徐歆歆[1](2021)在《黑水虻油的制备及其在框鲤幼鱼日粮中的应用研究》文中进行了进一步梳理黑水虻(Hermetia illucens),属双翅目水虻科昆虫,最早起源在美洲,目前分布于世界各地,并以热带及温带地区为主。因生长周期短、繁殖速度快及较高的营养价值等原因,黑水虻已成为地球上最有潜力的昆虫性饲料原料种类之一,有关它的饲料化研究主要集中在将其作为蛋白资源方面。另一方面,黑水虻的粗脂肪含量较高,其脂肪酸组成特征鲜明,如富含月桂酸。有研究指出,月桂酸作为能量型脂肪酸能够在动物体内发生快速氧化,在脂代谢的调控及疾病抵抗等方面具有十分重要的作用。此外,黑水虻油中含有淡水鱼类生长发育所需的必需脂肪酸(Essential Fatty Acid,EFA)-亚油酸(Linoleic Acid,LA)及亚麻酸(Linolenic Acid,LNA),显示其具有作为水产饲用油脂的潜力。然而,目前有关黑水虻油作为新型饲料原料在水产动物中的研究较少。鉴于此,本论文研究了黑水虻油的提取、黑水虻油品质的提升策略,并以框鲤为模型评估了日粮中使用黑水虻油对鱼类的影响,综合分析了其作为水产饲料用脂肪源的可行性,为以黑水虻油为原料的功能性水产饲料的开发提供参考资料。试验一,黑水虻油脂提取及理化性质分析通过单因素及正交试验设计,评估了浸提法相关条件下的试验参数(反应温度、反应时间、有机溶剂与幼虫粉的比例)对黑水虻中油脂提取率的影响,并对浸提法与压榨法两种方法提取的油脂理化性质进行比较。结果显示,黑水虻粉与石油醚的比例为1:12时,在50℃的条件下持续反应5 h后,用浸提法提取的油脂效率最高(24.59%)。对其理化性质进行分析发现,提取的黑水虻油颜色为淡黄色或浅黄色,其酸价、过氧化值、碘价、皂化值等与压榨法制备的黑水虻油之间无显着性差异,且酸价及过氧化值均低于饲料用鱼油、豆油及猪油的国际饲料用油脂标准,是一种有潜力的饲料原料。试验二:利用裂殖壶藻(Schizochytrium)藻渣提升黑水虻油营养价值的研究为提升黑水虻油的营养价值,采用含10%、20%、30%及40%富含n-3系列高不饱和脂肪酸(Highly Unsaturated Fatty Acid,HUFA)裂殖壶藻藻渣的基质饲喂初重约为12.74 mg的黑水虻幼虫,直到全麸皮组末重为100 mg时养殖结束(9天),随后检测幼虫生长、体成分及脂肪酸组成。结果表明,(1)10%藻渣组与全麸皮组幼虫在末重、体长、粗蛋白及粗脂肪含量等方面无显着性差异,20%藻渣组的末重和体长显着低于全麸皮组(P<0.05),30%和40%藻渣组的末重和体长显着低于20%藻渣组(P<0.05);(2)基质中藻渣添加水平高于20%时,幼虫的粗蛋白和粗脂肪含量显着降低(P<0.05);(3)摄食藻渣的幼虫体内二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid,EPA)、二十二碳六烯酸(Docosahexenoic acid,DHA)和n-3系列多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated Fatty Acid,PUFA)的水平显着高于全麸皮组(P<0.05)。综上所述,基质中添加10%藻渣时,黑水虻幼虫生长良好且油脂的营养价值得到提升。试验三:黑水虻油、黄粉虫油、蚕蛹油对框鲤幼鱼生长及健康状况的影响比较以黑水虻油、黄粉虫油、蚕蛹油及混合昆虫油(三种昆虫油的比例1:1:1)为油源制备四组等氮等脂的日粮,分别饲喂规格为(13.98±0.01 g)的框鲤幼鱼59天。结果表明,(1)含有黑水虻油组分的两组日粮饲喂的框鲤幼鱼其生长性能及饲料利用能力显着优于黄粉虫油组和蚕蛹油组(P<0.05);(2)含有黑水虻油组分的两组日粮饲喂的框鲤幼鱼其腹腔脂肪指数(Intra-peritoneal Fat Index,IFI)、脂肪细胞大小显着低于蚕蛹油组和黄粉虫油组(P<0.05)。同时,腹腔脂肪组织脂肪酸合成酶(Fatty Acid Synthetase,FAS)m RNA的相对表达量显着下调,脂解基因过氧化物酶体增殖物激活受体α(Peroxisome Proliferators-activated Receptors-α,PPAR-α)m RNA的相对表达量显着上调(P<0.05);(3)含有黑水虻油组分的两组日粮显着提高了鱼体肝脏中与抗氧化相关的超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的活性及其m RNA的相对表达量,且肝脏过氧化产物丙二醛(Malonaldehyde,MDA)含量显着下降(P<0.05);(4)含有黑水虻油组分的两组日粮与黄粉虫油和蚕蛹油日粮相比,显着提高了鱼血清中球蛋白(Globulin,GLO)的含量和肝脏中白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)m RNA的相对表达量(P<0.05);蚕蛹油组显着上调了白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)m RNA的相对表达量(P<0.05)。研究表明,与黄粉虫油及蚕蛹油相比,黑水虻油作为水产用饲料油脂具有更优的特性。试验四:黑水虻油在不同脂肪水平日粮中对框鲤幼鱼生长、健康及脂肪酸组成的影响为评估黑水虻油在不同脂肪水平日粮中对框鲤幼鱼的影响,采用2×2的试验设计方法,配制四种等氮(32.0%粗蛋白)日粮,其中包含两个脂肪水平(6%和9%)和两个黑水虻油水平(0和25 g kg-1),记为CT、CT+BSFO、HL、HL+BSFO,分别饲喂规格为(6.38±0.18 g)框鲤幼鱼56天。结果表明,(1)不同脂肪水平下鱼体的生长性能(末重、特定生长率)、饲料利用能力(饲料系数、蛋白沉积率等)不受黑水虻油是否添加的影响(P<0.05);(2)CT+BSFO组IFI及脂肪细胞大小显着小于CT组(P<0.05);(3)CT+BSFO组腹腔脂肪组织中PPAR-α基因m RNA表达水平与CT组相比显着升高(P<0.05);CT+BSFO和HL+BSFO组的肝脏组织PPAR-α相对表达量显着高于CT和HL组(P<0.05);肝脏粗脂肪含量在CT+BSFO组显着低于CT组(P<0.05),而在HL+BSFO组与HL组并无显着性差异(P>0.05);(3)随着日粮脂肪水平升高,肌肉中DHA水平降低,且黑水虻油的添加提升了肌肉DHA水平(P<0.05)。研究表明,不同脂肪水平日粮中添加25 g kg-1黑水虻油均可通过促进脂解调节脂肪代谢,且对生长性能无负面影响;但黑水虻油在高脂日粮中对鱼体脂代谢的调节效果不如在低脂日粮明显。此外,肌肉中DHA水平受日粮脂肪水平、油源及交互作用的影响,黑水虻油在两种脂肪水平的日粮中均可提高肌肉中n-3 HUFA的含量,强化肌肉品质。试验五:日粮中含n-3 HUFA的黑水虻油对框鲤幼鱼生长及健康状况的影响试验5.1:日粮中含n-3 HUFA的黑水虻油代替豆油对框鲤幼鱼生长和健康状况的影响本研究旨在探讨日粮中添加含n-3 HUFA的黑水虻油(n-3 HUFA含量为13.2%,通过饲喂黑水虻幼虫含10%裂殖壶藻渣的基质后所制备)对框鲤幼鱼生长性能、脂质代谢、炎症反应及相关基因表达的影响。用含n-3 HUFA的黑水虻油分别替代豆油的0%(0 g kg-1)、25%(6.25 g kg-1)、50%(12.5 g kg-1)、75%(18.75 g kg-1)及100%(25g kg-1)制备成五组等氮等脂的日粮,饲喂规格为(10.05±0.05 g)的框鲤幼鱼8周。结果表明,(1)当用含n-3 HUFA的黑水虻油替代日粮中50%或更高水平的豆油时,鱼的生长性能、饲料利用能力均得到显着改善(P<0.05);(2)替代水平在50%或以上时,会使IFI和脂肪细胞变小,并伴随PPAR-α肉毒碱棕榈酰转移酶(Carnitine Palmitoyl Transferase,CPT-1)m RNA水平的显着上调(P<0.05);(3)血清总蛋白(Total Protein,TP)、GLO及溶菌酶(Lysozyme,LZM)的含量在替代水平在50%或以上时也显着提高(P<0.05);(4)替代水平在50%或以上时,肝脏和肾脏组织中促炎因子(IL-1β和TNF-α)m RNA的相对表达量显着下调(P<0.05)。研究表明,含n-3 HUFA的黑水虻油替代鲤鱼日粮中50-100%的豆油(12.5-25 g kg-1),促进了框鲤幼鱼的生长性能,改善了其健康状况。试验5.2:日粮中普通黑水虻油及含n-3 HUFA黑水虻油对框鲤幼鱼生长及健康状况影响的比较为探究两种不同营养特性的黑水虻油(以藻渣和麸皮分别为基质源饲养黑水虻后制备)对框鲤幼鱼生长性能及健康状况的影响,以大豆油、摄食麦麸的黑水虻油(W-BSFO)和摄食藻渣的黑水虻油(A-BSFO)为油源,配制成3种等氮等脂的日粮,分别命名为Control、W-B及A-B,饲喂规格为(10.04±0.08 g)的框鲤幼鱼56天,随后进行生长、脂代谢及炎症反应等指标的检测。结果表明:(1)A-B组生长性能显着高于Control和W-B组(P<0.05);(2)与Control组相比,饲喂含黑水虻油日粮的两组试验鱼IFI和脂肪细胞显着较小(P<0.05)。W-B和A-B组腹腔脂肪组织中PPAR-α和CPT-1的m RNA相对表达量显着上调(P<0.05);(3)A-B组全鱼和肌肉中n-3 HUFA的水平、肠道绒毛高度显着高于Control和W-B组(P<0.05);(4)与Control和W-B组相比,A-B组血清谷丙转氨酶(Alanine Transaminase,ALT)含量显着下降,TP、GLO和LZM含量显着升高(P<0.05);A-B组肝脏SOD活性和m RNA相对表达量升高(P<0.05);肝脏和肾脏组织中促炎因子(IL-1β和TNF-α)m RNA的浓度下降(P<0.05)。研究表明,两种黑水虻油均可改善鱼类腹腔脂肪的脂质代谢,与普通黑水虻油相比,含n-3 HUFA黑水虻油对框鲤幼鱼生长性能、肠道健康、肝脏抗氧化能力和炎症反应的影响更为积极。研究表明:(1)浸提法及压榨法均可用于黑水虻油的制备;(2)从对框鲤生长、脂代谢及炎症反应的影响等方面考虑,黑水虻油与蚕蛹油和黄粉虫油相比,是一种更优质的昆虫性水产用饲料油脂;(3)两种脂肪水平日粮中添加黑水虻油均可通过促进脂解减少框鲤幼鱼的脂质蓄积,但黑水虻油在高脂日粮中对脂代谢的调节效果不如在低脂日粮明显,未来可考虑在高脂日粮中适当提高黑水虻油的添加量;(4)使用富含n-3 HUFA的藻渣作为培养基质,可提高黑水虻油中相应脂肪酸的水平,且所获得的黑水虻油可促进框鲤幼鱼生长、腹腔脂肪组织的脂解,并增强肝脏的抗氧化能力及抗炎能力。本研究为黑水虻油用作水产饲用油脂的开发与研究提供了参考资料。
倪金金[2](2020)在《池塘工程化循环水养殖模式下养殖密度对大口黑鲈生长与生理机能的影响》文中研究指明池塘工程化循环水生态养殖(In-pond raceway system,IPRS)是一种新型的养殖模式,实现了小面积养鱼、大面积净化的高密度养殖。与传统养殖模式相比,大大节约了水资源,同时持续的水流有利于鱼类的运动,具有绿色环保、肉质鲜嫩、高产等优点。养殖密度是池塘工程化生态养殖中最重要的环境因子之一,也是决定经济效益的关键因素。为了提高养殖利润,养殖户往往盲目增加养殖密度,然而,过高的放养密度会对鱼类造成应激,带来生长迟缓、代谢机能紊乱、免疫机能下降等一系列的负面影响。大口黑鲈原产于北美的淡水湖泊和河流,由于其适应性强、生长迅速、肉质鲜美,成为我国重要的淡水水产养殖品种,目前已在全国范围内广泛养殖。本研究以在池塘工程化生态养殖模式下大口黑鲈幼鱼(初始体重4.50±0.23g)为研究对象,设置3个养殖密度组,分别为0.2 kg/m3(SD1),0.4 kg/m3(SD2)和0.6 kg/m3(SD3),每个密度组设3个重复,实验周期为120 d,分别在实验的第30 d、60 d、90 d和120 d采集样本并分析,探讨了池塘工程化生态养殖模式下养殖密度对大口黑鲈生长与生理机能的影响,以期为池塘工程化生态养殖模式的示范推广提供科学支撑。实验结果如下:1.大口黑鲈生长指标受养殖密度影响明显。末体质量随着养殖密度的升高而显着下降(P<0.05),增重率、特定生长率、肥满度、食欲随着养殖密度的增加呈降低的趋势,实验结束时SD3组末体质量、增重率、特定生长率、日摄食量最低;各密度组大口黑鲈体水分、灰分、蛋白含量均没有显着差异(P>0.05),而SD3组脂肪含量显着低于SD1组与SD2组(P<0.05),说明鱼体优先消耗脂肪来应对应激下对能量的需求。2.养殖密度对大口黑鲈血清皮质醇、血糖、甘油三酯含量产生了显着影响。各试验组鱼皮质醇与血糖含量呈现先升高后降低的趋势,SD3组皮质醇、血糖甘油三酯含量显着大于SD1组(P<0.05),各密度组总蛋白与总胆固醇含量没有受到养殖密度的影响。60 d~120 d时,SD1组溶菌酶含量显着高于SD3组(P<0.05),表明高养殖密度抑制了大口黑鲈的免疫性能。3.本实验中,在养殖前90 d,肝脏SOD、CAT活性在各密度组间没有出现差异(P>0.05),而在120 d时,SD3组显着低于SD1组(P<0.05),表明高养殖密度引起的胁迫抑制了大口黑鲈的抗氧化能力,密度越高,鱼的组织氧化损伤越严重;同时在90和120 d时,SD3组鱼肝脏MDA含量显着高于SD1组(P<0.05),表明密度胁迫使鱼体内氧自由基增多,脂质过氧化反应增强,此外三个实验组鱼ALT、AST、ALP、T-AOC、GSH-PX没有显着差异(P>0.05);切片结果显示,本实验所设养殖密度未对大口黑鲈肝脏造成病理性的破坏,SD1、SD2、SD3组鱼肝脏内肝细胞结构正常,SD3空泡相对变大。4.各密度组大口黑鲈肠道淀粉酶、脂肪酶无显着差异(P>0.05);不同养殖密度组大口黑鲈肠道绒毛长度和绒毛厚度无显着差异(P>0.05),各密度组肠微绒毛组织结构完整,与SD1组相比,SD3组中杯状细胞的数量或大小减少,说明本实验中放养密度对大口黑鲈肠杯状细胞的数量和大小虽然有负面影响,但是并未影响肠道的消化吸收功能。5.养殖30 d时,SD2组鲈鱼脑部GH与肝脏IGF-I基因相对表达量显着高于SD1组(P<0.05),60 d与90 d时,SD3组脑部GH基因相对表达量显着高于SD1组(P<0.05),而SD1组鱼肝脏IGF-I基因相对表达量显着高于SD3组(P<0.05),120 d时脑部GH与肝脏IGF-I基因m RNA表达水平在各密度组间无显着差异(P>0.05)。SD3组大口黑鲈肝脏HSP70 m RNA表达水平在90 d和120 d时显着增强(P<0.05),说明密度应激诱导了HSP70在大口黑鲈肝脏中的表达;同样地,SD1组大口黑鲈肝脏SOD表达量在90 d和120 d时显着高于其他两组(P<0.05)。综上,本实验条件下,养殖密度对池塘工程化生态养殖大口黑鲈的生长、血清生化指标、免疫指标、肝脏抗氧化酶活等均造成了一定的影响。养殖前30 d,养殖密度为0.4 kg/m3组大口黑鲈生长率优于0.2 kg/m3和0.6 kg/m3组,而在养殖后期,养殖密度增加会引起大口黑鲈生长率下降、免疫性能降低,高养殖密度组鱼体抗氧化以及免疫功能受到抑制,肝脏和肠道结构会产生轻微损伤,0.2kg/m3密度组大口黑鲈的生理状况最好。从生产实际角度考虑,建议池塘工程化循环水养殖大口黑鲈的放养密度控制在0.2~0.4kg/m3之间,对于GH/IGF-I生长轴在大口黑鲈生长中的调控作用以及在应激时两者之间的关系还有待于进一步研究。
杨斯琪[3](2020)在《氨氮胁迫对大口黑鲈耗氧率、相关组织酶活及TLR2、IRF4基因的影响》文中指出在集约化养殖中,尤其在工厂式循环水养殖系统,由于过高的养殖密度、增加了投喂量、未及时清理残饵排泄物等因素,通常会引起氨氮在水体中逐渐积累,对经济鱼类产生不利的影响。然而在大口黑鲈中,关于氨氮胁迫的报道较少,对且其解毒机制尚不明确。因此研究氨氮对大口黑鲈的毒性作用具有重要意义。本研究以大口黑鲈为对象,首先研究了氨氮胁迫对其生长和代谢状况的影响;其次探究了氨氮的胁迫作用对其生理生化指标的影响;最后从免疫基因的方面分析其分子指标响应机制。主要研究内容和结果如下:采用封闭流水式实验方法,研究了氨氮、温度和体重对大口黑鲈(Micropterus salmoides)耗氧率、窒息点的影响。结果表明:在设定的总氨氮浓度0-8.61mg/L范围,随着氨氮浓度增加,大口黑鲈幼鱼耗氧率呈现先增加后降低的趋势,峰值为0.338mg/(g·h),窒息点随着氨氮浓度的增加而递增,影响显着(P<0.05);在13-33°C的实验温度范围,随着温度升高,耗氧率先增加,在29°C时达到峰值0.392mg/(g·h),随后出现下降。在体重6.66-15.87g范围,耗氧率随着体重的增加而下降,最低值为0.112mg/(g·h);耗氧率存在明显的昼夜节律变化,夜均0.214mg/(g·h)>日均0.199mg/(g·h),二者差异显着(P<0.05),并在2:00-6:00和18:00-20:00时间段出现二个峰值。以30.94±1.71g大口黑鲈(Micropterus salmoides)为研究对象,设置三个氨氮胁迫浓度(19,28.5,38mg/L)进行急性毒性实验,分别在胁迫第0、6、12、24、48、72、96h取其肾脏、肝脏、鳃丝、脑和肠组织,探讨急性氨氮胁迫对大口黑鲈的不同组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、总抗氧化活力(T-AOC)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响。结果:在试验期间内,氨氮质量浓度为19mg/L随胁迫时间延长T-SOD酶活逐渐升高外,其余各组三种酶活水平均显现先上调后下降的趋势。氨氮浓度越大,胁迫时间越长,其毒性作用越强,表现为38mg/L氨氮处理组在72h或96h后明显低于正常水平。当氨氮质量浓度为19mg/L时,大口黑鲈幼鱼T-SOD、T-AOC和GSH-Px指标在各组织中与对照组相比,除了GSH-Px在肝脏和鳃丝中出现低于正常水平(P<0.05),其他未出现显着性变化(P>0.05);当氨氮质量浓度为28.5mg/L时,肾脏和肝脏T-SOD,肝脏、鳃丝和肠T-AOC及全部组织GSH-Px含量等指标显着低于对照组(P<0.05);但当氨氮质量浓度为38mg/L时,大口黑鲈幼鱼的T-SOD、T-AOC和GSH-Px指标在各组织中均显着低于对照组(P<0.05)。根据峰值出现大小特征,在氨氮胁迫下,依次是鳃丝的T-SOD与肾脏T-AOC和GSH-Px表现出了最强的敏感性。试验条件下氨氮胁迫对大口黑鲈T-SOD、T-AOC和GSH-Px各指标活性产生明显影响(P<0.05),且随浓度增加及时间延长影响程度加大。由此可见,养殖水体中的氨氮会对大口黑鲈的酶活产生较大影响,同时作为氨氮胁迫的监测指标时,T-SOD作为以鳃组织为宜,T-AOC和GSH-Px以肾脏组织为宜。为了了解Toll样受体信号通路转导机制,探究Toll样受体2(Toll-like receptor2,TLR2)对大口黑鲈(Micropterus salmoides)幼鱼机体,在受到氨氮胁迫后的免疫保护作用。本研究从大口黑鲈转录组中获得了TLR2部分序列,采用RT-PCR及RACE获得TLR2全长cDNA。采用分子生物信息学对大口黑鲈TLR2基因序列以及氨基酸序列进行了分析,并根据所构建的系统发育树对这个基因分别进行了分子进化分析。采用qRT-PCR分析大口黑鲈TLR2基因的组织表达分布和氨氮胁迫后的免疫应答模式开展了研究。结果显示,TLR2基因全长2626 bp,2445 bp的开放阅读框(ORF),编码814个氨基酸。序列同源性比对发现,大口黑鲈TLR2与其他物种的TLR和基因结构相似,具有高度保守性,同源性分别为85.66%。系统进化树分析表明,大口黑鲈TLR2与花鲈、石斑鱼聚为一支。qRT-PCR分析表明,大口黑鲈TLR2在6个健康组织(肾脏、肝脏、脾脏、脑、鳃和肠)中均有表达,在肝脏和肾脏中的表达量较高。在受到氨氮胁迫后的免疫表达模式表明了大口黑鲈TLR2基因在应对毒害威胁时起到了重要作用。在这个途径中,TLR2通过MyD88依赖性途径介导NF-κB信号。为了研究急性氨氮胁迫对免疫反应相关基因表达的影响,了解干扰素调节因子4(Interferon regulatory factor 4,IRF4)对大口黑鲈(Micropterus salmoides)幼鱼机体的免疫保护作用。本研究从大口黑鲈转录组中获得了IRF4部分序列,采用RT-PCR及RACE获得IRF4全长cDNA。采用分子生物信息学对大口黑鲈IRF4基因序列以及氨基酸序列进行了分析,并根据所构建的系统发育树对这个基因分别进行了分子进化分析。采用qRT-PCR分析大口黑鲈IRF4基因的组织表达分布和氨氮胁迫后的免疫应答模式展开了研究。结果显示,IRF4基因全长1964 bp,1224 bp的ORF,编码407个氨基酸。序列同源性比对发现,大口黑鲈IRF4与其他物种的IRF基因结构相似,具有高度保守性,同源性分别为90.33%。系统进化树分析表明,大口黑鲈IRF4和鳜鱼聚为一支。qRT-PCR分析表明,大口黑鲈IRF4在6个健康组织(肾脏、肝脏、脾脏、脑、鳃和肠)中均有表达,在肾脏中的表达量较高。氨氮胁迫能诱导6个组织中IRF4基因的表达(P<0.05),出现峰值的时间存在差异。IRF4诱导的I型IFN(IFNα/β),能够参与机体的抵御氨氮胁迫反应。本研究表明,在受到氨氮胁迫后的免疫表达模式表明了大口黑鲈IRF4基因在应对氨氮中毒时起到了重要作用。
曹宏忠[4](2019)在《全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫生长、肉质及免疫的影响》文中进行了进一步梳理当前,鱼粉成本过高及供给不足成为制约我国水产养殖业快速发展的重要因素之一,羽毛粉是一种已在水产畜禽养殖业上被广泛应用并可替代鱼粉的优质蛋白源。本试验以江西特有且重要的经济性鱼类彭泽鲫为研究对象,旨在研究全水解羽毛粉蛋白替代鱼粉蛋白对彭泽鲫(Carassius auratus var.Pengze)生长、肉质、免疫及抗氧化状态的影响。试验选取初重为(12.89±0.04g)的健康彭泽鲫300尾,随机分为5组(每个处理组设置3个网箱(1.5×1.5×1.5 m),每个网箱20尾鱼,分别投喂以全水解羽毛粉蛋白替代鱼粉蛋白0%(对照)、15%(F15)、30%(F30)、45%(F45)、60%(F60)的等氮等能饲料,整个养殖周期为70 d。本文的研究结果如下:全水解羽毛粉蛋白替代1545%鱼粉蛋白对彭泽鲫生长无显着影响,而替代比例达到60%时,鱼的生长被显着抑制(P<0.05);全水解羽毛粉蛋白替代1560%鱼粉蛋白对彭泽鲫的饲料利用效率无显着影响。彭泽鲫鱼体的粗脂肪含量随着羽毛粉替代比例的上升而递增,替代比例为30%、45%和60%的三个处理组鱼体粗脂肪的含量显着高于对照组(P<0.05);彭泽鲫鱼体的粗蛋白含量随着羽毛粉替代比例的上升而呈递减趋势,替代比例为30%、45%和60%的三个处理组鱼体粗蛋白的含量显着低于对照组(P<0.05);全水解羽毛粉蛋白替代鱼粉蛋白对彭泽鲫的肝体比、脏体比和灰分含量无显着影响。全水解羽毛粉蛋白替代鱼粉蛋白会影响鱼体的肌肉品质,其使用可显着改善鱼体肌肉的弹性、内聚性、粘着性、咀嚼性和回复性(P<0.05)。相对于对照组,替代组彭泽鲫血清中的尿素、血氨、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量以及乳酸脱氢酶活性随着替代比例的增加而降低;替代比例达到45%时,彭泽鲫血清中的上述指标均显着低于对照组(P<0.05)。全水解羽毛粉蛋白替代鱼粉蛋白可影响彭泽鲫肠道的消化酶活性,替代比例为3045%时会显着提高肠道组织中淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶的活性(P<0.05);全水解羽毛粉蛋白替代鱼粉蛋白后显着改变了彭泽鲫肠道的形态结构,高替代水平会导致肠道的肌肉层厚度、皱褶高度、肠上皮细胞高度和微绒毛高度显着降低(P<0.05),其中60%替代水平对组肠道形态的影响尤为明显。全水解羽毛粉蛋白替代鱼粉蛋白对彭泽鲫的肝脏形态未造成显着影响,但影响到肝脏的糖代谢过程。高水替代水平会显着降低肝脏组织中的肝糖原含量和乳酸脱氢酶活性。全水解羽毛粉蛋白替代鱼粉蛋白后会显着降低彭泽鲫血清酸性磷酸酶和过氧化氢酶的活性(P<0.05),其中过氧化氢酶活性随替代水平的升高而逐步降低,但对血清的总超氧化物歧化酶和碱性磷酸酶活力无显着影响。全水解羽毛粉蛋白替代鱼粉蛋白会增加彭泽鲫肠道组织的酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的活性。高水平的替代会显着提高彭泽鲫肠道抗氧化指标如胱甘肽过氧化物酶、还原型谷胱甘肽和总超氧化物歧化酶的活性,肠道组织中丙二醛的含量也随着替代比例的增加而显着升高(P<0.05)。上述研究结果表明,全水解羽毛粉蛋白替代饲料中鱼粉蛋白可达45%而对彭泽鲫生长无显着影响,但会对鱼体的血清、肝脏和中肠组织的消化、免疫和抗氧化指标及组织形态特征等生理指标造成较明显的不良影响;替代比例为60%时则显着抑制彭泽鲫的生长。综上所述,彭泽鲫养殖所用饲料中全水解羽毛粉蛋白替代鱼粉蛋白的比例不宜超过45%,而30%为较合适的替代比例。
张改改[5](2019)在《不同脂肪源和蛋白源对大口黑鲈(Micropterus salmoides)脂质代谢及蛋白代谢的影响》文中研究说明1.基于脂质组学分析饲料中不同脂肪源对大口黑鲈生长性能和肌肉脂质分子的影响目前,关于饲料中不同脂肪源对鱼体脂肪酸组成和脂质代谢的影响的研究有很多,然而关于脂肪酸组成改变鱼体肌肉结构的信息较少。本研究通过生化和脂质组学分析方法研究了饲料中不同脂肪源对大口黑鲈肌肉脂质分子变化特征的影响,旨在探讨脂质分子特异性对鱼类生长性能的影响。试验饲料中分别添加12%的固体鱼油(SFO)、液体鱼油(FO)、菜籽油(RO)和混合油(亚麻籽油:大豆油=1:1)(LSO)作为单一脂肪源,配制4组等氮(46%粗蛋白)等能(21.31MJ/kg)的纯化饲料。将480尾(24.1±1.25)g大口黑鲈随机分成4组,每组3次重复,并用试验饲料喂养103天。结果表明,RO和LSO组鱼体重增重率和全鱼脂肪含量均显着高于SFO和FO组(P<0.05),而蛋白质含量则相反。该研究证实C16:0和C18:1n-9更倾向沉积于甘油骨架的外部位置。此外,大口黑鲈体内C18:2n-6与C18:3n-3之间存在竞争关系,导致肌肉中C18:2n-6的高积累和C18:3n-3的低积累。C18:2n-6特异性地沉积在磷脂酰胆碱(PC)的sn-2位置,并且C18:3n-3在甘油三酯(TG)中的sn-2位置沉积较高。另外,TG、PC和磷脂酰乙醇胺(PE)分子中高度不饱和脂肪酸(C20:4n-6、C20:5n-3和C22:3n-6)的位置分布相似,其中大多数是主要分布在TG分子的sn-1/3位置以及PC和PE分子的sn-2位置。综上所述,所有这些结构特征有助于减少饲料脂肪对鱼体的负面影响。2.酶解豆粕替代鱼粉对大口黑鲈的生长性能、消化率、肝脏功能和代谢的影响本研究旨在探究酶解豆粕替代鱼粉大口黑鲈的生长性能、消化酶活力、肝脏抗氧化能力以及代谢的影响,以植物蛋白复合物(酶解豆粕:玉米蛋白粉=10:1)替代部分鱼粉,酶解豆粕的添加量分别为0(E0组)、15%(E15组)、20%(E20组)、25%(E25组)、30%(E30组),各组替代鱼粉的量分别为0、23.64%、30.91%、40%、47.27%,并在E20组(替代30.91%的鱼粉)的基础上,将添加量为20%的酶解豆粕改用豆粕(SBM组)或发酵豆粕(FSBM组)等蛋白替代鱼粉,配制等氮等能的试验饲料。将初始体重为(17.17±0.14)g的大口黑鲈随机分为7组,分别投喂7种不同的试验饲料,养殖周期为67天。结果显示:(1)E25和E30的特定生长率和增重率显着高于其他组(P<0.05),各组的饲料系数无显着性差异,E25、E30组的存活率较低,可能与摄食不均衡,小个体被残杀有关,这也可能造成E25、E30组的生长性能显着高于其他组。随着酶解豆粕添加量的增加,脏体比、肝体比、全鱼脂肪含量显着降低(P<0.05);豆粕、酶解豆粕、发酵豆粕分别替代30.91%鱼粉时,FSBM组的特定生长率显着低于E20组(P<0.05),脏体比、肝体比显着高于其他两组(P<0.05)。(2)随着酶解豆粕替代鱼粉的比例不断增大,肠道淀粉酶和脂肪酶活力呈先上升后下降的趋势,均高于对照组;E20、E30组的胃蛋白酶显着高于对照组(P<0.05)。三种豆粕分别替代30.91%鱼粉时,FSBM组肠道淀粉酶显着高于其他两组(P<0.05),肠道脂肪酶活力的变化趋势则相反。(3)肝脏总抗氧化能力(T-AOC)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)显着高于对照组(P<0.05)(除E30组肝脏ALT外),肝脏丙二醛(MDA)呈下降趋势;E20、SBM与FSBM三组中,FSBM组的肝脏MDA、ALT显着低于其他两组(P<0.05),肝脏AST活力依次为E20>FSBM>SBM;(4)酶解豆粕替代鱼粉后,各组的耗氧率有显着升高的趋势(P<0.05),E20、E25、E30组的排氨率显着高于对照组(P<0.05),E20、E30组肌肉氮的保留率显着高于其他组;酶解豆粕替代鱼粉对大口黑鲈血清的游离脂肪酸(NEFA)、总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)都有显着的影响。三种不同豆粕分别替代30.91%鱼粉时,FSBM组的耗氧率显着低于其他两组(P<0.05),排氨率显着高于其他两组(P<0.05);豆粕组(SBM组)的血清T-CHO显着高于其他两组,而血清LDL-C与肌肉脂肪含量呈相反的结果;E20组的血清TG显着低于其他两组。综上所述,饲料中酶解豆粕的添加量小于30%时,对大口黑鲈的生长无不利影响,但有利于减轻肝脏氧化应激负担,并提高代谢水平。普通豆粕、酶解豆粕与发酵豆粕均可以替代30.91%鱼粉,且酶解豆粕的替代效果最好。3.基于代谢组学分析酶解豆粕及豆粕替代鱼粉对大口黑鲈代谢的影响本研究的目的是为探究酶解豆粕和豆粕分别替代鱼粉后,大口黑鲈的生长性能、抗氧化能力与代谢之间的调控机制。基于上述养殖试验结束后,统计E0、E20、E30、SBM四组大口黑鲈的生长性能并检测肝脏T-AOC活力和MDA含量。基于GS/MC代谢组学技术对肝脏代谢物进行检测。实验结果发现:(1)饲料中添加30%酶解豆粕对大口黑鲈的生长性能有显着的促进作用,并且可以显着提高肝脏抗氧化能力(P<0.05);酶解豆粕和豆粕同一水平替代鱼粉时,大口黑鲈的增重率没有显着性差异(P>0.05),但是肝脏抗氧化能力显着提高(P<0.05),其中酶解豆粕的替代效果最显着。(2)利用代谢组学分析出,在E0、E20、E30三组之间鉴定出共有的差异代谢物有91种,E0、E20、SBM三组之间共有的差异代谢物有80种。其中主要有氨基酸、糖类、脂肪酸、核苷类、有机酸等物质。这些差异代谢物参与的代谢途径主要有:丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢、柠檬酸(TCA)循环、丁酸代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、ABC转运蛋白、嘧啶代谢、谷胱甘肽代谢等代谢途径。综上所述,酶解豆粕和豆粕分别替代鱼粉时,大口黑鲈的生长性能和肝脏抗氧化能力升高可能与能量代谢、氨基酸代谢等代谢途径有关。4.酶解豆粕及豆粕替代鱼粉对大口黑鲈肠道微生物的影响饲料中植物蛋白替代鱼粉对水产动物肠道菌群的影响成为近几年研究热点。本研究旨在探究酶解豆粕和豆粕替代鱼粉对大口黑鲈肠道菌群结构的影响。Illumina MiSeq高通量测序技术对E0、E20、E30、SBM四组大口黑鲈肠道内容物的菌群结构进行分析。结果发现:(1)E0组的Ace及Chao指数低于其他三组,并存在显着性差异(P<0.05);E20、E30和SBM三组的Shannon指数均高于E0组,而Simpson指数的变化趋势则相反。(2)基于门水平,E0、E20、E30、SBM四组大口黑鲈肠道的优势菌群为为厚壁菌门(Firmicutes)、梭杆菌(Fusobacteria)、变形菌门(Proteobacteria),其中厚壁菌门占绝对优势;在属水平上,狭义梭菌属-1(Clostridium-sensu-stricto-1)、未分类的消化链球菌科(unclassified-f-Peptostreptococcaceae)、鲸杆菌属(Cetobacterium)是大口黑鲈肠道的优势菌群,其中,狭义梭菌属-1是E0、E30、SBM三组的绝对优势菌群,而消化链球菌是E20组的绝对优势菌群。(3)对属水平差异菌属进行研究分析发现,E0、E20和E30三组样品中的肠道菌群在属水平上存在显着性差异,E30组乳酸菌属(Lactobacillus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、分支杆菌(Mycobacterium)和假单胞菌(Pseudomonas)的丰度均高于其他两组,且存在显着性差异(P<0.05)。E0、E20、SBM三组样品在属水平上也存在显着性差异,SBM组中的漫游球菌属(Vagococcus)极显着高于其他两组(P<0.01),而分支杆菌(Mycobacterium)、Alpinimonas菌显着高于其他两组(P<0.05)。综上所述,酶解豆粕和豆粕替代鱼粉会增加大口黑鲈肠道菌群的多样性。酶解豆粕添加为30%时,可以显着增加大口黑鲈肠道中的有益菌;相较于酶解豆粕,豆粕增加肠道中的有害菌的丰度。
李潇[6](2019)在《高温环境下饲料维生素C对花鲈幼鱼生长性能、生理生化指标及肝脏组织结构的影响》文中研究表明本试验旨在研究高温环境下(33℃)饲料维生素C对花鲈幼鱼高温环境下饲料维生素C对花鲈幼鱼生长性能、生理生化指标及肝脏组织结构的影响。选取初始体重(2.2±0.2 g)的花鲈随机分为六组(每组4个重复,每个重复30尾)。以L-抗坏血酸多聚磷酸酯(2APP)为维生素C源,分别配制维生素C水平为0、40、80、160、320、640 mg/kg(实测值分别为:6.85、46.90、88.24、167.43、329.21和658.69 mg/kg,其中对照组为6.85 mg/kg)的6组等氮、等脂的试验饲料,进行为期56 d的摄食生长试验。主要研究结果如下:(1)高温环境下饲料维生素C对花鲈生长、体成分以及组织维生素C含量的影响饲料维生素C水平对花鲈生长性能没有产生显着影响(P>0.05)。饲料效率(FE)在46.9mg/kg组达到最大,显着高于329.21658.69 mg/kg组(P<0.05)。当饲料维生素C水平为46.9mg/kg时,花鲈蛋白质效率(PER)和蛋白质沉积率(PRR)显着高于其余各组(P<0.05)。饲料维生素C对肝体比(HSI)、脏体比(VSI)和肥满度(CF)没有显着影响(P>0.05)。体组成分析发现,各试验组花鲈全体水分、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分含量均没有显着差异(P>0.05)。此外,花鲈肝脏和肌肉中维生素C含量随饲料维生素C水平的升高而升高,而血清维生素C含量随饲料维生素C水平的升高在329.21 mg/kg组达到最大,之后维持不变。以花鲈血清维生素C含量为评价指标,通过折线回归分析可得,高温环境下,花鲈对于饲料维生素C的需要量为194.5 mg/kg。(2)高温环境下饲料维生素C对花鲈免疫、抗氧化以及抗应激能力的影响随着饲料维生素C水平的升高,花鲈血清免疫力显着升高。血清C3水平在329.21 mg/kg组达到最大,显着高于对照组(P<0.05),血清C4水平和溶菌酶(LZM)活性在88.24 mg/kg组显着高于对照组,在658.69 mg/kg组达到最大值(P<0.05),而血清IgM水平在167.43mg/kg组显着高于对照组(P<0.05),并在658.69 mg/kg组达到最大值。对肝脏抗氧化指标的分析发现,随着饲料维生素C水平的增加,花鲈肝脏中总抗氧化能力(T-AOC)在88.24 mg/kg维生素C组达到最大,之后维持稳定,而总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性先升高后降低,在167.43 mg/kg组达到最大(P<0.05)。血红素氧合酶(HO-1)活性在46.9167.43 mg/kg组显着高于对照组(P<0.05)。各维生素C组间肝脏谷胱甘肽(GSH)含量和过氧化氢酶(CAT)活性均显着高于对照组(P<0.05),而丙二醛(MDA)含量无显着差异(P>0.05)。通过组织学观察显示,各试验组花鲈肝脏组织形态没有明显不同。此外,肝脏炎性基因TNF-α、IL-1β、IL-10以及抗氧化基因Nrf2、HO-1、AP-1、NF-kβ的相对表达量均随维生素C水平的增加而先升高后降低,且在88.24 mg/kg维生素C组达到最大值(P<0.05),而IL-4的相对表达量在不同维生素C水平组均无显着差异(P>0.05)。对花鲈抗应激指标的分析发现,各组血清皮质醇(Cortisol)含量无显着变化(P>0.05),而血清HSPs含量以及肝脏HSP70 mRNA的相对表达量均随饲料维生素C水平的增加而先升高后降低,且分别在88.24 mg/kg和329.21 mg/kg组达到最大值。分别以花鲈血清IgM含量、肝脏T-AOC以及肝脏CAT活性为评价指标,经折线模型回归分析可得,高温环境下,花鲈对于饲料维生素C的需要量分别为:152.45、94.64和68.05mg/kg。(3)饲料维生素C对急性降温后花鲈免疫、抗氧化以及抗应激能力的影响56 d养殖试验结束后,每缸选取8尾花鲈进行为期48 h的急性降温试验(从33℃水体转入27℃水体)。分别于急性降温24 h和48 h后取样,并分析血清免疫指标、抗应激指标以及肝脏抗氧化指标。结果表明,血清C3、C4、IgM和HSPs水平以及肝脏T-SOD活性、GSH和MDA含量均受维生素C和急性降温时间交互作用的极显着影响(P<0.001)。随着降温时间的增加,花鲈血清C3、IgM水平极显着高于0 h水平(P<0.001),而血清C4、HSPs水平和LZM活性则表现出相反趋势(P<0.001)。急性降温后,随着饲料维生素C水平的增加,C3水平在167.43和658.69 mg/kg组极显着高于对照组(P<0.001),C4水平、LZM活性在88.24658.69mg/kg组极显着高于对照组(P<0.001),HSPs水平和IgM水平随饲料维生素C的增加先升高后降低,且HSPs水平在88.24 mg/kg组极显着高于对照组(P<0.01),而IgM水平在46.9167.43mg/kg组极显着高于对照组(P<0.001)。对抗氧化指标的分析发现,肝脏T-SOD活性、GSH浓度在急性降温24 h后极显着高于0 h水平,在48 h后极显着低于0 h水平(P<0.001)。肝脏HO-1活性在降温24 h后无显着影响,在48 h后,显着高于0 h水平。但是,肝脏MDA浓度随急性降温时间的增加先升高后降低,均极显着高于0 h水平(P<0.001)。急性降温后,随着饲料维生素C水平的增加,肝脏GSH浓度极显着高于对照组(P<0.001),肝脏MDA浓度极显着低于对照组(P<0.001),而肝脏T-SOD和HO-1活性不受维生素C水平的影响(P>0.05)。说明急性降温胁迫会导致花鲈产生应激反应,而饲料维生素C添加可提高花鲈应对急性降温应激的能力。
张丰登[7](2019)在《基于循环水养殖大口黑鲈摄食行为反馈的自适应投饲系统研究》文中进行了进一步梳理循环水养殖模式下如何实现饲料高效投喂不仅是生产管理上的难题,亦是实现福利化养殖需要解决的关键科学问题。目前,我国的投饲机械普遍存在着精准性差、智能程度低和稳定性差等问题。为解决此类问题,本文以大口黑鲈(Micropterus salmoides)为研究对象,通过引用一种基于水体流场特征的鱼类摄食活跃程度量化方法,对大口黑鲈的摄食活跃程度进行量化分析,并将量化结果作为对鱼群饥饿状态的判定依据。同时,依据量化结果制定相应的投饲策略,并以此为基础,设计研发出一款用于循环水养殖模式下的自适应投饲机,并通过与传统的定时定量式投饲机对比的方式,对其实际投喂效果进行了研究。具体的研究内容和结果如下:1.针对室内循环水养殖的特点,引用一种基于水体流场特征的鱼类摄食活跃程度量化方法,并对其是否适用于量化大口黑鲈的摄食活跃程度进行研究。研究表明,在4种不同肠胃饱食指数(分别为0.36±0.04、1.21±0.12、1.45±0.17、1.85±0.21)下,通过与CVFAI函数和SBCS函数对大口黑鲈鱼群摄食活跃程度的量化结果进行比较,结果表明该方法取得的量化效果优于另外两种,即所引用的方法适用于大口黑鲈。但其弊端是当养殖对象过小或养殖密度不足以搅动水体以达到水面反光区域变动或者反光区域变化不显着时,该方法则不再适用。2.基于上述大口黑鲈摄食活跃程度量化方法,设计研发出一款用于室内循环水养殖大口黑鲈的自适应投饲机,主要包括投饲装置、轨道结构和投饲控制系统的设计,以及硬件选型和样机试制与调试等工作。所设计的投饲机采用一种定时变量投喂方式,无需设定具体的投饲量,投饲量由当下投饲过程中的鱼群摄食活跃程度决定,投饲机可自我判断每餐的投饲量,以满足鱼群所需。3.针对上述设计研发的投饲机在实际循环水养殖过程中的适应性进行探究,以大口黑鲈幼鱼(32±5g)为实验对象,通过与传统的定时定量投饲机对比投饲的方式,展开养殖试验。试验结束后,分别对两种投饲方式下的大口黑鲈幼鱼的生长、生理和免疫等指标进行分析研究,获得结果如下:1)自适应投饲方式可以较好的满足大口黑鲈摄食需求,减少饲料浪费,同时可以弱化分级现象;2)自适应投饲方式和定时定量投饲方式在大口黑鲈存活率、肝体指数和肥满度方面无显着性差异(P>0.05);但在增重率方面,自适应组比定时定量组高30.17%(P<0.05);在饲料系数方面,自适应组比定时定量组降低了 0.21(P<0.05);在特定生长率方面,自适应组比定时定量组高0.22%(P<0.05),这表明自适应投饲方式鱼群生长速度较快,因此要优于定时定量投饲方式;3)各组在皮质醇、超氧化物歧化酶和丙二醛方面无显着性差异(P>0.05);在溶菌酶方面,定时定量组比自适应组高出4.73 nmol/mg(P<0.05)。从上述1)和2)结果可得,定时定量组因不能较好地满足鱼类摄食需求,使之出现短时间的饥饿状态,刺激溶菌酶活力升高;4)各组的水分、灰分和粗脂肪含量无显着性差异(P>0.05);在粗蛋白含量方面,定时定量组比自适应组高3.99%(P<0.05);5)各组的肝脏淀粉酶、肠淀粉酶、肝脏脂肪酶、肠脂肪酶、肝脏蛋白酶和肠胰蛋白酶的活力无显着性差异(P>0.05);在胃蛋白酶的活力方面,自适应组比定时定量组高了1.64U/mg(P<0.05),表明在该种投饲方式下,个体内的胃对于蛋白质的消化更为强烈,更有利于饲料中蛋白质的消化吸收,即更有利于生长。
欧红霞[8](2018)在《不同饲料对大口黑鲈消化酶及肠道形态结构的影响》文中认为大口黑鲈(Micropterus salmoides)是中国重要的淡水养殖品种之一。大口黑鲈是肉食性鱼类,养殖生产上主要投喂冰鲜鱼,但近几年野生资源的下降,冰鲜鱼的价格一直上升,致使养殖成本逐年加大。同时投喂冰鲜鱼对自然资源和生态环境造成很大的压力,严重影响了大口黑鲈养殖业的进一步发展,国内外科技工作者已对大口黑鲈的营养、消化酶等做了大量研究,并取得一定的研究成果。但目前主要集中在实验室水平,而且所研究的鱼类个体相对较小。对养殖成商品规格的大口黑鲈的消化道中各种酶活性以及肠道形态结构等研究还未见报道。同时,作为肉食性鱼类,大口黑鲈体内缺乏淀粉酶,这导致了大口黑鲈对配合饲料的摄食效果不理想,特别是不能摄食植物性饲料原料较高的人工饲料。鱼类所摄取的饲料物质必须经过消化道的物理消化及胃、肠、胰脏中所分泌的各种消化酶的消化,分解成为氨基酸、小肽、单糖及脂肪酸等小分子才能被消化道所吸收,来满足鱼类在生长过程中所需的能量。鱼类对于各种物质的消化吸收情况则在很大程度取决于鱼类的食性、消化特征及消化道各部分的消化酶的分泌量和活性大小。为此,本研究研究了摄食不同饲料对大口黑鲈淀粉酶活力的影响,分析摄食不同饲料的大口黑鲈肠道形态结构,并体外研究消化酶对几种饲料原料的消化率,为期能为人工饲料添加消化酶,弥补体内消化酶的不足,同时也为大口黑鲈的人工饲料开发提供基础数据和理论参考。主要研究结果如下:1.摄食不同饲料对大口黑鲈消化道指数和淀粉酶活性的影响为研究不同饲料对大口黑鲈(Micropterus salmoides)消化道指数和淀粉酶活性的影响,对摄食配合饲料(饲料组)和冰鲜鱼(冰鲜组)的大口黑鲈消化道指数和淀粉酶活性差异进行比较分析。结果显示:饲料组比肠质量、比肝胰脏质量、比内脏质量显着高于冰鲜组(P<0.05)。在各个消化器官中两组淀粉酶活性大小顺序均为:肝胰脏>幽门盲囊>肠>胃,而肝胰脏中淀粉酶活性均显着高于其它消化器官(P<0.05)。在胃、肝胰脏、幽门盲囊和肠4部位中,冰鲜组与饲料组淀粉酶的最适pH分别为7.2和6.8,6.4和6.8,6.4和6.8,6.8和6.8;最适温度分别为30℃和30℃,35℃和30℃,50℃和55℃,60℃和60℃;最适底物浓度分别为8%和8%,0.5%和2%,8%和8%,8%和8%。在相同温度和底物浓度下,摄食人工配合饲料的大口黑鲈消化器官淀粉酶活性显着高于摄食冰鲜杂鱼(P<0.05)。研究结果为在人工饲料配制过程中添加相应的酶制剂、优化人工饲料配方提供参考。2.摄食不同饲料对大口黑鲈肠道形态结构的影响为研究摄食不同饲料对大口黑鲈肠道形态结构的影响,对摄食配合饲料和冰鲜鱼的大口黑鲈肠道进行了切片制作和研究。结果表明饲料组的前、后肠的黏膜厚度、绒毛高度均低于冰鲜组;前、后肠黏膜厚度分别下降了13.71%(P<0.05)、22.73%(P<0.05),绒毛高度分别降低了22.49%(P<0.05)、20.51%(P<0.05);中肠黏膜厚度、绒毛高度则高于冰鲜组,分别升高了19.07%(P<0.05)、10.72%(P<0.05)。饲料组的前、中和后肠肌层厚度、V/C值(绒毛高度/隐窝深度)均低于冰鲜组,肌层厚度分别降低了47.40%(P<0.05)、7.40%(P>0.05)、22.66(P<0.05)%,V/C比分别降低了42.7%(P<0.05)、8.7%、(P<0.05)、56.5%(P<0.05)。饲料组前、中和后肠的隐窝深度均高于冰鲜组,分别增高了20.49%(P<0.05)、19.36%(P<0.05)、39.98%(P<0.05)。与冰鲜鱼相比,大口黑鲈饲喂配合饲料后,其肠道消化吸收功能降低,整体黏膜厚度、绒毛高度呈下降趋势,隐窝深度加深,V/C值降低,肠道健康受损。3.摄食不同饲料的大口黑鲈消化酶对5种常见饲料原料体外消化率的研究为了探讨大口黑鲈摄食不同饲料后消化酶对几种饲料原料体外消化率的影响以及温度对饲料原料体外消化率的影响,采用体外消化法,分别测定了大口黑鲈各消化器官的粗酶液对秘鲁鱼粉、国产鱼粉、玉米粉、豆粕和菜粕的体外消化率,以及不同温度下各消化器官的粗酶液对秘鲁鱼粉和玉米粉的体外消化率。实验结果为:饲料组的消化器官粗酶液对几种饲料原料干物质和蛋白质的体外消化率显着高于冰鲜组(P<0.05)。在2030℃,秘鲁鱼粉和玉米粉的体外消化率随着温度升高呈上升趋势。饲料组大口黑鲈胃、肝、幽门盲囊、肠对5种饲料原料的干物质的总消化率为:秘鲁鱼粉22.81%、国产鱼粉21.01%、菜粕20.22%、豆粕19.78%、玉米粉17.63%,而冰鲜组相应器官粗酶液对5种饲料原料的干物质的总消化率为:国产鱼粉18.64%、秘鲁鱼粉16.45%、菜粕14.05%、豆粕13.09%、玉米粉6.21%。饲料组对5种饲料原料的蛋白质的总消化率为:秘鲁鱼粉24.42%、国产鱼粉21.12%、菜粕20.22%、豆粕12.19%、玉米粉11.33%;冰鲜组为:秘鲁鱼粉17.08%、国产鱼粉16.93%、菜粕14.79%、豆粕11.86%、玉米粉6.33%。以上结果表明:饲料组大口黑鲈各器官消化酶体外消化能力强于冰鲜组;饲料体外消化率受温度影响;饲料组和冰鲜组均对动物性蛋白饲料消化效果好于植物性蛋白,表现为冰鲜组和饲料组均对秘鲁鱼粉和国产鱼粉的蛋白质体外消化效果最好,其次为菜粕、豆粕,对玉米粉的消化效果最差。
何竺柳[9](2018)在《低盐度胁迫对罗氏沼虾生长和肉质的影响》文中进行了进一步梳理本文以罗氏沼虾Macrobrachium rosenbergii为研究目标,采用行为学及生理学等知识,研究了低盐度(0,2,4,6,8,10,12,14)条件对罗氏沼虾行为、生长发育及肉质的影响,探寻一种可行的低盐度养殖该虾及其肉质改良方法,充分利用咸淡水水资源,为筛选出适宜罗氏沼虾养殖的盐度范围提供依据,打破发展瓶颈,从而提高罗氏沼虾养殖成活率并推进产业的健康发展,并为今后的罗氏沼虾研究提供更多的有益资料。主要研究结果如下:1.低盐度养殖条件对罗氏沼虾行为的影响在实验开始前,设置不同盐度对罗氏沼虾行为观察的预实验,确定罗氏沼虾的行为动作,随后在相同条件下选取规格状态一致的罗氏沼虾进行实验,平均质量为5.32±0.20 g,平均体长为6.13±0.20 cm,最后采用SPSS20.0软件对一小时内所记录到的罗氏沼虾的行为参数进行分析和作图,结果表明:(1)盐度会增加罗氏沼虾的寻食时间,在盐度在6以上时,罗氏沼虾的寻食时间变化不大。(2)随着盐度的升高,罗氏沼虾的摄食时间而出现显着的变化,呈现显着降低的趋势(P<0.05)。(3)罗氏沼虾的摄食次数随着盐度的升高而出现下降的趋向,但当养殖水体的盐份超过10的时,摄食次数会明显受到影响。(4)随着盐度的增加,罗氏沼虾的运动时间呈现降低的趋势,在盐度小于6的条件下,运动时间受到的影响比较小。另外,通过实验观察发现,在低盐度胁迫下,罗氏沼虾的蜕皮次数较淡水组明显减少,而且蜕壳时受到的攻击频率也降低,相残率得到有效控制,说明罗氏沼虾釆取了减少行为活动的对策来降低能量消耗,从而维持自身正常的生理代谢。因此可以通过调节水体盐度的方法,在较低盐度下进行养殖,提高罗氏沼虾的成活率,提高生产效益。2.低盐度养殖条件对罗氏沼虾生长状况和存活率的影响设置7个盐度组及1个对照组且每组3个平行于30 L的白色塑料箱中饲养,每个箱放入规格状态一样的幼虾30尾,平均质量为5.32±0.20 g,平均体长为6.13±0.20 cm。经过45天的低盐度养殖,从各盐度组中,随机抽取罗氏沼虾20尾,用吸水纸擦干虾体表的水分后,进行体质量、体长的测量,并计算和统计出各盐度组罗氏沼虾的平均蜕壳次数、体长增长率、存活率等生长参数,结果表明:(1)罗氏沼虾养殖初期时的体长增长率明显高于养殖末期,06的盐度组的养殖初期平均体长增长率是养殖末期的2倍以上。(2)罗氏沼虾养殖初期的特定生长率及肥满度均大于养殖末期,其中,06盐度组的养殖初末期的特定生长率相差不大,而其他较高盐度组养殖初期的特定生长率,则显着高于养殖末期(P<0.05)。(3)在014的盐度内,随着盐度的升高罗氏沼虾的存活率呈现增大的趋势,其中,盐度0对照组的罗氏沼虾存活率最低,仅为53.82±0.453,而实验组盐度14的存活率最高,达到83.36±0.795。(4)罗氏沼虾在淡水和咸水条件下,生长发育过程中,均有残食的现象,并且其存活率与平均蜕壳次数有关系,本研究结果也正好表明罗氏沼虾的平均蜕壳次数越少,其存活率越高。3.低盐度养殖条件对罗氏沼虾肉质的影响在各组饲养结束后,对其进行取样,每组随机取60尾,每个平行20尾,擦干虾体水份后置于冰盘上,迅速去掉头胸甲及肝胰腺剪取肌肉,用匀浆机将虾肌肉捣烂及混匀,零下80℃超低温保存,用于氨基酸、脂肪酸的测定,结果说明:(1)在氨基酸测定过程中,因为色氨酸在水解过程中被毁坏,未能够在罗氏沼虾的肌肉中检测到色氨酸,因此共检测获得了17种,包括两种鲜味氨基酸、四种呈味氨基酸、七种必须氨基酸及十种非必须氨基酸;其中,谷氨酸的含量最高,在盐度14时,达到9.08±0.15,而胱氨酸的含量最低,在盐度12时,仅有0.17±0.16;在罗氏沼虾的肌肉中,天冬氨酸、酪氨酸、缬氨酸、异亮氨酸及赖氨酸的含量随着盐度的增加而上升,但各盐度组间的差异不大;而丝氨酸、脯氨酸、精氨酸、苏氨酸及苯丙氨酸的含量则随着盐度的增加而减少;胱氨酸、组氨酸、蛋氨酸及亮氨酸的含量变化不显着(P>0.05),与水体的盐度变化的趋势波动不大。(2)各盐度组共检测到脂肪酸11种。饱和脂肪酸(SFA)中的3种脂肪酸组分在不同盐度组中都存在显着差异(P<0.05),其中随着盐度的升高,C14:0有先下降后升高的变化现象,盐度为6时最低(2.53±0.18);单不饱和脂肪酸MUFA中的3种脂肪酸组分含量在不同盐度组中均存在显着差别(P<0.05),但是其变化趋向与SFA不一样,随着盐度的提高而增加,在盐度组14时到达最高(30.62±0.32);但是,多不饱和脂肪酸(PUFA)含量在各盐度组之间差别不是很显着(P>0.05);但PUFA中的5种脂肪酸组分含量在不一样的盐度组中均具有非常显着差异(P<0.05),其中C18:2n-6、C18:3n-3及C20:4n-6的含量随着盐度的升高而增加,C20:5n-3(EPA)和C20:6n-3(DHA)的含量均随着盐度的升高而降低;因此,EPA/DHA的比值在各盐度组中差异不显着,范围在1.11±0.311.18±0.48;但EPA+DHA含量在不一样的处理组之间具有非常显着的差别(P<0.05),呈先上升后下降的变化趋向,在盐度组8时最高(14.43±0.39)。盐度的变化可以影响机体的氨基酸及脂肪酸的含量,有效地调节养殖环境的盐度将能改良罗氏沼虾的肉质,从而提高养殖业的经济效益。
杨文平[10](2017)在《梭鱼脂代谢相关基因的克隆及饲料营养水平对其脂肪蓄积和代谢的影响研究》文中研究指明梭鱼是我国沿海地区低盐度滩塘和海水池塘养殖的重要经济鱼类,也是江苏沿海正在开发的海、淡水养殖新兴品种之一。目前梭鱼的营养需要研究还很有限,配合饲料的配制主要借鉴其他杂食性鱼类的营养需要,在养殖中常发现梭鱼体(尤其是腹部)脂肪过量蓄积的现象。作为配合饲料的重要营养成分:脂肪、蛋白质和糖类的不平衡均会导致脂代谢紊乱和脂肪的过量蓄积,其发生、发展过程和脂代谢关键因子有着重要的联系。本文借助分子生物学和生物信息学手段,首次克隆获得梭鱼脂代谢关键因子过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)α 和γ、脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)基因全长cDNA和脂肪酸合成酶(fatty acid synthase)基因cDNA片段,测定了梭鱼上述基因在不同组织中的表达模式;研究了饲料脂肪、蛋白水平对梭鱼体组织脂肪蓄积和脂代谢基因表达的影响。研究结果可以为梭鱼配合饲料的开发及梭鱼脂质代谢的调控提供必要的参考。1.饲料脂肪水平对梭鱼生长、血液生化和肝脏抗氧化性能的影响采用单因子浓度梯度法,以鱼油为脂肪源,制成脂肪含量分别为2.04%、4.83%、7.47%、9.79%、12.01%、14.59%的六组等氮等能(蛋白含量为 30.70 土0.12%;总能22.32±0.13 MJ/kg)的饲料。健康的梭鱼鱼种(均重9.5±0.3 g),随机分为6组,每组3个重复,每个水族箱30尾鱼,分别投喂以上6种不同脂肪水平的饲料,饲养60d。试验结束后,饥饿24h,采样,测定。结果显示:7.47%和9.79%脂肪水平组增重率、饵料系数均差异不显着(P>0.05),增重率显着高于其他各组(P<0.05),饵料系数显着低于其他各组(P<0.05);9.79%脂肪水平组蛋白质效率显着高于其它各组(P<0.05),和7.47%组差异不显着(P>0.05);采用二次多项式回归模型分析梭鱼增重率与饲料脂肪水平之间的关系(二次性,P<0.001),确定了梭鱼适宜的脂肪水平,脂肪水平作为自变量(X),增重率作为因变量(Y),得到回归方程:Y=-0.8238 X2+14.949 X+162.51(R2=0.7750),当X=9.1%时,梭鱼幼鱼的增重率最高。血浆谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平随脂肪水平的增加显着升高(线性,P<0.05);脂肪水平对甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇四种血脂指标影响不显着(P>0.05)。过氧化氢酶活性随脂肪水平的升高呈先升高后降低的趋势(二次性,P<0.001),总超氧化物歧化酶活性表现出相同的变化趋势(二次性,P<0.001),总抗氧化能力随脂肪水平的升高而下降(线性,P=0.014),与此相反,丙二醛含量随脂肪水平的升高而升高(线性,P<0.001)。鉴于脂肪水平为7.47%和9.79%时,鱼体均获得了较好的生产性能和肝脏生化指标,因此梭鱼幼鱼饲料中脂肪水平以7.5%~10%为宜。2.饲料脂肪水平对梭鱼形体指标、体脂蓄积和脂肪酸组成的影响饲养方案同1。结果表明:肝体指数和脏体指数均随脂肪水平的升高呈先降低后升高的趋势(二次性,P<0.05),脂肪水平为4.83%、7.47%、9.79%、12.01%的四组间,差异均不显着(P>0.05)。肌肉和全鱼中脂肪含量和饲料脂肪水平呈正相关(线性,P<0.05),肌肉、肝脏和肠系膜脂肪三种组织脂肪蓄积量占鱼体总脂的比例分别为 20.30%~24.31%、2.43%~2.95%、11.33%~12.47%;各脂肪水平组间差异均不显着(P>0.05)。随着饲料脂肪水平(鱼油)的增加,三种组织和全鱼油脂中多不饱和脂肪酸的含量均有所增加,n-3/n-6多不饱和脂肪酸的比例也显着提高(P<0.05)。研究还发现,各试验组内,三种组织和全鱼油脂中22:6n-3含量都高于20:5n-3。3.梭鱼脂肪代谢相关基因的克隆及组织表达分析采用反转录聚合酶链式反应和cDNA末端快速扩增法技术克隆了梭鱼PPARα、PPARγ、LPL基因全长cDNA序列和FAS基因部分cDNA序列;并采用实时荧光定量PCR技术研究了梭鱼上述4种基因在不同组织中的表达情况,结果如下:(1)PPARα基因全长cDNA序列克隆及组织表达分析克隆了梭鱼PPARα基因全长cDNA序列(GenBank:KJ848472.1),包含2409个碱基,编码478个氨基酸。序列比对分析表明,PPARa基因具有4个功能区域,分别为保守性差的N端区域、DNA结合区、可变的铰链区、C端配体结合区;梭鱼PPARα和其他物种的相似性很高,一些重要的功能位点在进化过程中高度保守。PPARα基因在所有被检测组织中均有表达,其中,在肝脏组织表达量最高,其次是脑、胃、皮肤、脾、腹腔肠系膜脂肪、鳃、肾、肠、心脏,肌肉中表达量最低。(2)PPARy基因全长cDNA克隆及组织表达分析克隆了梭鱼PPARγ基因全长cDNA序列(GenBank:KJ848473.1),包含2985个碱基,其中5’端非编码区为200bp,3’端非编码区为1183 bp,开放阅读框1602 bp,编码533个氨基酸。PPARγ基因和PPARα基因类似,也具有4个功能区域:保守性差的N端区域、DNA结合区、可变的铰链区、C端配体结合区;序列比对分析表明,梭鱼和脊椎动物的序列相似性很高,该基因在进化过程中保守。PPARγ基因在被检测的11种组织中均有表达,腹腔肠系膜脂肪中表达量最高,其次是肠、鳃、肾、肝脏、皮肤、脑、脾、胃,心脏和肌肉中表达水平很低。(3)LLPL基因全长cDNA克隆及组织表达分析克隆的梭鱼LPL全长cDNA序列(GenBank:KJ825894.1)包含2395个碱基,5’端非编码区为168 bp,3’端非编码区为676 bp,开放阅读框为1551 bp,编码516个氨基酸。序列比对分析表明,LPL基因可以划分为N末端(24-362位氨基酸残基)和C末端(363-516位氨基酸残基)两个结构区域,一些重要的功能位点如脂肪结合域、催化三联体(Ser-Asp-His)等在进化过程中高度保守。LPLmRNA在所有被检测组织中均有表达,腹腔肠系膜脂肪中表达量最高,其次是肝脏、胃、肾、鳃、肠、脑、心脏、脾脏,在肌肉中表达量较低。(4)FAS基因cDNA部分序列的克隆及组织表达分析克隆的梭鱼FAS基因cDNA部分序列(GenBank:KJ848474.1)长920 bp,编码303个氨基酸。序列分析表明,梭鱼FAS基因和其他物种的该基因相似性为74%~95%。FAS基因mRNA在梭鱼被检测组织中表达丰度差异显着(P<0.05),脑中含量最高,其次是肝脏和腹腔肠系膜脂肪组织,肌肉中表达量最低,其余7种组织中的表达量均显着低于脑和肝脏(P<0.05)。4.饲料脂肪水平对梭鱼脂代谢相关基因表达和酶活性的影响饲养方案同1。结果表明:肝脏中PPARα基因mRNA的丰度随脂肪水平的升高而升高(P<0.05),腹腔肠系膜脂肪和肌肉中PPARα基因mRNA表达量随脂肪水平的升高无显着变化(P>0.05)。肌肉、肝脏、肠系膜脂肪组织中PPARγ基因mRNA表达丰度在脂肪水平增加时有升高趋势,但三种组织中各组间均差异不显着(P>0.05)。腹腔肠系膜脂肪和肌肉中LPLmRNA、FAS mRNA表达量各组之间差异均不显着(P>0.05)。肝脏中LPL mRNA的丰度随脂肪水平的升高显着升高(P<0.05),12.01%和14.59%两组表达水平显着高于2.04%、4.83%和7.47%三组(P<0.05);肝脏中LPL酶活性也随脂肪水平的升高表现出相同的变化趋势,14.59%组酶活性显着高于2.04%和4.83%组(P<0.05)。随着饲料脂肪水平的升高,肝脏中FAS mRNA的表达丰度显着下降(P<0.05),12.01%和14.59%两组均显着低于2.04%组(P<0.05),其余三组之间差异不显着(P>0.05);肝脏中FAS酶活性随脂肪水平的升高也显着下降,14.59%组显着低于2.04%和4.83%组(P<0.05)。5.饲料蛋白水平对梭鱼体脂蓄积、肝脏抗氧化性能、脂代谢相关基因表达和酶活性的影响配制蛋白含量分别为26%、28%、30%、32%的四组等能等脂(总能12.48 土0.10 MJ/kg;脂肪水平5.13±0.12%)饲料,配方中采用玉米淀粉补充蛋白浓度降低导致的能值缺失。均重92.20±4.23 g的梭鱼随机分到工业化养殖池中,随机分为4组,每组3个重复,每个水池2300kg(约25000尾鱼),分别投喂以上4种不同蛋白水平的饲料,养殖周期60 d,试验结束后饥饿24h,取样,测定。结果显示:肌肉、肝脏和肠系膜脂肪组织脂肪蓄积量占鱼体总脂的比例分别为23.29%~24.98%、3.30%~4.27%、7.11%~12.75%,各蛋白水平组间差异不显着(P>0.05),三种组织中均以26%蛋白水平组脂肪蓄积比例最高。肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(二次性,P=0.012)和总超氧化物歧化酶(二次性,P=0.014)活性随饲料蛋白水平的升高先增加后下降;26%蛋白组丙二醛含量显着高于其余三组(P<0.05);各组间总抗氧化能力、过氧化氢酶活性差异不显着(P>0.05)。随蛋白水平的增加,肌肉中PPARα基因mRNA表达水平先降低后升高,肠系膜脂肪中变化趋势和肌肉中相似,均以30%蛋白组表达水平最低(P<0.05);肝脏组织中各组间差异不显着(P>0.05)。三种组织中PPARγ基因mRNA表达水平均以26%组表达量最高,除肌肉组织中32%蛋白水平组外,各组织中26%组显着高于其它各蛋白水平组。三种组织中FAS mRNA表达水平和酶活性变化趋势一致,随饲料蛋白水平的升高均先降低后升高,各组织中均以26%组FAS mRNA表达水平和酶活性最高,28%和30%组间差异均不显着(P>0.05),然后在32%组又均有所提高。三种组织中LPL mRNA的丰度无显着差异(P>0.05),肠系膜脂肪组织中各组间LPL酶活性差异不显着(P>0.05),肌肉和肝脏中LPL酶活性随蛋白水平的升高呈升高趋势。综上所述,得出如下结论:(1)适宜的脂肪水平可以促进梭鱼的生长,提高生产性能,过高的脂肪水平(12.01%和14.59%)会抑制鱼体生长,降低肝脏的抗氧化能力,还会导致体组织(肌肉、肝脏)及全鱼蓄积较多的脂肪,因此饲料中应避免添加过多的脂肪;随鱼油添加水平的提高,组织中多不饱和脂肪酸尤其是n-3系列有显着提高,和EPA相比,梭鱼幼鱼体组织选择性沉积更多的DHA;梭鱼幼鱼三种脂肪蓄积位点的脂蓄积量占鱼体总脂的比例由高到低依次为肌肉、腹腔肠系膜脂肪组织、肝脏。(2)梭鱼PPARα、PPARγ、LPL、FAS四种基因编码序列保守性良好,在所有被测组织中均有表达,四种基因在不同组织中表达量差异显着。PPARα mRNA在肝脏中高表达,PAPARγ、LPL mRNA在腹腔肠系膜脂肪组织表达量最高,而FAS mRNA在脑、肝脏、腹腔肠系膜脂肪组织中高水平表达。(3)随脂肪水平的升高,脂肪分解基因PPARα和LPL mRNA在肝脏中的表达水平显着提高,LPL的酶活性也显着增加,而脂肪生成基因FAS mRNA表达和酶活性均显着下降。(4)在等能等脂条件下,低蛋白组(26%)和高蛋白组(32%),尤其是前者,上调了组织(肌肉、肝脏、腹腔肠系膜脂肪)生脂基因PPARγ和FAS的mRNA表达及后者的酶活性,也增强了组织脂肪的沉积,两种蛋白水平下,组织中PPARαmRNA表达水平均有提高,而高蛋白水平(32%)较低蛋白水平(26%)显着提高了 LPL的酶活性。蛋白水平试验中梭鱼幼鱼三种脂肪蓄积位点的脂肪蓄积模式和脂肪水平试验相同。
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本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号对照表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 昆虫资源饲料化发展历程 |
| 1.2 昆虫饲料创制需要考虑的因素 |
| 1.2.1 昆虫粗蛋白及氨基酸组成的评估 |
| 1.2.2 昆虫油脂及脂肪酸组成的评估 |
| 1.2.3 昆虫几丁质的评估 |
| 1.3 昆虫资源水产饲料化 |
| 1.3.1 昆虫性日粮中影响鱼类消化吸收的因素 |
| 1.3.2 昆虫性日粮影响鱼类健康的因素 |
| 1.4 黑水虻 |
| 1.4.1 黑水虻的营养组成 |
| 1.4.2 黑水虻饲料化安全性评估 |
| 1.4.3 黑水虻在动物生产中的应用 |
| 1.5 水产用饲料油脂 |
| 1.5.1 植物性油脂 |
| 1.5.2 动物性油脂 |
| 1.6 选题的目的与意义 |
| 第二章 黑水虻油脂提取及理化性质分析 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料方法 |
| 2.2.1 黑水虻油的制备 |
| 2.2.2 试验试剂 |
| 2.2.3 黑水虻油脂的有机溶液浸提法 |
| 2.2.4 黑水虻感官及理化指标的测定 |
| 2.2.5 数据统计 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 黑水虻粗脂肪含量的测定 |
| 2.3.2 提取温度对提取效果的影响 |
| 2.3.3 提取时间对提取效果的影响 |
| 2.3.4 物料比对提取效果的影响 |
| 2.3.5 油脂提取工艺优化结果 |
| 2.3.6 油脂感官及理化性质指标测定结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第三章 利用裂殖壶藻渣提升黑水虻油营养价值的研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 试验材料 |
| 3.2.2 试验设计 |
| 3.2.3 成份测定 |
| 3.2.4 数据分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 基质中不同含量的藻渣对幼虫生长的影响 |
| 3.3.2 基质中不同含量的藻渣对幼虫体成分的影响 |
| 3.3.3 基质中不同含量的藻渣对幼虫脂肪酸的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 基质中不同含量的藻渣对幼虫生长的影响 |
| 3.4.2 基质中不同含量的藻渣对幼虫体成分的影响 |
| 3.4.3 基质中不同含量的藻渣对幼虫脂肪酸的影响 |
| 3.5 结论 |
| 第四章 黑水虻油、黄粉虫油、蚕蛹油对框鲤幼鱼生长及健康状况的影响比较 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 试验日粮 |
| 4.2.2 试验动物与饲养管理 |
| 4.2.3 采样方法 |
| 4.2.4 常规成分测定 |
| 4.2.5 血清生化和抗氧化状态相关指标测定 |
| 4.2.6 脂肪及肠道组织切片的观察 |
| 4.2.7 实时定量检测基因表达 |
| 4.2.8 数据分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 日粮中黑水虻油、黄粉虫油和蚕蛹油对框鲤幼鱼生长和生物学性状影响的比较 |
| 4.3.2 日粮中黑水虻油、黄粉虫油和蚕蛹油对框鲤幼鱼血清生化指标和抗氧化状态影响的比较 |
| 4.3.3 日粮中黑水虻油、黄粉虫油和蚕蛹油对框鲤幼鱼脂肪及肠道组织形态学影响的比较 |
| 4.3.4 日粮中黑水虻油、黄粉虫油和蚕蛹油对框鲤幼鱼生长、脂代谢及炎症反应相关基因表达影响的比较 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 日粮中黑水虻油、黄粉虫油和蚕蛹油对框鲤幼鱼生长性能影响的比较 |
| 4.4.2 日粮中黑水虻油、黄粉虫油和蚕蛹油对鲤幼鱼脂代谢影响的比较 |
| 4.4.3 日粮中黑水虻油、黄粉虫油和蚕蛹油对框鲤幼鱼抗氧化及炎症反应影响的比较 |
| 4.5 结论 |
| 第五章 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼生长、健康及脂肪酸组成的影响 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 试验日粮 |
| 5.2.2 试验动物与饲养管理 |
| 5.2.3 采样方法 |
| 5.2.4 常规成分及脂肪酸的测定 |
| 5.2.5 组织与日粮脂肪酸相关性计算 |
| 5.2.6 血清生化指标的检测 |
| 5.2.7 脂肪和肝脏组织切片的制作 |
| 5.2.8 实时定量检测基因表达 |
| 5.2.9 数据分析 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼生长及生物学性状的影响 |
| 5.3.2 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼体成分的影响 |
| 5.3.3 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼脂肪酸组成的影响 |
| 5.3.4 组织和日粮脂肪酸的相关性 |
| 5.3.5 R值显示的日粮和组织脂肪酸的关系 |
| 5.3.6 组织脂肪酸组成的PCA分析 |
| 5.3.7 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼血清生化指标的影响 |
| 5.3.8 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼组织形态学的影响 |
| 5.3.9 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼基因表达的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼生长及生物学性状的影响 |
| 5.4.2 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼脂代谢的影响 |
| 5.4.3 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼血清生化的影响 |
| 5.4.4 日粮中黑水虻油在不同脂肪水平下对框鲤幼鱼脂肪酸组成的影响 |
| 5.5 结论 |
| 第六章 日粮中含n-3 HUFA的黑水虻油对框鲤幼鱼生长及健康状况的影响 |
| 6.1 日粮中含n-3 HUFA的黑水虻油代替豆油对框鲤幼鱼生长、健康状况的影响 |
| 6.1.1 前言 |
| 6.1.2 材料方法 |
| 6.1.3 结果 |
| 6.1.4 讨论 |
| 6.1.5 结论 |
| 6.2 相同添加水平下普通黑水虻油及含n-3 HUFA的黑水虻油对框鲤幼鱼生长及健康状况影响的比较 |
| 6.2.1 引言 |
| 6.2.2 材料方法 |
| 6.2.3 结果 |
| 6.2.4 讨论 |
| 6.2.5 结论 |
| 第七章 综合讨论 |
| 7.1 黑水虻油对框鲤的整体影响及机制分析 |
| 7.2 结论 |
| 7.3 创新性 |
| 7.4 下步计划 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 池塘工程化生态养殖模式概述 |
| 1.1 背景与发展 |
| 1.2 养殖技术要点 |
| 1.3 研究现状与存在问题 |
| 2 水产养殖密度研究概况 |
| 2.1 水产动物最适放养密度研究进展 |
| 2.2 养殖密度对鱼类生长的影响 |
| 2.3 养殖密度对鱼类血液生化和物质代谢的影响 |
| 2.4 养殖密度对鱼类氧化损伤的影响 |
| 2.5 养殖密度对鱼类免疫系统的影响 |
| 2.6 养殖密度与基因表达 |
| 3 本研究的目的与意义 |
| 第二章 养殖密度对池塘生态养殖大口黑鲈生长摄食的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验条件 |
| 1.2 试验设计与养殖管理 |
| 1.3 样本采集 |
| 1.4 指标测定 |
| 1.5 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 养殖密度对大口黑鲈幼鱼生长性能的影响 |
| 2.2 养殖密度对大口黑鲈体成分和形体指数的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 养殖密度对大口黑鲈幼鱼生长性能及摄食的影响 |
| 3.2 养殖密度对大口黑鲈幼鱼体成分的影响 |
| 第三章 养殖密度对池塘生态养殖大口黑鲈血清生化及免疫指标的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验条件 |
| 1.2 试验设计与养殖管理 |
| 1.3 样本采集 |
| 1.4 血清指标测定 |
| 1.5 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 养殖密度对大口黑鲈幼鱼血清生化指标的影响 |
| 2.2 养殖密度对大口黑鲈幼鱼免疫指标的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 养殖密度对大口黑鲈幼鱼血清皮质醇的影响 |
| 3.2 养殖密度对大口黑鲈幼鱼血清生化指标的影响 |
| 3.3 养殖密度对大口黑鲈幼鱼免疫指标的影响 |
| 第四章 养殖密度对池塘生态养殖大口黑鲈肝脏抗氧化能力及组织结构的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验条件 |
| 1.2 试验设计与饲养管理 |
| 1.3 样本采集 |
| 1.4 肝功能指标测定 |
| 1.5 抗氧化酶测定 |
| 1.6 肝脏切片与观察 |
| 1.7 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 养殖密度对大口黑鲈肝功能的影响 |
| 2.2 养殖密度对大口黑鲈肝脏抗氧化能力的影响 |
| 2.3 养殖密度对大口黑鲈肝脏组织结构的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 养殖密度对大口黑鲈肝功能的影响 |
| 3.2 养殖密度对大口黑鲈肝脏抗氧化能力的影响 |
| 3.3 养殖密度对大口黑鲈肝脏组织结构的影响 |
| 第五章 养殖密度对池塘生态养殖大口黑鲈消化能力的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验条件 |
| 1.2 试验设计与饲养管理 |
| 1.3 样本采集 |
| 1.4 消化酶活力测定 |
| 1.5 肠道切片与观察 |
| 1.6 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 养殖密度对大口黑鲈肠道消化酶的影响 |
| 2.2 养殖密度对大口黑鲈肠道组织结构的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 养殖密度对大口黑鲈肠道消化酶的影响 |
| 3.2 养殖密度对大口黑鲈肠道组织结构的影响 |
| 第六章 养殖密度对池塘生态养殖大口黑鲈生长及应激基因表达的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验条件 |
| 1.2 试验设计与饲养管理 |
| 1.3 样本采集 |
| 1.4 GH、IGF-I、HSP70与Cu-Zn SOD基因表达的测定 |
| 1.5 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 养殖密度对大口黑鲈GH和 IGF-I基因表达的影响 |
| 2.2 养殖密度对大口黑鲈肝脏HSP70、Cu-Zn SOD基因表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 养殖密度对大口黑鲈GH和 IGF-I基因表达的影响 |
| 3.2 养殖密度对大口黑鲈肝脏HSP70基因表达的影响 |
| 3.3 养殖密度对大口黑鲈肝脏Cu-Zn SOD基因表达的影响 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的文章 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 养殖水体中的氨氮研究 |
| 1.1.1 水体中氨氮来源 |
| 1.1.2 影响氨氮毒性的因素 |
| 1.1.3 氨氮对鱼类的毒性研究 |
| 1.2 鱼类呼吸代谢研究 |
| 1.2.1 耗氧率简介 |
| 1.2.2 影响鱼类呼吸代谢的因素 |
| 1.2.3 窒息点简介 |
| 1.3 抗氧化酶的研究 |
| 1.3.1 超氧化物歧化酶(SOD) |
| 1.3.2 总抗氧化能力(T-AOC) |
| 1.3.3 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) |
| 1.4 TOLL样受体(TLRs)和干扰素调节因子(IRFs)基因的研究 |
| 1.4.1 鱼类的TLRs研究 |
| 1.4.2 鱼类的IRFs研究 |
| 1.4.3 IRFs在 TOLL样受体信号通路中的作用 |
| 1.5 研究目的及意义 |
| 第二章 氨氮、温度和体重对大口黑鲈幼鱼耗氧率和窒息点的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.1.3 数据处理 |
| 2.2 结果与讨论 |
| 2.2.1 结果 |
| 2.2.2 讨论 |
| 2.3 本章小结 |
| 第三章 氨氮胁迫对大口黑鲈幼鱼T-SOD、T-AOC和 GSH-Px活性的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.1.3 数据处理 |
| 3.2 结果与讨论 |
| 3.2.1 结果 |
| 3.2.2 讨论 |
| 3.3 本章小结 |
| 第四章 大口黑鲈Toll样受体2基因克隆及氨氮胁迫后不同组织的表达 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验用鱼及氨氮胁迫感染实验 |
| 4.1.2 总RNA提取以及cDNA第一条链的合成 |
| 4.1.3 Ms-TLR2基因核心序列的克隆 |
| 4.1.4 Ms-TLR2 基因cDNA全长的克隆 |
| 4.1.5 Ms-TLR2 基因cDNA全长序列分析及生物信息学分析 |
| 4.1.6 Ms-TLR2基因的组织表达特异性分析 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.2.1 结果 |
| 4.2.2 讨论 |
| 4.3 本章小结 |
| 第五章 大口黑鲈干扰素调节因子4基因克隆及氨氮胁迫后不同组织的表达 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 实验用鱼及氨氮胁迫感染实验 |
| 5.1.2 总RNA提取以及cDNA第一条链的合成 |
| 5.1.3 Ms-IRF4基因核心序列的克隆 |
| 5.1.4 Ms-IRF4 基因cDNA全长的克隆 |
| 5.1.5 Ms-IRF4 基因cDNA全长序列分析及生物信息学分析 |
| 5.1.6 Ms-IRF4基因的组织表达特异性分析 |
| 5.2 结果与讨论 |
| 5.2.1 结果 |
| 5.2.2 讨论 |
| 5.3 本章小结 |
| 全文结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 |
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 彭泽鲫及其产业概况 |
| 1.2 饲料蛋白的作用及主要来源 |
| 1.3 鱼粉替代的国内外研究现状 |
| 1.3.1 植物蛋白替代鱼粉蛋白的国内外研究现状 |
| 1.3.2 动物蛋白替代鱼粉蛋白的国内外研究现状 |
| 1.3.3 新蛋白替代鱼粉蛋白的国内外研究现状 |
| 1.4 羽毛粉介绍 |
| 1.4.1 羽毛粉简介 |
| 1.4.2 羽毛粉的加工方法 |
| 1.5 羽毛粉替代鱼粉的必要性 |
| 1.6 羽毛粉替代鱼粉的可行性 |
| 1.7 羽毛粉替代鱼粉的国内外研究现状 |
| 1.8 总结与展望 |
| 第2章 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫生长、消化、鱼体成分和肉质的影响 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 饲料配方设计及饲料制作 |
| 2.2.2 试验鱼养殖 |
| 2.2.3 样品采集 |
| 2.2.4 样品测定 |
| 2.2.4.1 鱼体成分测定 |
| 2.2.4.2 中肠消化酶测定 |
| 2.2.4.3 鱼肉质的物理属性测定 |
| 2.2.5 计算及统计分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫生长的影响 |
| 2.3.2 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫体成分的影响 |
| 2.3.3 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫消化酶的影响 |
| 2.3.4 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫肉质的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫生长的影响 |
| 2.4.2 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫体成分的影响 |
| 2.4.3 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫消化的影响 |
| 2.4.4 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫肉质的影响 |
| 第3章 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫肝脏糖代谢、血清生理生化指标及肝脏、肠道形态的影响 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 饲料配方 |
| 3.2.2 试验鱼养殖 |
| 3.2.3 样品采集 |
| 3.2.4 样品测定 |
| 3.2.4.1 血清生理生化指标、肝脏糖代谢相关指标测定 |
| 3.2.4.2 肝脏和肠道形态的观察及肠道形态指标测定 |
| 3.2.5 计算及统计分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫肠道形态的影响 |
| 3.3.2 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫肝脏形态及糖代谢的影响 |
| 3.3.3 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫血清生理生化指标的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫肠道形态的影响 |
| 3.4.2 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫肝脏形态及糖代谢的影响 |
| 3.4.3 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫血清常规指标的影响 |
| 第4章 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫机体免疫及抗氧化的影响 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 饲料配方 |
| 4.2.2 试验鱼养殖 |
| 4.2.3 样品采集 |
| 4.2.4 样品测定 |
| 4.2.4.1 血清、中肠免疫和抗氧化相关生化指标测定 |
| 4.2.5 计算及统计分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫血清免疫及抗氧化指标的影响 |
| 4.3.2 全水解羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫肠道免疫及抗氧化指标的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 羽毛粉替代鱼粉对彭泽鲫血清、肠道免疫及抗氧化指标的影响 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 1.鱼油替代的研究进展 |
| 2.鱼粉替代的研究进展 |
| 2.1 其他蛋白源替代鱼粉的研究现状 |
| 2.2 其他蛋白源替代鱼粉存在的问题 |
| 2.3 解决鱼粉替代存在的问题的方法 |
| 3.代谢组学及脂质组学在水产动物上的应用 |
| 4.本论文的研究目的与意义 |
| 第一章 基于脂质组学分析饲料中不同脂肪源对大口黑鲈生长性能和肌肉脂质分子的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 试验饲料 |
| 1.2 试验对象及养殖管理 |
| 1.3 样品采集 |
| 1.4 测定指标与方法 |
| 1.5 统计分析 |
| 2.结果 |
| 2.1 生长性能及体成分分析 |
| 2.2 肌肉脂肪酸组成 |
| 2.3 肌肉脂质组学分析 |
| 3.讨论 |
| 3.1 生长性能和体成分分析 |
| 3.2 肌肉脂肪酸组成分析 |
| 3.3 肌肉脂质组学分析 |
| 4.小结 |
| 第二章 酶解豆粕替代鱼粉对大口黑鲈生长性能、消化酶活性、肝脏功能和代谢的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 试验饲料 |
| 1.2 试验对象及养殖 |
| 1.3 样品采集 |
| 1.4 测定指标与方法 |
| 1.5 指标的计算 |
| 1.6 数据统计与分析 |
| 2.结果 |
| 2.1 酶解豆粕替代鱼粉对大口黑鲈生长性能、饲料利用及体成分的影响 |
| 2.2 酶解豆粕替代鱼粉对大口黑鲈消化酶活性的影响 |
| 2.3 酶解豆粕替代鱼粉对大口黑鲈肝脏功能的影响 |
| 2.4 酶解豆粕替代鱼粉对大口黑鲈代谢的影响 |
| 3.讨论 |
| 3.1 酶解豆粕替代鱼粉对大口黑鲈生长性能、饲料利用及体成分的影响 |
| 3.2 替代鱼粉对大口黑鲈消化酶活性的影响 |
| 3.3 酶解豆粕替代鱼粉对大口黑鲈肝脏抗氧化指标的影响 |
| 3.4 酶解豆粕替代鱼粉对大口黑鲈代谢的影响 |
| 4.小结 |
| 第三章 基于代谢组学分析酶解豆粕及豆粕替代鱼粉对大口黑鲈代谢的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 试验饲料的配制 |
| 1.2 试验对象及养殖 |
| 1.3 样品采集 |
| 1.4 测定指标与方法 |
| 1.5 统计分析 |
| 2.结果 |
| 2.1 生长性能及肝脏抗氧化能力 |
| 2.2 代谢组学分析 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 第四章 酶解豆粕及豆粕替代鱼粉对大口黑鲈肠道微生物的影响 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 试验饲料的配制 |
| 1.2 试验对象及养殖 |
| 1.3 样品采集与试验方法 |
| 1.4 数据处理 |
| 2.结果 |
| 2.1 OTU聚类分析和大口黑鲈肠道菌群Alpha多样性分析 |
| 2.2 大口黑鲈肠道菌群物种组成分析 |
| 2.3 大口黑鲈肠道菌群属水平上的物种差异分析 |
| 2.4 样品的PCA与聚类分析 |
| 3.讨论 |
| 4.小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要符号表 |
| 第1章 引言 |
| 1.1 维生素C的化学性质 |
| 1.2 维生素C在鱼类体内合成概述 |
| 1.3 鱼类维生素C的研究进展 |
| 1.3.1 鱼类饲料中维生素C的添加形式 |
| 1.3.2 不同鱼类对维生素C的需要量 |
| 1.3.3 维生素C需要量的评价标准及方法 |
| 1.4 维生素C对鱼类的生理学作用 |
| 1.4.1 维生素C对鱼类体内羟化反应的作用 |
| 1.4.2 维生素C对鱼类抗氧化的影响 |
| 1.4.3 维生素C对鱼类抗应激的影响 |
| 1.4.4 维生素C对鱼类免疫力的影响 |
| 1.5 水温对鱼类的影响 |
| 1.6 研究目的与意义 |
| 1.7 研究内容与技术路线 |
| 1.7.1 研究内容 |
| 1.7.2 技术路线 |
| 第2章 高温环境下饲料维生素C对花鲈生长、体成分以及组织维生素C含量的影响 |
| 2.1 材料方法 |
| 2.1.1 试验饲料 |
| 2.1.2 动物饲养与管理 |
| 2.1.3 样品采集及分析测定方法 |
| 2.1.4 指标计算 |
| 2.1.5 数据统计与分析 |
| 2.2 试验结果 |
| 2.2.1 饲料维生素C对花鲈生长性能的影响 |
| 2.2.2 饲料维生素C对花鲈全体组成的影响 |
| 2.2.3 饲料维生素C对花鲈组织中抗坏血酸含量的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 饲料维生素C对花鲈生长性能的影响 |
| 2.3.2 饲料维生素C对花鲈全体组成的影响 |
| 2.3.3 饲料维生素C对花鲈组织中维生素C含量的影响 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 高温环境下饲料维生素C对花鲈免疫、抗氧化、抗应激能力以及肝脏组织形态学的影响 |
| 3.1 材料方法 |
| 3.1.1 样品采集 |
| 3.1.2 肝脏组织样品制备及测定方法 |
| 3.1.3 血清生化指标测定方法 |
| 3.1.4 肝脏组织H&E染色切片的制备 |
| 3.1.5 肝脏RNA提取及RT-q PCR荧光定量 |
| 3.1.6 数据统计与分析 |
| 3.2 试验结果 |
| 3.2.1 饲料维生素C对花鲈血清免疫指标的影响 |
| 3.2.2 饲料维生素C对花鲈肝脏抗氧化能力的影响 |
| 3.2.3 饲料维生素C对花鲈血清抗应激能力的影响 |
| 3.2.4 饲料维生素C对花鲈肝脏炎性基因表达的影响 |
| 3.2.5 饲料维生素C对花鲈肝脏抗氧化基因表达的影响 |
| 3.2.6 饲料维生素C对花鲈肝脏组织形态学的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 饲料维生素C对花鲈免疫力的影响 |
| 3.3.2 饲料维生素C对花鲈抗氧化能力的影响 |
| 3.3.3 饲料维生素C对花鲈抗应激能力的影响 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 饲料维生素C对急性降温后花鲈免疫、抗氧化以及抗应激能力的影响 |
| 4.1 材料方法 |
| 4.1.1 动物饲养与管理 |
| 4.1.2 样品采集与分析 |
| 4.1.3 数据统计与分析 |
| 4.2 试验结果 |
| 4.2.1 饲料维生素C对急性降温后花鲈血清免疫力的影响 |
| 4.2.2 饲料维生素C对急性降温后花鲈肝脏抗氧化能力的影响 |
| 4.2.3 饲料维生素C对急性降温后花鲈血清抗应激能力的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 饲料维生素C对急性降温后花鲈血清免疫力的影响 |
| 4.3.2 饲料维生素C对急性降温后花鲈肝脏抗氧化能力的影响 |
| 4.3.3 饲料维生素C对急性降温后花鲈血清抗应激能力的影响 |
| 4.4 小结 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 在学期间科研成果情况 |
| 致谢 |
| 项目资助 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 绪论 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 投喂在水产养殖过程中的研究现状 |
| 1.2.1 被动式投喂 |
| 1.2.1.1 基于行为反馈的投喂技术研究 |
| 1.2.1.2 基于非行为反馈的投喂技术研究 |
| 1.2.2 主动式投喂 |
| 1.3 投饲机的研究现状 |
| 1.3.1 国外研究现状及存在的问题 |
| 1.3.2 国内研究现状及存在的问题 |
| 1.4 课题研究意义与研究内容 |
| 1.4.1 研究目的和意义 |
| 1.4.2 研究对象和内容 |
| 1.4.3 技术路线 |
| 2 大口黑鲈摄食活跃程度量化方法的研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 试验对象 |
| 2.2.2 循环水养殖系统 |
| 2.2.3 试验设计 |
| 2.2.4 基于水体流场特征的大口黑鲈摄食活跃程度量化方法研究 |
| 2.2.4.1 水体反光区域分割 |
| 2.2.4.2 鱼群摄食活跃程度量化 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 鱼群摄食活跃程度量化效果分析 |
| 2.3.2 可行性分析 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 自适应投饲系统设计与分析 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 整机结构设计与工作原理 |
| 3.2.1 整体结构方案 |
| 3.2.2 技术参数 |
| 3.2.3 工作原理 |
| 3.3 关键部件设计与分析 |
| 3.3.1 投饲装置结构设计 |
| 3.3.1.1 结构设计 |
| 3.3.1.2 部件选型 |
| 3.3.2 轨道结构设计与运动方案设计 |
| 3.3.2.1 结构设计 |
| 3.3.2.2 运动方案设计 |
| 3.4 控制系统设计 |
| 3.4.1 控制系统元器件的选择 |
| 3.4.2 软件设计 |
| 3.4.2.1 概述 |
| 3.4.2.2 运行状态监控 |
| 3.4.2.3. 投饲参数设定和实时投饲趋势图 |
| 3.5 投饲机整机集成 |
| 3.6 小结 |
| 4 自适应投饲系统效果验证 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验对象与养殖管理 |
| 4.1.2 水质调节与检测方法 |
| 4.1.3 循环水养殖系统及装置 |
| 4.1.4 试验设计与取样 |
| 4.1.5 样品测定方法 |
| 4.1.5.1 胰蛋白酶测定 |
| 4.1.5.2 脂肪酶(LPS)测定 |
| 4.1.5.3 淀粉酶(AMS)测定(碘-淀粉比色法) |
| 4.1.5.4 超氧化物歧化酶(SOD)测定(羟胺法) |
| 4.1.5.5 丙二醛(MDA)测定 |
| 4.1.5.6 溶菌酶(LZM)测定 |
| 4.1.5.7 胃蛋白酶测定 |
| 4.1.5.8 皮质醇(Cortisol)测定 |
| 4.1.5.9 水分含量的测定(直接干燥法) |
| 4.1.5.10 肌肉蛋白浓度测定(考马斯亮蓝法) |
| 4.1.5.11 粗脂肪含量的测定(索氏抽提法) |
| 4.1.5.13 灰分的测定(灼烧称重法) |
| 4.1.6 统计分析 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.2.1 每日投饲水平与分级现象 |
| 4.2.2 生长性能评估 |
| 4.2.3 生化和免疫指标评估 |
| 4.2.4 生化成分评估 |
| 4.2.5 消化酶活力评估 |
| 4.3 小结 |
| 5 总结与展望 |
| 5.1 研究总结 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 在读读期间所获成果 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 1 大口黑鲈饲料的营养需求 |
| 1.1 蛋白质与氨基酸 |
| 1.2 脂肪与脂肪酸 |
| 1.3 碳水化合物 |
| 1.4 能量需求 |
| 1.5 维生素及矿物盐 |
| 2 大口黑鲈消化酶研究概况 |
| 2.1 大口黑鲈消化酶分布和酶促反应 |
| 2.2 饲料和饲料添加剂对大口黑鲈消化酶的影响 |
| 2.3 鱼类消化酶的研究及其应用 |
| 3 配合饲料对消化道结构的影响 |
| 4 问题与发展 |
| 第一章 摄食不同饲料对大口黑鲈消化道指数和淀粉酶活性的影响 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 试验材料 |
| 1.1.2 试验方法 |
| 1.1.3 酶活性适宜条件的研究 |
| 1.1.4 数据分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 不同饲料对大口黑鲈消化道指数的影响 |
| 1.2.2 不同饲料对大口黑鲈淀粉酶活性分布的影响 |
| 1.2.3 外界因子对消化酶的影响 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 投喂两种不同饲料后大口黑鲈消化道指数比较 |
| 1.3.2 投喂两种不同饲料后大口黑鲈淀粉酶活性分布比较 |
| 1.3.3 温度对两种饲料饲喂的大口黑鲈淀粉酶活性影响 |
| 1.3.4 pH对两种饲料饲喂的大口黑鲈淀粉酶活性影响 |
| 1.4 小结 |
| 第二章 摄食不同饲料对大口黑鲈肠道形态结构的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.1.3 数据分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.0 冰鲜鱼与配合饲料对大口黑鲈肠黏膜厚度的影响 |
| 2.2.1 冰鲜鱼与配合饲料对大口黑鲈肠绒毛高度的影响 |
| 2.2.2 冰鲜鱼与配合饲料对大口黑鲈肠隐窝深度的影响 |
| 2.2.3 冰鲜鱼与配合饲料对大口黑鲈肠肌层厚度的影响 |
| 2.2.4 冰鲜鱼与配合饲料对大口黑鲈肠V/C(绒毛高度/隐窝深度)值的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 摄食不同饲料的大口黑鲈对5种常见饲料原料体外消化率的研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验鱼 |
| 3.1.2 饲料原料 |
| 3.1.3 粗酶液的提取 |
| 3.1.4 消化实验 |
| 3.1.5 数据处理 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.2.1 不同饲料饲喂的大口黑鲈消化酶对饲料原料的体外消化率 |
| 3.2.2 不同温度下大口黑鲈消化器官对饲料原料的体外消化率 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 不同饲料饲喂的大口黑鲈对饲料原料体外消化率的影响 |
| 3.3.2 不同温度下大口黑鲈消化器官对饲料原料体外消化率的影响 |
| 3.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录1 缩略词表 |
| 附录2 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 罗氏沼虾的生物学特性 |
| 1.2.1 形态特征 |
| 1.2.2 生活习性及生长发育 |
| 1.3 盐度对鱼虾生长发育的影响 |
| 1.4 盐度对鱼虾行为的影响 |
| 1.5 盐度对鱼虾肉质的影响 |
| 1.6 罗氏沼虾研究现状 |
| 第二章 低盐度胁迫对罗氏沼虾行为的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验方法 |
| 2.3 数据处理 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 行为描述 |
| 2.4.2 不同盐度条件下对罗氏沼虾寻食时间的影响 |
| 2.4.3 不同盐度条件下对罗氏沼虾摄食时间的影响 |
| 2.4.4 不同盐度条件下对罗氏沼虾摄食次数的影响 |
| 2.4.5 不同盐度条件下对罗氏沼虾运动时间的影响 |
| 2.5 讨论 |
| 第三章 低盐度胁迫对罗氏沼虾生长状况和存活率的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.4 数据分析 |
| 3.5 结果 |
| 3.5.1 低盐度对罗氏沼虾生长的影响 |
| 3.5.2 低盐度对罗氏沼虾存活率的影响 |
| 3.6 讨论 |
| 3.6.1 盐度对罗氏沼虾生长发育的影响 |
| 3.6.2 盐度对罗氏沼虾存活的影响 |
| 第四章 低盐度胁迫对罗氏沼虾肉质的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.4 数据处理 |
| 4.5 结果 |
| 4.5.1 盐度对罗氏沼虾氨基酸组成和含量的影响 |
| 4.5.2 盐度对罗氏沼虾脂肪酸组成及含量的影响 |
| 4.6 讨论 |
| 4.6.1 氨基酸组成及营养评价 |
| 4.6.2 脂肪酸组成及营养评价 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.1.1 低盐度养殖条件对罗氏沼虾行为的影响 |
| 5.1.2 低盐度养殖条件对罗氏沼虾生长状况和存活率的影响 |
| 5.1.3 低盐度养殖条件对罗氏沼虾肉质的影响 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词对照 |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 鱼类脂肪过量蓄积的诱因 |
| 1.1 饲料营养素 |
| 1.2 抗脂肪肝物质 |
| 1.3 其他 |
| 2 脂肪蓄积和脂质代谢关键因子 |
| 2.1 过氧化物酶体增殖物激活受体α |
| 2.2 过氧化物酶体增殖物激活受体γ |
| 2.3 脂蛋白脂肪酶 |
| 2.4 脂肪酸合成酶 |
| 3 鱼类脂肪的蓄积和调控 |
| 3.1 脂肪的合成 |
| 3.2 脂肪分解和转运 |
| 3.3 鱼类脂肪蓄积和代谢的调控 |
| 4 本文研究目的和意义 |
| 第二章 饲料脂肪水平对梭鱼生长、血液生化和肝脏抗氧化性能的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验鱼 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 试验主要仪器和试剂 |
| 1.4 样品采集 |
| 1.5 测定方法 |
| 1.6 数据统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 饲料脂肪水平对梭鱼生产性能的影响 |
| 2.2 饲料脂肪水平对梭鱼血浆生化指标的影响 |
| 2.3 饲料脂肪水平对梭鱼肝脏抗氧化指标的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第三章 饲料脂肪水平对梭鱼形体指标、体脂蓄积和脂肪酸组成的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验鱼 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 试验主要仪器和试剂 |
| 1.4 样品采集 |
| 1.5 测定指标 |
| 1.6 数据统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 饲料脂肪水平对梭鱼形体指标的影响 |
| 2.2 饲料脂肪水平对梭鱼组织脂肪蓄积量的影响 |
| 2.3 饲料脂肪水平对梭鱼组织脂肪酸组成的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第四章 梭鱼部分脂代谢相关基因的克隆和表达分析 |
| 第一节 PPARα基因全长cDNA克隆及组织表达分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验用鱼 |
| 1.2 试验试剂及仪器 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.4 序列分析 |
| 1.5 数据统计与分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 梭鱼PPARα基因全长cDNA克隆与序列分析 |
| 2.2 梭鱼PPARα基因mRNA组织表达 |
| 3 讨论 |
| 4 本节小结 |
| 第二节 PPARγ基因全长cDNA克隆及组织表达分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验用鱼 |
| 1.2 试验试剂及仪器 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.4 序列分析 |
| 1.5 数据统计与分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 梭鱼PPARγ基因全长cDNA克隆与序列分析 |
| 2.2 梭鱼PPARγ基因mRNA组织表达 |
| 3 讨论 |
| 4 本节小结 |
| 第三节 LPL基因全长cDNA克隆及组织表达分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验用鱼 |
| 1.2 试验试剂及仪器 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.4 序列分析 |
| 1.5 数据统计与分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 梭鱼LPL基因全长cDNA克隆与序列分析 |
| 2.2 梭鱼LPL基因mRNA组织表达分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本节小结 |
| 第四节 FAS基因部分cDNA克隆及组织表达分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验用鱼 |
| 1.2 试验试剂及仪器 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.4 序列分析 |
| 1.5 数据统计与分析 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 梭鱼FAS基因的克隆与序列分析 |
| 2.2 梭鱼FAS基因mRNA组织表达 |
| 3 讨论 |
| 4 本节小结 |
| 第五章 饲料脂肪水平对梭鱼脂代谢相关基因表达和酶活性的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验鱼 |
| 1.2 试验试剂及仪器 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.4 数据统计与分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 饲料脂肪水平对梭鱼PPARα基因mRNA表达水平的影响 |
| 2.2 饲料脂肪水平对梭鱼PPARγ基因mRNA表达水平的影响 |
| 2.3 饲料脂肪水平对梭鱼LPL基因mRNA表达水平和酶活性的影响 |
| 2.4 饲料脂肪水平对梭鱼FAS基因mRNA表达水平和酶活性的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第六章 饲料蛋白水平对梭鱼体脂蓄积、肝脏抗氧化性能、脂代谢基因表达和酶活的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验鱼 |
| 1.2 试验设计 |
| 1.3 试验主要仪器和试剂 |
| 1.4 样品采集 |
| 1.5 测定方法 |
| 1.6 数据统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 饲料蛋白水平对梭鱼组织脂肪蓄积的影响 |
| 2.2 饲料蛋白水平对梭鱼肝脏抗氧化指标的影响 |
| 2.3 饲料蛋白水平对梭鱼组织基因表达和酶活性的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 本文创新点及有待进一步研究的问题 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表的论文情况 |