光学干扰 Hb的颜色在431和555nm波长附近能使比色、比浊法的吸光度增高,或使滴定法测定的滴定终点判辨困难而带来误差。 实际上,以上四类影响和/或干扰在溶血标本中同时存在并可相互作用,因而使受影响的检项更为复杂,这在超微量、高精度和多指标的检测分析中显然不可忽视,因此,严控标本溶血是保证检验质量的重要方面。3血液标本的及时处理 血样抽取后应及时送检,实验室则应尽早进行检验或标本的预处理,否则放置时间过久可导致某些化学成分的改变。譬如:糖酵解使血糖降低、RBC中K+逸入使血清K+升高、Cl-与CO2在细胞内外的交换使血清Cl-增高、CO2逸散使其结果减低、以及血液pH值变化、酶活性的降低或丧失等等,如果血样同时还有微生物的严重污染及气温较高等情况存在时,上述变化以及影响的检项就更加复杂。 一般说来,血液离体后30min即可进行血清分离操作,抗凝血在抽血后可立即分离血浆。如果不能及时检验,则应按检项要求进行标本预处理,譬如血清分离后置冰箱保存、制成去蛋白滤液、添加防腐剂等。需要注意血清冷藏前应移吸入另外的加塞试管,勿与血细胞共存,否则可引入溶血及其它误差因素;用于酶学检测的血清不宜反复冻融,此外还应注意保存时间不能太长,故实验室对血样的处理应根据其具体检验项目做出相应的明确规定。51 医护人员应向受试者做出必要的检验前准备的解释,特别是需提前停用的药物及某些饮食成分等需受试者配合准备的问题。53 尽可能赶在病人输液输血之前采血,若病人已在进行上述治疗,则严禁于正在输液输血的同一肢体抽血。55 任何血样均应严格避免溶血,故必须排除一切可能造成溶血的因素。57 对血样另有特殊要求的检项,实验室应通知临床科室及采血者。59 对于暂时不能检验而需要保存的血样,实验室应根据具体检项作出明确规定,如分离血清、制成去蛋白滤液、添加防腐剂或稳定剂、保存温度及期限等。5某些标本误差(如脂浊、溶血性干扰的第4种类型)虽可用样品空白法、双(多)波长比色法等措施进行部分校正[17],但这既增加了检测的繁琐与复杂性、校正也并非能恰到好处,在大批样、多指标的检测中及设备受限的实验室中实施亦有一定困难,且仍有许多标本误差因素是难以用上述方法校正的。②1标本采集2生化分析仪与试剂⑴日立7020自动分析仪;⑵日本麦克质控血清;⑶湖南省浏阳医疗公司生产的促凝管 1⑴门诊用促凝管静脉采集100份血液标本,每份标本量为6 ml,记录采血时间,每份标本放置20min后血液即可凝集,然后以1000r/min的速度离心15min。⑵准确吸取5ml蒸馏水溶解质控血清轻轻混匀,室温放置30min后,上机对试验的12项生化项目反复进行质控检测,使每一项目均在(﹢﹣)1s范围内。⑶于采血时间2h,分别对各标本进行12项生化项目测定,其结果做记录;然后将各标本分别加盖放到4℃冰箱中保存。⑷每次重复第⑵步的质控检测和第⑶步的标本保存步骤,分别于相应的4、8、24h对以上项目上机测定并做记录。 2 结果 结果见表105,差异有显著性。 如果以采血2h上机测定的结果为基准,则以上结果表明,血液放置4h其结果有显著性差异的项目是:血糖(GLU)血液放置8h,其结果有显著和差异的项目是GLU、总蛋白(TP)、谷草转每氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清钾(K)血液防止24h其结果有显著性差异的项目是:GLU、TP、白蛋白(ALB)、胆固醇(CHO)、谷丙转氨酶(ALT)、AST、肌酸激酶(CK)、LDH、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰转移酶(GGT)、K。 3 讨论 32 对于生化室的大多数的标本可放置24h,但应尽可能在4h内完成,对于工作量大的生化室应先测定不易长时间放置的标本,不能及时测定的项目应放到4℃冰箱中保存。 391 , APOB 乘以 02 倍。( 17 )问题:新换了一个试剂,有反应曲线、因数是正确的、方法学、读点、波长均无问题,结果是“ 0 ”,为什么?答:在参数中 Correction Factor A 常规下是:10000 ,不小心被改为了 1500 。( 19 )问题:经常丢试剂,但仅限某一项目,原因是什么?答:最常见的原因是您没有使用原厂的试剂瓶,国产的试剂瓶的形状可能不规则,在取试剂的过程中试剂针碰到试剂瓶的瓶口,就会报警设有试剂。( 20 )问题:给一新项目定标时,报警 ACAL incomplete ,为什么?答:最可能的有以下几种原因:① 定标液的位置不正确;② 定标液所用的样品杯太小、太低,不能被仪器探测到(比如有些用户用离心管);③ 试剂量不足,试剂 I 或试剂 II 任何一瓶试剂小于 2ml (旧版)或低于报警测试数目(新版);④ 没有定标申请而放入空白(蓝)和 / 或定标(黄)架子。( 21 )问题:新上了一个实验项目,定标不通过,报 Calibration Error ,是什么原因?答:在定标过种中如果有任何报警,将会定标失败:① 在定标过程中定标液不足;( # )② Rate 法的项目线性不好或范围设置不正确;( * )③ 试剂空白超出所设定的范围或波长设定错误;( Y 、 y 、 U 、 u )④ 在 P-B-I 定标参数中,因数范围过窄,先报 Calibration Factor Over Range ,后报 Calibration Error 。( 22 )问题:如果测定的标本特别多,如何给一个项目设定多瓶试剂?答:奥林巴斯的生化分析仪最多可以给一个项目设定九瓶试剂:点击 < 仪器状态 >< ( 0 )试剂状态 > ,先设一瓶试剂,再用光标选定一个空位置,点 后,选定项目、瓶子的规格,退出后,最后设定的为第一瓶试剂,以前的为第二瓶试剂,依此类推。( 23 )问题:经常发现某一种试剂用的特别快,比如早上检查有 100 个 TP 试剂,做四、五十个肝功后仪器就报警没有试剂了,可能是什么原因?答:在 P-Y-A 中,最下面是 LIH Reagent Test Name :您一定是选定的此项目,它的意义是, LIH 的测定与此项目共用一瓶试剂,但这个地方的误选,仪器不会了生错误而吸此项目的试剂,在另外一个画面 P-Y-C ( Round )中, LIH Measure :中默认是“ Selected ”,被不小心改成了“ ALL ”,也就是说您让仪器每个标本都做 LIH (血清信息),用的是您所选定的试剂。( 24 )问题:如何设定奥林巴斯带样品空白的 TBIL/DBIL ?答:按以下六步设定实验参数:1 . 首先,在 [Parameter]-[Common Test Parameter]-[Test Name] 编 TBIL 与 DBIL 的实验名称,然后在 91 号与 92 号编 TBILb 与 DBILb (总胆红素与直接胆红素的空白实验)2 .其次,在 [Parameter]-[Specific Test Parameter] 中,编辑 TBIL 与 91TBILb 的参数(详见试剂盒内的说明书), DBIL 与 92DBILb 的参数。请注意 TBIL 与 91TBILb 的参数要完全一样, DBIL 与 92DBILb 的参数要完全一样。3 . [Parameter]-[Inter-Related Tests]-[Sample Blank] 中,选 Color Test (颜色实验)为 TBIL 与 DBIL , Blank Test[ 空白实验 ] 为 91TBILb 与 DBILb 。4 . [Parameter]-[Calibration]-[Calibration Specific] 中,选 TBIL 与 DBIL 为 AB 定标方式, 91TBILb 与 92DBILb 为 MB 定标方式, Factor 为 1/Calculated Test No 调整试验顺序,把磷项目放在前面,先测定即可避免污染 利用仪器本身提供的抗交叉污染程序,通过增加冲洗次数可避免污染 。( 30 )溶血、黄疸、乳糜血对临床生化的那些项目有干扰?答:溶血、黄疸、乳糜对临床项目的干扰见以下表格(本结果仅供参考)( 31 )测定结果后面有时出现标志 “ u “ , 是什么原因?答:试剂空白的吸光度超出设定范围。解决方法:A 如为试剂变质,则更换试剂;B 重新调整试剂空白的吸光度范围;C 如更换灯泡或做过保养,重新做杯空白 (PHOTOCAL) 。( 32 )怎么样判断 K , Na, Cl 电极膜破裂?答:如果电极膜破裂,在 ISE 诊断中测定高值标准,底值标准和 MID 的电位值,如果三者电位值一致,没有明显区别。( 33 ) TG 测定时,质控高、低值都符合要求,病人结果偏低,为什么?答:可能的原因是用户所用定标液为甘油(无色水剂),试剂中的关键酶(脂肪酶)量不足或者活性中够,就会造成这种现象。( 34 ) ISE 定标时, SLOPE 值突然下降 10 点以上,为什么?答:Na,K,Cl Slope 值从 53 , 55 , 52 突然下降为 34,38,40 定标液敞口放置时间过长,更换新定标液。B 更换三通管。( 35 )如何在 AU400/600/640 仪器实验自动重做?答:⑴ 5 m l 为单位增减。Dil vol (付波长)测定波长共有十三种可以选择:340,380,410,450,520,540,570,600,660,700,750, 800nm 。Method (方法学) 共六种 :End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1 。前三种与后三种的差别为:前三种是以试剂为空白的,后三种是以比色杯为空白的。Reaction (反应方向) :+ , - 。End 与 Fixed 法不起作用,但是 Rate 法一定要输正确。请记住!向下反应一般来说只有三种:AST 、 ALT 、 HBDH, 其它均为向上反应。Point 1 Fst LstPoint 2 Fst Lst(读点设置) Point1 为主测定, Point2 为辅助测定。End 法:a )单试剂:一般均为 0--27 ,特例:ALB 为 0—4 ;b )双试剂(有样品空白功能):0—27 ;0—10 。Rate 法:a )单试剂:延迟时间较短的,一般输 4—10 。b) 延迟时间较长的,一般输 21—27 。Fixed 法:固定两个点之间去计算。a) 单试剂苦味酸法肌酐:1—4 ;尿素氮:3—8 。b) 双试剂苦味酸法肌酐:11—14 ;尿素氮:12—17 。Linearity (线性) :Fst Lst Rate 法才输入,一般国产试剂 30% ;进口试剂:15% 。No-Lag-Time :Rate 法才输入,在读点期内,如果反应太快,超过线性( Linearity 限)仪器会自动用线性比较好的那一段来计算。Min OD L Max OD H (吸光度限)Rate 法才输入,如果 Rate 法的反应,反应速度太快,出现了底物耗尽的情况,向下的反应会低于 Min OD ,向上的反应会超过 Max OD 。Reagent OD Limit Fst HLst9—20—05%, 最多可有 20U/L 的干扰。( 43 ) Olympus 质控或定标液中应选哪种方法的靶值?答:以下的表格为 Olymopus 定标液及质控血清中国建议使用的方法。( 44 )标本的某一项或几项的结果是零或负数,复查后正常,其它标本的结果和质控结果均正常,可能是什么原因?答:最常见的原因是血清表面有气泡。( 45 )在酶项目分析中“ Serum Start ” ( 血清启动 ) “ Substrate Start ” ( 底物启动 ) 有什么区别?答:通常血清启动为单试剂,加完标本就开始反应,底物启动一般为双试剂,标本与第一试剂没有反应,加完启动试剂(第二试剂)开始反应。( 46 )如何判断水的质量?答:此方法不一定科学,仅供参考:取一只一次性的塑料试管,加一毫升左右的镁(二甲苯胺兰法)试剂,然后加一两滴水,5 分钟后观察有无变成红色,如变成红色表明所用的水中含有离子。( 47 )如何排除仪器方面的问题?答 :( a ) 光路 : 在仪器上设定一个项目为终点法 , 因数为 10000 给这个项目做空白定标 (b) 比色杯 : 奥林巴斯的仪器是做光电校正 , 日立仪器是做比色杯空白 , 不同的仪器有不同的标准 Ca,Mg 等项目对比色杯敏感。( 48 )甘油三酯会发生类似免疫反应的前带现象吗?答:会发生。甘油三酯的催化反应主要是基于 L- 甘油 -3 磷酸氧化酶与改良的 Trinder\''s 反应。当 TG 大于 20mmol/L 时会有一个十分强烈的干扰反应,并经常发生在一些轻微乳糜的标本。产生干扰的原因是快速利用氧,反应处于厌氧状态, L- 甘油 -3 磷酸氧化酶与其电子受体作用使形成的颜色消退。( 49 )如何判断试剂针与搅拌棒的交叉污染?答:以 AU400/600/640/2700 为例,这些仪器都是三头搅拌棒:Px 为提供项目, Ra 为接受项目,做 20 个标本(混合血清),每个标本只做一个项目,按如下排列方式做:1 2 3 4 5 6 7 8 9 10Px1 Ra1 Ra2 Ra3 Ra4 Px2 Ra5 Ra6 Ra7 Ra8样品针:Data1 REF2搅拌棒:Data1 REF2以同样的方式做下一组标本,得到 Data3 、 Data4 、 REF3 、 REF4 。用以下方式研究:100- (( Data1/REF2 ) *100 )100- (( Data3/REF4 ) *100 )( 50 )如何判断比色杯的交叉污染?答:P 为提供项目, R 为接受项目,所有标本均为混合血清。以 AU400 为例 88 个比色杯要准备 176 份标本:P1 P2 P3………P20 P21 22(Water) P23 P24………P42 P43 44(Water)以此类推,第 66 与第 88 个标本的项目均为水。在同一个 ROUND 从第 89 到 176 个标本的项目均 R 项目,后 88 个标本均为血清,不放水。那么第 110 、 132 、 154 、 176 号标本的结果为参照结果( REF )从第 89 号到 176 号除外以上四个号码的标本均为受到比色杯干扰的结果。以上的操作再重复一次。公式:100- ((受干扰结果的平均值 / 四个对照结果的平均值) *100 )来源:检验星空下面的内容以奥林巴斯生化分析仪为例,其他品牌生化分析仪仅供参考。( 1 )问题:工作结束之后不能再次开始工作或正常关机。原因:最常见的原因是打印机处于实时打印状态( Data Log List 或 Realtime Report 状态),打印机可能缺纸、卡纸、被误操作为暂停或关机等。解决方法:排除打印机故障,点击 < 仪器状态 >< ( 6 ) DPR 状态 > ,点击 ,按 Resume 继续打印,按 Cancel 取消打印操作。( 2 )问题:是否每天定标就能保证结果稳定?答:不一定,可能您在定标时并不是每天都新溶解定标液,因为定标液复溶后有一些项目不稳定,比如:TBIL 、 DBIL (见光分解)、 GLU (细菌分解)、酶项目(冰冻后复溶降解)。解决方法:以上项目在定标时一定要新溶解一瓶定标液,至少溶解三十分钟,在一小时内测定完成。( 3 )问题:病人输液时加入右旋糖苷影响总蛋白的结果吗?答:影响。右旋糖苷存在血清中可引起轻度乳糜,双缩脲法测定总蛋白会使右旋糖苷形成沉淀及绿色化合物而导致错误的结果,偏高的结果最多可以达到 20 克 / 升。( 4 )问题:可以用总蛋白试剂测定尿或脑脊液中的蛋白吗?答:不能。因为敏感度太低。应选用 OSR6170 (尿 / 脑脊液蛋白试剂盒)。( 5 )问题:奥林巴斯水平 I 和水平 II 质控血清可以用在干化学的仪器上吗?答:不能。常规的质控血清在奥林巴斯仪器上测定时被试剂稀释,而干化学的质控系统质控液直接加到干片上。相对于常规质控,干化学质控中的保护剂、添加剂、稳定剂的浓度相对较高。实际上,没有任何一种质控同时适用于干化学与湿化学。( 6 )问题:可以用 CKMB 试剂盒测定 CKBB 吗?答:理论上可以,但提供的标本中必须不含有 CKMB ,这些可以用电泳法来检查。( 7 )问题:OSR6121 的葡萄糖试剂可以测定 CSF (脑脊液)中的葡萄糖吗?答:可以,因为与尿标本一样,都,都不含有蛋白质,但是前没有官方报道。( 8 )问题:如何防止 ALT 对 LDH 的交叉污染?答:在 ALT 试剂中加入终浓度为 5mmol/L 的 EDTA ,可以降低约 50% 的交叉污染(可降低至 14U/L 的 LDH )。( 9 )问题:EDTA 血浆影响苦味酸法的肌酐吗?答:影响。EDTA 抑制肌酐与苦味酸反应,使结果偏低。( 10 )问题:高葡萄糖的标本影响苦味酸法的肌酐吗?答:苦味酸与肌反应不特异,假肌酐如:酮体、抗坏血酸盐、丙酮酸盐、葡萄糖和尿酸都对 Jaffe 氏反应有明显的扰作用。通过调整 NaOH 与苦味酸的浓度,调节反应温度与测量窗口,可以减低这些竟争反应,奥林巴斯改良的 Jaffe 法可以做到葡萄糖浓度达到 17mmol/L 没有干扰。( 11 )问题:奥林巴斯 DBIL 直接胆红素试剂所测定结果是否包含△胆红素?答:是。因为奥林巴斯 DBIL 直接胆红素试剂带有样品空白,可以扣除△胆红素的干扰。所以有用户说结果太低,不是太低,是其它试剂的结果太高了。( 12 )问题:为什么 TP 总蛋白的试剂空白为负数?答:在测定试剂空白时,因为当试剂 II 加入后,在副波长 660nm 的吸光度大于主波长 540nm 的吸光度。用双波长测定,试剂空白为负数。( 13 )问题:为什么有些质控 CKMB 结果大于 CK ?答:因为质控中有一些添加成份,可能动物组织(牛脑),此组织中含有 CKBB ,所以 CKMB 的结果大于 CK ,但不应大于 CK的二倍。( 14 )问题:APOA1/APOB 是依照 IFCC 还是 CDC 标准追踪的?答:中国是最早是由卫生部老年病研究所根据美国疾病控制中心 CDC 引进的此项目,美国 CDC 的结果比国际卫生组织 WHO 低, APOA1 乘以 079 就与国内一致。一般欧州公司的产品都是 IFCC 标准的。( 15 )问题:葡萄试剂可以测定尿标本吗?答:可以。建议用已糖激酶法的葡萄糖试剂。葡萄糖氧化酶法的试剂会受尿中 Vc 的干扰。( 16 )问题:为什么有时 HBDH 的结果大于 LDH ?LDH opt 与 LDH IFCC 有什么关系?答:从某种意义上讲, HBDH 是 LDH 的一部分,但是可能由于方法学(底物、缓冲液、 PH 值等)的不同,会出现 HBDH 的结果大于 LDH ,如果 LDH 是 opt 法就没有这种现象。LDH opt 是欧洲的方法,底物是丙酮酸。LDH IFCC 的底物是乳酸,两者的正常值范围相比 LDH opt 比 LDH IFCC 大约高 20000 ,不小心被改为了 0 。( 18 )问题:新换了一个厂家的肌酐试剂,重新定标后,结果均为 1500 多,是何种原因?答:在参数中 Correction Factor B 常规下是:00000 。5 .设试剂位:TBIL/DBIL 为红盖, TBILb/DBILb 为白盖,共设定了四个试剂位。6 . [User]-[Calibration] 中, TBIL 与 DBIL 两点定标, TBILb 与 DBILb 空白定标。( 25 )问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ LIH Reagent Test No Miss Match ” , 是何原因?答:在 P-Y-A 中,最下面是 LIH Reagent Test Name :您一定是选定的此项目,这个地方的默认为 96 :LIH 。( 26 )问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ Total Sample:Item ” , 是何原因?答:在 P-I 中, SV (标本量) +DIL VOL (吐水量) +R1 (试剂 I ) +DIL VOL (吐水量) +R2 (试剂 II ) +DIL VOL (吐水量);在 AU400/600/640 应在 150-550 微升之间,在 AU2700/5400 应在 120-440 微升之间。( 27 ) 问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ R1+Dilution Volume:Item ” , 是何原因?答:在 P-I 中, R1 (试剂 I ) +DIL VOL (吐水量)在 AU400/600/640 应小于 300 微升, AU2700/5400 应小于 250 微升。( 28 ) 问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ Number of Muti:Item ” , 是何原因?答:在 P-Q-I 的质控参数编辑中,一个项目只能有两个“ Muti ”,表示用这两个项目画二维质控图( Twin Plot ),多了或者少了仪器都不能正常工作。( 29 ) 血清磷的测定有时偏高 1 倍以上,复查结果正常,为什么?答:交叉污染,例如仪器试剂针加完含磷酸盐的试剂( BG ),再加磷试剂,当冲洗不完全时造成污染。解决方法:A B 常见原因:A 清洗混匀棒。C[Parameter]-[System]-[System] 中:Routine Test Requsition 由 Sequential—Rack No; Auto/Standard Repeat: 由 Stanard → Auto 。⑵ 在 Online 参数中:改成 Batch-None-Batch-None 。⑶ 报警限确定(仅供参考):见表 1 。⑷ 重做规则以及相关实验:[Parameter]-[Repeat Parameter]-[Repeat Common] 中设置:Repeat Normal or Mode: # ; ? ; * ; ! ; G ; P ; TDilution or Mode: @ ; $ ; D ; B ; & ; Z ; F相关试验:ALB—TP ;DBIL—TBIL ;CKMB—CK ;TG—LDL 。( 36 )为什么要定标?多长时间要定标一次?答:⑴ 定标的意义:定标就是要找出一个参考点,就是一个 K 值(或 F 值)。它是由仪器与试剂状态确定下来的。当我们测定一个标本时,无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转换成一个浓度或是酶的活性。那就要乘上一个 K 值,计算并打印出来的结果对我们就有意义了。K 值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是有试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度:标准浓度 - 试剂空白A 标准 - A 试剂空白 (试剂空白通常是 0 )标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个 K 值。无论什么样的标本,用其吸光度乘以 K 值我们就得到了答案。因此, K 值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。⑵ K 值的决定因素:我们看看 K 值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。吸光度受仪器状况、试剂状况的影响,如果您的仪器相当稳定,试剂是影响 K 值的一个主要因素。⑶ 如何确定 K 值是正确的?一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说 K 值是准确的,用这个 K 值计算出来病人的结果也是准确的,所以 K 值非常关键。⑷ K 值的真面目:K 值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以 K 值的稳定性决定您的仪器与试剂,如果仪器与试剂都十分稳定,那 K 值也很稳定。⑸ 多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。⑹ 酶的项目如何确定 K 值:一是计算出来的理论 K 值;TV ′ 1000K= ————————SV ′ L ′ e二是用有酶项目的定标液得出 K 值:目前 OLYMPUS 公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。( 37 ) AU400/600/640 在编参数时有哪几项基本点?答:Sample vol (样品量) :2 ~ 50 m l , 可以按 0 ( 稀释液 - 吐水量 ) :一般建议样品量少于 5 m l 时,加 10 m l 水。Reagent 1 vol (第一试剂量) :25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。Reagent 2 vol (第二试剂量) :25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。第二试剂是固定的 10-11 点之间加入的。Wavelength Pri: (主波长) Sec L Fst L Lst H试剂空白 OD 限 :Fst 指的是 0 点, Lst 指的是 27 点。只对 Rate 法有用,一般向下的反应,输 05 ,向上的反应 -28 。Dynamic Range L H :指的是试剂盒的线性范围。ONBOARD STBLTY PERIOD 有条码的试剂在仪器上的稳定期。Normal Range (正常范围) :可以按姓别、年龄输入正常范围None selected (不分性别年龄的正常值) 如果什么都没有选择时的正常范围 ( AU600 在这里输入几位小数,结果就保留几位小数)Out of Range 超出范围Panic Value 报警值Unit 单位F7 :Decimal Places 小数位( 38 ) Olympus 生化分析仪可以做前带检查吗?答:可以,并且有三种检查方式,详见 [Parameter]-[Special]-[Datacheck Parameter] 。Olympus 的 TG 试剂就有第一种检查法。( 39 ) CKMB ﹥ CK 会出现在什么情况?答:国内及国外的很多报道有上述现象 , 只要 CKMB 的升高不是由于溶血造成的 ,CKMB >CK, 这样的病例 95% 是 O 型或 B 型血的癌症患者 , 原因是部分癌症病人免疫系统混乱, 其中的一些免疫球蛋白充当的辅酶的作用。( 40 )溶血标本可测定 CKMB 吗?答:通常测定 CKMB 的标本应避免溶血,在 Olympus 的试剂与仪器配合可以基本上扣除这种干扰。RBC 中并不含有 CKMB, 但 RBC 中含有 ADK, 一般厂家会在试剂中加入抑制剂 (5 磷 酸二腺酐 AP 5A ) 来抑制 ADK 的作用 , 但抑制率仅有 95-97%, 也就是说有 3-5% 没有被抑制 , 对于 正常的标本只升高 0-6U/L, 极端标本可能会到 35U/L, 只要应用双速率法 , 就可以扣除 ADK 的 干扰。( 41 ) CKMB 正常, CK 特别高可能会出现在什么情况的病人?答:溶血标本、肌肉损伤、外科手术后、酒精中毒、肌营养不良等。( 42 ) OlympusCKMB 试剂中抗 M 亚基抗体的特异性如何?答:在 37 ℃ 下最多可以达到 4000U/L, 特异性为 99 然后 , 把样品和试剂全部放成水 , 观察最后的结果 , 可以接受的范围是正负 151 Data2 REF1 Data2 REF1 ) *100 )100- (( Data2/REF3 ) *100 )100- (( Data4/REF91 , APOB 乘以 02 倍。( 17 )问题:新换了一个试剂,有反应曲线、因数是正确的、方法学、读点、波长均无问题,结果是“ 0 ”,为什么?答:在参数中 Correction Factor A 常规下是:10000 ,不小心被改为了 1500 。( 19 )问题:经常丢试剂,但仅限某一项目,原因是什么?答:最常见的原因是您没有使用原厂的试剂瓶,国产的试剂瓶的形状可能不规则,在取试剂的过程中试剂针碰到试剂瓶的瓶口,就会报警设有试剂。( 20 )问题:给一新项目定标时,报警 ACAL incomplete ,为什么?答:最可能的有以下几种原因:① 定标液的位置不正确;② 定标液所用的样品杯太小、太低,不能被仪器探测到(比如有些用户用离心管);③ 试剂量不足,试剂 I 或试剂 II 任何一瓶试剂小于 2ml (旧版)或低于报警测试数目(新版);④ 没有定标申请而放入空白(蓝)和 / 或定标(黄)架子。( 21 )问题:新上了一个实验项目,定标不通过,报 Calibration Error ,是什么原因?答:在定标过种中如果有任何报警,将会定标失败:① 在定标过程中定标液不足;( # )② Rate 法的项目线性不好或范围设置不正确;( * )③ 试剂空白超出所设定的范围或波长设定错误;( Y 、 y 、 U 、 u )④ 在 P-B-I 定标参数中,因数范围过窄,先报 Calibration Factor Over Range ,后报 Calibration Error 。( 22 )问题:如果测定的标本特别多,如何给一个项目设定多瓶试剂?答:奥林巴斯的生化分析仪最多可以给一个项目设定九瓶试剂:点击 < 仪器状态 >< ( 0 )试剂状态 > ,先设一瓶试剂,再用光标选定一个空位置,点 后,选定项目、瓶子的规格,退出后,最后设定的为第一瓶试剂,以前的为第二瓶试剂,依此类推。( 23 )问题:经常发现某一种试剂用的特别快,比如早上检查有 100 个 TP 试剂,做四、五十个肝功后仪器就报警没有试剂了,可能是什么原因?答:在 P-Y-A 中,最下面是 LIH Reagent Test Name :您一定是选定的此项目,它的意义是, LIH 的测定与此项目共用一瓶试剂,但这个地方的误选,仪器不会了生错误而吸此项目的试剂,在另外一个画面 P-Y-C ( Round )中, LIH Measure :中默认是“ Selected ”,被不小心改成了“ ALL ”,也就是说您让仪器每个标本都做 LIH (血清信息),用的是您所选定的试剂。( 24 )问题:如何设定奥林巴斯带样品空白的 TBIL/DBIL ?答:按以下六步设定实验参数:1 . 首先,在 [Parameter]-[Common Test Parameter]-[Test Name] 编 TBIL 与 DBIL 的实验名称,然后在 91 号与 92 号编 TBILb 与 DBILb (总胆红素与直接胆红素的空白实验)2 .其次,在 [Parameter]-[Specific Test Parameter] 中,编辑 TBIL 与 91TBILb 的参数(详见试剂盒内的说明书), DBIL 与 92DBILb 的参数。请注意 TBIL 与 91TBILb 的参数要完全一样, DBIL 与 92DBILb 的参数要完全一样。3 . [Parameter]-[Inter-Related Tests]-[Sample Blank] 中,选 Color Test (颜色实验)为 TBIL 与 DBIL , Blank Test[ 空白实验 ] 为 91TBILb 与 DBILb 。4 . [Parameter]-[Calibration]-[Calibration Specific] 中,选 TBIL 与 DBIL 为 AB 定标方式, 91TBILb 与 92DBILb 为 MB 定标方式, Factor 为 1/Calculated Test No 调整试验顺序,把磷项目放在前面,先测定即可避免污染 利用仪器本身提供的抗交叉污染程序,通过增加冲洗次数可避免污染 。( 30 )溶血、黄疸、乳糜血对临床生化的那些项目有干扰?答:溶血、黄疸、乳糜对临床项目的干扰见以下表格(本结果仅供参考)( 31 )测定结果后面有时出现标志 “ u “ , 是什么原因?答:试剂空白的吸光度超出设定范围。解决方法:A 如为试剂变质,则更换试剂;B 重新调整试剂空白的吸光度范围;C 如更换灯泡或做过保养,重新做杯空白 (PHOTOCAL) 。( 32 )怎么样判断 K , Na, Cl 电极膜破裂?答:如果电极膜破裂,在 ISE 诊断中测定高值标准,底值标准和 MID 的电位值,如果三者电位值一致,没有明显区别。( 33 ) TG 测定时,质控高、低值都符合要求,病人结果偏低,为什么?答:可能的原因是用户所用定标液为甘油(无色水剂),试剂中的关键酶(脂肪酶)量不足或者活性中够,就会造成这种现象。( 34 ) ISE 定标时, SLOPE 值突然下降 10 点以上,为什么?答:Na,K,Cl Slope 值从 53 , 55 , 52 突然下降为 34,38,40 定标液敞口放置时间过长,更换新定标液。B 更换三通管。( 35 )如何在 AU400/600/640 仪器实验自动重做?答:⑴ 5 m l 为单位增减。Dil vol (付波长)测定波长共有十三种可以选择:340,380,410,450,520,540,570,600,660,700,750, 800nm 。Method (方法学) 共六种 :End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1 。前三种与后三种的差别为:前三种是以试剂为空白的,后三种是以比色杯为空白的。Reaction (反应方向) :+ , - 。End 与 Fixed 法不起作用,但是 Rate 法一定要输正确。请记住!向下反应一般来说只有三种:AST 、 ALT 、 HBDH, 其它均为向上反应。Point 1 Fst LstPoint 2 Fst Lst(读点设置) Point1 为主测定, Point2 为辅助测定。End 法:a )单试剂:一般均为 0--27 ,特例:ALB 为 0—4 ;b )双试剂(有样品空白功能):0—27 ;0—10 。Rate 法:a )单试剂:延迟时间较短的,一般输 4—10 。b) 延迟时间较长的,一般输 21—27 。Fixed 法:固定两个点之间去计算。a) 单试剂苦味酸法肌酐:1—4 ;尿素氮:3—8 。b) 双试剂苦味酸法肌酐:11—14 ;尿素氮:12—17 。Linearity (线性) :Fst Lst Rate 法才输入,一般国产试剂 30% ;进口试剂:15% 。No-Lag-Time :Rate 法才输入,在读点期内,如果反应太快,超过线性( Linearity 限)仪器会自动用线性比较好的那一段来计算。Min OD L Max OD H (吸光度限)Rate 法才输入,如果 Rate 法的反应,反应速度太快,出现了底物耗尽的情况,向下的反应会低于 Min OD ,向上的反应会超过 Max OD 。Reagent OD Limit Fst HLst9—20—05%, 最多可有 20U/L 的干扰。( 43 ) Olympus 质控或定标液中应选哪种方法的靶值?答:以下的表格为 Olymopus 定标液及质控血清中国建议使用的方法。( 44 )标本的某一项或几项的结果是零或负数,复查后正常,其它标本的结果和质控结果均正常,可能是什么原因?答:最常见的原因是血清表面有气泡。( 45 )在酶项目分析中“ Serum Start ” ( 血清启动 ) “ Substrate Start ” ( 底物启动 ) 有什么区别?答:通常血清启动为单试剂,加完标本就开始反应,底物启动一般为双试剂,标本与第一试剂没有反应,加完启动试剂(第二试剂)开始反应。( 46 )如何判断水的质量?答:此方法不一定科学,仅供参考:取一只一次性的塑料试管,加一毫升左右的镁(二甲苯胺兰法)试剂,然后加一两滴水,5 分钟后观察有无变成红色,如变成红色表明所用的水中含有离子。( 47 )如何排除仪器方面的问题?答 :( a ) 光路 : 在仪器上设定一个项目为终点法 , 因数为 10000 给这个项目做空白定标 (b) 比色杯 : 奥林巴斯的仪器是做光电校正 , 日立仪器是做比色杯空白 , 不同的仪器有不同的标准 Ca,Mg 等项目对比色杯敏感。( 48 )甘油三酯会发生类似免疫反应的前带现象吗?答:会发生。甘油三酯的催化反应主要是基于 L- 甘油 -3 磷酸氧化酶与改良的 Trinder\''s 反应。当 TG 大于 20mmol/L 时会有一个十分强烈的干扰反应,并经常发生在一些轻微乳糜的标本。产生干扰的原因是快速利用氧,反应处于厌氧状态, L- 甘油 -3 磷酸氧化酶与其电子受体作用使形成的颜色消退。( 49 )如何判断试剂针与搅拌棒的交叉污染?答:以 AU400/600/640/2700 为例,这些仪器都是三头搅拌棒:Px 为提供项目, Ra 为接受项目,做 20 个标本(混合血清),每个标本只做一个项目,按如下排列方式做:1 2 3 4 5 6 7 8 9 10Px1 Ra1 Ra2 Ra3 Ra4 Px2 Ra5 Ra6 Ra7 Ra8样品针:Data1 REF2搅拌棒:Data1 REF2以同样的方式做下一组标本,得到 Data3 、 Data4 、 REF3 、 REF4 。用以下方式研究:100- (( Data1/REF2 ) *100 )100- (( Data3/REF4 ) *100 )( 50 )如何判断比色杯的交叉污染?答:P 为提供项目, R 为接受项目,所有标本均为混合血清。以 AU400 为例 88 个比色杯要准备 176 份标本:P1 P2 P3………P20 P21 22(Water) P23 P24………P42 P43 44(Water)以此类推,第 66 与第 88 个标本的项目均为水。在同一个 ROUND 从第 89 到 176 个标本的项目均 R 项目,后 88 个标本均为血清,不放水。那么第 110 、 132 、 154 、 176 号标本的结果为参照结果( REF )从第 89 号到 176 号除外以上四个号码的标本均为受到比色杯干扰的结果。以上的操作再重复一次。公式:100- ((受干扰结果的平均值 / 四个对照结果的平均值) *100 )来源:检验星空下面的内容以奥林巴斯生化分析仪为例,其他品牌生化分析仪仅供参考。( 1 )问题:工作结束之后不能再次开始工作或正常关机。原因:最常见的原因是打印机处于实时打印状态( Data Log List 或 Realtime Report 状态),打印机可能缺纸、卡纸、被误操作为暂停或关机等。解决方法:排除打印机故障,点击 < 仪器状态 >< ( 6 ) DPR 状态 > ,点击 ,按 Resume 继续打印,按 Cancel 取消打印操作。( 2 )问题:是否每天定标就能保证结果稳定?答:不一定,可能您在定标时并不是每天都新溶解定标液,因为定标液复溶后有一些项目不稳定,比如:TBIL 、 DBIL (见光分解)、 GLU (细菌分解)、酶项目(冰冻后复溶降解)。解决方法:以上项目在定标时一定要新溶解一瓶定标液,至少溶解三十分钟,在一小时内测定完成。( 3 )问题:病人输液时加入右旋糖苷影响总蛋白的结果吗?答:影响。右旋糖苷存在血清中可引起轻度乳糜,双缩脲法测定总蛋白会使右旋糖苷形成沉淀及绿色化合物而导致错误的结果,偏高的结果最多可以达到 20 克 / 升。( 4 )问题:可以用总蛋白试剂测定尿或脑脊液中的蛋白吗?答:不能。因为敏感度太低。应选用 OSR6170 (尿 / 脑脊液蛋白试剂盒)。( 5 )问题:奥林巴斯水平 I 和水平 II 质控血清可以用在干化学的仪器上吗?答:不能。常规的质控血清在奥林巴斯仪器上测定时被试剂稀释,而干化学的质控系统质控液直接加到干片上。相对于常规质控,干化学质控中的保护剂、添加剂、稳定剂的浓度相对较高。实际上,没有任何一种质控同时适用于干化学与湿化学。( 6 )问题:可以用 CKMB 试剂盒测定 CKBB 吗?答:理论上可以,但提供的标本中必须不含有 CKMB ,这些可以用电泳法来检查。( 7 )问题:OSR6121 的葡萄糖试剂可以测定 CSF (脑脊液)中的葡萄糖吗?答:可以,因为与尿标本一样,都,都不含有蛋白质,但是前没有官方报道。( 8 )问题:如何防止 ALT 对 LDH 的交叉污染?答:在 ALT 试剂中加入终浓度为 5mmol/L 的 EDTA ,可以降低约 50% 的交叉污染(可降低至 14U/L 的 LDH )。( 9 )问题:EDTA 血浆影响苦味酸法的肌酐吗?答:影响。EDTA 抑制肌酐与苦味酸反应,使结果偏低。( 10 )问题:高葡萄糖的标本影响苦味酸法的肌酐吗?答:苦味酸与肌反应不特异,假肌酐如:酮体、抗坏血酸盐、丙酮酸盐、葡萄糖和尿酸都对 Jaffe 氏反应有明显的扰作用。通过调整 NaOH 与苦味酸的浓度,调节反应温度与测量窗口,可以减低这些竟争反应,奥林巴斯改良的 Jaffe 法可以做到葡萄糖浓度达到 17mmol/L 没有干扰。( 11 )问题:奥林巴斯 DBIL 直接胆红素试剂所测定结果是否包含△胆红素?答:是。因为奥林巴斯 DBIL 直接胆红素试剂带有样品空白,可以扣除△胆红素的干扰。所以有用户说结果太低,不是太低,是其它试剂的结果太高了。( 12 )问题:为什么 TP 总蛋白的试剂空白为负数?答:在测定试剂空白时,因为当试剂 II 加入后,在副波长 660nm 的吸光度大于主波长 540nm 的吸光度。用双波长测定,试剂空白为负数。( 13 )问题:为什么有些质控 CKMB 结果大于 CK ?答:因为质控中有一些添加成份,可能动物组织(牛脑),此组织中含有 CKBB ,所以 CKMB 的结果大于 CK ,但不应大于 CK的二倍。( 14 )问题:APOA1/APOB 是依照 IFCC 还是 CDC 标准追踪的?答:中国是最早是由卫生部老年病研究所根据美国疾病控制中心 CDC 引进的此项目,美国 CDC 的结果比国际卫生组织 WHO 低, APOA1 乘以 079 就与国内一致。一般欧州公司的产品都是 IFCC 标准的。( 15 )问题:葡萄试剂可以测定尿标本吗?答:可以。建议用已糖激酶法的葡萄糖试剂。葡萄糖氧化酶法的试剂会受尿中 Vc 的干扰。( 16 )问题:为什么有时 HBDH 的结果大于 LDH ?LDH opt 与 LDH IFCC 有什么关系?答:从某种意义上讲, HBDH 是 LDH 的一部分,但是可能由于方法学(底物、缓冲液、 PH 值等)的不同,会出现 HBDH 的结果大于 LDH ,如果 LDH 是 opt 法就没有这种现象。LDH opt 是欧洲的方法,底物是丙酮酸。LDH IFCC 的底物是乳酸,两者的正常值范围相比 LDH opt 比 LDH IFCC 大约高 20000 ,不小心被改为了 0 。( 18 )问题:新换了一个厂家的肌酐试剂,重新定标后,结果均为 1500 多,是何种原因?答:在参数中 Correction Factor B 常规下是:00000 。5 .设试剂位:TBIL/DBIL 为红盖, TBILb/DBILb 为白盖,共设定了四个试剂位。6 . [User]-[Calibration] 中, TBIL 与 DBIL 两点定标, TBILb 与 DBILb 空白定标。( 25 )问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ LIH Reagent Test No Miss Match ” , 是何原因?答:在 P-Y-A 中,最下面是 LIH Reagent Test Name :您一定是选定的此项目,这个地方的默认为 96 :LIH 。( 26 )问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ Total Sample:Item ” , 是何原因?答:在 P-I 中, SV (标本量) +DIL VOL (吐水量) +R1 (试剂 I ) +DIL VOL (吐水量) +R2 (试剂 II ) +DIL VOL (吐水量);在 AU400/600/640 应在 150-550 微升之间,在 AU2700/5400 应在 120-440 微升之间。( 27 ) 问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ R1+Dilution Volume:Item ” , 是何原因?答:在 P-I 中, R1 (试剂 I ) +DIL VOL (吐水量)在 AU400/600/640 应小于 300 微升, AU2700/5400 应小于 250 微升。( 28 ) 问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ Number of Muti:Item ” , 是何原因?答:在 P-Q-I 的质控参数编辑中,一个项目只能有两个“ Muti ”,表示用这两个项目画二维质控图( Twin Plot ),多了或者少了仪器都不能正常工作。( 29 ) 血清磷的测定有时偏高 1 倍以上,复查结果正常,为什么?答:交叉污染,例如仪器试剂针加完含磷酸盐的试剂( BG ),再加磷试剂,当冲洗不完全时造成污染。解决方法:A B 常见原因:A 清洗混匀棒。C[Parameter]-[System]-[System] 中:Routine Test Requsition 由 Sequential—Rack No; Auto/Standard Repeat: 由 Stanard → Auto 。⑵ 在 Online 参数中:改成 Batch-None-Batch-None 。⑶ 报警限确定(仅供参考):见表 1 。⑷ 重做规则以及相关实验:[Parameter]-[Repeat Parameter]-[Repeat Common] 中设置:Repeat Normal or Mode: # ; ? ; * ; ! ; G ; P ; TDilution or Mode: @ ; $ ; D ; B ; & ; Z ; F相关试验:ALB—TP ;DBIL—TBIL ;CKMB—CK ;TG—LDL 。( 36 )为什么要定标?多长时间要定标一次?答:⑴ 定标的意义:定标就是要找出一个参考点,就是一个 K 值(或 F 值)。它是由仪器与试剂状态确定下来的。当我们测定一个标本时,无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转换成一个浓度或是酶的活性。那就要乘上一个 K 值,计算并打印出来的结果对我们就有意义了。K 值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是有试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度:标准浓度 - 试剂空白A 标准 - A 试剂空白 (试剂空白通常是 0 )标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个 K 值。无论什么样的标本,用其吸光度乘以 K 值我们就得到了答案。因此, K 值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。⑵ K 值的决定因素:我们看看 K 值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。吸光度受仪器状况、试剂状况的影响,如果您的仪器相当稳定,试剂是影响 K 值的一个主要因素。⑶ 如何确定 K 值是正确的?一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说 K 值是准确的,用这个 K 值计算出来病人的结果也是准确的,所以 K 值非常关键。⑷ K 值的真面目:K 值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以 K 值的稳定性决定您的仪器与试剂,如果仪器与试剂都十分稳定,那 K 值也很稳定。⑸ 多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。⑹ 酶的项目如何确定 K 值:一是计算出来的理论 K 值;TV ′ 1000K= ————————SV ′ L ′ e二是用有酶项目的定标液得出 K 值:目前 OLYMPUS 公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。( 37 ) AU400/600/640 在编参数时有哪几项基本点?答:Sample vol (样品量) :2 ~ 50 m l , 可以按 0 ( 稀释液 - 吐水量 ) :一般建议样品量少于 5 m l 时,加 10 m l 水。Reagent 1 vol (第一试剂量) :25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。Reagent 2 vol (第二试剂量) :25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。第二试剂是固定的 10-11 点之间加入的。Wavelength Pri: (主波长) Sec L Fst L Lst H试剂空白 OD 限 :Fst 指的是 0 点, Lst 指的是 27 点。只对 Rate 法有用,一般向下的反应,输 05 ,向上的反应 -28 。Dynamic Range L H :指的是试剂盒的线性范围。ONBOARD STBLTY PERIOD 有条码的试剂在仪器上的稳定期。Normal Range (正常范围) :可以按姓别、年龄输入正常范围None selected (不分性别年龄的正常值) 如果什么都没有选择时的正常范围 ( AU600 在这里输入几位小数,结果就保留几位小数)Out of Range 超出范围Panic Value 报警值Unit 单位F7 :Decimal Places 小数位( 38 ) Olympus 生化分析仪可以做前带检查吗?答:可以,并且有三种检查方式,详见 [Parameter]-[Special]-[Datacheck Parameter] 。Olympus 的 TG 试剂就有第一种检查法。( 39 ) CKMB ﹥ CK 会出现在什么情况?答:国内及国外的很多报道有上述现象 , 只要 CKMB 的升高不是由于溶血造成的 ,CKMB >CK, 这样的病例 95% 是 O 型或 B 型血的癌症患者 , 原因是部分癌症病人免疫系统混乱, 其中的一些免疫球蛋白充当的辅酶的作用。( 40 )溶血标本可测定 CKMB 吗?答:通常测定 CKMB 的标本应避免溶血,在 Olympus 的试剂与仪器配合可以基本上扣除这种干扰。RBC 中并不含有 CKMB, 但 RBC 中含有 ADK, 一般厂家会在试剂中加入抑制剂 (5 磷 酸二腺酐 AP 5A ) 来抑制 ADK 的作用 , 但抑制率仅有 95-97%, 也就是说有 3-5% 没有被抑制 , 对于 正常的标本只升高 0-6U/L, 极端标本可能会到 35U/L, 只要应用双速率法 , 就可以扣除 ADK 的 干扰。( 41 ) CKMB 正常, CK 特别高可能会出现在什么情况的病人?答:溶血标本、肌肉损伤、外科手术后、酒精中毒、肌营养不良等。( 42 ) OlympusCKMB 试剂中抗 M 亚基抗体的特异性如何?答:在 37 ℃ 下最多可以达到 4000U/L, 特异性为 99 然后 , 把样品和试剂全部放成水 , 观察最后的结果 , 可以接受的范围是正负 151 Data2 REF1 Data2 REF1 ) *100 )100- (( Data2/REF3 ) *100 )100- (( Data4/REF91 , APOB 乘以 02 倍。( 17 )问题:新换了一个试剂,有反应曲线、因数是正确的、方法学、读点、波长均无问题,结果是“ 0 ”,为什么?答:在参数中 Correction Factor A 常规下是:10000 ,不小心被改为了 1500 。( 19 )问题:经常丢试剂,但仅限某一项目,原因是什么?答:最常见的原因是您没有使用原厂的试剂瓶,国产的试剂瓶的形状可能不规则,在取试剂的过程中试剂针碰到试剂瓶的瓶口,就会报警设有试剂。( 20 )问题:给一新项目定标时,报警 ACAL incomplete ,为什么?答:最可能的有以下几种原因:① 定标液的位置不正确;② 定标液所用的样品杯太小、太低,不能被仪器探测到(比如有些用户用离心管);③ 试剂量不足,试剂 I 或试剂 II 任何一瓶试剂小于 2ml (旧版)或低于报警测试数目(新版);④ 没有定标申请而放入空白(蓝)和 / 或定标(黄)架子。( 21 )问题:新上了一个实验项目,定标不通过,报 Calibration Error ,是什么原因?答:在定标过种中如果有任何报警,将会定标失败:① 在定标过程中定标液不足;( # )② Rate 法的项目线性不好或范围设置不正确;( * )③ 试剂空白超出所设定的范围或波长设定错误;( Y 、 y 、 U 、 u )④ 在 P-B-I 定标参数中,因数范围过窄,先报 Calibration Factor Over Range ,后报 Calibration Error 。( 22 )问题:如果测定的标本特别多,如何给一个项目设定多瓶试剂?答:奥林巴斯的生化分析仪最多可以给一个项目设定九瓶试剂:点击 < 仪器状态 >< ( 0 )试剂状态 > ,先设一瓶试剂,再用光标选定一个空位置,点 后,选定项目、瓶子的规格,退出后,最后设定的为第一瓶试剂,以前的为第二瓶试剂,依此类推。( 23 )问题:经常发现某一种试剂用的特别快,比如早上检查有 100 个 TP 试剂,做四、五十个肝功后仪器就报警没有试剂了,可能是什么原因?答:在 P-Y-A 中,最下面是 LIH Reagent Test Name :您一定是选定的此项目,它的意义是, LIH 的测定与此项目共用一瓶试剂,但这个地方的误选,仪器不会了生错误而吸此项目的试剂,在另外一个画面 P-Y-C ( Round )中, LIH Measure :中默认是“ Selected ”,被不小心改成了“ ALL ”,也就是说您让仪器每个标本都做 LIH (血清信息),用的是您所选定的试剂。( 24 )问题:如何设定奥林巴斯带样品空白的 TBIL/DBIL ?答:按以下六步设定实验参数:1 . 首先,在 [Parameter]-[Common Test Parameter]-[Test Name] 编 TBIL 与 DBIL 的实验名称,然后在 91 号与 92 号编 TBILb 与 DBILb (总胆红素与直接胆红素的空白实验)2 .其次,在 [Parameter]-[Specific Test Parameter] 中,编辑 TBIL 与 91TBILb 的参数(详见试剂盒内的说明书), DBIL 与 92DBILb 的参数。请注意 TBIL 与 91TBILb 的参数要完全一样, DBIL 与 92DBILb 的参数要完全一样。3 . [Parameter]-[Inter-Related Tests]-[Sample Blank] 中,选 Color Test (颜色实验)为 TBIL 与 DBIL , Blank Test[ 空白实验 ] 为 91TBILb 与 DBILb 。4 . [Parameter]-[Calibration]-[Calibration Specific] 中,选 TBIL 与 DBIL 为 AB 定标方式, 91TBILb 与 92DBILb 为 MB 定标方式, Factor 为 1/Calculated Test No 调整试验顺序,把磷项目放在前面,先测定即可避免污染 利用仪器本身提供的抗交叉污染程序,通过增加冲洗次数可避免污染 。( 30 )溶血、黄疸、乳糜血对临床生化的那些项目有干扰?答:溶血、黄疸、乳糜对临床项目的干扰见以下表格(本结果仅供参考)( 31 )测定结果后面有时出现标志 “ u “ , 是什么原因?答:试剂空白的吸光度超出设定范围。解决方法:A 如为试剂变质,则更换试剂;B 重新调整试剂空白的吸光度范围;C 如更换灯泡或做过保养,重新做杯空白 (PHOTOCAL) 。( 32 )怎么样判断 K , Na, Cl 电极膜破裂?答:如果电极膜破裂,在 ISE 诊断中测定高值标准,底值标准和 MID 的电位值,如果三者电位值一致,没有明显区别。( 33 ) TG 测定时,质控高、低值都符合要求,病人结果偏低,为什么?答:可能的原因是用户所用定标液为甘油(无色水剂),试剂中的关键酶(脂肪酶)量不足或者活性中够,就会造成这种现象。( 34 ) ISE 定标时, SLOPE 值突然下降 10 点以上,为什么?答:Na,K,Cl Slope 值从 53 , 55 , 52 突然下降为 34,38,40 定标液敞口放置时间过长,更换新定标液。B 更换三通管。( 35 )如何在 AU400/600/640 仪器实验自动重做?答:⑴ 5 m l 为单位增减。Dil vol (付波长)测定波长共有十三种可以选择:340,380,410,450,520,540,570,600,660,700,750, 800nm 。Method (方法学) 共六种 :End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1 。前三种与后三种的差别为:前三种是以试剂为空白的,后三种是以比色杯为空白的。Reaction (反应方向) :+ , - 。End 与 Fixed 法不起作用,但是 Rate 法一定要输正确。请记住!向下反应一般来说只有三种:AST 、 ALT 、 HBDH, 其它均为向上反应。Point 1 Fst LstPoint 2 Fst Lst(读点设置) Point1 为主测定, Point2 为辅助测定。End 法:a )单试剂:一般均为 0--27 ,特例:ALB 为 0—4 ;b )双试剂(有样品空白功能):0—27 ;0—10 。Rate 法:a )单试剂:延迟时间较短的,一般输 4—10 。b) 延迟时间较长的,一般输 21—27 。Fixed 法:固定两个点之间去计算。a) 单试剂苦味酸法肌酐:1—4 ;尿素氮:3—8 。b) 双试剂苦味酸法肌酐:11—14 ;尿素氮:12—17 。Linearity (线性) :Fst Lst Rate 法才输入,一般国产试剂 30% ;进口试剂:15% 。No-Lag-Time :Rate 法才输入,在读点期内,如果反应太快,超过线性( Linearity 限)仪器会自动用线性比较好的那一段来计算。Min OD L Max OD H (吸光度限)Rate 法才输入,如果 Rate 法的反应,反应速度太快,出现了底物耗尽的情况,向下的反应会低于 Min OD ,向上的反应会超过 Max OD 。Reagent OD Limit Fst HLst9—20—05%, 最多可有 20U/L 的干扰。( 43 ) Olympus 质控或定标液中应选哪种方法的靶值?答:以下的表格为 Olymopus 定标液及质控血清中国建议使用的方法。( 44 )标本的某一项或几项的结果是零或负数,复查后正常,其它标本的结果和质控结果均正常,可能是什么原因?答:最常见的原因是血清表面有气泡。( 45 )在酶项目分析中“ Serum Start ” ( 血清启动 ) “ Substrate Start ” ( 底物启动 ) 有什么区别?答:通常血清启动为单试剂,加完标本就开始反应,底物启动一般为双试剂,标本与第一试剂没有反应,加完启动试剂(第二试剂)开始反应。( 46 )如何判断水的质量?答:此方法不一定科学,仅供参考:取一只一次性的塑料试管,加一毫升左右的镁(二甲苯胺兰法)试剂,然后加一两滴水,5 分钟后观察有无变成红色,如变成红色表明所用的水中含有离子。( 47 )如何排除仪器方面的问题?答 :( a ) 光路 : 在仪器上设定一个项目为终点法 , 因数为 10000 给这个项目做空白定标 (b) 比色杯 : 奥林巴斯的仪器是做光电校正 , 日立仪器是做比色杯空白 , 不同的仪器有不同的标准 Ca,Mg 等项目对比色杯敏感。( 48 )甘油三酯会发生类似免疫反应的前带现象吗?答:会发生。甘油三酯的催化反应主要是基于 L- 甘油 -3 磷酸氧化酶与改良的 Trinder\''s 反应。当 TG 大于 20mmol/L 时会有一个十分强烈的干扰反应,并经常发生在一些轻微乳糜的标本。产生干扰的原因是快速利用氧,反应处于厌氧状态, L- 甘油 -3 磷酸氧化酶与其电子受体作用使形成的颜色消退。( 49 )如何判断试剂针与搅拌棒的交叉污染?答:以 AU400/600/640/2700 为例,这些仪器都是三头搅拌棒:Px 为提供项目, Ra 为接受项目,做 20 个标本(混合血清),每个标本只做一个项目,按如下排列方式做:1 2 3 4 5 6 7 8 9 10Px1 Ra1 Ra2 Ra3 Ra4 Px2 Ra5 Ra6 Ra7 Ra8样品针:Data1 REF2搅拌棒:Data1 REF2以同样的方式做下一组标本,得到 Data3 、 Data4 、 REF3 、 REF4 。用以下方式研究:100- (( Data1/REF2 ) *100 )100- (( Data3/REF4 ) *100 )( 50 )如何判断比色杯的交叉污染?答:P 为提供项目, R 为接受项目,所有标本均为混合血清。以 AU400 为例 88 个比色杯要准备 176 份标本:P1 P2 P3………P20 P21 22(Water) P23 P24………P42 P43 44(Water)以此类推,第 66 与第 88 个标本的项目均为水。在同一个 ROUND 从第 89 到 176 个标本的项目均 R 项目,后 88 个标本均为血清,不放水。那么第 110 、 132 、 154 、 176 号标本的结果为参照结果( REF )从第 89 号到 176 号除外以上四个号码的标本均为受到比色杯干扰的结果。以上的操作再重复一次。公式:100- ((受干扰结果的平均值 / 四个对照结果的平均值) *100 )来源:检验星空下面的内容以奥林巴斯生化分析仪为例,其他品牌生化分析仪仅供参考。( 1 )问题:工作结束之后不能再次开始工作或正常关机。原因:最常见的原因是打印机处于实时打印状态( Data Log List 或 Realtime Report 状态),打印机可能缺纸、卡纸、被误操作为暂停或关机等。解决方法:排除打印机故障,点击 < 仪器状态 >< ( 6 ) DPR 状态 > ,点击 ,按 Resume 继续打印,按 Cancel 取消打印操作。( 2 )问题:是否每天定标就能保证结果稳定?答:不一定,可能您在定标时并不是每天都新溶解定标液,因为定标液复溶后有一些项目不稳定,比如:TBIL 、 DBIL (见光分解)、 GLU (细菌分解)、酶项目(冰冻后复溶降解)。解决方法:以上项目在定标时一定要新溶解一瓶定标液,至少溶解三十分钟,在一小时内测定完成。( 3 )问题:病人输液时加入右旋糖苷影响总蛋白的结果吗?答:影响。右旋糖苷存在血清中可引起轻度乳糜,双缩脲法测定总蛋白会使右旋糖苷形成沉淀及绿色化合物而导致错误的结果,偏高的结果最多可以达到 20 克 / 升。( 4 )问题:可以用总蛋白试剂测定尿或脑脊液中的蛋白吗?答:不能。因为敏感度太低。应选用 OSR6170 (尿 / 脑脊液蛋白试剂盒)。( 5 )问题:奥林巴斯水平 I 和水平 II 质控血清可以用在干化学的仪器上吗?答:不能。常规的质控血清在奥林巴斯仪器上测定时被试剂稀释,而干化学的质控系统质控液直接加到干片上。相对于常规质控,干化学质控中的保护剂、添加剂、稳定剂的浓度相对较高。实际上,没有任何一种质控同时适用于干化学与湿化学。( 6 )问题:可以用 CKMB 试剂盒测定 CKBB 吗?答:理论上可以,但提供的标本中必须不含有 CKMB ,这些可以用电泳法来检查。( 7 )问题:OSR6121 的葡萄糖试剂可以测定 CSF (脑脊液)中的葡萄糖吗?答:可以,因为与尿标本一样,都,都不含有蛋白质,但是前没有官方报道。( 8 )问题:如何防止 ALT 对 LDH 的交叉污染?答:在 ALT 试剂中加入终浓度为 5mmol/L 的 EDTA ,可以降低约 50% 的交叉污染(可降低至 14U/L 的 LDH )。( 9 )问题:EDTA 血浆影响苦味酸法的肌酐吗?答:影响。EDTA 抑制肌酐与苦味酸反应,使结果偏低。( 10 )问题:高葡萄糖的标本影响苦味酸法的肌酐吗?答:苦味酸与肌反应不特异,假肌酐如:酮体、抗坏血酸盐、丙酮酸盐、葡萄糖和尿酸都对 Jaffe 氏反应有明显的扰作用。通过调整 NaOH 与苦味酸的浓度,调节反应温度与测量窗口,可以减低这些竟争反应,奥林巴斯改良的 Jaffe 法可以做到葡萄糖浓度达到 17mmol/L 没有干扰。( 11 )问题:奥林巴斯 DBIL 直接胆红素试剂所测定结果是否包含△胆红素?答:是。因为奥林巴斯 DBIL 直接胆红素试剂带有样品空白,可以扣除△胆红素的干扰。所以有用户说结果太低,不是太低,是其它试剂的结果太高了。( 12 )问题:为什么 TP 总蛋白的试剂空白为负数?答:在测定试剂空白时,因为当试剂 II 加入后,在副波长 660nm 的吸光度大于主波长 540nm 的吸光度。用双波长测定,试剂空白为负数。( 13 )问题:为什么有些质控 CKMB 结果大于 CK ?答:因为质控中有一些添加成份,可能动物组织(牛脑),此组织中含有 CKBB ,所以 CKMB 的结果大于 CK ,但不应大于 CK的二倍。( 14 )问题:APOA1/APOB 是依照 IFCC 还是 CDC 标准追踪的?答:中国是最早是由卫生部老年病研究所根据美国疾病控制中心 CDC 引进的此项目,美国 CDC 的结果比国际卫生组织 WHO 低, APOA1 乘以 079 就与国内一致。一般欧州公司的产品都是 IFCC 标准的。( 15 )问题:葡萄试剂可以测定尿标本吗?答:可以。建议用已糖激酶法的葡萄糖试剂。葡萄糖氧化酶法的试剂会受尿中 Vc 的干扰。( 16 )问题:为什么有时 HBDH 的结果大于 LDH ?LDH opt 与 LDH IFCC 有什么关系?答:从某种意义上讲, HBDH 是 LDH 的一部分,但是可能由于方法学(底物、缓冲液、 PH 值等)的不同,会出现 HBDH 的结果大于 LDH ,如果 LDH 是 opt 法就没有这种现象。LDH opt 是欧洲的方法,底物是丙酮酸。LDH IFCC 的底物是乳酸,两者的正常值范围相比 LDH opt 比 LDH IFCC 大约高 20000 ,不小心被改为了 0 。( 18 )问题:新换了一个厂家的肌酐试剂,重新定标后,结果均为 1500 多,是何种原因?答:在参数中 Correction Factor B 常规下是:00000 。5 .设试剂位:TBIL/DBIL 为红盖, TBILb/DBILb 为白盖,共设定了四个试剂位。6 . [User]-[Calibration] 中, TBIL 与 DBIL 两点定标, TBILb 与 DBILb 空白定标。( 25 )问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ LIH Reagent Test No Miss Match ” , 是何原因?答:在 P-Y-A 中,最下面是 LIH Reagent Test Name :您一定是选定的此项目,这个地方的默认为 96 :LIH 。( 26 )问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ Total Sample:Item ” , 是何原因?答:在 P-I 中, SV (标本量) +DIL VOL (吐水量) +R1 (试剂 I ) +DIL VOL (吐水量) +R2 (试剂 II ) +DIL VOL (吐水量);在 AU400/600/640 应在 150-550 微升之间,在 AU2700/5400 应在 120-440 微升之间。( 27 ) 问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ R1+Dilution Volume:Item ” , 是何原因?答:在 P-I 中, R1 (试剂 I ) +DIL VOL (吐水量)在 AU400/600/640 应小于 300 微升, AU2700/5400 应小于 250 微升。( 28 ) 问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ Number of Muti:Item ” , 是何原因?答:在 P-Q-I 的质控参数编辑中,一个项目只能有两个“ Muti ”,表示用这两个项目画二维质控图( Twin Plot ),多了或者少了仪器都不能正常工作。( 29 ) 血清磷的测定有时偏高 1 倍以上,复查结果正常,为什么?答:交叉污染,例如仪器试剂针加完含磷酸盐的试剂( BG ),再加磷试剂,当冲洗不完全时造成污染。解决方法:A B 常见原因:A 清洗混匀棒。C[Parameter]-[System]-[System] 中:Routine Test Requsition 由 Sequential—Rack No; Auto/Standard Repeat: 由 Stanard → Auto 。⑵ 在 Online 参数中:改成 Batch-None-Batch-None 。⑶ 报警限确定(仅供参考):见表 1 。⑷ 重做规则以及相关实验:[Parameter]-[Repeat Parameter]-[Repeat Common] 中设置:Repeat Normal or Mode: # ; ? ; * ; ! ; G ; P ; TDilution or Mode: @ ; $ ; D ; B ; & ; Z ; F相关试验:ALB—TP ;DBIL—TBIL ;CKMB—CK ;TG—LDL 。( 36 )为什么要定标?多长时间要定标一次?答:⑴ 定标的意义:定标就是要找出一个参考点,就是一个 K 值(或 F 值)。它是由仪器与试剂状态确定下来的。当我们测定一个标本时,无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转换成一个浓度或是酶的活性。那就要乘上一个 K 值,计算并打印出来的结果对我们就有意义了。K 值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是有试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度:标准浓度 - 试剂空白A 标准 - A 试剂空白 (试剂空白通常是 0 )标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个 K 值。无论什么样的标本,用其吸光度乘以 K 值我们就得到了答案。因此, K 值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。⑵ K 值的决定因素:我们看看 K 值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。吸光度受仪器状况、试剂状况的影响,如果您的仪器相当稳定,试剂是影响 K 值的一个主要因素。⑶ 如何确定 K 值是正确的?一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说 K 值是准确的,用这个 K 值计算出来病人的结果也是准确的,所以 K 值非常关键。⑷ K 值的真面目:K 值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以 K 值的稳定性决定您的仪器与试剂,如果仪器与试剂都十分稳定,那 K 值也很稳定。⑸ 多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。⑹ 酶的项目如何确定 K 值:一是计算出来的理论 K 值;TV ′ 1000K= ————————SV ′ L ′ e二是用有酶项目的定标液得出 K 值:目前 OLYMPUS 公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。( 37 ) AU400/600/640 在编参数时有哪几项基本点?答:Sample vol (样品量) :2 ~ 50 m l , 可以按 0 ( 稀释液 - 吐水量 ) :一般建议样品量少于 5 m l 时,加 10 m l 水。Reagent 1 vol (第一试剂量) :25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。Reagent 2 vol (第二试剂量) :25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。第二试剂是固定的 10-11 点之间加入的。Wavelength Pri: (主波长) Sec L Fst L Lst H试剂空白 OD 限 :Fst 指的是 0 点, Lst 指的是 27 点。只对 Rate 法有用,一般向下的反应,输 05 ,向上的反应 -28 。Dynamic Range L H :指的是试剂盒的线性范围。ONBOARD STBLTY PERIOD 有条码的试剂在仪器上的稳定期。Normal Range (正常范围) :可以按姓别、年龄输入正常范围None selected (不分性别年龄的正常值) 如果什么都没有选择时的正常范围 ( AU600 在这里输入几位小数,结果就保留几位小数)Out of Range 超出范围Panic Value 报警值Unit 单位F7 :Decimal Places 小数位( 38 ) Olympus 生化分析仪可以做前带检查吗?答:可以,并且有三种检查方式,详见 [Parameter]-[Special]-[Datacheck Parameter] 。Olympus 的 TG 试剂就有第一种检查法。( 39 ) CKMB ﹥ CK 会出现在什么情况?答:国内及国外的很多报道有上述现象 , 只要 CKMB 的升高不是由于溶血造成的 ,CKMB >CK, 这样的病例 95% 是 O 型或 B 型血的癌症患者 , 原因是部分癌症病人免疫系统混乱, 其中的一些免疫球蛋白充当的辅酶的作用。( 40 )溶血标本可测定 CKMB 吗?答:通常测定 CKMB 的标本应避免溶血,在 Olympus 的试剂与仪器配合可以基本上扣除这种干扰。RBC 中并不含有 CKMB, 但 RBC 中含有 ADK, 一般厂家会在试剂中加入抑制剂 (5 磷 酸二腺酐 AP 5A ) 来抑制 ADK 的作用 , 但抑制率仅有 95-97%, 也就是说有 3-5% 没有被抑制 , 对于 正常的标本只升高 0-6U/L, 极端标本可能会到 35U/L, 只要应用双速率法 , 就可以扣除 ADK 的 干扰。( 41 ) CKMB 正常, CK 特别高可能会出现在什么情况的病人?答:溶血标本、肌肉损伤、外科手术后、酒精中毒、肌营养不良等。( 42 ) OlympusCKMB 试剂中抗 M 亚基抗体的特异性如何?答:在 37 ℃ 下最多可以达到 4000U/L, 特异性为 99 然后 , 把样品和试剂全部放成水 , 观察最后的结果 , 可以接受的范围是正负 151 Data2 REF1 Data2 REF1 ) *100 )100- (( Data2/REF3 ) *100 )100- (( Data4/REF91 , APOB 乘以 02 倍。( 17 )问题:新换了一个试剂,有反应曲线、因数是正确的、方法学、读点、波长均无问题,结果是“ 0 ”,为什么?答:在参数中 Correction Factor A 常规下是:10000 ,不小心被改为了 1500 。( 19 )问题:经常丢试剂,但仅限某一项目,原因是什么?答:最常见的原因是您没有使用原厂的试剂瓶,国产的试剂瓶的形状可能不规则,在取试剂的过程中试剂针碰到试剂瓶的瓶口,就会报警设有试剂。( 20 )问题:给一新项目定标时,报警 ACAL incomplete ,为什么?答:最可能的有以下几种原因:① 定标液的位置不正确;② 定标液所用的样品杯太小、太低,不能被仪器探测到(比如有些用户用离心管);③ 试剂量不足,试剂 I 或试剂 II 任何一瓶试剂小于 2ml (旧版)或低于报警测试数目(新版);④ 没有定标申请而放入空白(蓝)和 / 或定标(黄)架子。( 21 )问题:新上了一个实验项目,定标不通过,报 Calibration Error ,是什么原因?答:在定标过种中如果有任何报警,将会定标失败:① 在定标过程中定标液不足;( # )② Rate 法的项目线性不好或范围设置不正确;( * )③ 试剂空白超出所设定的范围或波长设定错误;( Y 、 y 、 U 、 u )④ 在 P-B-I 定标参数中,因数范围过窄,先报 Calibration Factor Over Range ,后报 Calibration Error 。( 22 )问题:如果测定的标本特别多,如何给一个项目设定多瓶试剂?答:奥林巴斯的生化分析仪最多可以给一个项目设定九瓶试剂:点击 < 仪器状态 >< ( 0 )试剂状态 > ,先设一瓶试剂,再用光标选定一个空位置,点 后,选定项目、瓶子的规格,退出后,最后设定的为第一瓶试剂,以前的为第二瓶试剂,依此类推。( 23 )问题:经常发现某一种试剂用的特别快,比如早上检查有 100 个 TP 试剂,做四、五十个肝功后仪器就报警没有试剂了,可能是什么原因?答:在 P-Y-A 中,最下面是 LIH Reagent Test Name :您一定是选定的此项目,它的意义是, LIH 的测定与此项目共用一瓶试剂,但这个地方的误选,仪器不会了生错误而吸此项目的试剂,在另外一个画面 P-Y-C ( Round )中, LIH Measure :中默认是“ Selected ”,被不小心改成了“ ALL ”,也就是说您让仪器每个标本都做 LIH (血清信息),用的是您所选定的试剂。( 24 )问题:如何设定奥林巴斯带样品空白的 TBIL/DBIL ?答:按以下六步设定实验参数:1 . 首先,在 [Parameter]-[Common Test Parameter]-[Test Name] 编 TBIL 与 DBIL 的实验名称,然后在 91 号与 92 号编 TBILb 与 DBILb (总胆红素与直接胆红素的空白实验)2 .其次,在 [Parameter]-[Specific Test Parameter] 中,编辑 TBIL 与 91TBILb 的参数(详见试剂盒内的说明书), DBIL 与 92DBILb 的参数。请注意 TBIL 与 91TBILb 的参数要完全一样, DBIL 与 92DBILb 的参数要完全一样。3 . [Parameter]-[Inter-Related Tests]-[Sample Blank] 中,选 Color Test (颜色实验)为 TBIL 与 DBIL , Blank Test[ 空白实验 ] 为 91TBILb 与 DBILb 。4 . [Parameter]-[Calibration]-[Calibration Specific] 中,选 TBIL 与 DBIL 为 AB 定标方式, 91TBILb 与 92DBILb 为 MB 定标方式, Factor 为 1/Calculated Test No 调整试验顺序,把磷项目放在前面,先测定即可避免污染 利用仪器本身提供的抗交叉污染程序,通过增加冲洗次数可避免污染 。( 30 )溶血、黄疸、乳糜血对临床生化的那些项目有干扰?答:溶血、黄疸、乳糜对临床项目的干扰见以下表格(本结果仅供参考)( 31 )测定结果后面有时出现标志 “ u “ , 是什么原因?答:试剂空白的吸光度超出设定范围。解决方法:A 如为试剂变质,则更换试剂;B 重新调整试剂空白的吸光度范围;C 如更换灯泡或做过保养,重新做杯空白 (PHOTOCAL) 。( 32 )怎么样判断 K , Na, Cl 电极膜破裂?答:如果电极膜破裂,在 ISE 诊断中测定高值标准,底值标准和 MID 的电位值,如果三者电位值一致,没有明显区别。( 33 ) TG 测定时,质控高、低值都符合要求,病人结果偏低,为什么?答:可能的原因是用户所用定标液为甘油(无色水剂),试剂中的关键酶(脂肪酶)量不足或者活性中够,就会造成这种现象。( 34 ) ISE 定标时, SLOPE 值突然下降 10 点以上,为什么?答:Na,K,Cl Slope 值从 53 , 55 , 52 突然下降为 34,38,40 定标液敞口放置时间过长,更换新定标液。B 更换三通管。( 35 )如何在 AU400/600/640 仪器实验自动重做?答:⑴ 5 m l 为单位增减。Dil vol (付波长)测定波长共有十三种可以选择:340,380,410,450,520,540,570,600,660,700,750, 800nm 。Method (方法学) 共六种 :End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1 。前三种与后三种的差别为:前三种是以试剂为空白的,后三种是以比色杯为空白的。Reaction (反应方向) :+ , - 。End 与 Fixed 法不起作用,但是 Rate 法一定要输正确。请记住!向下反应一般来说只有三种:AST 、 ALT 、 HBDH, 其它均为向上反应。Point 1 Fst LstPoint 2 Fst Lst(读点设置) Point1 为主测定, Point2 为辅助测定。End 法:a )单试剂:一般均为 0--27 ,特例:ALB 为 0—4 ;b )双试剂(有样品空白功能):0—27 ;0—10 。Rate 法:a )单试剂:延迟时间较短的,一般输 4—10 。b) 延迟时间较长的,一般输 21—27 。Fixed 法:固定两个点之间去计算。a) 单试剂苦味酸法肌酐:1—4 ;尿素氮:3—8 。b) 双试剂苦味酸法肌酐:11—14 ;尿素氮:12—17 。Linearity (线性) :Fst Lst Rate 法才输入,一般国产试剂 30% ;进口试剂:15% 。No-Lag-Time :Rate 法才输入,在读点期内,如果反应太快,超过线性( Linearity 限)仪器会自动用线性比较好的那一段来计算。Min OD L Max OD H (吸光度限)Rate 法才输入,如果 Rate 法的反应,反应速度太快,出现了底物耗尽的情况,向下的反应会低于 Min OD ,向上的反应会超过 Max OD 。Reagent OD Limit Fst HLst9—20—05%, 最多可有 20U/L 的干扰。( 43 ) Olympus 质控或定标液中应选哪种方法的靶值?答:以下的表格为 Olymopus 定标液及质控血清中国建议使用的方法。( 44 )标本的某一项或几项的结果是零或负数,复查后正常,其它标本的结果和质控结果均正常,可能是什么原因?答:最常见的原因是血清表面有气泡。( 45 )在酶项目分析中“ Serum Start ” ( 血清启动 ) “ Substrate Start ” ( 底物启动 ) 有什么区别?答:通常血清启动为单试剂,加完标本就开始反应,底物启动一般为双试剂,标本与第一试剂没有反应,加完启动试剂(第二试剂)开始反应。( 46 )如何判断水的质量?答:此方法不一定科学,仅供参考:取一只一次性的塑料试管,加一毫升左右的镁(二甲苯胺兰法)试剂,然后加一两滴水,5 分钟后观察有无变成红色,如变成红色表明所用的水中含有离子。( 47 )如何排除仪器方面的问题?答 :( a ) 光路 : 在仪器上设定一个项目为终点法 , 因数为 10000 给这个项目做空白定标 (b) 比色杯 : 奥林巴斯的仪器是做光电校正 , 日立仪器是做比色杯空白 , 不同的仪器有不同的标准 Ca,Mg 等项目对比色杯敏感。( 48 )甘油三酯会发生类似免疫反应的前带现象吗?答:会发生。甘油三酯的催化反应主要是基于 L- 甘油 -3 磷酸氧化酶与改良的 Trinder\''s 反应。当 TG 大于 20mmol/L 时会有一个十分强烈的干扰反应,并经常发生在一些轻微乳糜的标本。产生干扰的原因是快速利用氧,反应处于厌氧状态, L- 甘油 -3 磷酸氧化酶与其电子受体作用使形成的颜色消退。( 49 )如何判断试剂针与搅拌棒的交叉污染?答:以 AU400/600/640/2700 为例,这些仪器都是三头搅拌棒:Px 为提供项目, Ra 为接受项目,做 20 个标本(混合血清),每个标本只做一个项目,按如下排列方式做:1 2 3 4 5 6 7 8 9 10Px1 Ra1 Ra2 Ra3 Ra4 Px2 Ra5 Ra6 Ra7 Ra8样品针:Data1 REF2搅拌棒:Data1 REF2以同样的方式做下一组标本,得到 Data3 、 Data4 、 REF3 、 REF4 。用以下方式研究:100- (( Data1/REF2 ) *100 )100- (( Data3/REF4 ) *100 )( 50 )如何判断比色杯的交叉污染?答:P 为提供项目, R 为接受项目,所有标本均为混合血清。以 AU400 为例 88 个比色杯要准备 176 份标本:P1 P2 P3………P20 P21 22(Water) P23 P24………P42 P43 44(Water)以此类推,第 66 与第 88 个标本的项目均为水。在同一个 ROUND 从第 89 到 176 个标本的项目均 R 项目,后 88 个标本均为血清,不放水。那么第 110 、 132 、 154 、 176 号标本的结果为参照结果( REF )从第 89 号到 176 号除外以上四个号码的标本均为受到比色杯干扰的结果。以上的操作再重复一次。公式:100- ((受干扰结果的平均值 / 四个对照结果的平均值) *100 )来源:检验星空下面的内容以奥林巴斯生化分析仪为例,其他品牌生化分析仪仅供参考。( 1 )问题:工作结束之后不能再次开始工作或正常关机。原因:最常见的原因是打印机处于实时打印状态( Data Log List 或 Realtime Report 状态),打印机可能缺纸、卡纸、被误操作为暂停或关机等。解决方法:排除打印机故障,点击 < 仪器状态 >< ( 6 ) DPR 状态 > ,点击 ,按 Resume 继续打印,按 Cancel 取消打印操作。( 2 )问题:是否每天定标就能保证结果稳定?答:不一定,可能您在定标时并不是每天都新溶解定标液,因为定标液复溶后有一些项目不稳定,比如:TBIL 、 DBIL (见光分解)、 GLU (细菌分解)、酶项目(冰冻后复溶降解)。解决方法:以上项目在定标时一定要新溶解一瓶定标液,至少溶解三十分钟,在一小时内测定完成。( 3 )问题:病人输液时加入右旋糖苷影响总蛋白的结果吗?答:影响。右旋糖苷存在血清中可引起轻度乳糜,双缩脲法测定总蛋白会使右旋糖苷形成沉淀及绿色化合物而导致错误的结果,偏高的结果最多可以达到 20 克 / 升。( 4 )问题:可以用总蛋白试剂测定尿或脑脊液中的蛋白吗?答:不能。因为敏感度太低。应选用 OSR6170 (尿 / 脑脊液蛋白试剂盒)。( 5 )问题:奥林巴斯水平 I 和水平 II 质控血清可以用在干化学的仪器上吗?答:不能。常规的质控血清在奥林巴斯仪器上测定时被试剂稀释,而干化学的质控系统质控液直接加到干片上。相对于常规质控,干化学质控中的保护剂、添加剂、稳定剂的浓度相对较高。实际上,没有任何一种质控同时适用于干化学与湿化学。( 6 )问题:可以用 CKMB 试剂盒测定 CKBB 吗?答:理论上可以,但提供的标本中必须不含有 CKMB ,这些可以用电泳法来检查。( 7 )问题:OSR6121 的葡萄糖试剂可以测定 CSF (脑脊液)中的葡萄糖吗?答:可以,因为与尿标本一样,都,都不含有蛋白质,但是前没有官方报道。( 8 )问题:如何防止 ALT 对 LDH 的交叉污染?答:在 ALT 试剂中加入终浓度为 5mmol/L 的 EDTA ,可以降低约 50% 的交叉污染(可降低至 14U/L 的 LDH )。( 9 )问题:EDTA 血浆影响苦味酸法的肌酐吗?答:影响。EDTA 抑制肌酐与苦味酸反应,使结果偏低。( 10 )问题:高葡萄糖的标本影响苦味酸法的肌酐吗?答:苦味酸与肌反应不特异,假肌酐如:酮体、抗坏血酸盐、丙酮酸盐、葡萄糖和尿酸都对 Jaffe 氏反应有明显的扰作用。通过调整 NaOH 与苦味酸的浓度,调节反应温度与测量窗口,可以减低这些竟争反应,奥林巴斯改良的 Jaffe 法可以做到葡萄糖浓度达到 17mmol/L 没有干扰。( 11 )问题:奥林巴斯 DBIL 直接胆红素试剂所测定结果是否包含△胆红素?答:是。因为奥林巴斯 DBIL 直接胆红素试剂带有样品空白,可以扣除△胆红素的干扰。所以有用户说结果太低,不是太低,是其它试剂的结果太高了。( 12 )问题:为什么 TP 总蛋白的试剂空白为负数?答:在测定试剂空白时,因为当试剂 II 加入后,在副波长 660nm 的吸光度大于主波长 540nm 的吸光度。用双波长测定,试剂空白为负数。( 13 )问题:为什么有些质控 CKMB 结果大于 CK ?答:因为质控中有一些添加成份,可能动物组织(牛脑),此组织中含有 CKBB ,所以 CKMB 的结果大于 CK ,但不应大于 CK的二倍。( 14 )问题:APOA1/APOB 是依照 IFCC 还是 CDC 标准追踪的?答:中国是最早是由卫生部老年病研究所根据美国疾病控制中心 CDC 引进的此项目,美国 CDC 的结果比国际卫生组织 WHO 低, APOA1 乘以 079 就与国内一致。一般欧州公司的产品都是 IFCC 标准的。( 15 )问题:葡萄试剂可以测定尿标本吗?答:可以。建议用已糖激酶法的葡萄糖试剂。葡萄糖氧化酶法的试剂会受尿中 Vc 的干扰。( 16 )问题:为什么有时 HBDH 的结果大于 LDH ?LDH opt 与 LDH IFCC 有什么关系?答:从某种意义上讲, HBDH 是 LDH 的一部分,但是可能由于方法学(底物、缓冲液、 PH 值等)的不同,会出现 HBDH 的结果大于 LDH ,如果 LDH 是 opt 法就没有这种现象。LDH opt 是欧洲的方法,底物是丙酮酸。LDH IFCC 的底物是乳酸,两者的正常值范围相比 LDH opt 比 LDH IFCC 大约高 20000 ,不小心被改为了 0 。( 18 )问题:新换了一个厂家的肌酐试剂,重新定标后,结果均为 1500 多,是何种原因?答:在参数中 Correction Factor B 常规下是:00000 。5 .设试剂位:TBIL/DBIL 为红盖, TBILb/DBILb 为白盖,共设定了四个试剂位。6 . [User]-[Calibration] 中, TBIL 与 DBIL 两点定标, TBILb 与 DBILb 空白定标。( 25 )问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ LIH Reagent Test No Miss Match ” , 是何原因?答:在 P-Y-A 中,最下面是 LIH Reagent Test Name :您一定是选定的此项目,这个地方的默认为 96 :LIH 。( 26 )问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ Total Sample:Item ” , 是何原因?答:在 P-I 中, SV (标本量) +DIL VOL (吐水量) +R1 (试剂 I ) +DIL VOL (吐水量) +R2 (试剂 II ) +DIL VOL (吐水量);在 AU400/600/640 应在 150-550 微升之间,在 AU2700/5400 应在 120-440 微升之间。( 27 ) 问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ R1+Dilution Volume:Item ” , 是何原因?答:在 P-I 中, R1 (试剂 I ) +DIL VOL (吐水量)在 AU400/600/640 应小于 300 微升, AU2700/5400 应小于 250 微升。( 28 ) 问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ Number of Muti:Item ” , 是何原因?答:在 P-Q-I 的质控参数编辑中,一个项目只能有两个“ Muti ”,表示用这两个项目画二维质控图( Twin Plot ),多了或者少了仪器都不能正常工作。( 29 ) 血清磷的测定有时偏高 1 倍以上,复查结果正常,为什么?答:交叉污染,例如仪器试剂针加完含磷酸盐的试剂( BG ),再加磷试剂,当冲洗不完全时造成污染。解决方法:A B 常见原因:A 清洗混匀棒。C[Parameter]-[System]-[System] 中:Routine Test Requsition 由 Sequential—Rack No; Auto/Standard Repeat: 由 Stanard → Auto 。⑵ 在 Online 参数中:改成 Batch-None-Batch-None 。⑶ 报警限确定(仅供参考):见表 1 。⑷ 重做规则以及相关实验:[Parameter]-[Repeat Parameter]-[Repeat Common] 中设置:Repeat Normal or Mode: # ; ? ; * ; ! ; G ; P ; TDilution or Mode: @ ; $ ; D ; B ; & ; Z ; F相关试验:ALB—TP ;DBIL—TBIL ;CKMB—CK ;TG—LDL 。( 36 )为什么要定标?多长时间要定标一次?答:⑴ 定标的意义:定标就是要找出一个参考点,就是一个 K 值(或 F 值)。它是由仪器与试剂状态确定下来的。当我们测定一个标本时,无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转换成一个浓度或是酶的活性。那就要乘上一个 K 值,计算并打印出来的结果对我们就有意义了。K 值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是有试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度:标准浓度 - 试剂空白A 标准 - A 试剂空白 (试剂空白通常是 0 )标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个 K 值。无论什么样的标本,用其吸光度乘以 K 值我们就得到了答案。因此, K 值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。⑵ K 值的决定因素:我们看看 K 值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。吸光度受仪器状况、试剂状况的影响,如果您的仪器相当稳定,试剂是影响 K 值的一个主要因素。⑶ 如何确定 K 值是正确的?一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说 K 值是准确的,用这个 K 值计算出来病人的结果也是准确的,所以 K 值非常关键。⑷ K 值的真面目:K 值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以 K 值的稳定性决定您的仪器与试剂,如果仪器与试剂都十分稳定,那 K 值也很稳定。⑸ 多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。⑹ 酶的项目如何确定 K 值:一是计算出来的理论 K 值;TV ′ 1000K= ————————SV ′ L ′ e二是用有酶项目的定标液得出 K 值:目前 OLYMPUS 公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。( 37 ) AU400/600/640 在编参数时有哪几项基本点?答:Sample vol (样品量) :2 ~ 50 m l , 可以按 0 ( 稀释液 - 吐水量 ) :一般建议样品量少于 5 m l 时,加 10 m l 水。Reagent 1 vol (第一试剂量) :25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。Reagent 2 vol (第二试剂量) :25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。第二试剂是固定的 10-11 点之间加入的。Wavelength Pri: (主波长) Sec L Fst L Lst H试剂空白 OD 限 :Fst 指的是 0 点, Lst 指的是 27 点。只对 Rate 法有用,一般向下的反应,输 05 ,向上的反应 -28 。Dynamic Range L H :指的是试剂盒的线性范围。ONBOARD STBLTY PERIOD 有条码的试剂在仪器上的稳定期。Normal Range (正常范围) :可以按姓别、年龄输入正常范围None selected (不分性别年龄的正常值) 如果什么都没有选择时的正常范围 ( AU600 在这里输入几位小数,结果就保留几位小数)Out of Range 超出范围Panic Value 报警值Unit 单位F7 :Decimal Places 小数位( 38 ) Olympus 生化分析仪可以做前带检查吗?答:可以,并且有三种检查方式,详见 [Parameter]-[Special]-[Datacheck Parameter] 。Olympus 的 TG 试剂就有第一种检查法。( 39 ) CKMB ﹥ CK 会出现在什么情况?答:国内及国外的很多报道有上述现象 , 只要 CKMB 的升高不是由于溶血造成的 ,CKMB >CK, 这样的病例 95% 是 O 型或 B 型血的癌症患者 , 原因是部分癌症病人免疫系统混乱, 其中的一些免疫球蛋白充当的辅酶的作用。( 40 )溶血标本可测定 CKMB 吗?答:通常测定 CKMB 的标本应避免溶血,在 Olympus 的试剂与仪器配合可以基本上扣除这种干扰。RBC 中并不含有 CKMB, 但 RBC 中含有 ADK, 一般厂家会在试剂中加入抑制剂 (5 磷 酸二腺酐 AP 5A ) 来抑制 ADK 的作用 , 但抑制率仅有 95-97%, 也就是说有 3-5% 没有被抑制 , 对于 正常的标本只升高 0-6U/L, 极端标本可能会到 35U/L, 只要应用双速率法 , 就可以扣除 ADK 的 干扰。( 41 ) CKMB 正常, CK 特别高可能会出现在什么情况的病人?答:溶血标本、肌肉损伤、外科手术后、酒精中毒、肌营养不良等。( 42 ) OlympusCKMB 试剂中抗 M 亚基抗体的特异性如何?答:在 37 ℃ 下最多可以达到 4000U/L, 特异性为 99 然后 , 把样品和试剂全部放成水 , 观察最后的结果 , 可以接受的范围是正负 151 Data2 REF1 Data2 REF1 ) *100 )100- (( Data2/REF3 ) *100 )100- (( Data4/REF91 , APOB 乘以 02 倍。( 17 )问题:新换了一个试剂,有反应曲线、因数是正确的、方法学、读点、波长均无问题,结果是“ 0 ”,为什么?答:在参数中 Correction Factor A 常规下是:10000 ,不小心被改为了 1500 。( 19 )问题:经常丢试剂,但仅限某一项目,原因是什么?答:最常见的原因是您没有使用原厂的试剂瓶,国产的试剂瓶的形状可能不规则,在取试剂的过程中试剂针碰到试剂瓶的瓶口,就会报警设有试剂。( 20 )问题:给一新项目定标时,报警 ACAL incomplete ,为什么?答:最可能的有以下几种原因:① 定标液的位置不正确;② 定标液所用的样品杯太小、太低,不能被仪器探测到(比如有些用户用离心管);③ 试剂量不足,试剂 I 或试剂 II 任何一瓶试剂小于 2ml (旧版)或低于报警测试数目(新版);④ 没有定标申请而放入空白(蓝)和 / 或定标(黄)架子。( 21 )问题:新上了一个实验项目,定标不通过,报 Calibration Error ,是什么原因?答:在定标过种中如果有任何报警,将会定标失败:① 在定标过程中定标液不足;( # )② Rate 法的项目线性不好或范围设置不正确;( * )③ 试剂空白超出所设定的范围或波长设定错误;( Y 、 y 、 U 、 u )④ 在 P-B-I 定标参数中,因数范围过窄,先报 Calibration Factor Over Range ,后报 Calibration Error 。( 22 )问题:如果测定的标本特别多,如何给一个项目设定多瓶试剂?答:奥林巴斯的生化分析仪最多可以给一个项目设定九瓶试剂:点击 < 仪器状态 >< ( 0 )试剂状态 > ,先设一瓶试剂,再用光标选定一个空位置,点 后,选定项目、瓶子的规格,退出后,最后设定的为第一瓶试剂,以前的为第二瓶试剂,依此类推。( 23 )问题:经常发现某一种试剂用的特别快,比如早上检查有 100 个 TP 试剂,做四、五十个肝功后仪器就报警没有试剂了,可能是什么原因?答:在 P-Y-A 中,最下面是 LIH Reagent Test Name :您一定是选定的此项目,它的意义是, LIH 的测定与此项目共用一瓶试剂,但这个地方的误选,仪器不会了生错误而吸此项目的试剂,在另外一个画面 P-Y-C ( Round )中, LIH Measure :中默认是“ Selected ”,被不小心改成了“ ALL ”,也就是说您让仪器每个标本都做 LIH (血清信息),用的是您所选定的试剂。( 24 )问题:如何设定奥林巴斯带样品空白的 TBIL/DBIL ?答:按以下六步设定实验参数:1 . 首先,在 [Parameter]-[Common Test Parameter]-[Test Name] 编 TBIL 与 DBIL 的实验名称,然后在 91 号与 92 号编 TBILb 与 DBILb (总胆红素与直接胆红素的空白实验)2 .其次,在 [Parameter]-[Specific Test Parameter] 中,编辑 TBIL 与 91TBILb 的参数(详见试剂盒内的说明书), DBIL 与 92DBILb 的参数。请注意 TBIL 与 91TBILb 的参数要完全一样, DBIL 与 92DBILb 的参数要完全一样。3 . [Parameter]-[Inter-Related Tests]-[Sample Blank] 中,选 Color Test (颜色实验)为 TBIL 与 DBIL , Blank Test[ 空白实验 ] 为 91TBILb 与 DBILb 。4 . [Parameter]-[Calibration]-[Calibration Specific] 中,选 TBIL 与 DBIL 为 AB 定标方式, 91TBILb 与 92DBILb 为 MB 定标方式, Factor 为 1/Calculated Test No 调整试验顺序,把磷项目放在前面,先测定即可避免污染 利用仪器本身提供的抗交叉污染程序,通过增加冲洗次数可避免污染 。( 30 )溶血、黄疸、乳糜血对临床生化的那些项目有干扰?答:溶血、黄疸、乳糜对临床项目的干扰见以下表格(本结果仅供参考)( 31 )测定结果后面有时出现标志 “ u “ , 是什么原因?答:试剂空白的吸光度超出设定范围。解决方法:A 如为试剂变质,则更换试剂;B 重新调整试剂空白的吸光度范围;C 如更换灯泡或做过保养,重新做杯空白 (PHOTOCAL) 。( 32 )怎么样判断 K , Na, Cl 电极膜破裂?答:如果电极膜破裂,在 ISE 诊断中测定高值标准,底值标准和 MID 的电位值,如果三者电位值一致,没有明显区别。( 33 ) TG 测定时,质控高、低值都符合要求,病人结果偏低,为什么?答:可能的原因是用户所用定标液为甘油(无色水剂),试剂中的关键酶(脂肪酶)量不足或者活性中够,就会造成这种现象。( 34 ) ISE 定标时, SLOPE 值突然下降 10 点以上,为什么?答:Na,K,Cl Slope 值从 53 , 55 , 52 突然下降为 34,38,40 定标液敞口放置时间过长,更换新定标液。B 更换三通管。( 35 )如何在 AU400/600/640 仪器实验自动重做?答:⑴ 5 m l 为单位增减。Dil vol (付波长)测定波长共有十三种可以选择:340,380,410,450,520,540,570,600,660,700,750, 800nm 。Method (方法学) 共六种 :End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1 。前三种与后三种的差别为:前三种是以试剂为空白的,后三种是以比色杯为空白的。Reaction (反应方向) :+ , - 。End 与 Fixed 法不起作用,但是 Rate 法一定要输正确。请记住!向下反应一般来说只有三种:AST 、 ALT 、 HBDH, 其它均为向上反应。Point 1 Fst LstPoint 2 Fst Lst(读点设置) Point1 为主测定, Point2 为辅助测定。End 法:a )单试剂:一般均为 0--27 ,特例:ALB 为 0—4 ;b )双试剂(有样品空白功能):0—27 ;0—10 。Rate 法:a )单试剂:延迟时间较短的,一般输 4—10 。b) 延迟时间较长的,一般输 21—27 。Fixed 法:固定两个点之间去计算。a) 单试剂苦味酸法肌酐:1—4 ;尿素氮:3—8 。b) 双试剂苦味酸法肌酐:11—14 ;尿素氮:12—17 。Linearity (线性) :Fst Lst Rate 法才输入,一般国产试剂 30% ;进口试剂:15% 。No-Lag-Time :Rate 法才输入,在读点期内,如果反应太快,超过线性( Linearity 限)仪器会自动用线性比较好的那一段来计算。Min OD L Max OD H (吸光度限)Rate 法才输入,如果 Rate 法的反应,反应速度太快,出现了底物耗尽的情况,向下的反应会低于 Min OD ,向上的反应会超过 Max OD 。Reagent OD Limit Fst HLst9—20—05%, 最多可有 20U/L 的干扰。( 43 ) Olympus 质控或定标液中应选哪种方法的靶值?答:以下的表格为 Olymopus 定标液及质控血清中国建议使用的方法。( 44 )标本的某一项或几项的结果是零或负数,复查后正常,其它标本的结果和质控结果均正常,可能是什么原因?答:最常见的原因是血清表面有气泡。( 45 )在酶项目分析中“ Serum Start ” ( 血清启动 ) “ Substrate Start ” ( 底物启动 ) 有什么区别?答:通常血清启动为单试剂,加完标本就开始反应,底物启动一般为双试剂,标本与第一试剂没有反应,加完启动试剂(第二试剂)开始反应。( 46 )如何判断水的质量?答:此方法不一定科学,仅供参考:取一只一次性的塑料试管,加一毫升左右的镁(二甲苯胺兰法)试剂,然后加一两滴水,5 分钟后观察有无变成红色,如变成红色表明所用的水中含有离子。( 47 )如何排除仪器方面的问题?答 :( a ) 光路 : 在仪器上设定一个项目为终点法 , 因数为 10000 给这个项目做空白定标 (b) 比色杯 : 奥林巴斯的仪器是做光电校正 , 日立仪器是做比色杯空白 , 不同的仪器有不同的标准 Ca,Mg 等项目对比色杯敏感。( 48 )甘油三酯会发生类似免疫反应的前带现象吗?答:会发生。甘油三酯的催化反应主要是基于 L- 甘油 -3 磷酸氧化酶与改良的 Trinder\''s 反应。当 TG 大于 20mmol/L 时会有一个十分强烈的干扰反应,并经常发生在一些轻微乳糜的标本。产生干扰的原因是快速利用氧,反应处于厌氧状态, L- 甘油 -3 磷酸氧化酶与其电子受体作用使形成的颜色消退。( 49 )如何判断试剂针与搅拌棒的交叉污染?答:以 AU400/600/640/2700 为例,这些仪器都是三头搅拌棒:Px 为提供项目, Ra 为接受项目,做 20 个标本(混合血清),每个标本只做一个项目,按如下排列方式做:1 2 3 4 5 6 7 8 9 10Px1 Ra1 Ra2 Ra3 Ra4 Px2 Ra5 Ra6 Ra7 Ra8样品针:Data1 REF2搅拌棒:Data1 REF2以同样的方式做下一组标本,得到 Data3 、 Data4 、 REF3 、 REF4 。用以下方式研究:100- (( Data1/REF2 ) *100 )100- (( Data3/REF4 ) *100 )( 50 )如何判断比色杯的交叉污染?答:P 为提供项目, R 为接受项目,所有标本均为混合血清。以 AU400 为例 88 个比色杯要准备 176 份标本:P1 P2 P3………P20 P21 22(Water) P23 P24………P42 P43 44(Water)以此类推,第 66 与第 88 个标本的项目均为水。在同一个 ROUND 从第 89 到 176 个标本的项目均 R 项目,后 88 个标本均为血清,不放水。那么第 110 、 132 、 154 、 176 号标本的结果为参照结果( REF )从第 89 号到 176 号除外以上四个号码的标本均为受到比色杯干扰的结果。以上的操作再重复一次。公式:100- ((受干扰结果的平均值 / 四个对照结果的平均值) *100 )来源:检验星空下面的内容以奥林巴斯生化分析仪为例,其他品牌生化分析仪仅供参考。( 1 )问题:工作结束之后不能再次开始工作或正常关机。原因:最常见的原因是打印机处于实时打印状态( Data Log List 或 Realtime Report 状态),打印机可能缺纸、卡纸、被误操作为暂停或关机等。解决方法:排除打印机故障,点击 < 仪器状态 >< ( 6 ) DPR 状态 > ,点击 ,按 Resume 继续打印,按 Cancel 取消打印操作。( 2 )问题:是否每天定标就能保证结果稳定?答:不一定,可能您在定标时并不是每天都新溶解定标液,因为定标液复溶后有一些项目不稳定,比如:TBIL 、 DBIL (见光分解)、 GLU (细菌分解)、酶项目(冰冻后复溶降解)。解决方法:以上项目在定标时一定要新溶解一瓶定标液,至少溶解三十分钟,在一小时内测定完成。( 3 )问题:病人输液时加入右旋糖苷影响总蛋白的结果吗?答:影响。右旋糖苷存在血清中可引起轻度乳糜,双缩脲法测定总蛋白会使右旋糖苷形成沉淀及绿色化合物而导致错误的结果,偏高的结果最多可以达到 20 克 / 升。( 4 )问题:可以用总蛋白试剂测定尿或脑脊液中的蛋白吗?答:不能。因为敏感度太低。应选用 OSR6170 (尿 / 脑脊液蛋白试剂盒)。( 5 )问题:奥林巴斯水平 I 和水平 II 质控血清可以用在干化学的仪器上吗?答:不能。常规的质控血清在奥林巴斯仪器上测定时被试剂稀释,而干化学的质控系统质控液直接加到干片上。相对于常规质控,干化学质控中的保护剂、添加剂、稳定剂的浓度相对较高。实际上,没有任何一种质控同时适用于干化学与湿化学。( 6 )问题:可以用 CKMB 试剂盒测定 CKBB 吗?答:理论上可以,但提供的标本中必须不含有 CKMB ,这些可以用电泳法来检查。( 7 )问题:OSR6121 的葡萄糖试剂可以测定 CSF (脑脊液)中的葡萄糖吗?答:可以,因为与尿标本一样,都,都不含有蛋白质,但是前没有官方报道。( 8 )问题:如何防止 ALT 对 LDH 的交叉污染?答:在 ALT 试剂中加入终浓度为 5mmol/L 的 EDTA ,可以降低约 50% 的交叉污染(可降低至 14U/L 的 LDH )。( 9 )问题:EDTA 血浆影响苦味酸法的肌酐吗?答:影响。EDTA 抑制肌酐与苦味酸反应,使结果偏低。( 10 )问题:高葡萄糖的标本影响苦味酸法的肌酐吗?答:苦味酸与肌反应不特异,假肌酐如:酮体、抗坏血酸盐、丙酮酸盐、葡萄糖和尿酸都对 Jaffe 氏反应有明显的扰作用。通过调整 NaOH 与苦味酸的浓度,调节反应温度与测量窗口,可以减低这些竟争反应,奥林巴斯改良的 Jaffe 法可以做到葡萄糖浓度达到 17mmol/L 没有干扰。( 11 )问题:奥林巴斯 DBIL 直接胆红素试剂所测定结果是否包含△胆红素?答:是。因为奥林巴斯 DBIL 直接胆红素试剂带有样品空白,可以扣除△胆红素的干扰。所以有用户说结果太低,不是太低,是其它试剂的结果太高了。( 12 )问题:为什么 TP 总蛋白的试剂空白为负数?答:在测定试剂空白时,因为当试剂 II 加入后,在副波长 660nm 的吸光度大于主波长 540nm 的吸光度。用双波长测定,试剂空白为负数。( 13 )问题:为什么有些质控 CKMB 结果大于 CK ?答:因为质控中有一些添加成份,可能动物组织(牛脑),此组织中含有 CKBB ,所以 CKMB 的结果大于 CK ,但不应大于 CK的二倍。( 14 )问题:APOA1/APOB 是依照 IFCC 还是 CDC 标准追踪的?答:中国是最早是由卫生部老年病研究所根据美国疾病控制中心 CDC 引进的此项目,美国 CDC 的结果比国际卫生组织 WHO 低, APOA1 乘以 079 就与国内一致。一般欧州公司的产品都是 IFCC 标准的。( 15 )问题:葡萄试剂可以测定尿标本吗?答:可以。建议用已糖激酶法的葡萄糖试剂。葡萄糖氧化酶法的试剂会受尿中 Vc 的干扰。( 16 )问题:为什么有时 HBDH 的结果大于 LDH ?LDH opt 与 LDH IFCC 有什么关系?答:从某种意义上讲, HBDH 是 LDH 的一部分,但是可能由于方法学(底物、缓冲液、 PH 值等)的不同,会出现 HBDH 的结果大于 LDH ,如果 LDH 是 opt 法就没有这种现象。LDH opt 是欧洲的方法,底物是丙酮酸。LDH IFCC 的底物是乳酸,两者的正常值范围相比 LDH opt 比 LDH IFCC 大约高 20000 ,不小心被改为了 0 。( 18 )问题:新换了一个厂家的肌酐试剂,重新定标后,结果均为 1500 多,是何种原因?答:在参数中 Correction Factor B 常规下是:00000 。5 .设试剂位:TBIL/DBIL 为红盖, TBILb/DBILb 为白盖,共设定了四个试剂位。6 . [User]-[Calibration] 中, TBIL 与 DBIL 两点定标, TBILb 与 DBILb 空白定标。( 25 )问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ LIH Reagent Test No Miss Match ” , 是何原因?答:在 P-Y-A 中,最下面是 LIH Reagent Test Name :您一定是选定的此项目,这个地方的默认为 96 :LIH 。( 26 )问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ Total Sample:Item ” , 是何原因?答:在 P-I 中, SV (标本量) +DIL VOL (吐水量) +R1 (试剂 I ) +DIL VOL (吐水量) +R2 (试剂 II ) +DIL VOL (吐水量);在 AU400/600/640 应在 150-550 微升之间,在 AU2700/5400 应在 120-440 微升之间。( 27 ) 问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ R1+Dilution Volume:Item ” , 是何原因?答:在 P-I 中, R1 (试剂 I ) +DIL VOL (吐水量)在 AU400/600/640 应小于 300 微升, AU2700/5400 应小于 250 微升。( 28 ) 问题:新设定一个计算实验后,仪器不能正常工作,在退出时显示“ Number of Muti:Item ” , 是何原因?答:在 P-Q-I 的质控参数编辑中,一个项目只能有两个“ Muti ”,表示用这两个项目画二维质控图( Twin Plot ),多了或者少了仪器都不能正常工作。( 29 ) 血清磷的测定有时偏高 1 倍以上,复查结果正常,为什么?答:交叉污染,例如仪器试剂针加完含磷酸盐的试剂( BG ),再加磷试剂,当冲洗不完全时造成污染。解决方法:A B 常见原因:A 清洗混匀棒。C[Parameter]-[System]-[System] 中:Routine Test Requsition 由 Sequential—Rack No; Auto/Standard Repeat: 由 Stanard → Auto 。⑵ 在 Online 参数中:改成 Batch-None-Batch-None 。⑶ 报警限确定(仅供参考):见表 1 。⑷ 重做规则以及相关实验:[Parameter]-[Repeat Parameter]-[Repeat Common] 中设置:Repeat Normal or Mode: # ; ? ; * ; ! ; G ; P ; TDilution or Mode: @ ; $ ; D ; B ; & ; Z ; F相关试验:ALB—TP ;DBIL—TBIL ;CKMB—CK ;TG—LDL 。( 36 )为什么要定标?多长时间要定标一次?答:⑴ 定标的意义:定标就是要找出一个参考点,就是一个 K 值(或 F 值)。它是由仪器与试剂状态确定下来的。当我们测定一个标本时,无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转换成一个浓度或是酶的活性。那就要乘上一个 K 值,计算并打印出来的结果对我们就有意义了。K 值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是有试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度:标准浓度 - 试剂空白A 标准 - A 试剂空白 (试剂空白通常是 0 )标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个 K 值。无论什么样的标本,用其吸光度乘以 K 值我们就得到了答案。因此, K 值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。⑵ K 值的决定因素:我们看看 K 值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。吸光度受仪器状况、试剂状况的影响,如果您的仪器相当稳定,试剂是影响 K 值的一个主要因素。⑶ 如何确定 K 值是正确的?一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说 K 值是准确的,用这个 K 值计算出来病人的结果也是准确的,所以 K 值非常关键。⑷ K 值的真面目:K 值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以 K 值的稳定性决定您的仪器与试剂,如果仪器与试剂都十分稳定,那 K 值也很稳定。⑸ 多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。⑹ 酶的项目如何确定 K 值:一是计算出来的理论 K 值;TV ′ 1000K= ————————SV ′ L ′ e二是用有酶项目的定标液得出 K 值:目前 OLYMPUS 公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。( 37 ) AU400/600/640 在编参数时有哪几项基本点?答:Sample vol (样品量) :2 ~ 50 m l , 可以按 0 ( 稀释液 - 吐水量 ) :一般建议样品量少于 5 m l 时,加 10 m l 水。Reagent 1 vol (第一试剂量) :25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。Reagent 2 vol (第二试剂量) :25 -300 m l, 可以按 1 m l 为单位增减。Dil vol( 稀释液 - 吐水量 ) :一般用浓缩试剂时才用。第二试剂是固定的 10-11 点之间加入的。Wavelength Pri: (主波长) Sec L Fst L Lst H试剂空白 OD 限 :Fst 指的是 0 点, Lst 指的是 27 点。只对 Rate 法有用,一般向下的反应,输 05 ,向上的反应 -28 。Dynamic Range L H :指的是试剂盒的线性范围。ONBOARD STBLTY PERIOD 有条码的试剂在仪器上的稳定期。Normal Range (正常范围) :可以按姓别、年龄输入正常范围None selected (不分性别年龄的正常值) 如果什么都没有选择时的正常范围 ( AU600 在这里输入几位小数,结果就保留几位小数)Out of Range 超出范围Panic Value 报警值Unit 单位F7 :Decimal Places 小数位( 38 ) Olympus 生化分析仪可以做前带检查吗?答:可以,并且有三种检查方式,详见 [Parameter]-[Special]-[Datacheck Parameter] 。Olympus 的 TG 试剂就有第一种检查法。( 39 ) CKMB ﹥ CK 会出现在什么情况?答:国内及国外的很多报道有上述现象 , 只要 CKMB 的升高不是由于溶血造成的 ,CKMB >CK, 这样的病例 95% 是 O 型或 B 型血的癌症患者 , 原因是部分癌症病人免疫系统混乱, 其中的一些免疫球蛋白充当的辅酶的作用。( 40 )溶血标本可测定 CKMB 吗?答:通常测定 CKMB 的标本应避免溶血,在 Olympus 的试剂与仪器配合可以基本上扣除这种干扰。RBC 中并不含有 CKMB, 但 RBC 中含有 ADK, 一般厂家会在试剂中加入抑制剂 (5 磷 酸二腺酐 AP 5A ) 来抑制 ADK 的作用 , 但抑制率仅有 95-97%, 也就是说有 3-5% 没有被抑制 , 对于 正常的标本只升高 0-6U/L, 极端标本可能会到 35U/L, 只要应用双速率法 , 就可以扣除 ADK 的 干扰。( 41 ) CKMB 正常, CK 特别高可能会出现在什么情况的病人?答:溶血标本、肌肉损伤、外科手术后、酒精中毒、肌营养不良等。( 42 ) OlympusCKMB 试剂中抗 M 亚基抗体的特异性如何?答:在 37 ℃ 下最多可以达到 4000U/L, 特异性为 99 然后 , 把样品和试剂全部放成水 , 观察最后的结果 , 可以接受的范围是正负 151 Data2 REF1 Data2 REF1 ) *100 )100- (( Data2/REF3 ) *100 )100- (( Data4/REF.4 ) *100 )( 50 )如何判断比色杯的交叉污染?答:P 为提供项目, R 为接受项目,所有标本均为混合血清。以 AU400 为例 88 个比色杯要准备 176 份标本:P1 P2 P3………P20 P21 22(Water) P23 P24………P42 P43 44(Water)以此类推,第 66 与第 88 个标本的项目均为水。在同一个 ROUND 从第 89 到 176 个标本的项目均 R 项目,后 88 个标本均为血清,不放水。那么第 110 、 132 、 154 、 176 号标本的结果为参照结果( REF )从第 89 号到 176 号除外以上四个号码的标本均为受到比色杯干扰的结果。以上的操作再重复一次。公式:100- ((受干扰结果的平均值 / 四个对照结果的平均值) *100 )本回答被网友采纳
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