王菊凤[1]（2015）在《蛹虫草多糖锗的生物转化合成及其生物学活性研究》文中研究指明蛹虫草[Cordycepsp mliitaris（L.ex Fr.）Link]又名北虫草、北冬虫夏草、蛹草等,是我国着名的传统珍贵中药材之一。现代研究表明,蛹虫草具有与冬虫夏草（C.sinensis）极其相似的药理作用,可以作为冬虫夏草的代用品。蛹虫草中含有多种生理活性物质,其中蛹虫草多糖的含量最高,也是其主要活性成分之一。蛹虫草多糖有着多种生物活性功能,具有广泛的药理作用,是值得挖掘的一大生物资源宝库。同时蛹虫草多糖也是一种国际公认的免疫调节剂,在临床医学与预防保健中发挥着重要的作用。蛹虫草多糖锗（cordyceps polysaccharide germanium,CPG）是蛹虫草多糖和无机锗两者的结合体,为大分子有机锗。本实验以蛹虫草子实体和菌丝体为生物载体,运用生物工程技术,利用蛹虫草对锗具有的高度特异性富集功能,将无机锗（Ge02）按照一定浓度比例添加在固体和液体培养基中,蛹虫草在生长发育过程中,其菌丝体不断吸收培养基中的锗元素,被吸收的锗元素与蛹虫草体内的虫草多糖相结合,从而生成蛹虫草多糖锗。为了研究蛹虫草多糖锗的生物转化合成及其生物学活性,本项研究以蛹虫草为材料,运用固体培养和液体培养技术,系统地研究了蛹虫草多糖锗的生物转化合成、分离纯化、分子量及其单糖组成、安全性和抗衰老作用;同时探讨了蓝光对蛹虫草多糖锗和主要活性成分的促进作用;此外还研究了锗及其与硒协同对蛹虫草主要活性成分的影响。主要研究结果和结论如下:1、锗浓度对蛹虫草多糖锗的生物转化合成影响研究实验表明:锗浓度能显着影响蛹虫草子实体多糖化锗和菌丝体多糖化锗的生物转化（P<0.05）。在固体培养条件下,当锗浓度为200mg/L时,蛹虫草子实体的生物量最大,为5.95（g/瓶）;锗浓度为300mg/L时,子实体多糖化锗的生物转化量最多,达到216.76（μg/g）;锗浓度为250mg/L时,子实体有机锗转化率最高,为72.8%。在液体培养条件下,当锗浓度为250mg/L时,蛹虫草菌丝体的生物量最大为15.33（g/L）;锗浓度为150mg/L时,菌丝体多糖化锗的生物转化量最多,达到107.29（μg/g）;锗浓度为200mg/L时,菌丝体有机锗转化率最高,为85.1%。另外,在锗浓度为250mg/L时,子实体有机锗最高含量为489.86μg/g;在锗浓度为300mg/L时,子实体多糖化锗占子实体总有机锗比例最大为51.9%。在锗浓度为250mg/L时,菌丝体有机锗最高含量为584.76μg/g;在锗浓度为150mg/L时,菌丝体多糖化锗占菌丝体总有机锗比例最大为34.2%。总的来说,本研究显示锗浓度在150mg/L-300mg/L时,比较适合蛹虫草多糖化锗的生物转化。蛹虫草子实体对锗的富集及转化能力比菌丝体强。2、蛹虫草多糖锗的分离纯化、分子量以及单糖组成研究实验结果显示乙醇浓度、提取时间和子实体状态对从蛹虫草子实体中提取多糖锗有显着影响（P<0.05）。粉末子实体、2h提取时间、70%的乙醇浓度有利于蛹虫草多糖锗的提取。在用活性炭进行脱色时,2%的活性炭脱色处理效果最好。另外,子实体多糖锗与菌丝体多糖锗都是由阿拉伯糖、木糖、半乳糖和葡萄糖四种单糖组成的;子实体多糖锗中这四种单糖的质量比为:1:2.7:91.5:7.1;菌丝体多糖锗中这四种单糖的质量比为1:1.1:39.7:3.5。子实体多糖锗的数均分子量（Mn）为 9.3733×104g/mol;重均分子量（Mw）为 4.9465×105g/mol;Z 均分子量（Mz）为 1.4283×106g/mol。3、蓝光诱导下蛹虫草锗及主要活性成分的动力学研究经过一个周期的蓝光诱导试验,结果显示试验组比对照组蛹虫草子实体的生物量提高了 26.5%。固体培养条件下,接种后36d时,有一半以上的有机锗是多糖锗。无论是蛹虫草子实体有机锗,还是菌丝体有机锗,其中50%以上均为多糖锗。蓝光诱导能提高蛹虫草多糖的含量,在子实体培养36d后,蓝光照射多糖含量达到5.91%,是白光对照刚开始检测时的3.078倍;在培养52d后,蓝光照射多糖含量达到6.42%,是白光对照刚开始检测时的3.344倍。在菌丝体培养5d后,蓝光照射多糖含量达到5.92%,是黑暗对照刚开始检测时的2.508倍;在培养8d后,蓝光照射多糖含量达到6.88%,是黑暗对照刚开始检测时的2.915倍。说明蓝光照射诱导对蛹虫草多糖具有显着的促进作用（P<0.05）。蓝光照射子实体样品组的虫草素含量普遍比白光对照组的虫草素含量要高,在52d时前者子实体虫草素含量是后者的1.44倍。菌丝体蓝光照射组的虫草素含量是黑暗对照组的1.297倍。经过蓝光照射诱导后,蛹虫草子实体多糖是一种含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖和葡萄糖五种单糖的杂多糖,其中鼠李糖是新增的单糖,说明蓝光诱导对蛹虫草子实体多糖中单糖的组成种类和数量有显着的影响。菌丝体多糖的组成则没有变化。4、锗对蛹虫草子实体和菌丝体主要活性成分的影响不同浓度的锗对蛹虫草子实体和菌丝体中主要活性成分虫草素、腺苷和虫草多糖的含量都有不同程度的影响（P<0.05）。低浓度的锗可以促进这些活性成分的积累,而高浓度的锗对它们都有一定程度的抑制作用。对蛹虫草子实体来说,当培养基中锗浓度为250-300mg/L时,有利于虫草素、腺苷和虫草多糖这些活性成分的形成。对蛹虫草菌丝体来说,锗浓度为200mg/L时,可以促进这些活性物质的含量。由此可知,固体条件下培养蛹虫草子实体,其培养基中锗浓度要比液体条件下培养蛹虫草菌丝体的锗浓度高一点。从硒锗组合实验结果分析得知,适量的不同浓度硒锗组合处理对蛹虫草子实体中虫草素、腺苷和虫草多糖的产生都有不同程度的促进作用（P<0.05）,特别是对虫草素的影响最大,最高达到了对照组的2.89倍。这一结果超过了硒或锗单独对虫草素的影响之和,表现出显着的协同正效应。提示我们在以虫草素为目标物的蛹虫草子实体栽培中,可以适当添加硒锗以提高虫草素的产量。对腺苷和虫草多糖而言,也表现出类似的情况（P<0.05）。因此,可以在培养基中同时加入硒锗来提高这些生理活性物质的产量。5、蛹虫草多糖锗的毒理安全性实验研究小鼠和大鼠的急性毒性试验表明蛹虫草多糖锗属无毒级;大鼠的长期毒性试验也表明蛹虫草多糖锗是一种无毒的有机锗（P>0.05）。Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验及小鼠精子畸变试验表明:蛹虫草多糖锗属于无毒物,致突变试验均为阴性（P>0.05）,蛹虫草多糖锗无致突变作用。因此,蛹虫草多糖锗可以作为药品和保健食品的原料,在实验推荐的剂量下使用是安全的。6、蛹虫草多糖锗的抗衰老作用研究蛹虫草多糖锗对大鼠肝脏和脑中单胺氧化酶MAO活性影响的实验结果表明:蛹虫草多糖锗能显着影响雄鼠肝脏MAO活性和雌鼠脑MAO的活性（P<0.05）。雄鼠肝脏MAO活性随着蛹虫草多糖锗摄入剂量的增加而增加,二者呈正相关。连续饲喂26周,与对照组相比较,高剂量组雄鼠肝MAO活性则提高了 2.56倍,低剂量组雌鼠脑MAO活性降低36.9%。说明蛹虫草多糖锗具有抗衰老的作用。蛹虫草多糖锗对果蝇寿命影响实验表明:1.0%蛹虫草多糖锗可以有效的提高雌雄果蝇的平均寿命、最高寿命和半数死亡时间（P<0.05、P<0.01）。其中雄性果蝇平均寿命比对照组延长25.7%,最高寿命延长11.5%,半数死亡时间延长22.93%;雌性果蝇平均寿命比对照组延长44.12%,最高寿命高于对照组40.81%,半数死亡时间比对照组延长46.19%。蛹虫草多糖锗对雌性果蝇寿命的影响大于对雄性果蝇寿命的影响。本研究的创新点在于:（1）从蛹虫草的固体培养和液体培养两方面,首次系统地研究了蛹虫草多糖锗的生物转化合成。发现了蛹虫草子实体富锗能力比菌丝体强,从而为富锗蛹虫草的进一步研究打下了良好的基础。（2）首次研究了蛹虫草多糖锗的分子量及单糖组成。确定了蛹虫草多糖锗属于天然高聚物,是一种大分子有机锗。并明确了它的单糖组成。（3）首次研究了蓝光诱导下蛹虫草锗及主要活性成分的动力学过程。为蛹虫草主要活性成分含量的提高提供了一条可行途径。（4）首次系统地研究了蛹虫草多糖锗的毒性,确定了蛹虫草多糖锗为无毒物,蛹虫草多糖锗作为药品和保健食品,在实验推荐的剂量下使用是安全的。这一结果对于以后开发多糖锗抗肿瘤新药起着重要的作用。（5）首次研究了蛹虫草多糖锗对大鼠肝脏和脑中单胺氧化酶活性的影响。肯定了蛹虫草多糖锗具有抗衰老作用。本论文对蛹虫草多糖锗的研究结果不仅开拓了蛹虫草多糖研究的新领域,为富锗蛹虫草的进一步开发利用奠定了良好的基础,而且还为开发研究对人体有益,且安全、高效,又具有生理活性的功能性食品和医用药源提供了理论支持。因此具有重要的社会经济意义和很大的应用价值。
陈宏伟[2]（2010）在《蛹拟青霉对三种重要微量元素的有机转化及有机转化物的功能研究》文中认为本研究利用蛹虫草无性型——蛹拟青霉（Paecilomyces militaris）为载体,采用液体深层发酵法对硒、锌、锗三种重要微量元素进行富集和有机转化,探索了蛹虫草菌丝体对三种微量元素的富集、有机转化情况、蛹虫草菌丝体活性成分变化情况、微量元素与蛹虫草菌丝体代谢物的结合形式、微量元素在菌丝体内的分布以及有机转化物的生物活性和功能等问题,为更好地研制和开发对人体有益,且安全、高效,既能补充微量元素又具有生理活性的功能性食品和医用药物奠定基础。1、以生物量和微量元素硒、锌、锗的富集能力为指标,对本实验室已有的30株蛹拟青霉进行了筛选。实验结果表明,不同菌株对硒、锌、锗的富集能力各不相同,富集能力的高低基本上与菌丝体生物量和硒、锌、锗有机转化率有关。菌丝体的耐硒能力最弱,耐锌能力较好,耐锗能力最强；从有机转化率来看,硒最高,锌次之,锗最低。（1）富硒能力最强的菌株为PM14号菌株,在Na2Se03浓度为20μg/mL条件下,有机硒转化率达到31.6%。其生物量在相同浓度下也最高,达到17.0 mg/mL。（2）富锌能力较好的菌株为PM28号和PM14号菌株,在ZnS04浓度为200μg/mL条件下,有机锌转化率分别达到6.65%和5.78%。在相同浓度下,其生物量达到最大分别为19.5 mg/mL,17.6 mg/mL（3）富锗最佳菌株为PM28号菌株和PM14号菌株,在锗浓度为500μg/mL条件,有机锗转化率分别达到2.3%和1.9%。在相同浓度下,其生物量分别为15.1 mg/mL，13.8 mg/mL。从总体上衡量,由于PM14号菌株富集硒、锌、锗的能力都很强,因此,确定PM14号菌株为进一步研究的菌株。2、研究了有机硒、锌、锗在蛹拟青霉菌丝体内蛋白质、多糖和核酸等大分子物质中的含量分布情况。实验结果表明,有机硒、锌、锗含量在蛋白质中最多,其次是多糖,最少的是核酸。硒、锌、锗浓度对其含量有影响,当浓度过高或过低时其含量均降低。（1）当培养基中Na2Se03浓度为20μg/mL时,蛋白质、多糖、核酸中有机硒含量均达到最多,分别为221.5μg/g、86.2μg/g和0.6μg/g;当Na2Se03浓度为10μg/mL时,蛋白硒、多糖硒和核酸硒分别占菌丝体总有机硒的比例最大,分别为菌丝体总有机硒的65.8%、28.1%和0.2%,分别是空白的2.7倍、3.9倍和3.8倍。蛋白、多糖、核酸中总的有机硒含量在培养基Na2Se03浓度为20μg/mL时最多为308.4μg/g。在培养基Na2Se03浓度为10μg/mL时,蛋白硒、多糖硒、核酸硒在菌丝体总有机硒中占的比例最大,达到94.1%。（2）在实验锌浓度范围内,随着培养基中锌浓度的增加,蛋白质、多糖、核酸中有机锌的含量不断增加,蛋白质、多糖中有机锌占菌丝体总有机锌的比例都随着培养基中锌浓度的增加而增加,而核酸中有机锌比例却不断减少,但变化不明显。当ZnSO4浓度为200μg/mL时,有机锌含量最多,其在体内的分布情况是,蛋白质最多占菌丝体总有机锌的65.6%,其次是多糖有机锌占7.2%,核酸中有机锌最少,只占0.8%。此时蛋白锌和多糖锌分别是空白的2.2倍和1.1倍,而核酸锌却比空白少了33.9%。由此可见锌对蛋白质和多糖中有机锌合成的促进作用比较明显。（3）实验表明,低浓度锗对蛋白质、多糖、核酸中有机锗的含量有促进作用,高浓度锗对有机锗的形成有一定的抑制作用。当Ge02浓度为500μg/mL时,蛋白质、多糖、核酸中有机锗含量均达到最大,分别达到284.0μg/g、261.5μg/g和137.6μg/g,分别是空白组的4.4倍、5.4倍和8.3倍。蛋白锗和多糖锗所占菌丝体总有机锗比例相似。当Ge02浓度在100μg/mL时,蛋白质、多糖和核酸中的有机锗含量占菌丝体总有机锗的比例最高,分别达到39.8%,36.8%和18.2%。蛋白、多糖和核酸中有机锗之和在Ge02浓度为100μg/mL时,所占菌丝体总有机锗比例最大,达到94.8%。3、探讨了硒、锌、锗浓度对蛹拟青霉菌丝体的生物量和主要活性成分（胞内多糖、微量元素含量、虫草素、菌丝体SOD、蛋白质含量、氨基酸含量等）的影响。结果表明,硒、锌、锗在适宜浓度范围内,对菌丝体的主要活性成分有促进作用,浓度过大,对相关活性成分有抑制作用,不同的生物学指标所需的硒、锌、锗浓度各不相同。硒、锌、锗的适宜浓度分别为：10-20μg/mL,100μg/mL和200μg/mL-300μg/mL。4、抗氧化作用实验表明,富硒、锌、锗多糖均具有较好的清除超氧自由基、羟自由基和有机自由基DPPH的能力,硒、锌多糖清除自由基的能力与空白多糖相比具有显着差异。从清除自由基的种类来看,它们清除DPPH的能力最强,其次是羟自由基,最后是氧自由基。总体来看,硒多糖清除自由基能力最好,其次是锌多糖,最后是锗多糖。5、果蝇寿命实验表明,硒、锌、锗多糖对果蝇的半数死亡时间、平均寿命和最高寿命都有显着影响,对果蝇具有明显的延缓衰老作用。多糖对半数死亡时间的延长最好,而且是雄性好于雌性；硒多糖对最高寿命和平均寿命的影响无显着差异,锌、锗多糖对之的影响是最高寿命好于平均寿命,从性别差异来看,基本上是雌性优于雄性。硒多糖对于增加体弱果蝇的寿命效果显着,锌、锗多糖对于延长体魄强壮果蝇的寿命较好。6、小鼠负重游泳力竭实验、血乳酸含量和血尿素氮含量测定以及小鼠常压耐缺氧实验结果表明,富硒、锌、锗这三种蛹虫草菌丝体不同浓度对小鼠不同生理时期具有不同的耐疲劳能力。它们可以显着延长小鼠负重游泳力竭实验时间,具有明显减少小鼠在疲劳状态下体内产生乳酸的作用,对疲劳过程中产生的血尿素氮也有显着的减少或清除作用。然而,它们的耐缺氧效果不够明显。7、蚕豆微核实验表明,富硒、锌、锗多糖没有致突变作用,对抑制丝裂霉素和紫外线诱发的蚕豆根尖细胞微核的产生具有显着作用,多糖浓度与微核抑制率有明显的剂量-效应关系,微核抑制率随着多糖浓度的增加而增加。当多糖浓度为100μg/mL时,富硒、锌、锗多糖对丝裂霉素和紫外线诱发微核的抑制率分别为46.5%、37.2%、34.1%和53.3%、48.6%、43.8%。对微核的抑制效果是富硒多糖>富锌多糖>富锗多糖。8、体外抗肿瘤实验表明,硒多糖、锌多糖对肺腺癌A549细胞株生长的抑制作用与空白对照具有极显着差异,可以显着提高对肺腺癌A549细胞株生长的抑制作用,当多糖浓度为4 mg/mL时,硒多糖和锌多糖对肺腺癌A549细胞株生长的抑制率分别为54.2%和53.9%,分别比空白菌丝体多糖的抑制率提高38.8%和38.0%。硒、锌、锗多糖对鼻咽癌CNE-1细胞株生长的抑制作用与空白对照均具有极显着差异,当多糖在浓度为4 mg/mL时,硒、锌、锗多糖对鼻咽癌CNE-1细胞生长的抑制率分别为40.2%,32.1%和39.56%,分别比空白对照提高128.8%、82.4%和125.2%。硒、锌、锗多糖可以显着提高鼻咽癌CNE-1细胞株生长的抑制作用。9、小鼠急性经口毒理实验表明,蛹拟青霉富硒、锌、锗菌丝体属于无毒级产品。本研究表明,蛹拟青霉液体培养菌丝体具有较好的富集硒、锌、锗的能力,在适当的微量元素浓度时,富集微量元素后的菌丝体主要活性成分含量有明显提高,富硒、锌、锗菌丝体及微量元素有机物的抗氧化、抗疲劳、抗突变和抗肿瘤能力有显着增强,小鼠急性经口毒理实验和蚕豆根尖细胞微核实验表明,富硒、锌、锗蛹拟青霉菌丝体没有致突变作用,对小鼠无毒性。
张俊会[3]（2003）在《葛根基质下食药用真菌深层液体发酵及其发酵产物的抗氧化活性测定》文中研究指明发酵是传统中草药炮制的重要方法，许多经典药物都是通过发酵而形成的药物，国家一类新药槐耳冲剂也是通过发酵中草药而成。尽管近年来食药用真菌已经以其独有的营养与药用价值引起了人们的关注，但是真正利用食药用真菌发酵的药物数量有限，且用于发酵的菌种品种也比较单一，仅局限在虫草、白僵菌、槐耳等有限的几株真菌上，用其他真菌发酵炮制中草药的研究在国内外尚属空白。为扩大中草药发酵炮制的具体内容，将现代发酵工程技术用于中草药炮制，进一步拓展中草药及食药用真菌的利用空间，本项研究初步尝试了以自身发酵性能较好的白灵侧耳等菌株发酵中草药的研究。 发酵试验表明，与其他营养源相比，葛根非但没有抑制各菌株的生长，反而促进了某些菌株（桃红侧耳、白灵侧耳、韩芝）的生长，尤以白灵侧耳最为明显，生物量高峰达到3.32g／100ml（菌丝干重），且提前48h生物量到达高峰。发酵产物抗氧化活性试验表明，发酵过程中葛根的添加改变了白灵侧耳及葛根原有的药性，使其抑制肝脏脂质过氧化能力及果蝇寿命延长能力增强。小鼠中毒试验表明，白灵侧耳及其葛根基质发酵产物均能显着降低CCL4中毒小鼠心、肝MDA，且同等剂量的白灵侧耳葛根发酵产物组心、肝MDA显着低于白灵侧耳葛根混合组，白灵侧耳葛根发酵产物组小鼠心、肝MDA低于白灵侧耳普通基质发酵产物组，但二者之间无显着差异。果蝇生存试验表明，白灵侧耳葛根发酵产物能显着延长雌雄果蝇的寿命，与对照、白灵侧耳普通基质发酵产物组、葛根药物组之间有显着差异，而同等剂量的白灵侧耳普通基质发酵产物组和葛根组未观察到寿命延长现象。各成分抗氧化试验表明，白灵侧耳葛根发酵产物水提物较白灵侧耳普通发酵产物及葛根的水提物体外抗脂质过氧化活性有所提高，醇提物抗油脂氧化能力三者之间区别不大。其他菌株水提物亦观察到了类似变化，但刺琴侧耳醇提物的抗氧化能力则在发酵葛根后有显着上升。 上述研究结果表明，以白灵侧耳为代表的食药用真菌可对葛根基质进行良好液体发酵，且发酵产物具有更高的抗氧化能力和果蝇寿命延长作用，由此证实了食药用真菌发酵中草药的可行性。
施忠,沈均,刘云芳[4]（2000）在《虫草灵口服液的制备与临床应用》文中研究表明虫草灵口服液是由北冬虫夏草、灵芝等多味中药组成的运用现代方法研制而成的纯中药制剂。具有养心安神、补肝益肾之功 ,临床用于治疗各类神经症 ,显效率 73 % ,总有效率 90 % ,是一种具有良好治疗价值的制剂。
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 与锗相关的专用名词注释汇集 |
| 1 绪论 |
| 1.1 蛹虫草研究概述 |
| 1.1.1 生物学特性 |
| 1.1.2 活性成分 |
| 1.1.3 药理作用 |
| 1.1.4 开发应用现状及发展前景 |
| 1.2 有机锗研究概述 |
| 1.2.1 生物转化合成—锗的富集 |
| 1.2.2 生理功能 |
| 1.2.3 开发应用现状 |
| 1.3 保健食品安全性评价 |
| 1.4 论文研究背景 |
| 1.5 主要研究内容 |
| 1.6 研究目的和意义 |
| 2 锗浓度对蛹虫草多糖锗生物转化合成影响研究 |
| 2.1 固体培养条件下蛹虫草子实体多糖锗的生物转化合成 |
| 2.1.1 材料与方法 |
| 2.1.2 结果与分析 |
| 2.1.3 讨论与小结 |
| 2.2 液体培养条件下蛹虫草菌丝体多糖锗的生物转化合成 |
| 2.2.1 材料与方法 |
| 2.2.2 结果与分析 |
| 2.2.3 讨论与小结 |
| 本章小结 |
| 3 蛹虫草多糖锗的分离纯化、分子量及单糖组成 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 蛹虫草固体培养实验方法 |
| 3.1.3 蛹虫草液体培养实验方法 |
| 3.1.4 蛹虫草多糖锗的分离纯化 |
| 3.1.5 多糖含量测定 |
| 3.1.6 锗含量测定 |
| 3.1.7 蛹虫草多糖锗分子量测定 |
| 3.1.8 蛹虫草多糖锗单糖组成 |
| 3.1.9 数据分析方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 蛹虫草多糖锗生物转化合成原理 |
| 3.2.2 蛹虫草多糖锗的分离纯化 |
| 3.2.3 蛹虫草多糖锗分子量 |
| 3.2.4 蛹虫草多糖锗单糖组成分析 |
| 3.3 讨论与小结 |
| 本章小结 |
| 4 蓝光诱导下蛹虫草锗及主要活性成分的动力学研究 |
| 4.1 蓝光诱导对蛹虫草子实体锗及主要活性成分的动态影响 |
| 4.1.1 材料与方法 |
| 4.1.2 结果与分析 |
| 4.1.3 讨论与小结 |
| 4.2 蓝光诱导对蛹虫草菌丝体锗及主要活性成分的动态影响 |
| 4.2.1 材料与方法 |
| 4.2.2 结果与分析 |
| 4.2.3 讨论与小结 |
| 本章小结 |
| 5 锗对蛹虫草主要活性成分的影响 |
| 5.1 锗对蛹虫草子实体主要活性成分的影响 |
| 5.1.1 材料与方法 |
| 5.1.2 结果与分析 |
| 5.1.3 讨论与小结 |
| 5.2 锗对蛹虫草菌丝体主要活性成分的影响 |
| 5.2.1 材料与方法 |
| 5.2.2 结果与分析 |
| 5.2.3 讨论与小结 |
| 5.3 硒锗组合处理对蛹虫草子实体生长发育及主要活性成分的协同影响 |
| 5.3.1 材料与方法 |
| 5.3.2 结果与分析 |
| 5.3.3 讨论与小结 |
| 本章小结 |
| 6 蛹虫草多糖锗安全性研究 |
| 6.1 蛹虫草多糖锗急性毒性试验 |
| 6.1.1 实验材料 |
| 6.1.2 实验方法 |
| 6.1.3 统计学处理 |
| 6.1.4 结果与分析 |
| 6.1.5 讨论与小结 |
| 6.2 蛹虫草多糖锗长期毒性试验 |
| 6.2.1 材料 |
| 6.2.2 方法 |
| 6.2.3 结果与分析 |
| 6.2.4 讨论与小结 |
| 6.3 蛹虫草多糖锗致突变试验 |
| 6.3.1 Ames试验 |
| 6.3.2 小鼠骨髓细胞微核试验 |
| 6.3.3 小鼠精子畸变试验 |
| 6.3.4 讨论与小结 |
| 本章小结 |
| 7 蛹虫草多糖锗抗衰老作用研究 |
| 7.1 蛹虫草多糖锗对大鼠单胺氧化酶(MAO)活性的影响 |
| 7.1.1 材料 |
| 7.1.2 方法 |
| 7.1.3 结果与分析 |
| 7.1.4 讨论与小结 |
| 7.2 蛹虫草多糖锗对果蝇寿命的影响 |
| 7.2.1 材料 |
| 7.2.2 方法 |
| 7.2.3 结果与分析 |
| 7.2.4 讨论与小结 |
| 本章小结 |
| 8 结论与创新 |
| 8.1 结论 |
| 8.2 创新点 |
| 8.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录A |
| 附录B 攻读学位期间的主要学术成果 |
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 目录 |
| 主要缩略词和符号表 |
| 附图清单 |
| 附表清单 |
| 第一章 综述 |
| 1.1 蛹虫草研究概况 |
| 1.2 微量元素研究概况 |
| 1.2.1 硒的生理功能及硒的富集 |
| 1.2.2 锌的生理功能及锌的富集 |
| 1.2.3 锗的生理功能及锗的富集 |
| 1.3 蛹虫草产品的研究开发概况 |
| 1.4 生物活性物质及功能性评价方法 |
| 1.4.1 生物活性物质 |
| 1.4.2 生物活性物质的功能学评价方法 |
| 1.4.2.1 抗疲劳作用的功能学评价方法 |
| 1.4.2.2 耐缺氧作用的功能学评价方法 |
| 1.4.2.3 抗突变作用的功能学评价方法 |
| 1.4.2.4 抗衰老作用的功能学评价方法 |
| 1.4.2.5 抑制肿瘤作用的功能学研究及抗肿瘤药物的筛选方法 |
| 1.4.2.6 生物活性物质的安全性评价 |
| 第二章 引言 |
| 第三章 蛹拟青霉微量元素高富集菌株的筛选 |
| 第一节 蛹拟青霉高富硒菌株的筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 蛹拟青霉富硒菌株的生物量 |
| 2.2 蛹拟青霉不同菌株的富硒能力 |
| 3 讨论与结论 |
| 第二节 蛹拟青霉高富锌菌株的筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 蛹拟青霉富锌菌株的生物量 |
| 2.2 蛹拟青霉不同菌株的富锌能力 |
| 3 讨论与结论 |
| 第三节 蛹拟青霉高富锗菌株的筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 蛹拟青霉富锗菌株的生物量 |
| 2.2 蛹拟青霉不同菌株的富锗能力 |
| 3 讨论与结论 |
| 本章小节 |
| 第四章 硒、锌、锗元素在蛹拟青霉菌丝体内的分布研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 菌种及其来源 |
| 1.2 培养基 |
| 1.3 主要化学试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 1.5 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 硒在菌丝体蛋白质、多糖和核酸中的含量分布 |
| 2.2 锌在菌丝体蛋白质、多糖和核酸中的含量分布 |
| 2.3 锗在菌丝体蛋白质、多糖和核酸中的含量分布 |
| 3 讨论与结论 |
| 第五章 硒、锌、锗对蛹拟青霉主要活性成分的影响 |
| 第一节 硒对蛹拟青霉菌丝体主要活性成分的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 硒对蛹拟青霉富硒菌丝体生物量的影响 |
| 2.2 硒对蛹拟青霉富硒菌丝体胞内多糖含量的影响 |
| 2.3 硒对蛹拟青霉菌丝体硒含量和有机硒转化率的影响 |
| 2.4 硒对蛹拟青霉菌丝体蛋白质含量的影响 |
| 2.5 硒对蛹拟青霉菌丝体氨基酸含量的影响 |
| 2.6 硒对蛹拟青霉菌丝体SOD酶活力的影响 |
| 2.7 硒对蛹拟青霉菌丝体虫草素含量的影响 |
| 3 讨论与结论 |
| 第二节 锌对蛹拟青霉菌丝体主要活性成分的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 锌对蛹拟青霉富锌菌丝体生物量的影响 |
| 2.2 锌对蛹拟青霉富锌菌丝体胞内多糖含量的影响 |
| 2.3 锌对蛹拟青霉菌丝体锌含量和有机锌转化率的影响 |
| 2.4 锌对蛹拟青霉菌丝体蛋白质含量的影响 |
| 2.5 锌对蛹拟青霉菌丝体氨基酸含量的影响 |
| 2.6 锌对菌丝体SOD活性的影响 |
| 2.7 锌对菌丝体虫草素含量的影响 |
| 3 讨论与结论 |
| 第三节 锗对蛹拟青霉菌丝体主要活性成分的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 锗对蛹拟青霉菌丝体生物量的影响 |
| 2.2 锗对蛹拟青霉菌丝体胞内多糖量的影响 |
| 2.3 锗对蛹拟青霉菌丝体锗含量和有机锗转化率的影响 |
| 2.4 锗对蛹拟青霉菌丝体蛋白质含量的影响 |
| 2.5 锗对蛹拟青霉菌丝体氨基酸含量的影响 |
| 2.6 锗对菌丝体SOD活力的影响 |
| 2.7 锗对菌丝体虫草素含量的影响 |
| 3 讨论与结论 |
| 第六章 富硒、锌、锗蛹拟青霉抗氧化、抗衰老作用研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 菌种及其来源 |
| 1.1.2 培养基 |
| 1.1.3 主要试剂 |
| 1.1.4 主要设备 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 多糖中有机硒、锌、锗及多糖含量 |
| 2.2 硒、锌、锗多糖对超氧自由基的清除作用 |
| 2.3 硒、锌、锗多糖对羟自由基的清除作用 |
| 2.4 硒、锌、锗多糖对DPPH的清除作用 |
| 2.5 富硒、锌、锗菌丝体对果蝇体内SOD含量的影响 |
| 2.6 富硒、锌、锗菌丝体对果蝇体内MDA含量的影响 |
| 2.7 硒、锌、锗多糖对果蝇寿命的影响 |
| 3 讨论与结论 |
| 第七章 富硒、锌、锗蛹拟青霉菌丝体抗疲劳能力研究 |
| 第一节 富硒蛹拟青霉菌丝体抗疲劳能力研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 数据处理 |
| 1.4 结果判定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 富硒蛹拟青霉对小鼠负重游泳力竭时间的影响 |
| 2.2 富硒蛹拟青霉对小鼠血乳酸含量的影响 |
| 2.3 富硒蛹拟青霉对小鼠尿素氮含量的影响 |
| 2.4 富硒蛹拟青霉对小鼠常压耐缺氧能力的影响 |
| 3 讨论与结论 |
| 第二节 富锌蛹拟青霉菌丝体抗疲劳能力研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 富锌蛹拟青霉对小鼠负重游泳力竭时间的影响 |
| 2.2 富锌蛹拟青霉对小鼠血乳酸含量的影响 |
| 2.3 富锌蛹拟青霉对小鼠尿素氮含量的影响 |
| 2.4 富锌蛹拟青霉对小鼠常压耐缺氧能力的影响 |
| 3 讨论与结论 |
| 第三节 富锗蛹拟青霉菌丝体抗疲劳能力研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 富锗蛹拟青霉对小鼠负重游泳力竭时间的影响 |
| 2.2 富锗蛹拟青霉对小鼠血乳酸含量的影响 |
| 2.3 富锗蛹拟青霉对小鼠尿素氮含量的影响 |
| 2.4 富锗蛹拟青霉对小鼠常压耐缺氧能力的影响 |
| 3 讨论与结论 |
| 第四节 富硒、锌、锗蛹拟青霉菌丝体抗疲劳能力的比较分析 |
| 1 三种菌丝体对小鼠负重游泳时间影响的比较分析 |
| 2 三种菌丝体对小鼠血乳酸含量影响的比较分析 |
| 3 三种菌丝体对小鼠血尿素氮含量影响的比较分析 |
| 4 三种菌丝体对小鼠耐缺氧能力影响的比较分析 |
| 5 结论 |
| 第八章 富硒、锌、锗蛹拟青霉多糖抗突变作用研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 分析方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 多糖中有机硒、锌、锗及多糖含量 |
| 2.2 富硒、锌、锗多糖对丝裂霉素诱发蚕豆根尖细胞微核的影响 |
| 2.3 富硒、锌、锗多糖对紫外线诱发蚕豆根尖细胞微核的影响 |
| 3 讨论与结论 |
| 第九章 富硒、锌、锗蛹拟青霉胞内多糖抗肿瘤功能研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 富硒、锌、锗蛹拟青霉菌丝体胞内多糖对肺腺癌A549细胞株的抑制作用 |
| 2.2 富硒、锌、锗蛹拟青霉菌丝体胞内多糖对鼻咽癌CNE-1细胞株的抑制作用 |
| 3 讨论与结论 |
| 第十章 富硒、锌、锗蛹拟青霉菌丝体急性毒理评价 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论与结论 |
| 第十一章 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 在读博士期间发表的学术论文 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 食药用真菌开发现状 |
| 1.2.1 中国古代对食药用真菌的研究 |
| 1.2.2 近代对食药用真菌的研究 |
| 第2章 食药用真菌发酵中草药的意义与研究现状 |
| 2.1 研究目的及意义 |
| 2.1.1 食药用真菌具有较高的营养与药用价值 |
| 2.1.2 我国具有丰富的食药用真菌资源 |
| 2.1.3 食药用真菌具有较强的尖端生长优势，易于组织规模化液体发酵生产 |
| 2.1.4 食药用真菌具有丰富的酶库，有利于中草药有效成分的释放 |
| 2.1.5 发酵过程中可以发生新的代谢反应 |
| 2.1.6 有利于中草药的有效成分的提取 |
| 2.1.7 再现寄(共)生关系 |
| 2.2 本项研究的国内外发展概况及需求 |
| 第3章 中草药及菌种的选择 |
| 3.1 中草药感官筛选 |
| 3.2 菌种选择 |
| 3.3 斜面生长试验 |
| 3.4 摇瓶发酵可行性试验 |
| 3.5 葛根介绍 |
| 第4章 葛根用量及添加方法的选择 |
| 4.1 葛根添加量的选择 |
| 4.2 葛根添加方法的选择 |
| 第5章 葛根对食药用真菌生长的影响 |
| 5.1 葛根对刺琴侧耳生长的影响 |
| 5.1.1 单因子对比实验 |
| 5.1.2 生长曲线测定 |
| 5.2 葛根对桃红侧耳生长的影响 |
| 5.2.1 单因子对比实验 |
| 5.2.2 生长曲线测定 |
| 5.3 葛根对白灵侧耳生长的影响 |
| 5.3.1 单因子对比实验 |
| 5.3.2 生长曲线监测 |
| 5.4 葛根对金顶侧耳生长的影响 |
| 5.4.1 单因子对比实验 |
| 5.4.2 生长曲线监测 |
| 5.5 葛根对灵芝生长的影响 |
| 5.5.1 单因子对比实验 |
| 5.5.2 生长曲线测定 |
| 5.6 小结 |
| 第6章 葛根对食药用真菌发酵产物抗氧化活性的影响 |
| 6.1 药物体内抗氧化研究简介 |
| 6.1.1 药物抗氧化作用类型及测定指标 |
| 6.1.2 脂质过氧化过程简介 |
| 6.2 抗氧化活性测定 |
| 6.2.1 发酵产物整体活性 |
| 6.2.2 发酵产物各成分及其它菌株活性测定 |
| 6.3 小结与讨论 |
| 6.3.1 多糖与蛋白质的相互作用 |
| 6.3.2 硫酸酯取代度的变化 |
| 第7章 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
