刘铮[1]（2019）在《马梨形虫病三种核酸检测方法的建立》文中进行了进一步梳理马梨形虫病是一种由马泰勒虫（Theileia equi）和驽巴贝斯虫（Babesia caballi）寄生于马属动物血液红细胞的血液原虫病。临床症状主要为溶血性贫血、黄疸,症状严重时可造成患畜死亡。本病曾被列为中国二类动物疫病,目前是国际动物卫生组织（OIE）必须报告的疾病之一。感染梨形虫病的马匹如果未能及时诊断治疗,则会对养马业造成重大损失。目前,世界各国虽然在马梨形虫病的诊断新方法进行了大量的研究探索并取得了一定的成果,但仍需要一种敏感性高、特异性强并可再临床大规模推广的诊断方法。本研究在查阅了大量的马梨形虫病诊断及鉴定文献后,将研究目标确定在巢氏PCR核酸检测方法的建立上。根据Gen Bank中的T.equi 18S r RNA及B.caballi 18S r RNA保守序列设计了2组引物,通过对试验方法进行不断调整优化,并进行特异性、灵敏性试验,最终建立了马梨形虫病巢式PCR检测方法。结果显示,本试验所建立的马梨形虫病巢式PCR检测方法可特异地检测出T.equi和B.caballi的单独标准阳性样本及混合样本,具有良好的特异性和敏感性,牛中华泰勒虫均无反应,但在临床实际样本的检测中无法区分是T.equi感染还是B.caballi感染。鉴于这种情况,本试验又设计了马梨形虫病双重荧光定量PCR检测方法及马梨形虫病RPA检测方法,目前这两种方法的模拟质粒试验显示可特异性的区分T.equi或B.caballi感染。本研究建立的马梨形虫病巢式PCR检测方法可以对马梨形虫病进行快速的检测,双重荧光定量PCR检测方法及RPA检测方法可对梨形虫阳性的样品进行虫种分型鉴定,综合应用多种方法进行马梨形虫的鉴定具有较强的应用价值。
刘家国,王德云,张帆[2]（2011）在《1例马驽巴贝斯虫病的诊治》文中研究表明马驽巴贝斯虫病是由梨形虫纲驽巴贝斯虫（Basia caballi）寄生于马类家畜的红细胞内而引起的一类血液原虫病。该病主要的传播者是硬蜱。笔者于2009年诊治了1例典型病例,通过综合诊治取得满意的疗效,现报告如下:1发病情况
许应天,梁晚枫,宋建臣,张守发[3]（2003）在《以GST-BC48重组蛋白作诊断抗原对延边地区驽巴贝斯虫病血清流行病学调查》文中研究说明
许应天,梁晚枫,宋建臣,张守发,李春英[4]（2003）在《用EMA-1基因重组蛋白对马巴贝斯虫病的血清学调查》文中提出在寄生虫病的血清学诊断中 ,常用的虫体抗原有纯化难、制备有限和部分交叉反应等缺点。以重组蛋白作为诊断抗原具有特异性强、敏感性高、制备简单和易纯化等优点。本试验以EMA-1基因重组蛋白为诊断抗原 ,用 EL ISA方法对延边地区马巴贝斯虫病进行了血清学调查。结果表明 ,该地区马巴贝斯虫病的血清阳性率为 3 4.2 % （ 3 8/ 1 1 1 ） ,而血涂片染色镜检法的阳性率为 1 3 .5% （ 1 5/ 1 1 1 ） ,两者之间差异极显着 （ P <0 .0 1 ）。不同牧地和不同年龄被检血清阳性率之间未见显着差异。
马常熙[5]（2003）在《一例马混合感染驽巴贝斯虫与马巴贝斯虫病及并发症的诊治》文中研究指明从外地新购的马,混合感染驽巴贝斯虫、马巴贝斯虫,由于虫体代谢产物的刺激与渐进性贫血,而引发一系列并发症:心衰、肺水肿、出血性素质致肠弛缓。经实验室检查确诊后,用黄色素、贝尼尔驱杀致病体并采用补液、止血、通便、强心等一系列对症治疗措施及中兽医辨证治疗后,该病例救治成功。
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 马梨形虫病的概述 |
| 1.1.1 生活史 |
| 1.1.2 流行病学 |
| 1.1.3 临床症状 |
| 1.2 马梨形虫病的诊断方法 |
| 1.2.1 病原形态学诊断方法 |
| 1.2.2 免疫学诊断方法 |
| 1.2.3 分子生物学诊断方法 |
| 1.3 本研究的目的与意义 |
| 第二章 马梨形虫病巢式PCR检测方法的建立 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 标准阳性血液及标准阳性DNA样本 |
| 2.1.2 标准阳性质粒 |
| 2.1.3 临床待检样本 |
| 2.1.4 主要试剂 |
| 2.1.5 主要试剂盒 |
| 2.1.6 主要仪器 |
| 2.1.7 主要溶液的配制 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 巢式PCR引物设计 |
| 2.2.2 血液样本DNA提取 |
| 2.2.3 标准阳性质粒DNA的提取与验证 |
| 2.2.4 巢式PCR反应体系的建立 |
| 2.2.4.1 目的基因的扩增 |
| 2.2.4.2 PCR产物的验证及胶回收 |
| 2.2.5 灵敏性试验 |
| 2.2.6 特异性试验 |
| 2.2.7 临床样品检测试验 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 标准阳性质粒PCR结果 |
| 2.3.2 灵敏性试验结果 |
| 2.3.3 特异性试验结果 |
| 2.3.4 临床样本检测结果 |
| 2.4 讨论与结论 |
| 第三章 马梨形虫病双重荧光PCR检测方法的初步建立 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 样本来源 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 引物与探针的设计与合成 |
| 3.2.2 阳性虫株、临床样品DNA提取 |
| 3.2.3 荧光定量PCR反应条件优化 |
| 3.2.4 双重荧光定量PCR特异性及敏感性试验 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 双重荧光定量PCR反应体系的确定 |
| 3.3.2 双重荧光定量PCR特异性试验结果 |
| 3.3.3 双重荧光定量PCR敏感性试验结果 |
| 3.4 讨论与结论 |
| 第四章 马梨形虫病重组酶聚合酶检测方法的初步建立 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 样本来源 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 主要仪器 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.0 阳性血液样本DNA的提取 |
| 4.2.1 RPA引物的设计与筛选 |
| 4.2.2 RPA荧光探针的设计与优化 |
| 4.2.3 引物特异性试验 |
| 4.2.4 敏感性试验 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 引物筛选结果 |
| 4.3.2 RPA反应条件优化 |
| 4.3.3 敏感性试验结果 |
| 4.4 讨论与结论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 英文缩略表 |
| 1 发病情况 |
| 2 实验室检查 |
| 3 临床诊断经过 |
| 3.1 22日一诊 |
| 3.2 24日二诊 |
| 3.3 26日三诊 |
| 3.4 27日四诊 |
| 3.5 28日五诊 |
| 4 治疗体会 |
