疟疾（拉丁语：Malaria，俗称：打摆子、冷热病）是一种会感染人类及其他动物的全球性寄生虫传染病，主要流行地区包括非洲中部、南亚、东南亚及拉丁美洲。 其病原疟原虫隶属囊泡藻界，借由蚊子散播。感染疟疾后往往会引起发烧、畏寒、疲倦、呕吐和头痛，在严重的病例中还会引起黄疸、癫痫发作、昏迷或死亡。检查1疟原虫检查血液涂片（薄片或厚片）染色查疟原虫。并可鉴别疟原虫种类。骨髓涂片染色查疟原虫，阳性率较血片高。3流行病学有在疟疾流行区居住或旅行史，近年有疟疾发作史或近期曾接受过输血的发热患者都应被怀疑。疟疾2实验室检查主要是查找疟原虫，通常找到即可确诊。血片找疟原虫应当在寒战发作时采血，此时原虫数多、易找。需要时应多次重复查找。并一定要做厚血片寻找。如临床高度怀疑而血片多次阴性可做骨髓穿刺涂片查找疟原虫。4治疗性诊断临床表现很象疟疾，但经多次检查未找到疟原虫。可试用杀灭红内期原虫的药物（如氯喹），治疗48小时发热控制者，可能为疟疾。但注意耐氯喹虫株。一、疟疾检测方法 疟疾检查一般需从受检者耳垂或指尖采血作薄血膜和厚血膜涂片，以姬氏染液或瑞氏染液染色后镜检，应在发作开始（恶性疟）或发作后数小时至10小时（间日疟、三日疟）采血。恶性疟初发时只能查到环状体，而配子体在周围血液中出现时间则在查到环状体之后10天左右。除重症病人外，一般在周围血液中难查到恶性疟的滋养体和裂殖体。薄血膜涂片经染色后原虫形态结构完整，清晰，可辩认原虫的种类和各发育阶段的形态特征，适用于临床诊断，但虫数较少容易漏检。厚血膜涂片在处理过程中原虫皱缩，变形，而且红细胞已经溶解，鉴别有困难，但原虫较集中，易被发现，熟识其形态特征后可提高检出率，常用于流行病学调查。 疟疾病原学检查： 从患者周围血液中检出疟原虫，是疟疾确诊的依据。应用间接免疫荧光法检测特异性疟原虫抗体，已在流行病学调查中使用。近年来发展的新方法，如用单克隆抗体检测病人血中的疟原虫抗原，DNA探针检测疟原虫的核酸，或PCR法扩增少量疟原虫的DNA，以提高检出率等均取得一定的成绩。1 症状(symptom)：是患者患病后对机体生理功能异常的自身体验和感觉，如疼痛，瘙痒。3 体格检查(physical examination)：是医生用自己的感官或传统的辅助器具(听诊器、叩诊锤、血压计等)对患者进行系统的观察和检查,解释机体正常和异常征象的临床诊断方法。5 主诉(chief complaints) ：患者感受最主要的痛苦或最明显的症状或体征，也就是本次就诊最主要的原因。7 系统回顾：指各系统疾病均有其各自的特有症状，初学者必须按系统逐一询问，以便了解病人过去的健康状况和所患疾病。9 发热(fever)：当机体在致热源作用下或各种原因引起体温调节中枢的功能障碍时，体温升高超出正常范围，称发热。11 稽留热(continued fever)：体温恒定地维持在39－40℃以上的高水平，达数天或数周，24小时内体温波动范围不超过1摄氏度，常见于大叶性肺炎、斑疹伤寒及伤寒高热期。13 波状热：体温逐渐上升至39度或以上，数天后又逐渐下降至正常水平，持续数天后又逐渐升高，如此反复多次，多见于布鲁氏菌。15 体征(sign)：医生或其他人能客观检查到的改变称体征。17 咯血(hemoptysis) ：喉及喉以下呼吸道任何部位的出血，经口排出者称咯血。19 发绀(cyanosis)：又称紫绀，是指血液中还原血红蛋白增多，使皮肤、粘膜呈青紫色的表现。21 呼吸困难(dyspnea)：是指患者感到空气不足，呼吸费力；客观表现呼吸运动用力，重者鼻翼扇动，张口耸肩，甚至出现发绀，呼吸辅助 肌也参与活动，并伴有呼吸频率，深度与节律的异常。23 呕血(hematemesis)：是上消化道疾病(指屈氏韧带以上的消化器官，包括食管、胃、十二指肠、肝、胆、胰疾病)或全身性疾病所致的急性上消化道出血，血液经口腔呕出。25 黄疸(juandice)：由于血清中胆红素升高致使皮肤，黏膜和巩膜黄染的现象称黄疸。它是症状，也是体征。27 少尿(oliguria)：正常成人如果24小时尿量小于400毫升，或每小时尿量小于17毫升，称为少尿。29 尿三杯试验：患者一次排尿，将最初10～20毫升尿液留于第一杯中，中间30～40毫升尿液留在第二杯中，终末5～10毫升留在第 三杯中。若第一杯尿液异常，病变部位可能在前尿道；第三杯尿液异常，病变在膀胱或后尿道；若三杯尿液均异常，病变在膀胱颈以上。31 晕厥(faint)：由于一时性广泛性脑供血不足所致的短暂意识丧失状态，发作时病人因肌张力消失不能保持正常姿势而倒地。一般为突然发作，迅速恢复，少有后遗症。33抽搐(tic)：指全身或局部成群骨骼肌非自主地抽动或强烈收缩，常可引起关节运动和强直。35 意识障碍(disturbance of consciousness)：是指人对周围环境及自身状态的识别和觉察能力出现障碍。多由于高级神经中枢功能活动受损引起。医学教育网与大家一起跟着大纲来复习！疟原虫的试验诊断是检验技士考试需要掌握的内容，医学教育网小编为大家整理汇总如下，希望可以帮助大家复习掌握。厚、薄血膜染色镜检是目前最常用的方法。从受检者外周血液中检出疟原虫是确诊的最可靠依据，最好在服药以前取血检查。取外周血制作厚、薄血膜，经姬氏或瑞氏染液染色后镜检查找疟原虫。薄血膜中疟原虫形态完整、典型，容易识别和鉴别虫种，但原虫密度低时，容易漏检。厚血膜由于原虫比较集中，易检获，但染色过程中红细胞溶解，原虫形态有所改变，虫种鉴别较困难。因此，最好一张玻片上同时制作厚、薄两种血膜，如果在厚血膜查到原虫而鉴别有困难时，可再检查薄血膜。恶性疟在发作开始时，间日疟在发作后数小时至10余小时时采血能提高检出率。疟疾的病原学诊断可采用血液涂片姬姆萨染色或吖啶染色镜检，疟原虫抗原检测，疟原虫DNA探针检测和聚合酶链反应等方法。杀灭红细胞内原虫的滋养体和裂殖体可用氯喹、青蒿素及其衍生物、喹哌、咯萘啶、奎宁、甲氟喹和氯氟非烷等药物。
这些疟原虫有蚊虫和人两个宿主，包括蚊体内的有性繁殖和人体内的无性增殖，携带疟原虫的按蚊通过叮咬人而传播，引起疟疾寒热往来发作，俗称“打摆子”。而其他种类的疟原虫会感染它种动物，包括其他灵长目动物、啮齿目动物、鸟类及爬虫类。免疫学诊断(1)循环抗体检测：常用的方法有间接荧光抗体试验、间接血凝试验和酶联免疫吸附试验等。由于抗体在患者治愈后仍能持续一段时间，且广泛存在着个体差异，因此检测抗体主要用于疟疾的流行病学调查、防治效果评估及输血对象的筛选，而在临床上仅作辅助诊断用。(2)循环抗原检测：利用血清学方法检测疟原虫的循环抗原能更好地说明受检对象是否有活动感染。常用的方法有放射免疫试验、抑制法酶联免疫吸附试验、夹心法酶联免疫吸附试验和快速免疫色谱测试卡 (ICT)等。分子生物学技术PCR和核酸探针已用于疟疾的诊断，分子生物学检测技术的最突出的优点是对低原虫血症检出率较高。用核酸探针检测恶性疟原虫，其敏感性可达感染红细胞内01原虫/μl血。本回答由网友推荐
1临床表现典型的周期性寒战、发热、出汗可初步诊断。不规律发热，而伴脾、肝肿大及贫血，应想到疟疾的可能。凶险型多发生在流行期中，多急起，高热寒战，昏迷与抽搐等。流行区婴幼儿突然高热、寒战、昏迷，也应考虑本病。3分子生物学技术诊断法（1）聚合酶链反应（PCR）检测检测的灵敏性和特异性均较高。PCR检测方法已在原来的基础上发展成多种方法，如巢式PCR、反转录酶PCR、PCR-ELISA等。除可以直接检测血样中的疟原虫外，还可以检测滤纸干血滴上的疟原虫。已从检测恶性疟原虫发展到检测间日疟原虫。（2）DNA探针检测DNA探针检测具有良好的特异性和稳定性。52mg/kg；第2- 5日每次12mg，每日3次，连服7天。 磷酸哌喹：目前常用的剂型是与青蒿素的复方制剂（科泰复）。 对症治疗： 1、体温过高者给予物理降温。 2、保证液体入量。 3、应用低分子右旋糖酐，防止血管内红细胞凝集，有利于DIC的治疗与预防。 4、有脑水肿时，用20%甘露醇250ml快速滴注，每日2至3次。 5、重症患者可适当应用肾上腺皮质激素。对症治疗和预防复发。
过年期间，一篇名为《中国科学家用疟原虫感染治愈晚期癌症》的文章，刷爆朋友圈。好多人在走亲访友之余，不禁讨论起这种不起眼的小虫。
“文章是真的么？”
“疟原虫可以治疗癌症？”
“癌症终于可以被治愈了？”
…… ……
答案，自然要到文章主角陈小平先生的研究中去找。
太长不看版：
详细文字版：
首先，文章是真的。
俗话说，相关性不等于因果，不过，要想研究因果关系，往往要从相关线索中寻找。早在的读书的时候，陈小平就发现，疟原虫感染率与癌症死亡率似乎存在某种关联。
这一现象引起了陈小平的注意，他与哈佛大学合作，统计全球疟原虫感染率与癌症死亡率的关系，结果显示，剔除经济、环境、医疗水平等干扰因素之后，二者之间仍然存在显著的负相关性，也就是说疟原虫感染越高的地区，癌症死亡率越低。
疟疾发病率与癌症死亡率的关系（图片来源：陈小平的演讲）
难道，疟原虫感染可以治疗癌症？
说到这里，必须补充一点背景知识。如果我们把人体比作一个塑料大棚，免疫系统便是照料蔬菜的农民伯伯，而癌细胞则是大棚内的杂草。农民伯伯对付杂草，有两个方法，一是控制大棚内的温度、湿度，使其不利于杂草生长，二是定期巡视，遇到杂草后手动拔除。前者称之为固有免疫，包括NK细胞、巨噬细胞等，它们是全面的，遇到衰老细胞、有问题的物质就顺手清理掉，降低细胞癌变的几率；后者，称之为特有免疫，由T细胞等组成，针对性很强、杀伤性也很强。
虽然有这么两道防线，癌症还是会不可避免地出现。一方面，随着年龄的增加，免疫系统的活性会缓慢下降。如果塑料大棚年久失修、处处漏风，自然做不到精准控制温湿度。另一方面，癌细胞在长期进化中，“演技”越来越出色了。T细胞要想发挥作用，首先必须识别癌细胞。识别的方式，是寻找抗原。癌细胞的抗原性越弱，T细胞识别起来越是困难好比说，如果杂草长得跟蔬菜特别像，农民伯伯难免会疏忽。
除此之外，癌细胞可以分泌血管内皮生长因子，促进新血管形成，相当于自带给养，生长十分迅速。只要出现一个癌细胞，铺天盖地的癌细胞便会随之而来，到时候即使T细胞反应过来准备帮忙，也往往无计可施了。
肿瘤逃避免疫系统的方式（图片来源：《医学免疫学》）
遇到这种情况该怎么办呢？
一个解决思路是，让农民伯伯更勤快一些。先前有研究显示，某些病毒可以刺激免疫系统，增加免疫系统的效率；还有研究显示，肠道内的细菌也可以增加免疫应答，令免疫系统识别到癌细胞。这为疟原虫抗癌，打下了理论基础。
有了假设和理论，接下来必须通过实验去检验它们。
2011年，陈小平所在的课题组发表了研究结果。他们首先让小鼠换上刘易斯肺癌（LLC），接着，对实验组小鼠注射疟原虫（LLC+Py），统计各组小鼠的生存时间，结果显示，感染疟原虫的小鼠，生存时间大大增加。
小鼠实验原理及结果（图片来源：Antitumor effect of malaria parasite infection in a murine Lewis lung cancer model through induction of innate and adaptive immunity）
在论文中，研究者提到，这个实验有两个局限性：首先，小鼠感染疟原虫后的症状与人类不同，这也是我们说过多次的，动物实验有效不等于人体治疗有效；其次，实验时间普遍较短，长期的安全性与有效性未知。
随后，他们又进行了另一组实验，这次瞄准的是血管内皮生长因子。前面说到，血管内皮生长因子可催生新血管，方便癌细胞快速增殖。研究显示，疟原虫感染能够干扰血管内皮生长因子，进而，遏制肿瘤生长。
实验结果（图片来源：Exosomes from Plasmodium-infected hosts inhibit tumor angiogenesis in a murine Lewis lung cancer model）
至此，开篇提到的第二个问题，“疟原虫可以治疗癌症”，也有了答案。
陈小平课题组的研究显示，疟原虫入侵人体之后，可以激活NK细胞，NK细胞在杀伤疟原虫的同时，会顺手对抗癌细胞。
疟原虫（图片来源：enorg）
疟原虫生活史（图片来源：slidesplayer 医学免疫学[M]
[2]李兰娟, 任红 人民卫生出版社, 2013 Going viral with cancer immunotherapy[J] Cancer, 2014, 14(8): 559567 Plasmodium parasite as an effective hepatocellular carcinoma antigen glypican-3 delivery vector[J]
[5]VIAUD S, SACCHERI F, MIGNOT G等 Science (New York, N), 2013, 342(6161): 971976 Exosomes from Plasmodium-infected hosts inhibit tumor angiogenesis in a murine Lewis lung cancer model[J]
[7]CHEN L, HE Z, QIN L等 PloS One, 2011, 6(9): e24407govcn/”>官方网站关键词：云南昆钢医院疟原虫临床招募。11月20日开始的。
临床表现1凶险型疟疾主要见于恶性疟。其他三种疟疾极少见到凶险型。(1)脑型：多见于无免疫力而又未及时治疗者。临床上分为嗜睡、昏睡和昏迷三级。(2)超高热型：以起病较急、体温迅速上升至41℃以上并持续不退为特点。(3)厥冷型：病人软弱无力，皮肤湿冷、苍白或轻度发绀，可有阵发性上腹剧痛，常伴有顽固性呕吐或水样便，很快虚脱以至昏迷，多因循环衰竭而死亡。(4)胃肠型：有明显腹痛、腹泻和里急后重感。本型是凶险型中预后较好、病死率较低一型。诊断人体四种疟疾在临床表现、病程经过、对药物反应等方面有许多共同性，又各有一定的特殊性。因此，在诊断上应明确患者的疟疾种类。1实验室诊断(1)血中病原体检查：人体四种疟原虫只有恶性疟一种在周围血内仅见环状体和配子体，且在发作期检出机会较多，发作间歇期多数原虫进入内脏毛细血管，如当时配子体尚未出现，则血检可能暂呈阴性，因此恶性疟在发作期间查血最为适宜;其余三种疟疾的血检不受时间限制，无论在发作期及间歇期均可见到原虫。临床上酷似疟疾，血检原虫阴性者，应坚持一天查血2次，连续几天。细致地按规定检查厚血膜，其功率高于薄血膜很多倍，凡是疟疾，最终定能在周围血中查到疟原虫。从患者耳垂或指尖刺取血液涂片、染色、镜检，迄今仍是最可靠的确诊疟疾方法，如发现红内期疟原虫即可确诊。鉴于镜检法的准确性受到血中原虫密度、制片和染色技术、服药后原虫变形或密度下降以及镜检经验等因素的影响，近年来对传统的血检法有了一些改进。其一为BectonDickinson公司QBC法(quantitativebuffycoat)。用含有抗凝剂和吖啶橙的毛细管，取病人60�0�8l血，加一个浮器，离心后，疟原虫浓集在红细胞上层和白细胞下层，由于管中央有浮器存在，把上述两层细胞和疟原虫推向管壁，可以直接在荧光显微镜下检查发荧光的疟原虫。此法有浓缩作用，可提高敏感度，不需要染色，节省了时间。其二是00%皂素溶液代替普通水溶血，然后以吉氏液染色后镜检。优点是以皂素处理过的厚血膜底板清晰，无红细胞残骸和血小板干扰，有助于疟原虫检出。(2)免疫学检测：①检测疟原虫抗原;可查出原虫血症者，故对临床诊断为现症病人以及从人群中查传染源、考核疗效均可使用。主要方法有琼脂糖扩散试验、对流免疫电泳、酶联免疫吸附试验、直接荧光或酶免疫染色法等;②检测疟原虫抗体：可用于流行病学调查，追溯传染源;借助测定流行区人群抗体水平的高低，来推断疟疾的流行趋势;过筛供血者以预防疟疾输血感染，以及考核抗疟措施的效果等。此外对多次发作又未查明原因者，检测疟疾抗体有助于诊断。检测抗体的方法较常用的有间接荧光抗体试验、间接血凝试验、酶联免疫吸附试验等。(3)核酸探针检测：目前国内外已有几种不同的核酸探针用于疟原虫的检测。由于其独特的高特异性，敏感性可高于镜检，认为核酸探针技术非常有希望替代常规的显微镜检查，且可在短时间内批理处理大量样本，已被认为可以定量及估算疟原虫血症水平，是疟疾流行病学调查及评价抗疟措施效果很有潜力的诊断工具。目前大量生产核酸探针和大规模现场使用尚存在一些技术问题须解决。(4)PCR检测：目前公认，在各种疟疾检测方法中，PCR方法的敏感性和特异性是最高的。为进一步提高PCR技术的敏感性和特异性，以及便于在实际工作中推广，在此基础上，又进行了巢式PCR(nestedPCR)、PCR-ELISA等方法的研究。除能够直接检测抗凝血样中的疟原虫外，PCR检测滤纸干血滴上的疟原虫技术也已成熟，从而便于以PCR技术监测边远地区的疟疾。由于它对实验技术和条件的要求较高，从而限制了其在现场的应用。就目前多数疟区的条件，现场采血后，尚要回到具有较好条件的实验室做进一步的分析处理。(5)Dipstick方法：目前，世界卫生组织推荐应用Dipstick方法，其原理是利用恶性疟原虫能够合成、分泌一种稳定的水溶性抗原-富组蛋白Ⅱ(histidinerichproteinⅡ，HRPⅡ)，以其制备的单克隆抗体滴于免疫层析条上，经过吸附、洗涤与显色，检测血中富组蛋白Ⅱ的存在。据国外比较Dip-stick及其他几种方法的报道，Dipstick方法诊断疟疾的敏感性(849%)和特异性(815%)均较高;且具有操作简便、快速稳定、易学的特点，适用于镜检或实验室技术质量难以保证、及待确定疟疾的流行范围、疟疾呈低度传播、需避免药物滥用以减少抗性发展的地区。必须指出的是，应用Dipstick方法也有一定的局限性，用此法难以检出尚处于潜伏期或血中仅含有成熟配子体的恶性疟原虫。本回答由提问者推荐
疟疾疟疾是经按蚊叮咬或输入带疟原虫者的血液而感染疟原虫所引起的虫媒传染病。寄生于人体的疟原虫共有四种，即间日疟原虫，三日疟原虫，恶性疟原虫和卵形疟原虫。在我国主要是间日疟原虫和恶性疟原虫；其他二种少见，近年偶见国外输入的一些病例。不同的疟原虫分别引起间日疟、三日疟、恶性疟及卵圆疟。本病主要表现为周期性规律发作，全身发冷、发热、多汗，长期多次发作后，可引起贫血和脾肿大。病因传染源：疟疾现症患者或无症状带虫者，其血液中具有配子体者便成为传染源。血液中原虫密度越高，配子体的密度也会越高，传播的机率也越大。临床表现18℃），称潜伏期。潜伏期包括整个红外期和红内期的第一个繁殖周期。一般间日疟、卵形疟14天，恶性疟12天，三日疟30天。感染原虫量、株的不一，人体免疫力的差异，感染方式的不同均可造成不同的潜伏期。温带地区有所谓长潜伏期虫株，可长达8～14个月。输血感染潜伏期7～10天。胎传疟疾，潜伏期就更短。有一定免疫力的人或服过预防药的人，潜伏期可延长。2发热期冷感消失以后，面色转红，发绀消失，体温迅速上升，通常发冷越显著，则体温就愈高，可达40℃以上。高热患者痛苦难忍。有的辗转不安，呻呤不止；有的谵妄，撮空，甚至抽搐或不省人事；有的剧烈头痛、顽固呕吐。患者面赤、气促；结膜充血；皮灼热而干燥；脉洪而速；尿短而色深。多诉说心悸，口渴，欲冷饮。持续2～6小时，个别达10余小时。发作数次后唇鼻常见疱疹。45℃。患者感觉舒适，但十分困倦，常安然入睡。一觉醒来，精神轻快，食欲恢复，又可照常工作。此刻进入间歇期。检查1疟原虫检查血液涂片（薄片或厚片）染色查疟原虫。并可鉴别疟原虫种类。骨髓涂片染色查疟原虫，阳性率较血片高。3流行病学有在疟疾流行区居住或旅行史，近年有疟疾发作史或近期曾接受过输血的发热患者都应被怀疑。2实验室检查主要是查找疟原虫，通常找到即可确诊。血片找疟原虫应当在寒战发作时采血，此时原虫数多、易找。需要时应多次重复查找。并一定要做厚血片寻找。如临床高度怀疑而血片多次阴性可做骨髓穿刺涂片查找疟原虫。4治疗性诊断临床表现很象疟疾，但经多次检查未找到疟原虫。可试用杀灭红内期原虫的药物（如氯喹），治疗48小时发热控制者，可能为疟疾。但注意耐氯喹虫株。鉴别诊断对于症状不明显的疟疾，或疑似疟疾的其他疾病，应进行鉴别。疟疾有发热和肝、脾肿大症状，应与有此特征性症状的其他疾病相鉴别。1与脑性疟以外的昏迷的鉴别脑膜炎、脑炎、癫痫、脑脓肿、脑瘤、脑血管意外、热带地区的锥虫病，镰状细胞病等均可引起昏迷，如将其临床表现与实验室诊断结果综合起来分析，不难判断是否脑型疟引起的昏迷。不过，至少在现阶段，凡近期在非洲和东南亚等疟疾流行地区居留过而出现昏迷症状者，脑性疟是首先要考虑的疾病。治疗1病原治疗目的是既要杀灭红内期的疟原虫以控制发作，又要杀灭红外期的疟原虫以防止复发，并要杀灭配子体以防止传播。（1）间日疟、三日疟和卵形疟治疗：包括现症病例和间日疟复发病例，须用血内裂殖体杀灭药如氯喹，杀灭红内期的原虫，迅速退热，并用组织期裂殖体杀灭药亦称根治药或抗复发药进行根治或称抗复发治疗，杀灭红外期的原虫。常用氯喹与伯氨喹联合治疗。（2）恶性疟治疗：对氯喹尚未产生抗性地区，仍可用氯喹杀灭红细胞内期的原虫，同时须加用配子体杀灭药。成人口服氯喹加伯氨喹。3快速高效抗疟药可选用青蒿素和青蒿琥酯等。519亿疟疾病例，恶性疟原虫是非洲区域最流行的疟疾寄生虫，占2017年估计疟疾病例总数的998%、东地中海占69%、西太平洋占711%。2017年，中国累计病例2861例，其中2858例为境外输入性病例，有3例为输血感染。2017年，我国首次实现了本地疟疾病例零报告。疾病类型
分子生物学技术在国内防制虫媒传染病领域的应用【摘要】 本文综述了国内近年来,分子生物学技术在虫媒病中蚊媒传染病防制的应用情况,以期为蚊媒传染病的防制、应对突发公共卫生事件中蚊媒传染病的发生提供参考1992年在国际虫媒病毒中心登记的已达535种,其中128种对人有致病性[1]这类疾病大都属于自然疫源性疾病,有一定的地域性和时间性,发病率低、死亡率高,主要通过媒介的控制进行防制[2]1 常用的分子生物学技术[3]1·1 核酸分子杂交技术核酸的分子杂交(molecular hybridization)它是利用核酸分子的碱基互补原则,在特定的条件下,双链解开成两条单链,与异源的DNA或RNA (单链)复性,若异源DNA或RNA之间的某些区域有互补的碱基序列,则在复性时可形成杂交的核酸分子核酸探针可用放射性核素、生物素或其它活性物质标记分类:根据被测定的对象,分为Southern杂交和Northern杂交;根据所用的方法,分为斑点(dot)杂交、狭槽(slot)杂交和菌落原位杂交;根据环境条件:分为液相杂交和固相杂交通过不断重复这一过程,可以使目的DNA片段得到扩增,同时新合成的DNA片段也可以作为模板,使DNA的合成量呈指数型增长1·3 DNA芯片基因芯片又称DNA芯片(DNA chip)或DNA微阵列(DNA microarray)特点:具有通量大,并行性、微量化与自动化等优点,但在实践中其研究成本较高;方法标准化不足;配套软件不够完善基因芯片在疟原虫的研究内容还有疟原虫新基因发现[5]、转录因子调控网络[6]、疟原虫适应人体宿主机制[7]、疟原虫比较基因组杂交分析[8]、恶性疟原虫抗原变异分子机制[9]以及疟原虫攻击红细胞机制[10]等常规丝虫检测是在夜间采血,有资料显示[12], SsP/PCR扩增系统可用于检测班氏丝虫病患者血样中的循环DNA,能用于周期性或夜间周期性丝虫病的日间血检工作,从根本上改变了丝虫病的诊断、监测和工作方式长期受这种疾病困扰的地区将有望通过这种技术的完善,获得有效的治疗和保护07亿疟疾病例，有626摄氏度）时，一天中的进食时间不会影响载体的能力。当蚊子在高于或低于80℉几度的真实条件下生存时，媒介能力有显著变化。对于斯蒂芬斯按蚊来说，大约88%的夜间叮咬者，65%的午夜叮咬者和13%的早晨叮咬者被检测到疟原虫呈阳性。而对于冈比亚按蚊来说，55%的夜间叮咬者、26%的午夜叮咬者和0使用DDT等杀虫剂，但是要小心破坏生态及蚊虫抗药性等问题。2穿着浅色长袖衣服、长裤、帽子，减少皮肤外露。蚊虫叮咬患有疟疾病毒后，再叮咬其他人，就会将疟疾病毒传给不同的人，从而造成病毒扩散。可以用一些杀灭蚊虫的东西，比如说杀虫灵，在室内喷洒，关紧门窗，密闭一段时间，就可以杀灭蚊虫，预防感染疟疾病毒。疟疾病毒通过蚊虫传播的方法是很简单的，蚊虫通过吸食得疟疾病毒人的血液，从而达到了蚊虫可以携带病毒的效果，当携带病毒的蚊虫，在吸食没有得到疟疾的人 的血液就会将病毒注射到人的体内从而传播疟疾病毒。人类想要预防这些疾病的话，就首先要预防被虫蚊叮咬，比如用一些杀蚊虫的药剂等等。
海洋生物来源药物先导化合物的研究进展【摘要】 海洋生物中活性物质丰富，本篇文章对国内外近3年来从海洋生物中分离提取到的萜类化合物以及糖苷类化合物进行了归纳，并对其研究趋势进行了展望。这些新发现的萜类化合物广泛分布于海藻、珊瑚、海绵以及一些海洋真菌等海洋生物中，主要以单萜、倍半萜、二萜、三萜结构型式存在；而糖苷类化合物在海藻、海绵、海参、海星等海洋生物中发现大部分以糖苷脂、甾体糖苷、萜类糖苷型式存在。 【关键词】 海洋生物 萜类化合物 糖苷类 生物活性 【Abstract】 Marine organism show some important biological activities Terpenoids are mainly occurred on marine algae, coral, sponge and some fungi by monoterpene, sesquiterpene, diterpene and triterpene 【Key words】 Marine organism; terpenoid; glycoside; bioactivity 海洋是生命之源，由于海洋环境的特殊性，具有高压、低营养、低温（特别是深海）、无光照以及局部高温、高盐等生命极限环境，海洋生物适应了海洋独特的生活环境，必然造就了海洋生物具有独特的代谢途径和遗传背景，必定也会有新的、在许多陆地生物中未曾发现过的新结构类型和特殊生物活性的化合物。 萜类物质是一类天然的烃类物质，其分子中具有异戊二烯(C5H8)的基本单位。故凡由异戊二烯衍生的化合物，其分子式符合(C5H8)n通式的均称萜类化合物(terpenoids)或异戊二烯类化合物（isopenoids）。但有些情况下，在分子合成过程中由于正碳离子引起的甲基迁移或碳架重排以及烷基化、降解等原因，分子的某一片断会不完全遵照异戊二烯规律产生出一些变形碳架，它们仍属于萜类化合物。海洋生物中萜类化合物主要以单萜、倍半萜、二萜、二倍半萜为主，三萜和四萜种类和数量都较少，且大部分以糖苷形式存在。萜类化合物是海洋生物活性物质的重要组成部分，广泛分布于海藻、珊瑚、海绵、软体动物等海洋生物中，具有细胞毒性、抗肿瘤活性、杀菌止痛等活性作用。 糖苷的分类有多种方法，按照在生物体内是原生的还是次生的可将其分为原生糖苷和次生糖苷（从原生糖苷中脱掉一个以上的苷称为次生苷或次级苷）；按照糖苷中含有的单糖基的个数可将糖苷分为单糖苷、双糖苷、三糖苷等；按照糖苷的某些特殊化学性质或生理活性可将糖苷分为皂苷、强心苷等；按照苷元化学结构类型可分为黄酮糖苷、蒽醌糖苷、生物碱糖苷、三萜糖苷等，海洋类的糖苷大部分是按照此特点分类的，主要包括鞘脂类糖苷、甾体糖苷、萜类糖苷和大环内酯糖苷等，在很多海洋生物如海藻、珊瑚、海参、海绵等中均发现有糖苷类化合物存在。已有的研究表明海洋糖苷类成分大都具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗菌、增强免疫力等生物活性。抗白血病和艾氏癌药物阿糖胞苷Ara-C(D-arabinosyl cytosine) 1、抗病毒药物的Ara - A 2以及Ara-C的N4-C16-19饱和脂肪酰基化衍生物3是海洋糖苷类药物成功开发的典范〔1〕。 本篇文章对国内外自2005年来从海洋生物中分离提取到的萜类化合物以及糖苷类化合物进行了总结。 1 萜类化合物 1 G2 倍半萜 从海泥来源的真菌Emericella variecolor GF10的发酵液中分离得到两个新型的倍半萜化合物6-epi-ophiobolin G（4）和6-epi-ophiobolin N（5），化合物在1～3μM浓度时能使神经癌细胞Neuro 2A凋亡，同时伴随细胞萎缩和染色体聚集〔5〕。这一类ophiobolins是天然的三环或四环的倍半萜化合物，对线虫、真菌、细菌以及肿瘤细胞有着普遍的抑制活性。 Willam Fenical等人从海洋沉积物分离得到一株放线菌CNH-099，在该菌的代谢产物中分离到具有细胞毒作用的新颖的 marinonc 衍生物 neomarinone（6）、isomarinone（7）、hydroxydebromomarinone（8）和methoxydeuromomarinonc（9），它们均是倍半萜萘醌类抗生素。Neomarinone（6）和marinones（7～9）对HCrll6结肠癌细胞显示中等程度的体外细胞毒作用(IC50=8μg/ml)，而且，neomarinone(6)对NCI-s60癌细胞也具有中等程度细胞毒作用（IC50=10μg/ml）〔6〕。 化合物花侧柏烯倍半萜（10～12）从希腊北爱情海希俄斯岛采集的红藻 L microcladia 经有机溶剂CH2Cl2/MeOH (3:1)提取，以Cyclohexane/EtOAc（9:1）为洗脱液进行硅胶柱层析，最后经HPLC纯化得到化合物（10-12）。该试验并对化合物活性进行了研究，发现三种化合物均对肺癌细胞NSCLC-N6 和 A-549有抑制作用，化合物（10）：IC50=1968 μM (A-549)，化合物（11）：IC50 = 734 μM (A-549) ，化合物（12）：IC50= 830 μM (A-549)。后两个化合物对肺癌细胞毒活性作用明显高于第一个化合物，推测可能由于后两个化合物结构中酚羟基以及五环内双键的存在提高了化合物活性，而化合物中溴原子的存在并没有对其活性构成影响。从中国南京采集的红藻L luzonensis中分离得到〔9〕。 从一个软海绵种属Halichondria sp中分离得到四种具有抗微生物活性的含氮桉烷倍半萜化合物halichonadins A-D（22～25）〔10〕。该海绵采集于日本冲绳运天港，29g EtOAc萃取物经硅胶柱层析后，洗脱液为MeOH/CHCl3（95:5）和石油醚/乙醚（9:1），得到化合物halichonadins A-D（22～25）和已知化合物acanthenes B、C。活性检测实验显示：化合物halichonadins A-D均具有抗细菌活性，同时halichonadins B和C也具有抗真菌活性，化合物halichonadins C对新型隐球菌（Cryptococcus neoformans）的半致死浓度（IC50）达到0中分离得到〔11〕。冷冻的海绵样品经4℃去离子水浸泡冷冻干燥后得到的干涸物， 随后用MeOH/CH2Cl2（1:1）和MeOH/H2O（9:1）的有机溶剂提取获得粗提物。采用活性追踪的方式，对粗提物（IC50=8μg/ml）进一步分离，将其溶于100mlMeOH/H2O（9:1）有机溶剂中，得到15 mg, tR=19min)以及化合物（28） luffariellolide (4中提取的七种倍半萜代谢产物（37～43）〔15〕，含有榄烷，桉烷和吉玛烷骨架结构，研究显示对Eunicea 种属的疟原虫具有轻度的抑制作用。 1 luzonensis中也分离得到二萜类化合物luzodiol (62)〔9〕。一个溴代二萜类化合物 (63)从日本其他红藻Laurencia物种中分离得到 〔22〕。 Xenicane二萜类化合物(64～71)从台湾珊瑚Xenia blumi分离出来，而化合物xeniolactones A-C (72～74)则是从台湾Xenia florida中分离出来的〔23〕。化合物 (64～67), (69), (70) 和 (72)具有轻微的细胞毒性作用。非Xenicane代谢产物xenibellal (75)对Xenia umbellata也具有轻微的细胞毒性作用〔24〕。化合物Confertdiate (76)是一个四环的二萜类物质，从中国珊瑚Sinularia conferta中分离得到〔25〕。 从史密森尼博物院癌症研究所收集的海葵中分离得到的二萜类化合物actiniarins A-C (77～79)能适度抑制人cdc25B磷酸酶重组〔26〕。 Periconicins A,B (80～81)〔27〕是从内生红树林真菌Periconia sp rhynchopetala分离出三种二萜类化合物 (87～89) 〔30〕。与之结构相似的二萜类化合物 (90～93)从中国Bruguiera gymnorrhiza中分离得到，其中化合物 (92)和 (93)有轻微的细胞毒活性〔31〕。 15 三萜 从海洋生物中提取得到的三萜类化合物主要以三萜皂苷、三萜烯类、三萜糖苷等形式存在。四环三萜皂苷类化合物nobilisidenol (105) 和 (106)是从中国黑乳海参Holothuria nobilis分离得到的〔34〕。采集于福建东山的黑乳海参洗净切碎后用85%的EtOH冷浸提取，得到的流浸膏均匀分散于水中，依次用石油醚、二氯甲烷、n-BuOH萃取，研究发现n-BuOH提取物经大孔吸附树脂、正相硅胶层析、反相C-18硅胶柱层析以及反相C-18 柱HPLC分离得到三萜皂苷类化合物nobilisidenol (105)和(106)。易杨华等同时从海参中提取到了其它的三萜糖苷类化合物以及三萜皂苷脱硫衍生物〔35，36〕。三萜烯类化合物intercedensides D-I（107-112）从中国海参Mensamaria intercedens中分离得到，具有细胞毒功能〔37〕。新西兰海参Australostichopus mollis是单硫酸酯三萜糖甙化合物mollisosides A（113）, B1（114） 和 B2（115）的来源〔38〕。 具有细胞溶解作用的三萜类化合物sodwanone S (116)是从印度洋多毛岛采集的海绵Axinella weltneri中分离得到的〔39〕。三萜苷类化合物sarasinosides J-M (117-120)分离自印尼苏拉威西岛采集的海绵Melophlus sarassinorum，对B cerevisae的细菌具有抗微生物活性作用〔40〕。 2 糖苷类化合物 从中国海南采集的甲藻A carterae大规模培养后用甲苯/MeOH（1:3）的有机溶剂提取，所得干涸物分别用甲苯、1N NaCl 水溶液提取。研究发现有机相提取物经硅胶柱（洗脱液为不同比例的MeOH/CHCl3）、反相C-18硅胶柱层析（洗脱液为MeOH/H2O=9:1），最后经反相C-18柱制备型HPLC（流动相为MeOH/H2O =95:5）分离纯化得到25mg不饱和的糖基甘油酯化合物（121）。从多米尼克普次矛斯采集的绿藻Avrainvillea nigricans中可以分离出一个甘油酯avrainvilloside（122），该化合物含有6-脱氧-6-氨基糖苷部分〔42〕。 两个甘油一酯化合物homaxinolin（123）和（124），磷脂酰胆碱homaxinolin（125）以及能抑制细胞生长的脂肪酸（126）是从韩国海绵Homaxinella sp中分离得到〔47〕。将新鲜的软珊瑚干质量 15g用30%的甲醇溶解后, 依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取, 石油醚提取液经减压浓缩后得棕黑色胶状物 62.5g，将此提取物硅胶柱减压层析, 用石油醚乙酸乙酯溶剂体系梯度洗脱, 从石油醚/乙酸乙酯（20:80）洗脱液中所得的洗脱部分在反相C-18柱上进行HPLC分离, 用MeOH洗脱得到化合物60mg（135）和3mg（136），该类化合物具有抗早孕和抑制肿瘤细胞生长活性。 四种甾体糖苷化合物（137-140）是从中国珊瑚Junceella juncea EtOH/CH2Cl2提取液中分离得到〔48〕。 3 结语 目前，从海洋生物中发现的萜类和糖苷类天然化合物的数量近几年呈现逐渐增加的趋势，有些化合物的活性确切而且活性作用强烈是很有希望的一些药物先导化合物，但是用于临床研究的化合物还相对较少，因此开发更多新的天然化合物是有必要的。其次，从海洋生物中发现的活性化合物也存在着活性较低或毒性较大等问题,可以通过对其结构进行修饰，使其活性达到最佳效果。此外，从海洋生物中提取的活性化合物含量通常较低，而且化合物在提取过程中受到提取试剂、方法等外界因素的影响，所以采用化学合成的方法进行化合物的半合成或者全合成解决化合物在提取过程中结构易变、试剂耗量大等缺点。例如从海洋真菌中发现的结构新颖，有抗菌、抗癌和神经心血管活性的物质头孢菌素C，就是从海洋真菌中分离得到的，这是一大类半合成的广为人知的抗生素，它已广泛用于临床〔49〕。所以采用合成或半合成的方法解决活性化合物作为药源的大量生产方式是通行的。我们期待着这些药物先导化合物在药物开发方面发挥重要作用。
疟原虫 检测方法 论文 rdt
