浅谈影响胆碱酯酶回收率的几个因素

一、浅谈影响胆碱酯酶回升的几种因素（论文文献综述）

张敏芬^[1]（2014）在《参芪方治疗慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生的临床研究》文中研究表明目的：评价参芪方治疗中、重度慢性萎缩性胃炎伴中、重度肠上皮化生的临床疗效及安全性。为中医药治疗中、重度慢性萎缩性胃炎伴中、重度肠上皮化生提供理论依据。方法：收集田耀洲主任门诊的中、重度慢性萎缩性胃炎伴中、重度肠上皮化生患者,可伴有上皮内瘤变,经诊断标准、纳入标准及排除标准筛选,入选病人共60例。予口服中药参芪方治疗,水煎服,每日1剂早晚分服,每次200ml。3个月为1疗程,服药2个疗程。观察治疗前后患者临床症状、胃粘膜萎缩、肠上皮化生、上皮内瘤变等变化,将获得的资料进行统计分析。结果：治疗后患者临床症状显着改善,治疗前后症状积分比较有显着性差异（P<0.05）,临床证候总有效率93.33%。胃粘膜萎缩、肠上皮化生改善有显着差异（P<0.05）,上皮内瘤改善无明显统计学差异,病理改善情况总有效率为68.33%。治疗过程中无明显不良事件及安全性问题。结论：参芪方治疗中、重度慢性萎缩性胃炎伴中、重度肠上皮化生具有良好的疗效,能改善临床症状及病理表现,能阻断胃癌前病变状态的发展,是治疗本病安全、有效的方剂。

戴凯旋^[2]（2012）在《从心肝论治冠心病室性早搏的临床研究》文中研究表明目的：探讨从肝和情志方面出发在冠心病室性早搏治疗中所起的作用。方法：通过文献研究和临床观察相结合的方法。1.文献研究：首先，从中医学方面，对历代文献进行梳理，寻找肝和情志对“心悸”“惊悸”致病的机理和论据；其次，查阅现代医学研究心理因素诱发冠心病室性早搏的相关资料，以及现阶段现代医学的治疗方法。2.临床研究：方法：将60例中年冠心病室性早搏患者随机分为治疗组30例，予经验方剂治疗，对照组30例，予可达龙口服，疗程为60天，观察治疗前后临床症状和实验室检查指标的变化。结果：经临床观察，治疗组患者的临床症状明显改善，其疗效与对照组有显着性差异（P<0.05）。早搏次数两组治疗前后均有明显减少，组间比较有显着性差异（P<0.05）。观察组患者的室性早搏次数、心电图QT离散度、心电图ST-T等指标的改善明显优于对照组。结论：观察组从整体调控入手，强调情志因素在发病致病中的重要性，治疗冠心病室性早搏，显着改善了患者的临床症状和动态心电图表现，减少了室性早搏发生次数，降低了室性早搏的严重程度，同时兼有改善心肌缺血的作用。此研究肯定了从心肝理论出发治疗冠心病室性早搏的临床疗效，丰富了中医药治疗冠心病室性早搏的理论内容。

王俊清^[3]（2009）在《枸杞木虱啮小蜂Tamarixa Lyciumi Yang生物学特性的研究》文中进行了进一步梳理枸杞木虱Paratrioza sinica Yang & Li是枸杞的重要害虫,给我国枸杞产业造成了巨大的损失。为了给枸杞木虱的生物防治工作提供科学依据,作者对枸杞木虱的一种重要的专寄生天敌—枸杞木虱啮小蜂Tamarixa lyciumi Yang（膜翅目Hymenoptera:姬小蜂科Eulophidae）的形态、行为、发育、存活、繁殖等生物学特性进行了较为系统的研究。主要研究结果如下:1.形态观察:成蜂体黑色,略带金属光泽,雌蜂个体明显大于雄蜂。卵长椭圆形,光滑,一端稍膨大。2.枸杞木虱啮小蜂在内蒙古西部地区1a发生5～6代,7月末8月初寄生率达到最高。3.枸杞木虱啮小蜂卵多产于枸杞木虱胸足间,产1粒卵需40～80s。羽化时间多集中在清晨6:00～8:00和下午18:00～20:00点间,雄性较雌性早羽化2～3d。雌雄虫均可多次交尾,交尾时间一般30～40s,交尾后便可产卵。成虫趋光性强,在黑暗状态下,行动迟缓,也不交配产卵。4.枸杞木虱啮小蜂大多进行两性生殖,少数雌蜂也能进行孤雌生殖,孤雌生殖所羽化的小蜂均为雄性。枸杞木虱啮小蜂的自然性比为1.51:12.28:l,平均1.80:1。5.第13d蜂龄的枸杞木虱啮小蜂的寄生能力较高。该蜂最喜寄生4龄枸杞木虱若虫,其次为5龄和3龄若虫。一头蜂一般一次只产一粒卵,寄生一头寄主,对已被寄生的寄主具有明显的辨别能力。在试验条件下,枸杞木虱啮小蜂不能在沙枣木虱和柽柳木虱等其它寄主上产卵寄生,只有枸杞木虱才能被枸杞木虱啮小蜂雌蜂所寄生。6.温度和补充营养对枸杞木虱啮小蜂成蜂寿命有显着影响。在1636℃间[0],分别以15%蜂蜜水溶液、15%蔗糖溶液、百事可乐、不喂食为营养源时,单头饲养未交配的枸杞木虱啮小蜂成蜂[0],随温度的升高,成蜂的寿命逐渐缩短,补充各种营养的成蜂寿命均在36℃时最短;在相同温度条件下补充营养能延长成虫寿命,取食15%蜂蜜水的寿命最长,不补充营养寿命最短。7.营养条件对枸杞木虱啮小蜂的繁殖有显着的影响。喂食20%蜂蜜水时其繁殖力最高,各指标均分别为:雌蜂寿命7.56d、雄蜂3.92 d,产卵期为7.16d、每雌蜂日均产卵5.65粒、一生总产卵量为40.24粒、羽化子蜂总数为35.68头;其次为20%蔗糖溶液,补充清水时只可延长枸杞木虱啮小蜂寿命而不能提高其繁殖力。8.通过室内实验发现,温度对枸杞木虱啮小蜂的发育、繁殖均有显着的影响。枸杞木虱啮小蜂卵、幼虫、蛹的发育起点温度分别为8.06℃、9.16℃和7.65℃,有效积温则分别为20.53、69.37和127.49日度;从卵发育到成虫需要8.22℃以上的有效积温217.21日度。成虫寿命与温度之间呈直线负相关,其关系式为:雌蜂y = -0.44x + 17.904（R2 = 0.9571）,雄蜂y = -0.1864x + 7.82（R2 = 0.9136）;成虫的平均总产卵量y与温度x呈抛物线相关,其关系式为:y = -0.2523x2 + 12.059x– 105.27（R2 = 0.9773）。枸杞木虱啮小蜂在温度为23.45℃时,单雌总产卵量达到理论最大值。9. 5℃下冷藏枸杞木虱啮小蜂蛹15天以内,不影响其正常羽化、繁殖。冷藏15d以上时羽化率显着降低;冷藏30d内对雌雄蜂寿命无明显影响,而且雌蜂寄生能力也没有受到显着影响。10.分别研究了枸杞木虱啮小蜂在25℃下对不同龄期枸杞木虱若虫及对4龄枸杞木虱若虫在不同温度下的寄生功能反应。结果表明,其功能反应均呈HollingⅡ型,且功能反应受到寄主龄期、温度、寄主密度和寄生物密度的影响。在相同寄主龄期下,枸杞木虱啮小蜂的寄生数量随寄主密度的增大而增加,不同龄期的寄生数量在4龄时最大,5龄时次之,3龄时最少;在同一温度下,寄生数量随寄主密度的增大而增加,在15℃～25℃范围内,随着温度的升高,被寄生的枸杞木虱数量增加,但在25℃～35℃呈相反的趋势。枸杞木虱啮小蜂的寄生功能反应有较强的种内干扰作用,随自身密度（P）的增加,枸杞木虱啮小蜂对枸杞木虱4龄若虫的发现域（a）随之降低,枸杞木虱啮小蜂自身密度对其寄生能力的影响可采用Hassell-varley（1969）模型a = QP -m进行模拟,其关系式为a = 0.1222P -0.4641（25℃,4龄枸杞木虱）。上述枸杞木虱啮小蜂寄生生物学和繁殖生物学的研究结果,为以后的大量繁殖和进一步研究利用提供了基本的理论依据,因而具有一定的理论意义和实践价值。

金鑫^[4]（2009）在《心肺转流对靶控输注丙泊酚血药浓度的影响》文中进行了进一步梳理研究背景近十几年来,随着心外科技术和心肺转流（CPB）心肌保护技术的提高,麻醉药物和理念的更新,“快车道”心脏麻醉成为发展趋势。遂自1996年,Barvais[1]等尝试性将非心脏病人群丙泊酚药代动力学参数用于冠状动脉搭桥术后,靶控输注技术逐渐在心外科手术广泛应用。虽然该给药方法是以药代动力学与药效动力学为基础,以血浆或效应室的药物浓度为指标由计算机控制给药输注速率的变化,在绝大部分外科病人能够按临床需要调节麻醉,镇静和镇痛的目的一种静脉给药。同时丙泊酚作为一种起效快,苏醒迅速的新型静脉全麻用药对循环影响短暂和易于调节等优点,适用于该给药方法及各种类型的手术麻醉。它们的结合是麻醉史上一项重大的革命。但该系统的缺陷为其显示的血浆靶浓度是根据药代动力学原理自动完成预期的静脉给药。由于心肺转流期间存在很多干扰因素,包括血液稀释、低温、器官灌注等,所以它并不能满足心肺转流时对麻醉的要求,而前两种因素对其影响尤为明显,遂本实验选取心肺转流中血液稀释及低温因素对丙泊酚TCI血药浓度的影响行进一步探讨,分析此期间丙泊酚血药浓度的变化规律,为临床应用提供依据。目的在特定双频指数（BIS）指导下,以丙泊酚为麻醉药物,对健康人群丙泊酚靶控输注参数在心脏瓣膜手术中的可行性进行评价,并试图分析此期间丙泊酚血药浓度的变化规律,为临床应用提供依据。方法实验分为三部分1. HPLC条件为:Nucleodur C18反相柱（250 mm×4. 6 mm,5μm）。流动相:乙腈:水:三氟乙酸（ 65: 35: 0. 1）,流速1. 4 m1/min。柱温:30℃,荧光激发波长276 nm.,发射波长310 nm。2.体外循环血液稀释对靶控输注丙泊酚血药浓度的影响选择14例16-60岁ASAⅡ～Ⅳ级择期行双瓣置换术患者,诱导后持续静脉靶控输注丙泊酚,靶浓度（Cp）2μg/ml,人工心肺开机后按20～30 ml/kg比率输注4%琥珀酰明胶实施血液稀释。于血液稀释前（T0）、血液稀释后3 min（T1）、8 min（T2）、15 min（T3）采集动脉血2 ml,采用高效液相色谱——荧光法测定丙泊酚血药浓度（Cm）,并于相同时相点监测血红蛋白（Hb）、血球压积（Hct）及谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、血肌酐（Cr）及血尿素氮（Bun）。应用SPSS12.0统计软件包进行统计学处理。3.体外循环低温对靶控输注丙泊酚血药浓度的影响选择13例16～60岁ASAⅡ—Ⅳ级择期行双瓣置换术患者,诱导后持续静脉靶控输注丙泊酚,靶浓度（Cp）2μg/ml,于肝素化后CPB15min开始使用变温水箱分别通过变温毯和人工心肺行体表和血液降温,同时行患者头部冰袋辅助降温以及降低手术间温度。使脑温、直肠温及核心体温在转机后20 min左右降至32℃。于肛温36℃、34℃、32℃、30℃及28℃时采集2ml桡动脉血,之后采用高效液相色谱——荧光法测定所采集标本的药物浓度（Cm）,并测定当时的血红蛋白（Hb）、血球压积（Hct）及谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、血肌酐（Cr）及血尿素氮（Bun）。术中持续监测HR、SPO2、PETCO2、MAP、CVP、鼻咽温、肛温及脑电双频指数（BIS）,并将BIS值维持在45～55（从诱导到实验结束）。计量资料以均数±标准差x±s表示,采样点血药浓度前后比较采用配对t检验或单因素方差分析。结果在选定的色谱条件下,丙泊酚被测物峰形良好,无杂质峰干扰。血清中丙泊酚回收率为其回收率为95.80%～104.92%,其日内、日间RSD均小于10%,血清丙泊酚浓度在0.1～10.0μg/ml范围内相关性良好,R2=0.9999。患者体内丙泊酚最低检测浓度为0.1μg/ml。T1、T2和T3的Hb、Hct较T0时明显降低（P﹤0.01）,并且以上各时点Cm及Cm/Cp均明显低于T0;而血液稀释后各时点之间血药浓度比较无统计学意义。稀释前后AST、ALT、Cr及BUN均无统计学差异。降温后的Hb、Hct比较无统计学差异（P﹥0.05）;随着肛温的降低,Cm及Cm/Cp均开始升高;而此期间的AST、ALT、Cr及BUN均在正常范围之内,结论本实验建立的微量血样监测血药浓度的方法特异性强,日内日间变异小,线性范围广,简便准确,可作为监测丙泊酚血药浓度的常规方法。CPB后的急性血液稀释导致丙泊酚血药浓度明显下降。稀释前实测血药浓度（Cm）高于TCI系统机设浓度（Cp）,而稀释后的Cm均低于Cp。为达到理想靶浓度,血液稀释后应该按比例加大丙泊酚的用量。CPB后的低温通过降低肝肾的代谢率而导致丙泊酚Cm/Cp明显上升,为防止麻醉过深,应该按比例下调丙泊酚TCI时的靶浓度。

蒋春晓^[5]（2008）在《重组人Elafin对大鼠急性肝损伤作用的研究》文中研究说明本论文采用动物实验学、分子生物学,免疫学、病理学相关方法和技术,建立四氯化碳和D-氨基半乳糖大鼠急性肝损伤模型,给予重组人弹性蛋白酶特异性抑制因子（Elafin）进行干预。通过检测急性肝损伤大鼠血清生化和肝组织病理学的变化,观察重组人Elafin对急性肝损伤大鼠的作用,并对其可能的作用机制进行探讨。其可能的机制在于,炎性反应是机体对损伤的一种保护性反应,以破坏、稀释并清除损伤源为目的,与此同时也会引起不同程度的自身损伤。中性粒细胞弹性蛋白酶被认为是炎性反应的主要终效应因子,Elafin是内源性的弹性蛋白酶抑制剂,为中性粒细胞弹性蛋白酶、胰弹性蛋白酶、蛋白酶3等丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂。具有抗蛋白酶活性、抗炎活性和直接的抗微生物活性等重要作用。本论文的创新之处在于,首次证实了Elafin对实验性大鼠急性肝损伤的治疗作用并对其作用机制进行探讨。国内外尚未见Elafin对大鼠急性肝损伤作用的相关报道。本研究的意义在于,肝损伤是严重危害人类健康的各种肝脏疾病的病变结果,其所涉及的病理因素比较广泛,探讨肝损伤的发生因素及病理机制,对指导临床治疗以及预防肝损伤的发生均有积极意义。

安永^[6]（2007）在《大鼠体外循环后肝细胞损害及生长激素上调STAT5信号通路的保护作用和机制研究》文中研究指明背景与目的体外循环（CPB）对机体是一种全身性的强刺激,能引起机体产生应激反应。应激引起的过度的炎症反应造成组织损害、多器官功能障碍综合征（MODS）,是心脏外科患者术后死亡的主要原因之一。因此,CPB过程中器官保护一直是心血管外科临床与基础研究的重点。一直以来,人们对CPB所致的心、脑、肺、肾等器官的研究较多,也比较深入,而对肝脏功能的影响及其机制却缺乏深入系统研究。我们知道,肝脏是应激反应的中心器官和重要靶器官之一。临床研究表明,CPB术后不仅存在较高比例肝酶谱升高,而且存在着混合性的高胆红素血症（23.2-35.1%）,肝功能障碍,甚至肝功能衰竭。恶性肝损害一旦发生,治疗棘手,往往导致MODS,预后差,病死率高。而慢性肝病或肝硬变患者CPB术后死亡率更高达25-31%,并发症发生率更高达58-66%。因此肝功能障碍是CPB术后的严重并发症。我国是个肝炎大国,很多心脏病病人本身就是肝炎或肝病患者,而心脏病本身也可以导致急性或慢性肝损害,此类患者心脏手术的时机选择以及适应症也是困绕心外科医生的问题,有的患者因此而丧失治疗的机会。因此研究CPB过程中肝细胞损伤的发生机制及探讨相应的保护措施,对增强手术耐受性,促进术后肝功能恢复具有重要意义。临床研究表明,CPB术后高胆红素血症或黄疸是由结合和非结合胆红素共同升高所致。这说明并非单纯由于溶血导致,同时也存在着肝细胞转运胆红素的功能障碍。而胆红素的转运则完全依赖于位于肝细胞膜面的肝胆膜转运蛋白（HMTs）,也称胆红素转运子。HMTs基因表达异常有可能导致肝细胞胆汁淤积和肝细胞受损,而这类基因表达的信号调控机制尚未完全阐明。而CPB时存在胆红素代谢异常,其分子机制尚未明确,我们推测可能与HMTs基因表达的改变有关,此类研究尚未见文献报道。综合文献报道,在大多数HMTs启动子区域含有类干扰素活化序列,相应的转录因子与该序列结合后可启动HMTs的转录。信号转导转录活化因子5（STAT5）是胞浆信号蛋白,活化后可直接转移至胞核内,作为转录因子与靶基因启动子区域的类干扰素活化序列结合,引起靶基因的活化。因此我们推测STAT5途径可能是调控HMTs基因表达的途径之一。STAT5信号途径具有广泛的生物学效应,可促进合成代谢、刺激细胞再生、抗凋亡、调节急性期反应、稳定肠粘膜屏障等功能。已知生长激素（GH）—生长激素受体（GHR）轴是引起STAT5活化的最主要的路径。GHR主要位于肝细胞,当GH分泌不足和GHR表达下降时,STAT5的活性亦随之降低。因此给予外源性GH上调STAT5活性调控HMTs表达具有理论上的可行性。本研究可丰富对肝细胞胆盐转运信号调控的分子机制的认识。由于CPB是一个可以预期的应激反应,我们完全可以提前采取措施,在非应激条件下建立机体对围手术期损伤机制的耐受性,激发机体的自然防御机制减轻炎症反应和器官损伤,是很有前景的途径。但是通过GH预处理保护CPB后肝细胞功能的作用及机制研究未见报道。深入探讨这一途径的效果和可行性对于改善CPB后全身炎症反应,减少并发症具有重要临床意义。方法1.利用显微外科器械,采用微型化CPB环路设备,经右颈静脉腔房引流、左颈动脉灌注方法建立大鼠闭胸式CPB 2h模型,对CPB的大鼠进行分组,常规CPB组和GH干预CPB组（简称GH组,术前3天开始肌注GH 2.5mg/kg,1/日,预充液中加入2.5mg/kg）,同时设立假手术组（SH组）和正常对照组（N组）。2.观察CPB后肝细胞损害与全身炎症反应的关系:检测指标包括一般肝功能检测;血清肝脏结构蛋白:前白蛋白（PA）、转铁蛋白（Tf）;血清急性期反应蛋白:C反应蛋白（CRP）、血清淀粉样蛋白A（SAA）;血清致炎因子:TNF-α、IL-1β、IL-6等的测定;血清GH、GH结合蛋白（GHBP）改变;肝脏改变的研究（肝细胞凋亡、再生情况及病理组织学改变等）。3.观察CPB后肝细胞胆盐转运功能的改变:利用免疫荧光组化、RT-PCR、Western blot等方法从细胞和分子水平测定肝细胞HMTs （NTCP,BSEP、FXR）的表达情况;4.观察CPB对肝细胞STAT5活性的影响及GH-GHR途径上调STAT5调控HMTs的机制:利用免疫荧光组化、原位杂交、RT-PCR、Western blot等方法从细胞和分子水平测定肝细胞GHR、STAT5的表达情况;观察STAT5活性改变对肝细胞HMTs的表达及功能的影响。5.统计学方法:所有数据采用均数±标准差表示。统计学处理采用SPSS11.0软件行t检验及ANOVA。结果1.通过微型化CPB环路设备,经右颈静脉腔房引流、左颈动脉灌注方法成功建立建立大鼠CPB模型,转流过程中血流动力学、血气分析等指标均在正常范围,术后可以长期生存。2. CPB后早期存在着明显的肝细胞损害,以CPB后3h最为明显;表现为肝功能受损,ALT、TB增高;血清肝脏结构蛋白浓度降低;血清急性期反应蛋白浓度增加,肝细胞凋亡增加,炎性细胞浸润。血清GHBP降低,血清致炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6升高。直线回归分析表明肝损害与炎症反应及GHBP水平高度相关。3.大鼠CPB后存在肝细胞胆盐转运功能障碍,肝胆膜转运蛋白HMTs对CPB高度敏感,以CPB后3h最为明显;表现为CPB早期各种HMTs的mRNA及蛋白表达水平呈现不同程度的下降和不均一;核胆酸受体FXR mRNA及蛋白表达水平亦明显受抑。4. CPB术后早期存在着肝细胞GHR mRNA及蛋白表达水平不同程度的下降;STAT5 mRNA、蛋白表达水平及活性水平也下降;以CPB后3h最为明显;STAT5活性下降与GHR抵抗有关。而且,肝损害与STAT5活性下降及GHR抵抗均相关。5. STAT5上调途径对CPB后肝细胞的影响。GH预处理可上调STAT5表达活性,直接调控HMTs的表达,提高核胆酸受体FXR的活性,促进胆盐转运,降低高胆红素血症对肝细胞的损害;同时STAT5的上调可降低肝脏炎症反应,增加肝脏结构蛋白,降低肝脏急性期反应,抑制凋亡,促进再生,改善肝脏功能。结论1.我们成功建立了大鼠闭胸式CPB模型。利用显微外科器械,采用微型化CPB环路设备,经右颈静脉腔房引流、左颈动脉灌注方法建立大鼠闭胸式CPB模型比较符合生理,具有较好的稳定性和可靠性,是进行CPB术后肝脏病理生理改变研究的理想动物模型。2. CPB可导致明显的肝细胞损害。表现为（1）肝功能受损,ALT、TB增高;血清肝脏结构蛋白浓度降低;血清急性期反应蛋白浓度增加,肝细胞凋亡增加,炎性细胞浸润等。（2） CPB导致肝细胞胆盐转运存在障碍。表现为CPB早期各种HMTs的mRNA及蛋白表达水平呈现不同程度的下降和不均一;核胆酸受体FXR mRNA及蛋白表达水平明显受抑。肝细胞NTCP,BSEP等HMTs和核胆酸受体FXR的表达程度的下降和不均一是CPB术后肝细胞损害的重要原因之一。肝细胞内胆红素蓄积、过度炎性反应和急性期反应（APR）、FXR表达受抑和GH抵抗导致的STAT5活性下调共同介导了HMTs的表达的不均一;3. GH预处理有望成为预防和减轻CPB过程中肝细胞损害及SIRS的新策略。GH预处理上调STAT5途径对CPB后肝细胞具有明显的保护作用。其可能的机制为（1）直接调控HMTs的表达,促进胆盐转运,降低高胆红素血症对肝细胞的损害;（2）提高核胆酸受体FXR的活性,从而调控HMTs的表达;（3）降低肝脏炎症反应和APR,直接减轻对肝细胞的炎性损害,间接解除炎性反应对HMTs的抑制;（4）增加肝脏结构蛋白合成,抑制肝细胞凋亡,促进肝细胞再生。

李旭平^[7]（2007）在《蛋白酶体抑制引起多巴胺神经元变性机制和保护策略的研究》文中研究指明目的:帕金森病（Parkinson’s disease,PD）的病理特征之一是中脑黑质致密部多巴胺（Dopamine, DA）神经元进行性丢失。其机制尚未明了,且该病缺乏根本性治疗手段。近来认为泛素-蛋白酶体系统（Ubiquitin proteasome system,UPS）障碍在PD发病中起重要作用,然此障碍引起DA神经元变性的机制,以及可能的保护策略尚不清楚。为此,本实验旨在探讨细胞内游离钙平衡紊乱、c-Jun氨基端激酶（c-Jun NH2 terminal kinases,JNK）激活和胱冬肽酶-3介导的内源性凋亡通路、内质网应激（Endoplasmic reticulum stress,ERS）在蛋白酶体抑制引起DA神经元变性中的作用,以及胶质源性神经营养因子（Glial derived neurotrophic factor, GDNF）对其损伤DA神经元的可能保护机制。方法:我们分别用蛋白酶体抑制剂lactacystin处理体外培养的DA神经元和大鼠脑内立体定位注射的方法,建立UPS障碍的细胞模型和动物模型,分三部分进行研究。第一部分,在原代培养的腹侧中脑（Ventral mesencephalon, VM）神经元模型上,观察lactacystin对DA神经元游离钙水平和细胞存活的影响,以及L-型电压依赖钙通道的可能作用,以探讨钙平衡紊乱与蛋白酶体抑制引起DA神经元损伤的关系。第二部分,在细胞和动物模型上,观察JNK激活对胱冬肽酶-3介导的内源性凋亡和大鼠黑质DA神经系统损伤,来验证JNK通路在蛋白酶体抑制引起DA神经元变性中的作用。第三部分,在VM神经元模型上,观察GDNF对DA神经元损伤、ERS、胱冬肽酶-3激活和α-突触共核素阳性包涵体形成的影响,来评价GDNF保护蛋白酶体抑制引起DA神经元损伤的作用及其可能的机制。结果:我们发现,（1） lactacystin处理使钙紊乱相关基因表达增高、DA神经元内游离钙降低、除极化诱导的钙增幅和DA释放减少、引起DA神经元损伤;而除极化使DA神经元钙离子浓度回升并保护DA神经元,这种保护作用能被L-型钙通道激动剂模拟,但被拮抗剂阻断。（2）细胞模型上,lactacystin引起DA神经元凋亡和ERS、激活JNK和胱冬肽酶-3介导的内源性凋亡通路;JNK抑制剂能阻断JNK底物活化和内源性凋亡,保护细胞损伤。动物模型上,lactacystin引起大鼠运动行为异常、纹状体DA浓度下降、黑质致密部DA神经元丢失和JNK激活,而JNK抑制剂可改善DA神经系统的损伤。（3） GDNF预处理能抑制lactacystin引起的DA神经元丢失和凋亡、抑制ERS和胱冬肽酶-3激活,但不影响α-突触共核素阳性包涵体形成。结论:这些结果表明,UPS障碍情况下,（1） DA神经元变性和L-型电压依赖性钙通道活动减弱引起的钙平衡紊乱有密切关系; （2） JNK激活可通过内源性凋亡通路激活胱冬肽酶-3,参与多巴胺神经元变性; （3） GDNF能保护UPS障碍引起的DA神经元损伤,其作用与抑制ERS和胱冬肽酶-3激活有关,但不影响包涵体形成。这些新发现为了解PD中脑DA神经元变性的分子机制,寻找潜在的PD治疗靶点提供了有益的信息。

李永生^[8]（2004）在《血管性痴呆胆碱能机制的实验研究》文中研究说明在体和离体研究中枢胆碱能神经系统在血管性痴呆（VaD）认知功能障碍形成中的作用及机制。结果发现，在体实验条件下，随时间发展VaD模型大鼠基底前脑出现不可逆缺血性病理改变、胆碱能神经元损伤、烟碱型乙酰胆碱受体最大结合容积减少、cAMP反应元件结合蛋白（CREB）磷酸化水平降低以及VaD大鼠学习记忆能力下降，应用胆碱酯酶抑制剂可改善大鼠学习记忆能力；离体低氧实验条件下，原代培养海马神经元CREB磷酸化水平降低以及突起长度缩短，应用毒蕈碱和烟碱型乙酰胆碱受体激动剂，可提高CREB磷酸化水平以及突起长度。据此我们认为慢性脑灌注不足时，中枢胆碱能神经元损伤，合成乙酰胆碱分子能力下降、突触后受体数量减少以及受体亚型相关信号转导通路功能低下，致使CREB磷酸化水平降低，进而影响神经元突触可塑性和神经网络的形成，最终导致VaD认知功能障碍。

崔连智,赵会卿,张丽华,苑俊卿^[9]（2003）在《浅谈影响胆碱酯酶回升的几种因素》文中研究指明 2001年1月-2002年6月,本科共收治有机磷农药中毒72例,其中男性30例、女性42例,年龄14～77岁,平均年龄44岁。由于抢救与应用复能剂及时、治疗得当,除1例转科后发生反跳死亡,其余71例均康复。虽然均康复出院,但笔者发现,治疗效果及胆碱酯酶回升情况却有所不同。现就几种因素可能对胆碱酯酶回升情况有所影响探讨如下。

张丽青^[10]（2003）在《TrxA-EstB1融合蛋白的表达、纯化与活性分析》文中研究说明农药的大量施用不仅对环境造成严重污染，而且使大量害虫产生抗药性。其中抗性库蚊产生大量酯酶对农药起代谢作用是其产生抗药性的主要原因，抗药性的产生加大了农药治虫的难度，加剧了农药对环境的污染。然而，将抗性蚊虫产生的解毒酶用于农药污染的生物治理是环境污染治理的新思路、新方向，有较好的应用前景。本文旨在将解毒酶酯酶B1基因融合高效表达，为其实际应用创造条件。 本文将从抗性库蚊（Culex pipiens）中分离出的解毒酶基因和硫氧还蛋白融合表达载体pThioHisA用限制性内切酶EcoRI消化，用低熔点胶回收消化片段并纯化，纯化后的载体脱磷，在T4 DNA连接酶作用下将二者进行体外连接，将连接产物转化大肠杆菌DH5α，在100μg/L氨苄青霉素平板上筛选Ampr转化子，将重组质粒分别经BglⅡ、BamHI单酶切，电泳分析获得酯酶基因插入方向正确的融合表达质粒，命名为pThioHisA-B1。 挑取鉴定正确的单菌落，接种于2ml含氨苄青霉素（50μg/ml）的LB培养基中，37℃，180rpm培养过夜，次日按5％接种量转接1次，同样条件下培养至OD550达0.5左右，加入IPTG至浓度1mmol/L，诱导12h。12％ SDS-PAGE电泳检测出工程菌可表达分子量约63KD的TrxA-EstB1融合蛋白，将胶体进行薄层扫描确定诱导7h后目的蛋白表达量最高，占菌体总蛋白的48.7％。 菌体在样品提取液中超声、冻融破壁后，4℃，10000rpm离心20min，分别取离心后的上清液和沉淀进行SDS-PAGE电泳鉴定，发现TrxA-EstB1融合蛋白大部分以包涵体形式存在，少部分以可溶形式存在。为了提高目的蛋白的可溶性表达，本实验在低温下（34℃、32℃、30℃、28℃、25℃）进行目的蛋白表达，最终确定28℃下诱导，可溶性目的蛋白表达量最高，占目的蛋白总数的65％，占菌体总蛋白的30％左右；IPTG浓度在常规用量1mmol/L的基础上降低至0.4mmol/L时，目的蛋白的表达量无显着差异。 以α-NA为底物对所构建工程菌进行酯酶活性测定，结果表明该工程菌能高效降解α-NA,具有较强的酯酶活性，融合伴侣硫氧还蛋白促进了酯<WP=7>酶B1的正确折叠，形成了天然的蛋白质构象。本研究将工程菌以2.5％海藻酸钠、3％ CaCl2进行包埋固定，以α-NA为底物测定固定化工程菌的酯酶活性，结果表明工程菌固定化后，酶活虽有所降低，但仍有一定的解毒能力。将最适条件下诱导的工程菌发酵液离心，收集菌体，加样品提取液超声、冻融法将菌体破壁，4℃，10000rpm离心收集上清液，获得粗提蛋白。将粗提蛋白经硫酸铵分级盐析，DEAE-Sepharose CL-6B离子交换层析,Sephadex G-150分子筛层析后，用聚乙二醇包埋浓缩，SDS-PAGE电泳检测提取物纯度,表明TrxA-EstB1融合蛋白已被提纯。对该融合蛋白进行酶活性测定表明它具有酯酶B1的解毒活性，最适反应条件为40℃， pH 7.5。

二、浅谈影响胆碱酯酶回升的几种因素（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、浅谈影响胆碱酯酶回升的几种因素（论文提纲范文）

（1）参芪方治疗慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生的临床研究（论文提纲范文）

（2）从心肝论治冠心病室性早搏的临床研究（论文提纲范文）

（3）枸杞木虱啮小蜂Tamarixa Lyciumi Yang生物学特性的研究（论文提纲范文）

（4）心肺转流对靶控输注丙泊酚血药浓度的影响（论文提纲范文）

（5）重组人Elafin对大鼠急性肝损伤作用的研究（论文提纲范文）

（6）大鼠体外循环后肝细胞损害及生长激素上调STAT5信号通路的保护作用和机制研究（论文提纲范文）

（7）蛋白酶体抑制引起多巴胺神经元变性机制和保护策略的研究（论文提纲范文）

（8）血管性痴呆胆碱能机制的实验研究（论文提纲范文）

（10）TrxA-EstB1融合蛋白的表达、纯化与活性分析（论文提纲范文）

四、浅谈影响胆碱酯酶回升的几种因素（论文参考文献）

• [1]参芪方治疗慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生的临床研究[D]. 张敏芬. 南京中医药大学, 2014(03)
• [2]从心肝论治冠心病室性早搏的临床研究[D]. 戴凯旋. 山东中医药大学, 2012(01)
• [3]枸杞木虱啮小蜂Tamarixa Lyciumi Yang生物学特性的研究[D]. 王俊清. 内蒙古师范大学, 2009(05)
• [4]心肺转流对靶控输注丙泊酚血药浓度的影响[D]. 金鑫. 第三军医大学, 2009(06)
• [5]重组人Elafin对大鼠急性肝损伤作用的研究[D]. 蒋春晓. 吉林大学, 2008(11)
• [6]大鼠体外循环后肝细胞损害及生长激素上调STAT5信号通路的保护作用和机制研究[D]. 安永. 第三军医大学, 2007(03)
• [7]蛋白酶体抑制引起多巴胺神经元变性机制和保护策略的研究[D]. 李旭平. 中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）, 2007(03)
• [8]血管性痴呆胆碱能机制的实验研究[D]. 李永生. 第二军医大学, 2004(01)
• [9]浅谈影响胆碱酯酶回升的几种因素[J]. 崔连智,赵会卿,张丽华,苑俊卿. 河北职工医学院学报, 2003(04)
• [10]TrxA-EstB1融合蛋白的表达、纯化与活性分析[D]. 张丽青. 山东农业大学, 2003(03)